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丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏 IRS-1的调节作用
目的::观察彩色蚕茧水提物-丝胶对2型糖尿病大鼠肝脏胰岛素受体底物-1( IRS-1)的调节作用。方法:48只雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗高剂量组和丝胶治疗低剂量组,每组12只大鼠。采用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法制作2型糖尿病大鼠模型,以空腹血糖≥11.1mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后,丝胶治疗高(2.4g/kg/d)、低(1.8g/kg/d)剂量组大鼠分别给予不同剂量丝胶灌胃35天,正常对照组、模型组大鼠给予同等剂量生理盐水灌胃35天。釆用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的血糖,采用Real Time PCR法检测各组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达。结果:模型组大鼠的血糖为(29.45±4.82)mmol/L,明显高于正常对照组大鼠的血糖(10.83±2.03) mmol/L(P<0.05);丝胶治疗高、低剂量组大鼠的血糖分别为(13.20±4.09)mmol/L、(13.18±2.30)mmol/L,均明显低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠肝脏IRS-1 mRNA的表达水平为(0.0099±0.0040)拷贝数/μl,明显低于正常对照组大鼠(0.0251±0.0041)拷贝数/μl(P<0.05);丝胶治疗高、低剂量组大鼠肝脏的IRS-1 mRNA的表达水平分别为(0.0108±0.0039)拷贝数/μl、(0.0131±0.0036)拷贝数/微升,均明显高于模型组( P<0.05)。结论:IRS-1是胰岛素PI3 K/Akt信号通路的关键因子,本研究提示丝胶可能通过提高PI3 K/Akt信号通路IRS-1的表达发挥降低血糖的作用。
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一氧化氮在大鼠梗阻性黄疸继发肝功能损伤中的作用
目的:探讨一氧化氮(NO)在梗阻性黄疸合并肝功能障碍中的作用.方法:将56只Wistar大鼠随机分成假手术对照组和胆总管结扎组(实验组).应用胶原酶灌注法分离肝细胞并进行培养;用白介素-1β(IL-1β)等细胞因子处理培养的肝细胞,应用Griess法和Western印迹分析法检测两组NO及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的产生;应用高效液相色谱法(HPLC)检测两组肝细胞5'三磷酸腺苷(ATP)的合成;应用酶法检测两组肝细胞酮体含量并计算酮体比率(乙酰乙酸盐/β-羟基丁酸盐)(KBR).结果:实验组NO产生量明显高于对照组(207.99 μmoL/L vs78.57 μmoL/L P<0.01);NO的产生与IL-1β作用时间和作用剂量有关;实验组和对照组的iNOS产生量在蛋白水平没有差异;IL-1 β降低了实验组培养肝细胞的ATP含量(15.94 nmoL/106 cells vs 20.21 nmoL/106cells,P<0.05),对照组改变不明显;IL-1 β降低了两组的KBR,实验组降低程度大于对照组;一氧化氮合酶(NOS)抑制剂NG-甲基-L-精氨酸(L-NMMA)抑制了NO的产生,使降低的肝细胞ATP含量、KBR得以恢复.结论:梗阻性黄疸能够促进肝细胞产生NO,导致肝功能障碍.L-NMMA可以缓解由于大量NO导致的ATP合成障碍及KBR下降.对NO产生的调节可能会成为预防及治疗梗阻性黄疸继发肝功能损害的有效方法.
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P34cdc2、Cyclin B1在大肠癌中的表达及意义
目的:研究p34cdc2、细胞周期素B1(cyclin B1)在大肠癌组织中的表达,并探讨其与大肠癌发生、发展的关系.方法:应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测p34cdc2、cyclin B1在64例大肠腺癌组织及10例正常对照大肠组织中的表达情况.结果:64例大肠癌组织中p34cdc2、cyclin B1表达阳性率分别为68.75%和82.81%,定位于细胞质中,呈棕黄色或棕褐色.10例正常对照大肠组织中p34cdc2、cyclin B1部分为弱阳性及中度阳性表达.病例组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05).cyclin B1与p34cdc2的表达呈正相关,相关系数为0.586.p34cdc2和cyclinB1在大肠癌组织中的表达在有淋巴结和远隔器官转移组与没有淋巴结和远隔器官转移组间其差异有显著性(P<0.05);而在根据患者年龄、性别、肿瘤的原发部位、分化程度等进行分组的组间其表达的差异没有显著性.在大肠癌组织中pCNA阳性细胞呈弥漫分布,呈明显异质性,阳性率为73.44%.在正常大肠组织中见PCNA阴性或少量阳性表达.经统计学分析在大肠癌组织中PCNA的表达与p34cdc2和cyclin B1均没有相关性.结论:p34cdc2、cyclin B1在大肠癌中呈过表达,可作为反映大肠癌淋巴结转移和远隔器官转移的指标之一.
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赖氏法与丙酮酸氧化酶法检测ALT在血站实验室的应用
丙氨酸氨基转移酶(ALT)是血站实验室筛查献血者血液的必检项目之一.在采供血机构,随着全自动血液筛查系统的应用及<血站实验室质量管理规范>的实施,检测ALT的方法进一步标准化、规范化.我站目前采用赖氏法做初检,同时以丙酮酸氧化酶法做复检,对5 998份血液标本的测定结果进行比较分析,现总结如下.
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酶法检测唾液酸在肿瘤患者中的诊断效果
目的 探讨酶法检测唾液酸在肿瘤患者中的诊断效果.方法 选自本院2016年1月—2017年8月所接收的肿瘤患者96例作为研究对象,将患者分为良性组和恶性组.另选取同期在本院接受体检的健康体检者48例作为正常组.本次研究对象均接受了酶法检测唾液酸.结果 三组研究对象在接受检测之后,恶性组患者的SA水平与正常组研究对象对比,差异具有统计学意义(P<0.05).但良性组患者的SA水平与正常组研究对象对比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 在肿瘤疾病的临床诊断工作中,使用酶法检测唾液酸这一方法仅限于在恶性肿瘤疾病的临床诊断中,在恶性肿瘤疾病的临床诊断中,使用这一检测方法的诊断准确性较高,且还能为患者疾病后续的治疗提供一定的辅助作用.
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涂片法与抗体法联合检测幽门螺杆菌的评价
现代流行病学发现胃幽门螺杆菌是许多消化道疾病的首要致病因素[1,2];我们对此进行了一些临床研究,采用直接涂片法和脲素酶法检测胃粘膜的幽门螺杆菌(HP),同时测定病人体内的HP-IgM抗体.在被检测356例标本中,直接涂片法阳性203例(57.0%),脲素酶法阳性201例(56.4%),HP-IgM法阳性208例(58.4%).提示直接涂片法与HP-IgM法二者联合检测HP,具有简便、快速、检出率高的优点.
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经典抗人球蛋白法与木瓜酶法检测孕妇血清中IgG抗A(B)效价结果分析
母婴血型不合而产生的同种免疫所引起的新生儿溶血病(HDN),对胎儿和新生儿可因严重贫血而死亡,或因溶血所产生的大量胆红素渗入脑组织发生核黄疸症.我们对187名O型RhD(+)孕妇血清分别用经典抗人球蛋白法和木瓜酶法检测IgG抗A(B)效价,评价2种方法的灵敏度,旨在为临床诊断提供更可靠的实验依据.报告如下.
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两种细菌性阴道病测定方法的临床应用比较
细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是妇产科常见的疾病之一,感染率在15%~50%,且易复发.它是由于阴道正常菌群减少,阴道加德纳菌及多种厌氧菌过度繁殖引起的阴道分泌物增多的一种感染[1].BV的诊断传统上采用Amsel标准[2].现对我院妇科门诊367例疑似BV患者分别进行Amsel法和唾液酸酶法检测,现报告如下.
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胰腺炎的早期诊断
胰腺炎是病死率较高的腹部疾病之一,我院使用酶法检测尿淀粉酶,使胰腺炎的早期诊断率显著提高,现总结如下。资料与方法:本组对腹部症状(不适、腹胀、腹痛、返酸、嗳气)、腰部不适及疼痛等症状持续6h以上的208例病人均做尿淀粉酶检测。经临床观察和实践分析,凡用本法化验尿淀粉酶≥1200U/L,可诊为早期胰腺炎。
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电极法(ISE)与酶法检测血清K+、Na+、Cl-比较
目前实验室内检测K+、Na+、Cl-方法很多,其中以电极法居多.为进一步了解酶法分析的特点.本文就全自动生化分析仪酶法检测K+、Na+、Cl-与电极法检测K+Na+、Cl-作对比实验.
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α-硫辛酸对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响
目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性及血脂的影响.方法:将30只ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组、α-硫辛酸、辛伐他汀组,高脂饮食16周后,分别给与生理盐水、α-硫辛酸、辛伐他汀灌胃,另取10只G57BL/6J小鼠正常饮食后给与生理盐水灌胃作为正常对照组.8周后处死小鼠,酶法检测血清血脂,氧化型低密度脂蛋白,HE染色观察主动脉粥样硬化斑块病理形态结构,图像分析法测定主动脉粥样硬化斑块面积及与管腔面积比值,胶原Mas-son染色检测斑块部位胶原含量及占斑块面积比值.结果:与高脂模型组比较,α-LA组TG,LDL,ox-LDL均明显降低,HDL明显升高(P<0.01),TC降低(P<0.05).与高脂模型组比较,α-LA动脉粥样硬化斑块面积及与管腔面积比值缩小(P<0.05).胶原含量及占斑块面积比值增加.结论:α-LA有稳定ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑决的作用,其作用与降脂,抗脂质过氧化有关.
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荧光素酶法检测幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞白细胞介素-8转录能力
幽门螺杆菌(Hp)是人消化性溃疡、慢性胃炎、胃癌及胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的重要致病因子,对Hp免疫致病机制的探讨是当今研究的热点.Hp诱导胃上皮细胞产生趋化因子(chemokines)与胃黏膜炎症过程密切相关,其中以C-X-C类趋化因子IL-8尤为引人注目[1].文献中对胃上皮细胞IL-8转录水平的检测多采用分子生物学(如Northern blot, RT-PCR等)方法,但这些方法操作要求高、步骤复杂、耗时较长.我们应用荧光素酶活性测定检测Hp诱导的胃上皮细胞IL-8转录能力,旨在探讨一种敏感、快速、简便的测定胃上皮细胞IL-8转录的方法.
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碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测T细胞亚群技术的改进
我们自1993年以来,对碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(AppAAp)桥联酶技术反复摸索,对原技术 [1]作不断改进,改进要点介绍如下:(1)玻片预处理的改进:原法按稀盐酸浸泡→水洗→95%乙醇浸泡处理,此处理的玻片30%左右出现染色不佳,细胞脱落等情况.
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糖化白蛋白酶法测定试剂研制与评价
目的:研发糖化白蛋白(GA)酶法测定试剂并进行方法学评价。方法:利用特异性的蛋白酶(PR)在3 min内裂解GA并释放出糖化氨基酸,然后利用酮胺氧化酶进行氧化并释放出过氧化氢,过氧化氢经Trinder’s反应显色后,与同样处理的标准溶液比较求得GA含量。结果:该试剂批内、批间不精密度(CV)分别为0.84%~1.88%和1.14%~2.35%;线性范围为1.3~1200μmol/L,血清样本2~16倍稀释范围与原倍血清的百分偏差在99.3%~108.6%之间,平均回收率为101.8%;血清中胆红素<35 mg/dL,甘油三酯(TG)<750 mg/dL,血红蛋白<200 mg/dL,胆汁酸<8 mg/dL,尿酸<33 mg/dL,葡萄糖<1800 mg·dL-1,维生素C 15 mg/dL,EDTA·K22.5 mg/dL,肝素钠80 U/L,枸橼酸钠8.0 mg/dL,对550μmol/L GA的检测干扰<±5%。与日本ASAHI公司提供的GA测定试剂方法进行比较,回归方程及相关系数分别为Y=0.9991X+0.0809,r=0.9958;试剂置4℃开盖储存至少稳定30 d,置4℃加盖储存至少稳定12个月。结论:GA酶法测定试剂精密度良好,线性范围宽,稀释准确性满足临床需要,回收率较高,抗干扰能力较强,与进口试剂相关性好,具有推广应用价值。
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高危新生儿低血糖34例临床分析
1998年~1999年间,我院收治高危新生儿175例,其中检出低血糖患儿34例,发生率为19.4%.本文就其发生低血糖的相关因素,分析如下:1 临床资料1.1 一般资料自1998年1月至1999年10月出生的有围产期高危因素的新生儿175例,男90例,女85例,体重<2500克41例,2500~4000克130例,>4000克4例.早产儿32例,足月儿133例,过期产10例.1.2 方法与诊断标准全部病例均于喂奶前半小时和静脉补液前采股静脉血,标本采集后立即用葡萄糖氧化酶法检测血糖,检测仪器为日立7060全自动生化分析仪,试剂盒由宁波亚太生物技术有限公司提供.诊断标准按Corublach和Schwartz提出的标准:足月儿生后3天内血糖低于1.68mmol/L,3天后低于2.24mmol/L;早产儿及小于胎龄儿低于1.12mmol/L者诊断为低血糖[1].
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酶法检测解冻红细胞残留甘油含量
红细胞冰冻保存需要添加一定的保护剂,目前常见的保护剂为甘油,但临床应用前须经一定的程序洗涤,尽量去除添加的外源性甘油.解冻洗涤处理过的冰冻红细胞内残留甘油的含量对于保证其质量至关重要,国家规定的标准为≤10 g/L[1].目前血站对于冰冻红细胞内残留甘油的检测大多采用高碘酸法[2],但其操作繁琐.本实验室利用甘油三酯试剂盒(酶法)检测解冻红细胞残留甘油含量,取得较好的效果,现报告如下.
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干化学试纸法与全自动生化分析仪酶法检测结果比较
同一实验室有两台或者两台以上的生化分析仪开展相同的检验项目时,应定期进行仪器间的比对,特别是一般生化分析仪与干式生化分析仪测定结果的比对[1].
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两种检测系统测定血清电解质的结果比较
火焰光度法测定钾、钠因其不易自动化,在临床实验室已逐渐被自动化程度更高的离子选择电极法取代.随着医学检验技术的迅猛发展,大量新型的生化分析仪投入到临床中,在全自动生化分析仪上用酶法检测钾、钠,用化学法检测氯已经成为常规项目.
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血糖仪和葡萄糖氧化酶法测定血糖值的对照分析
血糖仪由于其体积小,携带方便,不需要特殊训练,可随时快速检测血糖结果,应用日趋广泛.但临床上常出现血糖仪与实验室测值不一致的现象,人们往往倾向于实验室所测结果.为了评价血糖仪所测结果的准确性及其与实验室测值的相关性,对Accutrend alpha血糖检测仪检测的毛细血管与静脉全血血糖和化验室葡萄糖氧化酶法检测的血糖水平进行了对照分析,现报道如下:
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120例初发消化性溃疡的治疗
我们对84例初发消化性溃疡患者使用雷尼替丁+阿莫西林+克拉霉素联合治疗,并与36例初发消化性溃疡使用洛赛克+阿莫西林+克拉霉素联合治疗进行对照,现将结果报告如下。资料和方法 一、病例选择所选120例初发消化性溃疡患者均经我院胃镜证实。对反复发作,合并并发症及直径>2 cm、深度>1 cm的溃疡予以剔除。用快速尿素酶法检测Hp为阳性,随机分为两组,治疗组(A组)84例,男58例,女26例,年龄19~68岁,平均43.12岁,其中胃溃疡(GU)18例,十二指肠球溃疡(DU)57例,复合溃疡(CU)9例;对照组(B组)36例,男24例,女12例,年龄17~65岁,平均42.25岁,其中GU9例,DU21例,CU6例。