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德国拜发酶法分析:葡萄酒和果汁行业的国际标准方法
酶法分析是检测食品饮料中糖、酸,醇及甘油.二氧化硫等成分的国际标准方法,不但可以获得与HPLC法同样的准确性和精密度,而且在某些方面要优于HPLC法,如检测设备成本低,操作简单.无需专业的技术人员,种类多(包括几十种不同检测试剂盒),无有毒性废物产生等.
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简议酶分析法
简要介绍了酶分析法及其在部分领域的应用.
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血清总胆汁酸测定在婴幼儿肝炎综合征中的应用
目的通过检测血清总胆汁酸(TBA)水平,确立该指标在婴幼儿肝炎综合征诊治中的意义.方法采用全自动酶法分析技术对67例婴幼儿肝炎综合征患儿(年龄26 d~7个月)及100名正常对照组的婴幼儿(年龄20 d~1岁)进行空腹血清总胆汁酸测定,同时对其他肝功能相关项目进行测定.结果正常对照组TBA值频数呈正偏态分布,经对数转换后,正态性D检验呈对数正态分布参考范围:0~11.3 μmol/L.患儿组测试结果:TBA异常率达89.5%,数值范围:0.5~226 μmol/L[±s=(79.5±54.3) μmol/L],与正常对照组差异有显著意义.患儿组TBA与血清碱性磷酸酶(ALP)、直接胆红素(DBIL)、及γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)的检测水平有良好的相关性.且TBA在灵敏度和特异性上均优于以往的指标.结论血清TBA的测定在婴幼儿肝炎综合征的诊断、疗效观察及对预后的判断中均有重要的意义.
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复合氨基酸注射液中山梨醇含量测定的方法比较
目的:测定复合氨基酸注射液中山梨醇的含量.方法:①酶法分析(NADH体系)②部颁标准(过树脂后高碘酸盐法).结果:两种方法测的结果相符.结论:我国现行的部颁标准方法简便,准确.适用于药品的质量控制.
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肝病患者血清中总胆汁酸测定的意义
采用全自动酶法分析法,测定321例各种肝病患者血清总胆汁酸(TBA).结果表明:血清总胆汁酸是一种较灵敏的肝功能指标.在各类肝病中,尤其是急性肝炎、肝硬化、肝癌患者的总胆汁酸(TBA)浓度均明显高于正常对照组(P<0.01),并在肝功能常规指标改变不明显时对肝脏疾病的诊断有一定的价值.
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钾钠酶法自动分析的注意事项
钾离子(K+)、钠离子(Na+)是维持人体内各组织液渗透压平衡和水平衡的基础,在调节人体酸碱平衡及心脏及肌肉功能等方面起着重要作用。我科以前使用离子选择电极(ISE)法测定 K+、Na+,近期开始在生化仪上使用酶法分析,虽然酶法自动分析大幅提高自动化程度,但 K+、Na+酶法自动分析中有一些需要引起我们注意的事项,尤其是基质效应问题[1]。另外,其测试精密度及试剂的稳定性也不太理想,这在一定程度上影响了结果的可靠性。现叙述如下。
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电极法(ISE)与酶法检测血清K+、Na+、Cl-比较
目前实验室内检测K+、Na+、Cl-方法很多,其中以电极法居多.为进一步了解酶法分析的特点.本文就全自动生化分析仪酶法检测K+、Na+、Cl-与电极法检测K+Na+、Cl-作对比实验.
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代谢物浓度酶法测定的现状与发展
20世纪起临床就开始用酶来测定人体中物质的含量,它在70年代得到较大的发展,在理论和实践上也趋于成熟.随着蛋白质纯化技术的提高,品种齐全、质量可靠的商品酶制剂的大量供应得到保证,加上自动化分析仪在检验科的普遍应用,使得酶在临床化学测定中的应用日益广泛.近几年来,基因重组技术在酶生产上也有应用,活力高,杂酶含量少且价格低廉的重组酶蛋白不久会面世,并应用于临床检验.传统的代谢物酶法测定分为终点法和动力学法,循环酶法是新近发展起来的又一种灵敏度高的方法.酶法分析的优点是特异性高,它在准确性、精密度、灵敏度和线性测定范围等方面都优于传统的化学法.由于酶作用的特异性,成份复杂的血清等体液样品往往不需进行预处理,简化了实验程序.酶的本质是蛋白质,没有毒性,这样就避免了环境污染.酶促反应的条件温和,制成试剂盒可适用于自动分析.本文就代谢物酶法测定的基本理论及各类测定方法的特点做一简单介绍.
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酶循环法及其在酶法分析中的应用
由于酶法测定的特异性好,检测简便,反应温和,无污染,且灵敏度较高(10~100 μmol/L),已能满足体液中大部分物质的测定,因此在临床化学测定中已广为应用.随着临床化学的发展,体液中某些微量物质的准确测定逐渐显得重要.酶循环法是利用酶的底物特异性来放大靶物质(被测物)的测定方法.此法仅循环靶物质,减少了样品中存在的其它物质对测定的干扰,因此不需要对样品进行预处理或对靶物质的提取,而且该法不需要专门的设备,是一种前景广阔的测定技术.日本旭化成(Asahi Chemical)公司发展了这一技术,笔者参考旭化成公司的有关资料[1~3],将这一技术介绍给国内同道.
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关于血清肌酐酶法分析特异性的几点讨论
血肌酐(creatinine,Cr)常规检测方法主要有两大类:化学法和酶法.化学法主要有碱性苦味酸终点法和碱性苦味酸二点动力学法.终点法的内源性干扰物种类太多,有的干扰物与苦味酸反应比Cr反应快,称为"快干扰物",如乙酸、乙酞乙酸;有的比Cr反应慢,称"慢干扰物",如葡萄糖、某些蛋白质残基等.因此,现多用二点动力学法测Cr.该法检测信号的"窗时间"一般为30 s至120s,可较好地避开"快干扰"和"慢干扰".但是,有一些干扰物的反应速度与Cr相似,如丙酮酸、a-酮戊二酸,特别是糖尿病、肾病酮症酸中毒患者血清中酮体干扰明显,碱性苦味酸二点动力学法也难以排除.此外,胆红素会使Cr测定结果偏低,当胆红素浓度升至600 μmol/L时干扰明显.
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血清总胆汁酸测定在肝脏疾病中的临床价值
目的为探讨血清总胆汁酸测定对肝病的诊断意义.方法采用酶耦联比色法检测119例各种肝病患者血清总胆汁酸水平.结果显示急性肝炎、慢性肝炎、重型肝炎、肝硬化、肝癌及脂肪肝患者血清总胆汁酸水平均明显高于正常对照组.肝硬化患者血清总胆汁酸异常率为94.3%,高于其它肝功能指标异常率,且与血清白蛋白呈负相关.结论提示血清总胆汁酸是一项较灵敏的肝功能指标,尤其是在肝功能常规指标改变不明显时,对各种肝病特别是肝硬化的诊断有一定的价值.
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血清TCO2酶法测定液体和干粉试剂的应用评价
血清总二氧化碳(TCO2)测定目前多为离子选择电极法[1]和酶法[2].前者由于离子选择电极价格昂贵,维护保养繁琐,不宜推广应用,而酶法分析具有特异性强,准确性、精密度和灵敏度高以及测量范围宽,经济实用等优点,已广泛应用于自动化生化分析仪[3].
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一种果糖中葡萄糖含量的检查方法
目的 建立一种果糖中葡萄糖含量检查方法,并讨论了测量条件.方法 葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,同时产生过氧化氢.在过氧化氢的作用下,利用过氧化物酶可以使ABTS[2,2′-连氮-双-(3-苯乙基噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]显色.结果 利用此方法测定葡萄糖的检测限为1.5 μg·mL-1.结论 该方法具有较好的专属性和耐用性,且灵敏度较高.说明可以利用该方法对果糖中葡萄糖含量检查.
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婴儿肝炎综合征血清总胆汁酸测定的临床意义
为探讨总胆汁酸(TBA)在婴儿肝炎综合征(IHS)诊断中的价值,本文检测60例IHS患儿TBA及常规肝功,并与对照组进行比较,现报告如下.
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中国南方地区正常人群血清肌酐水平的变化其临床意义
目的:探讨中国南方地区正常人群各年龄阶段的血清肌酐水平变化,并初步建立酶学检测中国人群血清肌酐的参考范围.方法:采用酶法检测2 000例不同年龄阶段的健康人群血清肌酐水平,其中男性1 200例,女性800例,年龄从1个月至80岁,通过统计学方法分析各年龄阶段人群的血清肌酐水平.结果:正常人群的血清肌酐水平随年龄增长而增高,在同一年龄组中,两性之间的血清肌酐水平存在显著差异.10岁以下的男女血清肌酐分别为(26.67±7.84、25.20±6.40)μmol/L;11-20岁组分别为(68.26±12.74、54.72±7.78)μmol/L;21-30岁组分别为(77.74±8.09、57.17±8.18)μmol/L;31-40岁组分别为(79.35±10.36、55.65±9.07)μmol/L;41-50岁组分别为(81.21±12.86、62.40±10.91)μmol/L;51-60岁组分别为(79.49±11.54、61.11±12.65)μmol/L;61-70岁组分别为(83.87±16.74、60.62±11.47)μmol/L;年龄大于71岁组分别为(96.61±25.26、64.55±12.01)μmol/L.结论:不同年龄正常人群的血清肌酐水平存在显著的差异;在同一年龄阶段,男女之间也存在显著的差异,在临床诊断中应该建立对应的参考标准.
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血清总胆汁酸测定在新生儿窒息中的临床应用
目的:探讨新生儿窒息患儿血清总胆汁酸浓度的变化及临床应用.方法:采用OLYMPUS AU-400(日本)全自动生化分析仪,对86例新生儿窒息患儿和34例正常对照新生儿进行空腹血清总胆汁酸(TBA)测定,同时对其他肝功能相关指标进行测定.结果:新生儿窒息患儿血清TBA与对照组相比呈显著性升高(P<0.001);血清TBA与本组的血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰转移酶(r-GT)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DIBL)的检测水平有良好的相关性.治疗后的新生儿窒息患儿血清TBA水平下降趋向正常.结论:血清TBA是一项灵敏的肝功能指标,尤其是对新生儿窒息后导致肝脏损害的早期诊治以及预后观察有着重要的临床意义.
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血清β-羟丁酸的测定对糖尿病酮症酸中毒的诊断意义
糖尿病患者不能正常利用血糖,体内脂肪代谢紊乱,大量酮体堆聚,很容易产生酸中毒,晚期主要并发症之一是以高血糖为主的酮症酸中毒(DKA).对酮症酸中毒的诊断与疗效观察常需测定血液中酮体的浓度,一般以检测血清β-羟丁酸的浓度反映体内酮体的水平.该测定具有准确、简便、快速、灵敏和特异的特点,受到临床的重视.我们对血清β-羟丁酸的酶法分析作了方法学和临床应用评价,现将有关评价结果报告如下.
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血清总胆汁酸测定在各类型肝病诊断中的临床结果分析
目的:探讨血清总胆汁酸及测定对各类性肝病的诊断价值.方法:采用循环酶速率对120例各种肝病患者血清总胆汁酸水平进行测定.结果:表明急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者血清中总胆汁酸水平高于对照组.其中急性肝肝炎高,肝硬化与肝癌次之,慢性肝炎较低.并且肝癌,肝硬化TBA的异常率高,均为100%,慢性肝炎、肝硬化、肝癌的异常率均比ALT高.结论:提示血清中总胆汁酸是一项灵敏的肝功能指标,尤其在肝功能常规指标改变不明确时,对各种肝病,特别是肝硬化的诊断有一定价值.