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中国八省市各级医疗机构确诊急性乙型肝炎实验室检测能力调查
医疗机构的乙型肝炎(乙肝)诊断能力是影响乙肝报告发病率的重要因素,我们在全国范围开展此次调查,以初步了解我国各级医疗机构急性乙肝实验室诊断能力.采用典型抽样在北京、吉林、浙江、山东、河南、广东、四川、甘肃8省/市抽取95家省、地、县、乡级医疗机构作为调查对象(各级比例为1:2:3.7:3.3),采取问卷和现场观察方法调查乙肝实验室人员配备、检测频度、设备配置、检测项目、检测试剂等情况.调查诊断急性乙肝的标准:乙肝两对半、ALT、抗-HBc IgM,同时检测抗-HAV IgM与甲肝鉴别诊断.
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呼伦贝尔市2001-2003年麻疹疑似病例M抗体测定结果分析
对内蒙古自治区呼伦贝尔市13个旗(市)2001-2003 年送检的麻疹疑似病例血清标本进行检测,对部分病例测定风疹IgM抗体.血清标本由呼伦贝尔市疾病预防控制中心检验中心实验室用ELISA法测定麻疹IgM和风疹IgM抗体.共检测麻疹IgM抗体325例,阳性165例,阳性率50.77%;检测风疹IgM抗体244例,风疹IgM抗体阳性率67.21%.对其中84例血清标本同时检测麻疹IgM抗体和风疹IgM抗体,结果显示,麻疹IgM抗体阳性14例,风疹IgM抗体阳性30例,全部阴性40例.按卫生部免疫程序接种麻疹疫苗(MV),为了提高MV接种率,在全市范围内对1.5~2 岁的儿童复种1针;因此325例分组统计基础免疫(<12月龄)和复种1针(1.5~2 岁)为一组,免疫间隙(2~6 岁)为一组,复种2针(7~14 岁)期,成人(>14 岁)期及不祥的各为一组.
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基因芯片在乙型肝炎的基因诊断中的应用
基因芯片利用芯片技术中信息的集成化和平行处理原理,在一张芯片固定成千上万个探针同时进行实验,因而具高效、愉效、多参量等特点,把基因芯片技术用于疾病的诊断,其优点有以下几个方面:一是高度的灵敏性和准确性;二是快速简便;三是可同时检测多种疾病.本研究应用基因芯片对乙型肝炎病毒感染者血清标本进行了检测.1.材料与方法:于2001年3月采集深圳市卫生防疫站门诊体检人员乙型肝炎感染者血清标本20份,保存于-20℃冰箱,待检.乙型肝炎基因芯片试剂由博道公司提供.ScanArray 5000扫描仪购自基因公司.核酸提取方法:取裂解200 0644l加待检血清100 μl,混合均匀,然后加入等量的酚-氯仿-异戊醇,混匀后13 000 r/min,离心5 min;取上清加等量冷异丙醇,再加tRNA 1.5 μl,混匀后13 000 r/min,离心5 min;弃上清,和75%乙醇洗沉淀,13 000 r/min离心5 min,干燥后加5 μl纯水即可.
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膜免疫层析法快速诊断试纸现场检测O1霍乱弧菌
常规的霍乱诊断以分离培养鉴定出霍乱弧菌为主要依据.我们在对62例疑似霍乱患者的便标本进行O1霍乱弧菌常规分离培养鉴定过程中,用O1霍乱弧菌膜免疫层析法快速诊断试纸 (O1快速试纸)同时检测.结果如下.
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高效液相色谱法同时检测食品中四种黄曲霉毒素
黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉产生的一类代谢产物,具有极强的毒性和致癌性,能引起多种动物发生癌变,主要诱发肝癌.黄曲霉毒素广泛存在于粮油食品中,其中以花生和玉米污染为严重,一般以热带和亚热带地区的食品污染较重.由于它的剧毒性、强致癌性及存在的广泛性[1].因此建立方便、快速、稳定的检测方法显得尤为重要.
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高效液相色谱法同时检测水飞蓟素和丹参酮
水飞蓟为菊科水飞蓟属植物,其有效成分为水飞蓟素又称西利马灵,是一类新型的具有C9 取代基的黄酮类化合物,即以二氢黄酮醇和苯丙素类衍生物缩合而成的黄酮木脂素类,主要含水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭.丹参主要有效成分为丹参酮类化合物,包括丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮和二氢丹参酮Ⅰ.两种植物常同时在保健食品和药品中使用.我们应用高效液相色谱法同时检测丹参酮和水飞蓟素,取得了较为满意的实验结果.
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多重基因表达遗传分析系统在转基因食品检测中的应用
目前,国内外对转基因食品检测技术种类较多[1-2],常用的PCR大多是针对单个基因的,费时且成本较高.笔者基于多重基因表达(gene expression profiler,GEXP)遗传分析系统,建立了一种新型多重PCR技术,可同时检测转基因食品中常见的6种外源基因(nos、Camv35s、epsps、pat、Fmv35s、bar).
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HPLC-DAD法同时测定乙肝扶正胶囊中6种有效成分的含量
目的 建立同时测定乙肝扶正胶囊中6种有效成分含量的方法.方法 采用二极管阵列检测器(DAD)波长切换高效液相色谱法.流动相为乙腈-甲醇-0.1%醋酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为320nm(0~40min),切换为254nm(40~65min)检测5家厂乙肝扶正胶囊的有效成分.结果 没食子酸、虎杖苷、二苯乙烯苷、白藜芦醇、肉桂醛、丹参硐ⅡA 6个有效成分的色谱峰能有效分离,其质量浓度分别在0.244~4.88、0.196~3.92、0.272~5.44、0.208~4.16、0.272~5.44、0.200~4.00mg·ml-1范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.99);其检出限分别为2.86~8.86ng·ml-1,定量限分别10.06~20.86ng·ml-1,均符合含量测定要求.5家厂的产品中的6种有效成分均能同时检出.结论 本方法快速、准确、重复性好,可用于乙肝扶正胶囊的质量控制.
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当飞利肝宁胶囊治疗慢性乙型肺炎肝纤维化40例
慢性乙型肝炎(慢性乙肝)肝纤维化是形成肝硬化的必经之路,如何阻止这一病变的进展,具有重要的临床意义,因此,抗肝纤维化治疗显得非常重要.为了观察当飞利肝宁胶囊(肝勃宁胶囊)的抗肝纤维化作用,我们于2003年2月~2003年12月对本院门诊及住院的76例慢性乙肝患者血清肝纤维化标志物:透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘蛋白(LN)的变化,进行了临床对照研究,并同时检测血清转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,结果显示,当飞利肝它胶囊具有较好的抗肝纤维化作用.现报告如下.
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TSGF和tPSA联合检测在前列腺癌早期诊断中的应用
前列腺特异性抗原(PSA)是目前常用的前列腺肿瘤标志物,但它只是组织特异性抗原,而非肿瘤特异性抗原.肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)是近年来研制的广谱的特异性肿瘤标志物,在多种肿瘤中的应用多有报道[1,2],本文以血清总PSA(tPSA)在0.2~20ng/mL的前列腺疾病患者为研究对象,在检测血清TSGF的同时检测tPSA的水平,旨在探讨两者联合检测对早期前列腺癌(PCa)的诊断作用.
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FQ-PCR在乙肝检测中的应用
目前,乙肝常见的诊断指标是二对半检测,应用广泛的检测技术是酶免法(ELISA)及固相放射免疫分析法(SPRIA).ELISA技术的灵敏度低,准确性较差,而SPRIA技术采用125I.125I具有放射性、易污染,试剂保存时间短.这两种方法检测的是HBV的血清标志物,它不能完全体现HBV在体内的复制状态.鉴于这一情况,广州达安公司在常规PCR技术基础上加以改进,研制出了FQ-PCR检测方法和试剂盒.本科将180例临床标本采用SPRIA法及FQ-PCR法同时检测,现报道如下:
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原发性高血压患者血浆心钠素水平探讨
为探讨原发性高血压患者血浆心钠素(ANP)的水平及其与高血压病之间的关系,本文对比检测了143例原发性高血压患者和50名正常人的ANP,按同时检测的肾素(PRA)值,进行分组,报道如下.
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雅培全自动化学发光免疫分析仪i2000SR故障维修一例
0 引言全自动化学发光免疫分析仪是医院检验科常用设备之一,大连大学附属中山医院使用的是美国雅培公司i2000SR全自动化学发光免疫分析仪,可同时检测25个项目,每小时能完成200个测试,具有较高的工作效率及准确性和灵敏度.化学发光免疫分析(chemilumineseent immunoassay,CLIA)是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物直接标志抗体或抗原的数量,进而对抗体或抗原进行特定量检测的一类免疫分析法.检测技术中检测小分子抗原使用竞争法,检测大分子抗原用夹心法.i2000SR全自动免疫发光分析仪中肝炎检测项目优势明显,在肝炎定量检测方面属于全球金标准测试,其中的HbsAg和HbsAb为全定量检测,HbeAg、HbeAb、HBcAb为半定量检测.i2000SR全自动免疫发光分析仪对甲状腺的检测项目中促甲状腺素(thyroid Stimulating Hormone,TSH)具有优灵敏度.
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宫颈癌中RASSF1A基因微卫星的不稳定性
Ras相关区域家族1A(ras association domain family 1A,RASSF1A)基因是新近克隆出来的一种肿瘤抑制基因[1],其在调节细胞周期和细胞凋亡方面具有重要作用.RASSF1A基因失表达见于多种人类肿瘤中.本研究选择RASSF1A基因内的两个微卫星多态标记,对110例宫颈组织进行微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)的检测和分析;同时检测标本中人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPVl6)的感染状态,分析其与RASSF1A基因MSI之间的关系,旨在探讨RASSF1A基因在宫颈癌发生、发展过程中的作用.
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合肥市2001~2002年发热出疹性病人实验室监测分析
为了解合肥市麻疹和风疹的流行情况,对来自合肥市市区和3个县2001、2002年的1?283例发热出疹性病人的血清标本,同时检测麻疹、风疹IgM抗体.麻疹IgM抗体检测采用捕捉IgM抗体酶联免疫吸附试验(ELISA),试剂购自中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所、上海荣盛生物科技有限公司.风疹IgM抗体检测采用间接ELISA,试剂购自海南华美生物有限公司.血清标本置低温冰箱冻存,以备上级CDC网络实验室随机抽样复核.数据采用Excel进行统计分析.
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北京市一所高校发生风疹暴发
2000年3月31日~4月7日,北京市某大学发生一起经血清学检测证实的风疹暴发,现简报如下.北京某大学有4个系和研究生部,共2000余人,学生住30、31号楼和女生楼.3月31日~4月7日发生8例发热、出疹性病人.分布在治安系99级5例,侦察系97级、法律系98级和管理系99级各1例.临床表现主要有发热,但均<38.5℃;出皮疹,为红色斑丘疹,且融合成片,但均无色素沉着.7例在发热1天内出疹,1例发热3天后出疹.有5例合并枕后、耳后淋巴结肿大.8例均为外埠学生,入学后都注射过麻疹疫苗.采集8例血清标本,经实验室同时检测麻疹和风疹IgM抗体,结果麻疹IgM抗体均为阴性,风疹IgM抗体5例阳性(占63%),确定此起发热、出疹性疾病为风疹暴发.
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多重荧光PCR和Bin/Panel片段分析微卫星不稳定
我们应用ABI 3100-Avant型遗传分析仪对54例肿瘤患者和36名正常人进行多片段的多重荧光PCR微卫星不稳定(MSI)检测,单道毛细管同时检测5个颜色长短不同的DNA片段,利用GeneMapper软件分析Bin/Panel片段数据,可提高对MSI诊断的速度.同时我们对影响基因自动分型的一些技术因素进行了分析和改进.
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酶联免疫吸附法同时检测血清中的HIV和HCV抗体
用酶联免疫吸附试验检测病毒抗体,多为对单一抗体的检测,我们将人类免疫缺陷病毒(HIV-1/2)和丙型肝炎病毒(HCV)抗原包被于同一载体,同时检测这两种病毒的抗体,取得了与单测法基本一致的效果.HIV-1/2抗原和HCV抗原为加拿大Yes生物技术研究有限公司产品;HIV酶联免疫检测试剂盒批号960515,HCV酶联免疫诊断试剂盒批号960723,均为厦门新创科技有限公司产品.HIV和HCV抗体阴、阳性国家参照品由卫生部药品生物制品检定所制备,批号分别为9601、9604.1 120份血清样品取自山东医科大学附属医院、济南市传染病医院和济南市中心血站.加拿大Yes生物技术有限公司提供HIV抗体阳性血清5份.
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丙型肝炎病毒感染外周血单个核细胞的进一步研究
本文用三项不同技术,同时检测20例慢性丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞(PBMC)中的HCV RNA和HCVNS5抗原,以进一步了解HCV感染PBMC的状况,并对不同方法的检测结果进行比较分析。
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HPV16 L1重组蛋白的纯化及免疫原性的实验研究
人乳头瘤病毒(HPV)16、18型感染与宫颈癌的发生密切相关.本研究通过包涵体提取、溶解、变性、复性、纯化,获得GST-HPV16 L1融合蛋白,同时检测GST-HPV16 L1蛋白在体外复性过程中自我组装成病毒样颗粒(VLP)的情况.通过动物实验验证HPV16 L1融合蛋白的免疫学作用.