利用HPLC串联DAD-FLD检测器测定白酒中糖精钠的方法研究

糖精钠,又称可溶性糖精,是糖精的钠盐,无色结晶或稍带白色的结晶性粉末,一般含有两个结晶水,易失去结晶水而成无水糖精,呈白色粉末,无臭或微有香气,味浓甜带苦.其甜度是蔗糖的500倍左右.耐热及耐碱性弱,酸性条件下加热甜味渐渐消失,溶液大于0.026％则味苦.针对其毒性,FAO/WHO (1984)暂定ADI为0～0.0025g/kg体重.为增加白酒口感,某些白酒生产企业也会在产品中添加糖精钠.在检测白酒中糖精钠时发现,有一种未知的化合物与糖精钠的保留时间极近,难以区分,这就会对检测结果造成影响.本文利用高效液相色谱法(HPLC)将二极管阵列检测器和荧光检测器串联检测白酒中糖精钠的含量,使两个检测器相互验证,能够大大提高定性的准确性.与GB/T5009.28比较,该方法改变了紫外检测器单一波长的检测方式,可避免单纯用紫外检测器检测时受干扰物影响而产生的假阳性或定量偏高的情况,为白酒中糖精钠的检测提供新的思路.

二极管阵列检测器在食品检测中的应用探讨

目的:通过HPLC法对食品添加剂苯甲酸、山梨酸的检验,探讨二极管阵列检测器在食品营养学中的应用范围.方法:采用Agilent C18(150*4.6mm,5μm)色谱柱,用SPD-M20A二极管阵列检测器检验,检测波长:230nm.以甲醇-乙酸铵溶液(5:95)为流动相,柱温25.0℃,流速1.00mL/min.结果:疑似峰为苯甲酸峰,且在225nm处有大吸收.结论:二极管阵列检测器能够准确甄别目标峰,在食品检验领域具有重要的应用价值.

高效液相色谱法同时测定辅助改善记忆类保健食品中非法添加的17种化学药物

目的 建立辅助改善记忆类保健食品不同剂型中(口服液、丸剂、软胶囊)17种非法添加化学药物的高效液相色谱测定方法.方法 3种不同剂型的保健食品样品以50％甲醇水为提取溶剂进行超声提取,提取后采用C18-SPE柱净化,通过Thermo AccliaimTM Mixed-Mode WCX-1色谱柱(150 mm×2.1 mm,3μm)分离,以100 mmol/L磷酸二氢钠水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,采用二极管阵列检测器定性、外标法定量.结果 在相应浓度范围内,17种化学药物线性关系良好,r ＞0.99,加标回收率为85％～120％,检出限为10 ～ 40 μg/ml,相对标准偏差(RSD)为0.8％ ～4.8％.结论 该方法操作简便、准确、快速,能实现3种剂型中17种非法添加化学物的同时分析,可用于辅助改善记忆类保健食品中非法添加化学药品的定性筛查和定量检测.

HPLC-PDAD/MS法检测中兽药散剂中违规添加2种喹喔啉二氧化物的研究

目的:建立检测止痢散等7种中兽药散剂中违规添加喹乙醇、乙酰甲喹的HPLC-PDAD法,并用MS进行确证.方法:根据处方和临床治疗量配制阴性中兽药散剂和阳性供试品；用90％乙腈提取,HPLC-PDAD法进行检测,并用MS进行确证.结果:检出限为0.05 g·kg-1,喹乙醇和乙酰甲喹在止痢散中的平均回收率分别为93.69％和101.22％.结论:该方法快速、简便、准确,可用于中兽药散剂中违规添加喹乙醇、乙酰甲喹的检测.

基于指纹图谱评价葛根芩连汤中药物的成分分析研究

目的:采用HPLC(高效液相)指纹图谱分析研究葛根芩连汤中药物的成分.方法:在指纹图谱研究方法中采用HPLC-DAD(高效液相-二极管阵列检测器),HPLC指纹图谱试验色谱条件:进样量为20μL,色谱柱选择直径5μm的Ulti-mate AQ C18柱,柱温30℃,流动相A是0.02 mol/L醋酸铵+0.3％三乙胺+1％冰醋酸混合而成,终PH值为4.3;流动相B是乙腈,流速统一为0.7 mL/min.检测波长通过预实验不断调整,终葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素、甘草酸铵和甘草次酸的检查波长为250 nm;黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和甘草苷检测波长为280 nm;余下对照品检测波长为346 nm;并对HPLC精密度试验、重复性试验、稳定性试验、专属性试验、加样回收率试验、线性回归试验等方法学进行严谨性考察,通过比较混合对照品溶液指纹图谱,葛根芩连汤单味药材指纹图谱和葛根芩连汤指纹图谱,分析研究葛根芩连汤中的14个药物成分.结果:1)精密度试验平均相对峰面积RSD为0.38％,重复性试验平均相对峰面积RSD为1.14％,稳定性试验平均相对峰面积RSD为1.03％,专属性试验结果良好.2)14个药物成分线性回归良好,且加样回收试验中平均回收率的范围是96.45％～104.69％,RSD的范围是为0.65％～2.11％.3)本研究根据不同的检测波长250 nm、280 nm和346 nm,将混合对照品指纹图谱分为3张图,便于后续分析,同时标注14个对照品成分的峰号.4)在检测波长为250 nm时,葛根指纹图谱有11个特征峰,而甘草有2个特征峰;在检测波长280 nm时,黄芩有6个特征峰,而在检测波长346 nm时,黄连有4个特征峰.5)在葛根芩连汤的指纹图谱中显示波长250 nm时有12个特征峰,其中1～11主要体现葛根的药物成分特征,而12主要体现甘草的药物成分特征;波长280 nm时有7个特征峰,主要体现甘草和黄芩的药物成分特征;波长346 nm时有4个特征峰,主要体现黄连的药物成分特征.结论:从整体性解析葛根芩连汤剂HPLC指纹图谱的药物成分来源,为葛根芩连汤中含有的药物成分等物质基础、药理相关性研究提供实验基础.

HPLC测定复方关节炎胶囊中维生素B1、吡罗昔康和醋酸泼尼松

目的:建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定复方关节炎胶囊中维生素B1、吡罗昔康和醋酸泼尼松3种西药成分.方法:采用HPLC-DAD分析技术确定复方关节炎胶囊中3种西药成分,并对其进行含量测定.色谱柱Phenomenex Luna ODS C<,18>(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(38:62),柱温室温,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm.结果:复方关节炎胶囊中检出维生素B1、吡罗昔康和醋酸泼尼松3种西药成分含量分别为22.6,13.8,7.12mg·g-1.结论:方法简便,结果准确,可作为中药制剂中西药成分的检测分析方法.

HPLC-DAD法同时测定乙肝扶正胶囊中6种有效成分的含量

目的 建立同时测定乙肝扶正胶囊中6种有效成分含量的方法.方法 采用二极管阵列检测器(DAD)波长切换高效液相色谱法.流动相为乙腈-甲醇-0.1%醋酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为320nm(0~40min),切换为254nm(40~65min)检测5家厂乙肝扶正胶囊的有效成分.结果 没食子酸、虎杖苷、二苯乙烯苷、白藜芦醇、肉桂醛、丹参硐ⅡA 6个有效成分的色谱峰能有效分离,其质量浓度分别在0.244~4.88、0.196~3.92、0.272~5.44、0.208~4.16、0.272~5.44、0.200~4.00mg·ml-1范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.99);其检出限分别为2.86~8.86ng·ml-1,定量限分别10.06~20.86ng·ml-1,均符合含量测定要求.5家厂的产品中的6种有效成分均能同时检出.结论 本方法快速、准确、重复性好,可用于乙肝扶正胶囊的质量控制.

高效液相色谱法测定小儿腹泻宁颗粒剂中葛根素含量

小儿腹泻宁为一传统验方，由党参、白术、茯苓、葛根、甘草、广藿香、木香组成，其糖浆剂收载于部颁标准中。由于该复方制剂服用剂量较难把握，贮运不方便，使其临床推广受到限制。我们与武汉健民药业集团合作研制了小儿腹泻宁颗粒剂，对小儿腹泻宁颗粒剂进行质量控制，达到了满意的效果。1　方法与结果　　仪器与试药：Waters-515型泵，Waters-996紫外可见二极管阵列检测器，Millennium　32色谱工作站；葛根素对照品由中国药品生物制品检定所提供(经HPLC分析，用归一法测出其含量为99.6%)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，小儿腹泻宁颗粒剂由武汉市健民制药厂提供。　　色谱条件：色谱柱Inertsil ODS-3柱(4.6 mm id×250 mm，5 μm)，流动相甲醇-水-冰乙酸（41∶59∶0.9），流速0.70 ml*min-1，检测波长250 nm。　　标准曲线的绘制：配置一系列浓度梯度的对照品溶液，分别精密吸取10 μl注入高效液相色谱仪中测定，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标作图，得回归方程Y=5.62×106X-13943，r=0.9999，在0.172～0.860 μg线性关系良好。　　供试品溶液制备：取小儿腹泻宁颗粒剂烘干至恒重，准确称取1 g左右，加水超声提取10 min，离心，取上清。每次加水10 ml，反复提取3次，合并3次上清液定容至50 ml，微孔滤膜过滤(0.45 μm)，得供试液。　　精密度和稳定性试验：取供试液连续进样5次，葛根素峰面积的RSD为0.86%(n=5)，表明本试验精密度良好；在4 h内，每隔一定时间取供试液进样1次，葛根素峰面积的RSD为0.62%(n=5)，表明样品溶液在4 h内稳定性较好。　　样品含量测定：平行制备5个供试液，分别在上述色谱条件下，以外标一点法定量，结果表明小儿腹泻宁颗粒剂中葛根素平均含量为2.014 mg*g-1，RSD为0.64%；取除葛根以外的6种药材，煎煮，过滤，醇沉，制备得阴性样液，在上述色谱条件下进样测定。在葛根素出峰时间未见干扰峰。　　加样回收试验：采用加样回收法，准确称定已知含量样品1.0027 g，添加0.86 mg葛根素对照品，按上述供试液制备方法处理得供试液，测定含量，加样回收率平均值为95.40%，RSD为1.80%(n=5)。2　讨论与结论　　本试验曾选用甲醇、乙醇、乙酸乙酯不同溶剂的提取对比研究，实验结果表明，本文选择的水超声提取效果佳。本试验所采用的色谱条件为自行摸索，曾选用不同流动相组成及不同配比，实验结果表明本文选择的色谱条件分离效果佳。

款冬花药材的HPLC化学成分指纹图谱研究

建立款冬花药材的高效液相色谱(HPLc)化学成分指纹图谱,为科学评价其质量提供可靠方法.建立了不同产地和,或商品药材款冬花的HPLC指纹图谱;测定了10批款冬花样品,指纹图谱有25个共有色谱峰,并指认了16个.对各产地药材指纹图谱进行聚类分析,根据聚类分析结果将款冬花样品分为2类,选定第2类6批样品建立共有模式,并应用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004B版)"对各产地药材进行了评价.所建立款冬花的指纹图谱特征性和专属性强,方法简便、可靠,可定性用于全面控制款冬花的质量.

维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量测定方法的优化

目的:优化维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量测定方法.方法:采用反复萃取(药典法)和直接超声两种提取方法,比较马来酸氯苯那敏的含量测定结果.结果:反复萃取法步骤繁琐,污染环境,其回收率仅为91.4%,含量为116%;直接提取法简单,环境友好,其回收率为100.3%,含量为131%.二极管阵列检测结果表明优化后的方法色谱峰纯度符合要求.结论:优化方法适用于控制维C银翘片中马来酸氯苯那敏的质量,实验数据提示,维C银翘片的质量问题需要密切关注.

超高效液相色谱柱切换技术快速测定人血浆中的美罗培南浓度

目的 建立超高效液相色谱柱切换技术快速测定人血浆中的美罗培南浓度的方法.方法 美罗培南血浆样品稀释、过滤,在线柱切换提取,分析色谱柱为Acquity UPLC(R)BEH-C18柱.流动相A和提取流动相C:甲醇-0.05 mol·L-1K2HPO4(pH7.0) 5:95;流动相B:甲醇.柱温:35℃.梯度洗脱.美罗培南大吸收波长299 nm.分别用内标法和外标法对测定结果进行计算,用SPSS统计软件对计算结果进行配对t检验,考察2种计算结果是否存在差异.结果 人血浆美罗培南线性范围为0.67～86.00 mg·L-1(r =0.999 9),方法学回收率为(93.59±1.15)％ ～ (99.21±4.06)％,提取回收率大于85％,日内日间精密度RSD小于5.0％.内、外标法配对t检验两者无显著差异,转换方程为ρInternal=1.039ρExterna1-0.468(r=0.997 0).结论 采用在线柱切换技术快速、灵敏、高回收率、重现性好,适用于人血浆中美罗培南浓度监测和药动学研究.

HPLC法测定止痛化症片和胶囊中丹参素钠的含量

目的 建立HPLC法测定止痛化症品种中丹参素钠含量的方法.方法 采用Agilent HC-C18色谱柱;流动相:甲醇为流动相A,二甲基甲酰胺-冰醋酸水溶液为流动相B,梯度洗脱;检测波长:283nm;柱温:30℃;流速:0.7mL·min-1.结果 丹参素钠在0.269～5.38μg范围内线性关系良好(r=0.9994);加样回收率=96.4%,RSD=1.3%(n=6).结论 本法简便、准确、重复性好,可作评价止痛化症品种中丹参素钠含量的质控方法.

HPLC法测定脑心清胶囊中非法添加氢氯噻嗪

目的 应用HPLC法测定中成药脑心清胶囊中非法添加氢氯噻嗪.方法 采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测(RP-HPLC-DAD)分析技术,Agilent C18色谱柱,流动相为水-乙腈(80:20),流速为1.0mL·min(-1),柱温为30℃,检测波长为270nm,进样量为l0μL.结果 氢氯噻嗪在16.68～83.40μg·mL(-1)浓度范围内线性关系良好,平均回收率为100.4%,RSD为0.6%.结论 本方法简便、快捷、灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于测定脑心清胶囊中非法添加氢氯噻嗪.

大气颗粒物PM2.5中16种多环芳烃的超高效液相色谱测定法

目的 建立大气颗粒物PM25中16种多环芳烃(PAHs)的超高效液相色谱-二极管阵列检测器测定法.方法 空气样品滤膜经乙腈密封超声提取,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,过Waters ACQUITY UPLC(R)BEH Shield RP18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7 μm),超高效液相色谱法测定,反相色谱法梯度淋洗分离后,二极管阵列检测器检测.结果 在10～1 000 μg/L的范围内,所得16种PAHs的回归方程均呈良好的线性关系良好(r＞0.999 9).方法的检出限为0.5～6.0 μg/L,平均回收率为88.9％～119.4％,RSD为0.3％～4.9％.结论 该方法操作简单,灵敏高,分析速度快,适用于空气中16种PAHs的监测.

液相色谱法测定鲑鱼中孔雀绿和无色孔雀绿(通过原位氧化作用)残留量

利用液相色谱(LC)法测定鲑鱼中孔雀石绿(MG)和无色孔雀石绿(LMG)残留量.1仪器设备液相色谱仪Agilent 1100系列液相色谱仪,程序二极管阵列检测器(DAD,Agilent Technologies公司,Palo Alto,CA).

食品中4种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的高效液相色谱测定法

目的建立样品前处理方法简单,灵敏度高,适于对食品中对羟基苯甲酸酯类进行测定的方法.方法使用带二极管阵列检测器的液相色谱仪进行分离检测.结果前处理方法简单易行,应用二极管阵列检测器能有效提高定性的可靠性和定量的准确性.该方法精密度、准确度与相关系数均符合<全国卫生防疫工作规范>的要求.结论方法测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果令人满意.

面粉及面制品中过氧化苯甲酰的二极管阵列检测-高效液相色谱测定法

目的研究检测面粉及面制品样品中过氧化苯甲酰含量的前处理及测定方法,并对市售面粉及面制品中过氧化苯甲酰添加状况进行调查.方法用乙醇提取面粉及面制品中过氧化苯甲酰,碘化钾还原过氧化苯甲酰为苯甲酸,以高效液相色谱法二极管阵列检测器测定其含量,色谱条件:流动相为0.02mol/L NH4Ac水溶液:甲醇(96:4),流速1.20ml/min,柱温40℃,检测波长225nm,进样量为10μl.结果方法检出限为0.005mg(以3倍噪声值计),回收率在97.0%～100.7%之间,精密度为1.21%(低浓度)和0.44%(高浓度).调查147份面粉和102份面制品样品,阳性率84.3%,超标率29.3%,面制品超标率高于面粉.结论该方法测定面粉及制品中过氧化苯甲酰具有操作简单、干扰少、准确可靠等特点,可以在日常检测工作中推广;面制品用面粉过氧化苯甲酰卫生标准进行评价不合适,应采用食品中防腐剂苯甲酸的卫生标准.

三黄片质量标准研究

三黄片由大黄、盐酸小檗碱和黄芩浸膏组成,原收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十二册中,该标准缺少有效成分的定量检测指标,为了控制药品质量,对定性鉴别和检查方法进行了改进,建立了君药大黄中大黄素和大黄酚的含量测定方法.1 材料和仪器盐酸小檗碱、黄芩苷、大黄素和大黄酚对照品、大黄对照药材均为中国药品生物制品检定所提供.土大黄为本所中药室留样.作流动相用的甲醇为优级醇,其他试剂为分析纯.硅胶G为青岛海洋化工厂生产,薄层板均以0.5%CMCNa作粘合剂.日本岛津LC-10AD高压输液泵,SPD-M10A二极管阵列检测器,CLASS-10A色谱工作站.

高效液相色谱法-蒸发光散射检测器和二级管阵列检测器测定红车轴草提取物中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的含量

目的建立以蒸发光散射检测器(ELSD)和二极管阵列检测器(DAD)测定红车轴草提取物中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的高效液相色谱分析方法.方法色谱柱:Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:254nm;柱温:25℃;体积流量:1.0mL/min;检测器:Agilent1100二极管阵列检测器,SEDEX55型蒸发光散射检测器.结果鹰嘴豆芽素A和芒柄花素分别在1.275～3.315μg和0.965～2.509μg与峰面积线性关系良好.鹰嘴豆芽素A和芒柄花素在以ELSD检测时的加样回收率分别为99.54%、100.84%,RSD分别为2.03%、2.15%,在以DAD检测时的加样回收率分别为101.26%、101.59%,RSD分别为1.84%、1.91%.结论本方法准确、快速、重现性好

077用带有二极管阵列检测器的HPLC和ESI-MS定量测定制剂产品中的石杉碱A