柱切换高效液相色谱法检验食品的相关探讨

柱切换指的是在对多通道切换阀应用的基础上,使得进样阀和色谱柱、色谱柱和检测器之间呈现出来的相互关系发生一定程度的变化的技术措施,针对在样品当中使用到的多组分待检测物质净化和分离分析,柱切换高效液相色谱法是一种有效性比较强的分析措施,样品需要经过预期性处理之后再开展进样工作.待检测物质可以开展富集、净化以及衍生等操作,以此为基础自然也就可以使得有机溶液的使用量得到有效的控制,并使得回收率得到一定程度的提升,因此对柱切换高效液相色谱法在食品检验领域中得到应用具有一定的现实意义,希望能够给从事食品检验的相关工作人员在对这个问题分析时起到一定程度的借鉴作用,终为推动我国社会经济向前发展做出一定的贡献.

柱切换高效液相色谱法及其在食品检验中的应用

柱切换是指利用多通路切换阎改变进样阈与色谱柱、色谱柱与色谱柱、色谱柱与检测器之间的连接关系的技术.对于样品中多组分待测物的净化和分离分析,柱切换高效液相色谱法是有效的分析方法.样品前处理后进样,待测物可在线进行富集、净化、衍生化等,从而减少有机溶剂的用量、提高回收率、降低检出限和定量限.由此综述柱切换的原理和装置,在食品中农药残留检测、兽药残留检测、食品成分分析和其它成分的应用,以及存在的问题.

柱切换色谱法同时测定香丹注射液中水溶性成分及橙花叔醇的含量

目的:采用柱切换程序进样高效液相色谱法对香丹注射液中高含量水溶性成分(丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B)及微量挥发性成分橙花叔醇(含量相差近3个数量级)的含量进行测定.方法:以Agilent SB-C18预柱为预处理柱,Lichrospher C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为分析柱;预处理流动相为1%醋酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1;分析流动相为0.05%醋酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1;检测波长:0 min,280nm,40 min,210 nm;柱温40℃;进样程序及进样量为:0 min,10 μL供试品溶液1;15.3 min,200 μL供试品溶液2.结果:丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和橙花叔醇在实验浓度范围内线性关系良好(R2≥0.999 0);平均加样回收率在100%～102%,RSD小于3.0%;丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和橙花叔醇的检出限分别为17.1,0.473,60.2,50.6μg·L-1.结论:方法简便、灵敏,重复性与加样回收率良好,可用于香丹注射液质量分析.

柱切换色谱法测定人血清中的伊曲康唑及其代谢产物羟基伊曲康唑

柱切换在线基体消除法测定利奈唑胺中的叠氮根离子

目的:建立柱切换在线基体消除法测定利奈唑胺中残留的痕量叠氮根离子.方法:将预处理柱、富集柱和分析柱以适当的方式与六通阀连接,通过阀的切换,NG1柱将所需分析的痕量N3-从利奈唑胺基质中分离出来,再将被分析组分通过TAC-ULP1进行浓缩,后将浓缩的N3-通过AS18分析柱进行分离,采用抑制性电导检测器进行检测.结果:方法重现性良好,回收率在85.4％～100.8％之间,低检出为2 ng·mL-1,在0.02 ～0.50 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好.结论:方法预处理简单、灵敏度高、重复性好,可用于脂溶性药品中痕量离子的检测.

联合使用反相液相色谱,柱切换以及两性离子交换-反相亲水性相互作用混合模式色谱-质谱法分析抗生素中的杂质

建立并优化了一种二维柱切换、高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)系统,用于分析抗生素及其有关物质.在一维色谱中,采用两性离子交换-反相亲水性相互作用(ZIC-RP-HILIC)混合模式色谱柱对目标杂质进行分离,并采用液质联用技术(LC-MS/MS)进行检测.在二维色谱中,采用常规的反相LC色谱柱对供试品及其杂质进行分析.ZIC-RP-HILIC混合模式色谱系统的流动相为一种适用于LC-MS/MS的可挥发性缓冲盐,能够提高杂质的离子化效率,便于对目标杂质进行结构解析.直接采用ZIC-RP-HILIC-MS系统,对使用离子对反相色谱分离的抗生素杂质进行定性分析.ZIC-RP-HILIC混合模式色谱与反相LC色谱系统之间的正交性,进一步保证了杂质检测的全面性.此方法的优势体现在对青霉素V钾,苯唑青霉素钠、头孢曲松钠的杂质分析中.另外,该方法便于进行抗生素的杂质谱分析,并可用于其它药物的杂质分析.

超高效液相色谱柱切换技术快速测定人血浆中的美罗培南浓度

目的 建立超高效液相色谱柱切换技术快速测定人血浆中的美罗培南浓度的方法.方法 美罗培南血浆样品稀释、过滤,在线柱切换提取,分析色谱柱为Acquity UPLC(R)BEH-C18柱.流动相A和提取流动相C:甲醇-0.05 mol·L-1K2HPO4(pH7.0) 5:95;流动相B:甲醇.柱温:35℃.梯度洗脱.美罗培南大吸收波长299 nm.分别用内标法和外标法对测定结果进行计算,用SPSS统计软件对计算结果进行配对t检验,考察2种计算结果是否存在差异.结果 人血浆美罗培南线性范围为0.67～86.00 mg·L-1(r =0.999 9),方法学回收率为(93.59±1.15)％ ～ (99.21±4.06)％,提取回收率大于85％,日内日间精密度RSD小于5.0％.内、外标法配对t检验两者无显著差异,转换方程为ρInternal=1.039ρExterna1-0.468(r=0.997 0).结论 采用在线柱切换技术快速、灵敏、高回收率、重现性好,适用于人血浆中美罗培南浓度监测和药动学研究.

肝脏血液灌流中活性炭用量对阿霉素吸附效果的影响

目的以活性炭作为吸附剂,确定阿霉素在血液灌流法治疗肝癌时所用吸附剂的佳用量,以减少阿霉素的毒副作用.方法采用含阿霉素的血浆灌注于不同组合量的活性炭柱,用柱切换高效液相色谱法测定阿霉素的灌注前后血药浓度.结果A组(150g×1支)、B组(150g×2支)、C组(150g×3支)、D组(150g×4支)及E组(150g×5支)活性炭柱对阿霉素的吸附率分别为20.19%、27.60%、55.98%、56.42%、57.13%,经方差分析有极显著性差异,经两两比较的q检验,C、D及E组间无显著性差异.结论除D组与E组P＞0.05外,其它三个低剂量活性炭组中任意两组皆为P＜0.01,故150g×3支活性炭柱为活性炭吸附剂的佳用量,该用量的确定为血液灌流法治疗肝癌提供了理论依据.

柱切换HPLC技术在生物样品测定中的应用

作为一种现代分析技术,高效液相色谱法的应用已越来越广泛.其中,高效液相色谱-高效液相色谱联用技术(柱切换,columnswitchingtechnique),自20世纪70年代问世以来,经过逾30年的发展,以其样品预处理简单,样品用量少,可对样品在线净化、富集等优点,已被越来越多的分析工作者所重视,并广泛应用于环境保护、农药残留监测、食品检验、生化分析、体内药物分析等众多领域.

在线柱切换反相高效液相色谱法测定大鼠血浆丁螺环酮浓度及药代动力学研究

目的 利用在线柱切换反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定大鼠血浆丁螺环酮浓度及药代动力学.方法 以自制限进填料柱为预处理柱,Luna C18柱为分析柱,预处理流动相为水-甲醇(95∶5,V/V),流速为1 ml/min;分析流动相为甲醇-5 mmol/L甲酸铵(75∶25,V/V),流速为1 ml/min,切换时间为3 min,柱温为25℃;检测波长为283 nm.选取Wistar大鼠6只,禁食12 h,按15 mg/kg剂量给予丁螺环酮片剂灌胃,并于给药后0.08、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24 h经大鼠眼球后静脉丛采血0.5 ml,离心,取上清液进样,观察血药浓度-时间曲线下面积、半衰期(t1/2)、大浓度(Cmax)、清除率(CLZ).结果 丁螺环酮在0.2~4.8 μg/ml的浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9993),3个加标水平(0.3、0.6、2.4 μg/ml)的平均回收率为96.03%、104.67%、105.76%,日内和日间精密度均<5%.血药浓度-时间曲线下面积AUC0→8为3.023 μg/(ml·h),AUC0→∞为4.056 μg/(ml·h),t1/2为3.944 h,Cmax为1.38 μg/ml,CLZ为3.712 L/(h·kg).结论 RP-HPLC简便、快速、灵敏、准确,适用于血浆样品中丁螺环酮的药代动力学研究.

柱切换高效液相色谱法分析4种鼠尾草属植物的化学成分

目的 应用柱切换高效液相色谱技术实现鼠尾草属植物中水溶性和脂溶性化学成分在不同色谱柱上的分析,实现更多成分的分离.方法 在HPLC基础上利用二位十通切换阀实现水溶性成分和脂溶性成分的切割,以Megres-C18色谱柱(4.6 mm×10 mm,5μm)为预吸附柱,用Zorbax Sb-Aq色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)完成水溶性成分分析,用Eclips XDB-C1s色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)完成脂溶性成分分析.结果 建立了柱切换高效液相色谱技术分离鼠尾草属植物化学成分的方法,完成其中7种成分(丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA)的定性和定量分析.结论 利用柱切换高效液相色谱技术可以很好地实现鼠尾草植物中极性差异较大化学成分的分离和分析,为复杂中药的质量控制提供了一种方法借鉴.

用HPLC法测定复方盐酸阿替卡因注射液中两种组分的含量

目的:建立用HPLC法测定复方盐酸阿替卡因注射液中盐酸阿替卡因和肾上腺素两组分含量的方法.方法:采用C8柱和C18柱分别建立两组分的色谱分离检测系统,其中测定盐酸阿替卡因采用的流动相为含庚烷磺酸钠的乙腈与磷酸盐缓冲液,检测波长为276 nm;测定肾上腺素时采用了水和甲醇双流动相切换洗脱装置,检测波长为220 nm.结果:盐酸阿替卡因的浓度线性范围为4～400 μg/mL(r=0.999 9),低、中、高3个浓度溶液的加样回收率分别为(103.83±0.85)%、(101.26±0.44)%、(99.15±0.31)%(n=5),日内RSD分别为1.69%、0.60%、0.21%(n=5),日间RSD分别为1.73%、0.67%、0.22%(n=5).肾上腺素的浓度线性范围为1～100 μg/mL(r=0.999 9).低、中、高3个浓度溶液的加样回收率分别为(102.89±0.85)%、(99.30±0.43)%、(100.39±0.82)%(n=5),日内RSD分别为0.94%、0.71%、0.34%(n=5),日间RSD分别为1.37%、0.96%、0.55%(n=5).结论:该方法精密、简便、准确,可用于复方

液相色谱法测定羟基喜树碱含量及药动学研究

目的:建立一个简单、快速、灵敏的柱切换高效液相色谱法测定人血清中10-羟基喜树碱(HCPT)含量.方法:生物样品首先在装有限进介质(RAM)填料的预柱中净化和富集,然后转移到C18分析柱分析待测物,用荧光法检测.结果:整个分析时间8 min.在1～1 000 ng/mL浓度范围内,HCPT显良好的线性关系,日内、日间变异小于5%,低检测限为0.1 ng/mL.结论:本法已应用于临床病人注射HCPT后的药代动力学研究,结果符合一房室模型并计算出它的药动学参数.

柱切换高效液相色谱法测定尿中苯骈二氮杂(艹卓)类药物

目的:建立尿中10种常见的苯骈二氮杂(艹卓)类药物(氯硝西泮、氟硝西泮、艾司唑仑、三唑仑、阿普唑仑、硝西泮、去甲地西泮、奥沙西泮、替马西泮、地西泮)的柱切换高效液相色谱测定方法.方法:尿样用磷酸盐缓冲液1:1稀释,离心后直接进样1.0 mL进入预处理柱,用水作为预处理流动相,然后用分析流动相CH3OH-H2O(60:40)将保留在预处理柱上的药物反冲进入分析柱进行分析.检测波长(λ)为200 nm.结果:氯硝西泮、氟硝西泮、艾司唑仑、三唑仑、阿普唑仑的检测限均为2ng@mL*1(rSN=3),线性范围为10～1000 ng@mL-1,r≥0.999 2;硝西泮、奥沙西泮、替马西泮、去甲地西泮、地西泮的检测限为5ng@mL-1(rSN=3),线性范围为20～1 000ng@mL-1,r≥0.999 3.日内、日间RSD均＜10%(n=5).结论:本法准确、灵敏、快速、简便,可直接用于尿中苯骈二氮杂(艹卓)类药物的检测.

柱切换HPLC法测定血浆中的丙基硫氧嘧啶

丙基硫氧嘧啶(propylthiouracil, PTU)为抗甲状腺药,临床常用于多种原因引起的甲状腺功能亢进的治疗.由于其口服吸收快,半衰期短,服药后血药浓度变化范围大,患者接受治疗后疗效各异,不良反应发生率高[1]、表现类型多[2,3].因此有必要建立其血药浓度分析方法,以了解药代动力学及药效学之间的关系,促进合理用药.应用HPLC法测定PTU体内血药浓度,已有文献报道[4],但均需对样品进行提取处理,包括沉淀蛋白或萃取、氮气吹干等一系列预处理步骤.本研究利用柱切换技术直接进血浆样品测定PTU浓度,改良了测定方法.

柱切换高效液相色谱法测定血浆左氧氟沙星浓度

目的 应用柱切换高效液相色谱(HPLC)技术直接测定血浆中左氧氟沙星的浓度.方法 采用手动柱切换装置,分析柱采用大连依利特公司的Hypersil ODS C18柱(200mm×4.6 mm,5μm),预柱采用μBondapak C18(50mm×4.6mm,37～50μm,干法自填).分析流动相(AMP)为甲醇-磷酸二氢钾缓冲液(0.01 mol·L-1,pH值=2.5)-四丁基溴化铵(0.05 mol·L-1)-三乙胺=40∶60∶4∶0.2(V/V);预处理流动相(PMP)为磷酸二氢钾缓冲液(0.01mol·L-1,pH值=2.)-四丁基溴化铵(0.05 mol·L-1)=100∶1(V/V).分析流动相流速1 mL·min-1,预处理流动相流速2 ML·min-1.检测波长为294nm.结果 左氧氟沙星在100～8000ng·mL-1内有良好的线性关系.相关系数r=0.999 8,方法 平均相对回收率98.8%,日内及日问差小于10%,低检测限0.05μg·mL-1(S/N≥3).结论 样品无须预处理,直接进样分析测定,简便易行.

肝脏隔离灌注中活性炭用量对表柔比星吸附效果的影响

目的:研究在肝脏隔离灌注治疗肝癌过程中,活性炭作为表柔比星吸附剂的佳用量.方法:采用含表柔比星的血浆灌注于不同组合量的活性炭罐,A组(150 g×1),B组(150 g×2),C组(150 g×3),D组(150 g×4),E组(150 g×5)及F组(150 g×6),用高效液相色谱柱切换法测定表柔比星过滤前后血药浓度.结果:A、B、C、D、E、F组活性炭对表柔比星的吸附率分别为(25.60±4.72)%,(38.47±4.02)%,(50.13±2.68)%,(70.25±2.17)%,(72.02±2.21)%, (73.90±4.02)%,经两两比较的q检验,A、B、C、D任意两组间均差异有极显著性(P＜0.01),而D、E、F任意两组间均差异无显著性(P＞0.05).结论:D组活性炭为活性炭吸附剂的佳用量,该用量的确定为肝脏隔离灌注治疗肝癌提供了理论依据.

高效液相柱切换法测定人血浆中盐酸左氧氟沙星浓度及其生物等效性研究

目的:建立简便、灵敏、快速的高效液相柱切换法测定人血浆中盐酸左氧氟沙星浓度,比较两种剂型的盐酸左氧氟沙星主要药物动力学参数,进行生物等效性评价.方法:20名健康男性受试者进行随机双交叉试验,随机单剂量口服200 mg盐酸左氧氟沙星片参比制剂和试验制剂后采集血样,以环丙沙星为内标,采用柱切换荧光检测法测定盐酸左氧氟沙星血浆浓度,计算药动学参数及进行生物等效性评价.结果:单剂量口服受试制剂和参比制剂后血浆中的左氧氟沙星主要药动学参数:tv2分别为:(8.04±0.8)h和(8.3±1.02)h；tmax分别为(0.7±0.2)h和(0.8±0.4)h；Cmax分别为(2 282.62±619.58)ng·ml-1和(2 187.83±601.82) ng·m1-1；AUCo-36分别为(17 682.78±3 191.45) ng·h·ml-1和(16 768.09±3 161) ng·h·ml-1；A UCo-∞分别为(18 455.6±3 289.1)ng·h·ml -和(17 571.92±2915.07) ng·h·ml-1；受试药物的相对生物利用度(F)为:(105.4±9.0)%.结论:建立的高效液相柱切换技法在左氧氟沙星片生物等效性研究中的应用准确、灵敏,结果可靠；统计分析表明盐酸左氧氟沙星片试验制剂和参比制剂生物等效.

柱切换色谱法测定丹参注射液中隐丹参酮的含量

目的:建立一种丹参注射液中痕量成分隐丹参酮的有效检测方法.方法:采用柱切换色谱法对丹参注射液中的痕量成分隐丹参酮进行分析,色谱柱:shimadzu Shim-pack VP-ODS,流动相:甲醇-水,检测波长:270 nm.结果:用外标法定量分析,平均加样回收率为97.4%～99.2%,RSD＜0.95%,丹参注射液中隐丹参酮的含量为5.49 mg·L-1.结论:本法简单、灵敏、结果可靠.可有效的检测丹参注射液中的痕量成分隐丹参酮.

柱切换高效液相色谱法测定人血浆中阿莫西林浓度

目的:建立柱切换高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中阿莫西林浓度.方法:血浆样品用乙腈沉淀蛋白及二氯甲烷反洗后,其水相进样于C18短柱,经0.02 mol·L-1磷酸二氢钾(pH3.0)在线净化,再由流动相0.02 mol·L-1磷酸二氢钾(pH4.6)-甲醇(95:5)洗脱切入C8分析柱进行分离测定.结果:线性范围0.2～20 mg·L-1,净化回收率81.7%～88.5%,方法回收率为93.2%～96.7%,日内RSD为1.25%～2.57%,日间RSD为2.74%～9.49%.结论:本法准确可靠,可用于阿莫西林体内血药浓度测定.