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一氧化氮和白介素对钙黏附蛋白在人子宫内膜的影响
钙粘附蛋白(cadherin)是钙依赖的粘附分子家族,其成员在人体组织分布广泛,越来越多的研究发现其在生理、病理过程中起着不可忽视的作用,其在子宫内膜的表达与胚胎着床有密切关系.为探讨一氧化氮(NO)及炎性细胞因子白细胞介素-1(IL-1)是否参与了E-cadherin在人子宫内膜表达的调节,本研究采用原代培养人分泌中期子宫内膜腺上皮细胞,探讨NO及IL-1对E-cadherin表达的调节作用.
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2.45大鼠短期十二指肠胃反流的实验性研究
目的十二指肠胃反流是导致胃黏膜损害的重要因素,十二指肠胃反流可导致胃黏膜炎症、糜烂、溃疡甚至胃癌.鸟氨酸脱羧酶是多巴合成的限速酶,其组织水平可以反应组织细胞增殖的水平.本研究拟通过大鼠模型探讨短期十二指肠胃反流对胃黏膜的损害及其特点,短期十二指肠胃反流导致胃黏膜表达鸟氨酸脱羧酶的改变.
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用改良地高辛标记原位杂交方法检测Ly49CmRNA表达
由Ly49C在细胞免疫调节中传导抑制性信号,推测该分子与移植免疫耐受有关.国内外大多数的研究是用单克隆抗体方法检测该分子的膜表达,但是试剂价格昂贵,且需要特殊实验设备(如免疫荧光显微镜、流式细胞仪等),不利于推广应用.我们根据核酸杂交原理,从减少组织细胞的破坏、降低成本两方面,对地高辛标记原位杂交方法进行了改良,并应用改良后的原位杂交方法在培养细胞的甩片上检测Ly49CmRNA的表达,具有特异、清晰、低成本、简单等特点[1].介绍如下.
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大肠癌组织HLA-Ⅰ类抗原及相关分子的表达意义
目的:探讨大肠癌组织HLA-Ⅰ类分子及相关分子表达及其意义.方法:用免疫组化的方法,以切端黏膜作为正常对照,检测大肠癌组织、癌旁组织和正常黏膜组织中HLA-Ⅰ类分子及相关分子的表达,并结合肿瘤的临床病理资料综合分析.结果:受检的大肠癌组织中重链HLA-A位点、B/C位点及轻链beta2微球蛋白(β2M)较其相应正常黏膜表达明显下调(P=0.0 001);肠癌中低分子量多肽(LMP2)(P=0.0 001),钙联蛋白(calnexin)(P=0.004)较正常黏膜表达明显下调;肠癌中HLA-Ⅰ类分子表达与肿瘤分化无关;随着肿瘤的Dukes分期,癌组织中HLA-Ⅰ类分子表达渐次降低,但各位点表达情况并不相同,HLA-B/C表达水平与肿瘤分期相关,其在Dukes A期表达水平高于D期(P=0.0262).结论:肠癌组织及癌旁黏膜中HLA-Ⅰ类分子、低分子量多肽及钙联蛋白较正常黏膜表达明显下调;肠癌组织中HLA-B/C位点随着肿瘤Dukes分期演进其表达下调.
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三叶因子1在胃黏膜中的表达及存在的分子形式
目的:研究三叶因子1在人胃黏膜中的表达及存在的分子形式,探讨其胃黏膜保护作用的分子生物学机制.方法:采用western-b1ot方法观察三叶因子1在人胃黏膜中的存在形式,并采用免疫组化方法了解三叶因子1在胃黏膜中的定位,比较其在胃溃疡周边及距周边5 cm外胃黏膜中的表达改变.结果:(1)三叶因子1在人胃黏膜中以三种形式存在:单聚体、二聚体及一种分子量约为21 kDa的TFF1与某种分子结合而成的复合物,其中,TFF1复合物的含量高.(2)三叶因子1主要在人胃体及胃窦黏膜上皮表面细胞胞质中表达,核周聚集较明显,越靠近腔面的细胞表达越强.(3)三叶因子1在胃溃疡周边黏膜的表达明显高于距溃疡周边5 cm外的黏膜(P<0.001).结论:三叶因子1主要在人胃体及胃窦黏膜上皮表面细胞胞质中表达,其与某种分子结合形成的复合物是TFF1在胃黏膜中存在的主要形式,这种TFF1复合物可能比TFF1单聚体及二聚体有更强的生物活性.TFF1在胃溃疡周边黏膜表达高于距溃疡周边5 cm外的黏膜,说明其在胃黏膜保护及修护方面具有重要的作用.
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雌、孕激素对CCR5在子宫内膜表达的调节
CCR5是RANTES(regulated upon activation normalT cell expressed and secreted)蛋白和巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1)的受体,属于G蛋白耦联受体,主要表达于单核细胞、树突状细胞、活化的T淋巴细胞和自然杀伤细胞[1].RANTES蛋白可以趋化活化的T淋巴细胞、单核细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞以及巨噬细胞,子宫内膜上有此蛋白表达[2].许多细胞因子都是宿主的抵抗蛋白,参与机体免疫.除此之外,它们还可以促进或抑制血管生成,其作用机制目前较为肯定的就是与其相应的受体相结合从而发挥作用.本文通过对CCR5在子宫内膜处于不同时期表达情况的研究,揭示雌、孕激素对于趋化因子受体CCR5表达的影响,以进一步完善妇女月经周期变化的分子机制.
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癌抗原125在常见非恶性呼吸疾病中的应用研究进展
癌抗原125(cancer antigen 125,CA125)是一种大分子糖蛋白,初被人们认识为产生于卵巢上皮细胞并应用于卵巢癌的诊断及预后判断, CA125不仅可以在卵巢、输卵管上皮细胞及子宫内膜表达,还可以在胸膜、心包、腹膜产生,此外,正常人的气管、支气管黏膜上皮、肺癌细胞亦可表达CA125。随着对CA125更多的研究,发现血清CA125增高也见于其他很多非恶性疾病,并且CA125在这些疾病中的意义日益被人们所认识。本文就CA125在常见呼吸系统疾病的研究及价值做一综述。
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水通道蛋白5在胎肺发育中的意义
人类肺发育起始于胚胎早期的原始肺芽,一直持续到出生后.胚胎期肺内液体的存在对肺的发育有重要意义,然而这些液体经过肺上皮的转运机制尚不完全清楚.水通道蛋白( aquaporin,AQP)被认为是通过渗透压和静水压差使水快速跨膜转运的一类特殊蛋白.AQPs在多种动植物组织中均有表达,在人、羊、大鼠和小鼠等的肺内有AQP1、3、4和5表达.目前研究认为AQP5主要在肺泡Ⅰ型上皮细胞(typeⅠ alveolar epithelial cell,AECs -Ⅰ)顶膜表达,在肺泡水的跨膜转运和液体代谢中可能发挥重要作用.本文就AQP5在肺发育中的研究进展做一综述.
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P选择素在先天性心脏病肺动脉高压中的变化
先天性心脏病(简称先心病)患者存在止血功能的异常,容易发生血栓形成和出血,血小板的活化是导致其止血功能异常的重要因素.P选择素是研究中广泛应用的颗粒膜蛋白活化依赖性单克隆抗体,存在于静息血小板α颗粒和内皮细胞Weibel-Palade小体中,激活后转移至浆膜表达,为血小板活化的敏感标志物.目前对血小板的活化是否介导先心病肺动脉高压尚无肯定的结论,为此我们观察了血小板活化释放的P选择素在先心病肺动脉高压中的变化.
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锚定表达GM-CSF疫苗的抑瘤效果研究
目的:研究锚定表达GM-CSF的小鼠黑色素瘤作为肿瘤疫苗的有效性.方法:GM-CSF基因嵌合GPI信号肽修饰序列实现在B16小鼠黑色素瘤细胞表面的锚定表达,研究锚定修饰的B16细胞于同源C57BL/6小鼠的成瘤性及诱导抗肿瘤免疫的效果.结果:抑瘤实验结果表明,锚定修饰GM-CSF的肿瘤细胞免疫原性增强,成瘤性明显下降;成瘤率为58.8%,而肿瘤对照组为100%.活瘤苗接种实验结果显示锚定修饰的肿瘤细胞可以预防肿瘤的发生,肿瘤发生率仅为20%,说明抗肿瘤的免疫应答有记忆性,能够有效地防止野生型肿瘤细胞的攻击.结论:锚定修饰GM-CSF的肿瘤细胞可以诱导抗特异性的抗肿瘤反应,这种设计可以应用于肿瘤疫苗的研究中.
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膜表达热休克蛋白70真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞的转染
目的构建普遍适合性的膜表达热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,修饰并建立HSP 70表达并结合在细胞膜表面的肿瘤细胞.方法RT-PCR法从人胚肾中获取HSP 70的cDNA,扩增成带酶切位点的目的基因.选择载体pDisplay,将目的基因插入载体多克隆酶位点中.DNA测序证实后,以脂质体转染的方法,将载体转染到黑色素瘤细胞.用G418抗性筛选获得阳性克隆.结果酶切电泳和DNA测序证实载体构建正确;目的基因的上游带信号肽序列,下游带跨膜序列.RT-PCR产物电泳、Westem Blotting、激光共聚焦显微镜和流式细胞术证实大量HSP 70表达并结合在转染的黑色素瘤细胞膜表面.结论成功地构建了膜表达HSP 70的真核表达载体;转染到黑色素瘤细胞后,细胞膜表面表达丰富的HSP70.转染细胞可以进一步制备新型瘤苗.
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ABCG2在大肠癌中的表达及其对预后的影响
背景 ABCG2是A11Pbinding cassette转运蛋白家族中的成员,与多药耐药和SP(side population)表型相关.研究表明,ABCG2在多种肿瘤的生物学行为方面起着重要的作用.目的 探讨ABCG2在大肠癌的表达方式与I临床病理学变量以及患者生存率的关系,为进一步的功能鉴定奠定基础.方法 225例大肠癌组织免疫组化染色(SP法),分别进行细胞膜和细胞浆染色的半定量分析.通过统计学方法分别分析其与临床病理学资料的相关性,并对随访的69例大肠癌患者进行生存分析.结果 在225例大肠癌组织中.83.1%的组织在细胞浆有ABCG2的表达,而66.2%的组织在细胞膜有ABCG2的表达;15.6%的组织在细胞膜上呈现ABCG2的强表达.ABCG2在细胞浆上的表达,与大肠癌高的肿瘤分期(Dukes)(P=0.039)相关;ABCG2在细胞膜上的表达.与大肠癌高的肿瘤分期(Dukes)(P<0.01)、淋巴结(P<0.01)和远处转移(P<0.01)相关.随访的69例大肠癌患者的生存分析表明,ABCG2在细胞膜的强表达与生存率的降低相关(Cox回归:P=0.038).结论 ABCG2在大肠癌中的表达是普遍升高的,其在大肠癌的转移过程中可能起作用.是一种新的预测大肠癌预后的分子标记.
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膜表达热休克蛋白70的肠癌瘤苗抗肿瘤治疗作用研究
目的研制膜表达热休克蛋白( HSP) 70瘤苗并研究其抗肿瘤治疗作用.方法以膜表达 HSP70的真核表达载体 pDisplay- mbHSP70转染肠癌细胞株 CT26.用 G418抗性筛选获得阳性克隆,扩增并制备瘤苗.观察瘤苗在体外对小鼠脾淋巴细胞的增殖刺激效应;在 BALB/c小鼠结直肠癌模型中观察瘤苗的抗肿瘤治疗作用;并检测实验鼠的自然杀伤细胞 (NK)和细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL)活性.结果激光共聚焦显微镜和流式细胞术均证明,大量 HSP70表达并结合在肠癌瘤苗细胞膜表面.比较对照,胞浆表达 HSP70瘤苗显示出较高的鼠淋巴细胞增殖刺激效应,较强的瘤体生长抑制,并使荷瘤鼠的生存时间延长;而膜表达 HSP70瘤苗比胞浆表达者有着更高的淋巴增殖刺激效应,更强的瘤体生长抑制作用,并使荷瘤鼠的生存时间进一步延长.结论 HSP70表达并结合在细胞膜表面的肠癌细胞瘤苗对结直肠癌 CT26荷瘤小鼠有更强的治疗作用.
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腹膜透析对碱性成纤维生长因子在大鼠腹膜表达的影响
腹膜超滤衰竭(UFF)是长期腹膜透析(PD)的主要并发症,而UFF患者腹膜组织病理检查显示新生血管明显增多.碱性成纤维生长因子(bFGF)是目前公认的促血管生成因子,在腹膜间皮细胞呈结构件表达.在CAPD患者腹透液中也可榆测到bFGF[1].因此,本研究探讨bFGF在腹膜组织新牛血管形成中可能的作用及机制.
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血型抗原在传染病中的作用
血型抗原可将感染因子作为受体与疾病直接关联,或间接被宿主的免疫反应干扰.只有少数感染因子,如:疟原虫、细小病毒B19影响红细胞及其前体.大多数感染因子附着在红细胞上,把它们作为靶器官的载体,或附着在粘膜表达的血型抗原上.