首页 > 文献资料
-
细胞周期调控在HT 29结肠癌细胞低剂量辐射超敏感性中作用的研究
低剂量辐射超敏感性是细胞对低剂量照射(0.02～0.50 Gy)较敏感,但对其后剂区域(0.50～1.00 Gy)敏感性下降.其发生机制现不清楚,可能与细胞周期调控有关[1-2].笔者观察HT 29结肠癌细胞放射敏感性与γ线照射剂量关系,分析不同剂照射后细胞周期调控变化及Phos-pho-Cdc25C(Ser216)蛋白表达情况,探讨低剂量辐射超敏感性机制.
-
p21/WAF-1/CIP-1与宫颈癌放射敏感性的关系
已知凋亡受多种基因调控,其中p21/WAF-1/CIP-1是近年来研究较多的基因,又简称p21[1].它通过作用于周期蛋白-周期蛋白依赖性激酶(cyclin-CDK)复合物及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)引起肿瘤细胞生长抑制及调控细胞凋亡,从而影响肿瘤的放射敏感性.笔者搜集了30例宫颈癌病例,通过研究细胞凋亡与肿瘤放射敏感性以及p21与细胞凋亡的关系,探讨p21对宫颈癌放射敏感性的作用.
-
丙戊酸钠增加Hela细胞放射增敏性及其机制的探讨
组蛋白去乙酰化酶(HDAC)功能异常被证实与肿瘤发生和发展直接相关.通过对HDAC功能的抑制可达到治疗肿瘤的目的.丙戊酸钠(VPA)是临床常用的抗癫痫药物,近发现其属于HDAC抑制剂[1].本研究选择VPA作为HDAC抑制剂的代表,来观察VPA能否增加Hda细胞的放射敏感性,并探讨其机制,为临床上治疗提供必要的理论基础.
-
放射对乏氧胃癌细胞PTEN基因和VEGF等蛋白表达的影响
越来越多的证据表明乏氧可以诱导血管内皮细胞生长因子(VEGF)、表皮生长因子受体(EGFR) 的表达,VEGF、EGFR与肿瘤的放射敏感性关系密切[1,2].笔者拟通过观察胃癌细胞系MGC 803乏氧不同时间后细胞周期、抑癌基因PTEN mRNA及VEGF、EGFR蛋白表达的变化及乏氧与乏氧照射后细胞存活情况,探讨乏氧时间对细胞放射后存活的影响.
-
放射联合内皮抑素对人鼻咽癌细胞系VEGF表达及放射敏感性作用的研究
在所有内源性血管生成抑制因子中,内皮抑素拥有广的抗瘤谱和小的毒性,且不产生耐药性~([1]).内皮抑素与放疗联合应用可改善放疗疗效,增强抗瘤效应,而不增加毒副反应.
-
PCNA、Ki-67、p53与鼻咽癌颈淋巴结转移灶放射敏感性的相关关系
放射治疗前如何准确地预测鼻咽癌的放射敏感性,以针对不同的患者制定更合理的放射治疗方案显得极为重要.许多研究发现生物标记物可能与肿瘤的放射敏感性相关.本实验用免疫组织化学染色技术测定鼻咽癌组织中PCNA、Ki-67蛋白及异常p53蛋白的含量,并分析其与鼻咽癌颈淋巴结转移灶放射敏感性之间的相互关系.
-
宫颈癌细胞周期阻滞和凋亡与放射敏感性的关系
宫颈癌是我国女性常见的恶性肿瘤之一.放射治疗是治疗宫颈癌的主要方法,但疗效仍不满意.如果在放射治疗前即可预测肿瘤的放射敏感性,制定个体化的治疗方案,则可能提高疗效.笔者搜集了45例宫颈癌病例,对其癌组织标本细胞周期及凋亡在放射治疗过程中的变化与放射敏感性的关系进行了研究,现报道如下.
-
吸混合氧加服烟酰胺对放射治疗增敏的研究
增加肿瘤组织的血氧浓度，改善细胞对放射线的敏感性，提高肿瘤的放射治疗效应， 是放射 治疗学者们研究的热门课题。1998年1月至1999年12月，本院对200例中晚期宫颈癌患者进行 了吸5%CO2 +95%O2(CB)加服烟酰胺（NA）对放射治疗增敏的前瞻性随机分组临 床研究，现将结果报道如下。1 材料与方法 观察组100例，中位年龄50.0岁（32～69岁），对照组100例，中位年龄50.5岁（32～7 4岁）。观察组鳞癌99例，腺癌1例；对照组鳞癌97例，腺癌3例。依据1994年“FIGO”蒙特 利尔会议分期法分期：观察组Ⅱb期5例，Ⅲb期95例；对照组Ⅱb期4例 ，Ⅲb期96例。肿瘤分型：观察组菜花型48例、结节型43例、溃疡型9例；对照组菜花 型45例、结节型43例、溃疡型12例。肿瘤大小：观察组<3?cm 1例，3～5?cm 77例，>5?c m 22例。对照组<3?cm 5例，3～5?cm 75例，>5?cm 20例。 放射治疗方法：全部采用 60Co外照射，先给全盆野30?Gy左右，再改宫旁野加照15～20?Gy；腔内（宫旁A点） 照射采用天津产华阳192Ir腔内后装治疗机，1 次/周，5～7?Gy/次，总量为30～49 ?Gy。观察组放射治疗前30～60?min顿服NA 600?mg，放射治疗前5～10?min吸CB直至放 射结束后继续吸5～10?min。对照组不服药，不吸CB，不加任何辅助治疗。2 结果 肿瘤完全消退（CR）率：观察组为84%（84/100），对照组为72%（72/100）。肿瘤形态 与疗效：菜花型观察组CR率为85.4%(41/48)，对照组为84.4%(38/45)；结节溃疡型观察组CR 率为82.7%(43/52)，对照组为61.8%(34/55)，结节溃疡型与对照组疗效差异有显著性意义（ χ 2=5.78,P<0.05）。放射治疗期间副反应的比较：观察组头晕1例，恶心 10例，呕吐1例，食欲不振3例，皮肤反应Ⅰ度11例，Ⅱ度1例；对照组头晕2例，恶心11例， 食欲不振8例，皮肤反应Ⅰ度9例，Ⅱ度1例，2个组差异无显著性意义（P> 0.05）。血氧饱和度: 手指皮肤测量法（30例），口服NA吸CB前后各测1次，提高幅度为0.0 1～0.12。基础高的提高少，基础低的提高多。动脉血氧分压（10例）提高幅度为1.33～2.6 6?kPa，肘静脉血氧分压提高幅度为0.93～1.33?kPa，饱和度提高0.15～0.20。3 讨论 目前在恶性肿瘤增敏方法的诸多研究中，以照射技术的改进、时间和剂量变换、药物增敏、 微波热疗加放射治疗以及高压氧舱加放射治疗虽可提高疗效，多费时费力，临床上难以推广 。本研究选择的宫颈癌放射治疗前口服NA，放射治疗时深吸CB，方法简单易行，患者容易接 受。早在1955年Thomlinso和Gyay报道的支气管肺癌新标本的组织形态学观察结果为：凡肿 瘤 索半径>200?μm的都有坏死中心；经过多种测量和计算后认为：在肿瘤内一小部分缺氧 细胞 的存在，能在某些临床情况下限制放射治疗的成功率。临床上早已发现贫血患者宫颈癌的放 射疗效差。在高压氧舱中放射治疗宫颈、膀胱、支气管、肺、头颈等部位临床Ⅲ期肿瘤，结 果表明除宫颈癌疗效有提高外，其它都不明显。吸纯氧或CB可能会提高肿瘤放射敏感性，但 同时也有可能增加正常组织损伤。NA是近年来国内外学者研究较多的放射治疗、化疗增敏剂 。它对体外培养的恶性肿瘤细胞、鼠类肿瘤以及人体恶性肿瘤的异种移植瘤均有显著的放射 和化疗增敏作用，其作用机制为：NA是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参于机体代谢过程，在 促进生物氧化还原中发挥递氢作用，从而改善肿瘤组织血供，提高肿瘤细胞放射敏感性，同 时抑制DNA损伤修复。Siemann等临床前期研究显示，在小白鼠实验中，对乏氧细胞应用NA 和CB将提高肿瘤的杀伤力。这是因为CB中CO2有扩张血管的作用，继而改善微循环， 促进氧弥散。围绕这个目标，笔者采用了放射治疗前服NA加吸CB，确实提高了患者在放射治 疗时的血氧饱和度。治疗结果表明，宫颈癌的近期疗效CR率有所提高(观察组为84%，对照组 为72%)，特别是质地较硬、坏死溃烂的结节型和溃疡型肿瘤(观察组为82.7%,对照组为61.8% ),从而进一步证实了上述理论和观点。较低的胃肠及皮肤反应基本可以消除放射治疗学家们 心中的疑虑。
-
表皮生长因子受体抗体对人舌鳞癌细胞增殖和放射敏感性的影响
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种在细胞生存信号路径中起重要作用的跨膜酪氨酸蛋白因子,其过度表达与恶性肿瘤进展有关;采用EGFR单克隆抗体(EGFRmAb)竞争性的抑制其正常配体与受体的结合,可以抑制肿瘤的生长和发展.笔者选用人舌鳞癌Tca8113细胞系观察EGFRmAb对其增殖和放射敏感性方面的影响.
-
血红蛋白浓度对鼻咽癌患者早期黏膜放射反应的影响
氧效应在肿瘤的放射治疗中起着重要的作用,贫血将影响到肿瘤的氧合状态,从而影响到肿瘤的放射敏感性.然而,贫血是否影响到正常组织的氧合状态及血红蛋白(Hb)和正常组织放射损伤的关系报道尚少.笔者就鼻咽癌患者Hb和早期黏膜放射反应的关系进行回顾性分析.
-
RNA干扰MDC1基因对食管癌细胞X线照后细胞周期及相关蛋白表达影响
目的：利用RNA干扰技术降低食管癌细胞ECA109中MDC1基因表达，观察照射后细胞周期和放射敏感性变化并探讨相关机制。方法针对MDC1mRNA序列设计合成3对有效干扰序列和阴性对照序列，与载体pSIH1?H1?copGFP形成重组质粒，RT?PCR和蛋白印迹法测定MDC1mRNA和蛋白水平表达。克隆形成实验检测细胞放射敏感性，流式细胞术检测细胞周期，蛋白印迹法检测CHK1、CHK2蛋白表达，激光共聚焦显微镜观察细胞核内MDC1斑点数量。单因素方差分析组间差别。结果成功构建 pMDC1?shRNA 质粒并感染 ECA109细胞，获得稳定转染细胞 ECA109M。ECA109M细胞MDC1mRNA、蛋白表达水平低于ECA109N、ECA109细胞（ P＝0．032、P＝0．041）。5 Gy照射后 ECA109M 细胞 G2＋M 期比例低于 ECA109N、ECA109（P＝0．026）。5 Gy 照射后 ECA109、ECA109N、ECA109M细胞中CHK1和CHK2蛋白表达相近（P＝0．345和P＝0．451），ECA109M 细胞CHK2T68蛋白表达低于ECA109、ECA109N细胞（ P＝0．012）。 ECA109细胞D0值为3．06 Gy，SF2值为0．91；ECA109N、ECA109M细胞的D0值分别为2．90、1．88 Gy；SF2值分别为0．89、0．84（ P＝0．021；P＝0．037）。结论 RNA干扰降低MDC1蛋白表达后可以降低细胞周期相关蛋白的表达，解除细胞周期阻滞，增强食管癌细胞ECA109的放射敏感性。
-
姜黄素增强人乳头瘤状甲状腺癌细胞TP C-1放射敏感性的研究
目的：研究姜黄素对人乳头瘤状甲状腺癌细胞TCP?1放射敏感性的影响，并探索姜黄素可能作用的信号通路，为甲状腺癌放射增敏剂的开发提供新的思路。方法使用姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC?1，CCK?8法检测细胞增殖，克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，流式细胞仪检测细胞凋亡情况， western blot检测p50、p65、凋亡相关蛋白Bcl?2和Bax的表达变化。使用NF?κB信号通路抑制剂PDTC抑制NF?κB信号通路活性，检测细胞增殖、克隆形成和凋亡变化。结果姜黄素和放射性碘处理人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC?1后，细胞增殖率下降，克隆形成减少，凋亡上升，凋亡抑制蛋白Bcl?2表达下调，促凋亡蛋白Bax表达上调，并呈浓度依赖性。这些结果表明姜黄素可增加TPC?1细胞的放射敏感性。碘放射后TPC?1细胞NF?κB通路活化，姜黄素可以抑制碘放射后TPC?1细胞NF?κB通路的激活。使用抑制剂抑制NF?κB通路的活性，细胞增殖下降，克隆形成减少，凋亡上升，放射敏感性升高。结论姜黄素可能靶向NF?κB信号通路，通过抑制NF?κB信号通路活性调节甲状腺癌细胞的放射敏感性。
-
miR-34a对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响
骨肉瘤是儿童和青少年中常见的骨原发性恶性肿瘤，具有侵袭性强，预见性差，致死和致残率高的特点［1?2］。放射是目前骨肉瘤治疗的主要手段之一，可以有效治疗转移性骨痛和复发、不宜手术或拒绝手术者。然而放射抵抗是放射的主要瓶颈，如何提高放射敏感性是骨肉瘤治疗面临的主要问题。 microRNAs （ miRNAs ）是一类内源性非编码单链 RNA分子，对细胞的生长分化、增殖凋亡和肿瘤发生具有重要调控作用［3］。相关研究表明miRNAs还可通过抑制目标基因相关信号转导通路的活化，提高细胞凋亡率，降低肿瘤放射抵抗，有潜力成为靶向提高骨肉瘤放射敏感性的新靶点。
-
miR-485-3p通过靶向TLR1／NF-κB信号通路调节胃癌细胞放射敏感性
目的：研究miR?485?3p是否通过靶向TLR1对胃癌细胞放射敏感性起作用。方法分别用qRT?PCR和蛋白印迹法检测miR?485?3p和TLR1的表达变化，DIANA、TargetScan和miRanda软件预测和双荧光素酶报告实验验证 miR?485?3p 对 TLR1的靶向作用。将 miR?485?3p mimic 或TLR1 siRNA转染到胃癌MGC803细胞中，放射处理细胞，凋亡实验、克隆形成实验和MTT检测细胞放射敏感性的变化。双荧光素酶报告实验检测miR?485?3p上调和TLR1沉默对NF?κB活性的影响。蛋白免疫印迹实验探究miR?485?3p上调和TLR1沉默对NF?κB靶基因的影响。结果放射处理后胃癌细胞miR?485?3p表达下调，TLR1表达上调。靶基因预测软件发现TLR1可能是miR?485?3p的靶基因，双荧光素酶报告实验进一步验证了TLR1是miR?485?3p的直接靶点。 miR?485?3p负调控TLR1的表达。 miR?485?3p的过表达提高了细胞凋亡率，降低了细胞克隆形成和细胞群体增殖能力，增强了细胞的放射敏感性，且TLR1的沉默也具有相同作用。 miR?485?3p上调和TLR1沉默均降低了NF?κB的活性，下调了NF?κB多个靶基因的表达。结论 miR?485?3p可能通过靶向TLR1调控NF?κB信号通路增强胃癌细胞的放射敏感性。
-
多西紫杉醇对甲状腺乳头状癌TPC－1细胞生长及放射敏感性的影响
本实验采用多西紫杉醇联合放射作用于体外培养的人甲状腺乳头状癌TPC－1细胞系，初步探讨多西紫杉醇对TPC－1细胞的放射增敏作用及相关机制。
-
肿瘤放射增敏剂临床应用现状
在恶性肿瘤放疗时试用放射增敏剂以提高肿瘤细胞的放射敏感性,进而改善恶性肿瘤放疗效果,是当前临床放射生物学的重要课题之一.已有若干放射增敏剂在完成临床前试验研究后过度到临床试用.虽然有的药物在临床试验后因毒性过大或未能得到预期效果而被放弃,但是各国学者仍在不懈努力中.增敏剂的应用必将进一步提高恶性肿瘤患者的放疗效果.
-
反义miR-221/222上调p27kip1对MCF-7乳腺癌细胞系的放射增敏作用
目的 探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响.方法 经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系.脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后,用Northern blot法检测转染后MCF-7细胞miR-221、miR-222表达水平;将实验细胞分为6组:对照组、对照照射组、无义序列组、无义序列照射组、反义miR-221/222共转染组和反义miR-221/222共转染照射组.用MTT法检测细胞增殖及放射协同作用,流式细胞仪分析细胞周期,克隆形成实验检测细胞增殖,Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化.数据间的方差分析采用F检验;两两比较采用LSD-t检验.结果 经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27kip1是miR-221/222的靶基因.Northern blot显示反义miR-221/222共转染组miR-221、miR-222的表达水平明显下降(miR-221:P=0.000;miR-222:P=0.000).对照组及无义序列组之间miR-221、miR-222表达水平的差异无统计学意义(miR-221:P=0.371;miR-222:P=0.284).MTT结果显示转染后第4天共转染组肿瘤细胞生长抑制效果好,细胞增殖率明显低于对照组和无义序列组(P=0.000),但与放射治疗无协同作用(P=0.091).流式细胞术检测可见共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞(P=0.000).经放射治疗后,可明显降低S期比例(P=0.002).克隆形成实验表明反义miR-221/222可增加MCF-7细胞的放射敏感性.Western blot显示反义miR-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调(P=0.000).结论 反义miR-221/222通过上调p27kip1蛋白表达可以增加MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性.
-
食管癌术前放疗后病理反应与预后的关系
目的探讨食管癌术前放疗后病理反应与远期生存之间的关系,以及放射敏感性在食管癌放疗中的意义.方法 176例食管癌术前放疗后行肿瘤切除的患者,按放疗后肿瘤组织的病理反应分为轻、中、重度反应组,分析各组间的总生存率、无病生存率及相关的影响因素,并与191例单纯手术患者进行对照.结果 (1)重、中、轻度反应组的5年总生存率分别为60.7%、46.4%和21.1%,重度反应组优于中度反应组(P=0.029),中度反应组优于轻度反应组(P=0.013).与单纯手术组的5年生存率(38.8%)比较,重度反应组优于单纯手术组(P=0.000),中度反应组稍优于单纯手术组(P=0.295),轻度反应组低于单纯手术组(P=0.034).(2)重、中、轻度反应组5年无病生存率分别为55.7%、40.7%和18.7%,重度反应组优于中度反应组(P=0.029),中度反应组优于轻度反应组(P=0.018).与单纯手术组的5年无病生存率(33.3%)比较,重度反应组优于单纯手术组(P=0.000),中度反应组稍优于单纯手术组(P=0.23),轻度反应组低于单纯手术组(P=0.096).(3)重度反应组T4、N1、Ⅰ～Ⅱ期和根治切除的比例分别为9.8%、18.0%、90.2%和90.2%,中度反应组分别为20.3%、15.9%、79.7%和82.6%,轻度反应组分别为42.2%、 37.8%、53.3%和46.7%,单纯手术切除组分别为50.3%、40.8%、37.7%和77.5%,中、重度反应组均优于轻度反应组和单纯手术组(P<0.01),轻度反应组与单纯手术组相仿(P>0.05).结论食管癌术前放疗组中,肿瘤组织有重度放射反应的患者较单纯手术切除组的疗效得到了明显提高,中度反应组略改善,轻度反应组反而下降.这说明对放射不敏感的患者,术前放疗并无好处,甚至有害,提示在决定术前放疗前应该进行肿瘤放射敏感性预测,使治疗更个体化.
-
RNA干扰抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶基因表达对放射敏感性的影响
目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因特异性短发夹样RNA(shRNA)真核表达载体,观察其联合射线对人喉癌Hep-2细胞端粒酶活性和细胞存活的影响,研究hTERT基因在放射增敏中的作用.方法 根据hTERT mRNA编码序列设计RNA干扰(RNAi)靶点,构建重组表达质粒pshRNA-hTERT,构建成功后,转染Hep-2细胞并作射线处理,用端粒重复序列扩增方法(TRAP-PCR-ELISA)检测端粒酶活性的动态变化,采用克隆形成分析方法观察质粒pshRNA-hTERT对Hep-2细胞放射敏感性的影响,计算放射增敏比SERSF2.结果 转染质粒pshRNA-hTERT后,Hep-2细胞的hTERT mRNA表达抑制率为60.8%,质粒pshRNA-hTERT不仅能够抑制Hep-2细胞的端粒酶活性(P＜0.05),而且还可以抑制辐射诱导的端粒酶活性上升(P＜0.05).照射前经pshRNA-hTERT处理24 h,明显降低了2 Gy照射后Hep-2细胞的存活分数(85.7%),与单纯放射组(67.7%)相比,差异有统计学意义(P＜0.05),pshRNA-hTERT的放射增敏比SERSF2为1.27.结论 RNAi显著抑制了靶基因hTERT的表达,质粒pshRNA-hTERT能明显抑制2Gy照射诱导的Hep-2细胞端粒酶活性升高,并显著提高其体外放射敏感性;质粒pshRNA-hTERT的放射增敏作用可能与端粒酶活性受抑制有关.
-
表皮生长因子受体表达与非小细胞肺癌放疗敏感性的关系
目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)表达与非小细胞肺癌(NSCLC)放疗敏感性的关系.方法 体外化学合成EGFR基因序列特异性双链RNA(dsRNA)结合脂质体Lipofectamine 2000转染肺腺癌细胞株SPC-A1,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和Western blot法测定转染细胞中EGFRmRNA和蛋白的表达,采用集落抑制实验观察EGFR序列特异性dsRNA(dsRNA-EGFR)的体外放疗增敏作用.建立裸鼠肿瘤模型,通过测定肿瘤体积和肿瘤重量,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤抑制率.结果 对照组、dsRNA-unrelated组和dsRNA-EGFR组的EGFRmRNA相对表达量分别为1.51±0.22、1.38±0.15和0.45±0.11(F=482.7,P＜0.01),EGFR蛋白表达水平分别为2340.87±10.99、2231.85 ±35.66和832.03±39.13(F =263.3,P＜0.05).dsRNA-EGFR可将对照组EGFR mRNA和蛋白水平分别下调70.2％和64.5％.放疗对照组、dsRNA-unrelated联合放疗组和dsRNA-EGFR联合放疗组的集落抑制率分别为9.3％、12.5％和65.5％,肿瘤抑制率分别为21.3％、24.4％和64.2％,dsRNA-EGFR联合放疗可显著抑制体外、体内的肿瘤生长.结论 dsRNA-EGFR可显著抑制NSCLC中EGFR mRNA和蛋白的表达,有效抑制肿瘤生长,增强NSCLC的放疗敏感性.
