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人子宫内膜癌细胞株HECCL-1生物学特性的研究
目的:探讨HECCL-1细胞株的生物学特性.方法:利用流式细胞仪测定耐药相关基因蛋白MDRl、GST-P、LRP、MMT和MRP及凋亡相关基因Fas,p53、Bcl-2和p16的表迭,检测细胞DNA周期和瘤细胞接种裸鼠后成瘤情况;采用MTT法测定HECCL-1细胞在不同剂量6 MV X线照射后的存活分数,计算放射生物学参数.并和HeLa细胞株作比较,计算照射前后细胞倍增时间.结果:HECCL-1细胞耐药基因及相关蛋白、凋亡相关基因均呈阴性表达.DNA周期检测结果:G0～G1期88.63%,G2～M期6.74%,S期4.63%.瘤细胞接种裸鼠后可再次成瘤并有肝转移表现;HECCL-1细胞株对射线敏感,肿瘤细胞群体倍增时间照射前后差异有统计学意艾,P<0.01.结论:HECCL-1细胞株耐药基因、凋亡基因、细胞DNA周期的检测及放射敏感性的研究结果,有助于指导子宫内膜癌的治疗.
关键词： 子宫内膜肿瘤/生物学 放射生物学 基因表达 放射敏感性 -
CpG ODN107增强人脑胶质瘤细胞放射敏感性的研究
目的:探讨CpG ODN107增加人脑胶质瘤细胞(CHG-5)放射敏感性的作用及可能机制.方法: 用不同浓度CpG ODN107处理CHG-5细胞,然后经放射线照射,MTT法检测细胞的增殖情况,体外培养集落形成率与细胞划痕法观察细胞的集落形成和迁移能力,ELISA法检测细胞TNF-α的分泌水平.结果:CpG ODN107抑制CHG-5细胞的增殖,并呈量效关系.CpG ODN107(10 μg/mL)联合放射线照射,抑制CHG-5细胞的增殖作用强(0.52±0.76).CpG ODN107(10 μg/mL)同样能抑制CHG-5细胞增殖和迁移,并且增加了TNF-α的分泌,在联合照射后作用更加显著(193±0.58) pg/mL.结论: CpG ODN107对CHG-5有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN107增强肿瘤细胞TNF-α的分泌有关.
关键词： CpG ODN107 人脑胶质瘤细胞 放射敏感性 研究 -
鼻咽癌移植瘤Annexin A3和Nm23-H1蛋白表达与放射敏感相关性的研究
目的:探讨不同放射敏感性鼻咽癌移植瘤中Annexin A3和Nm23-H1蛋白的表达及意义.方法:将不同放射敏感性鼻咽癌细胞CNE-2R和CNE-2分别注射到裸鼠后肢皮下成瘤.成瘤后以X射线分次照射16 Gy,计算肿瘤体积及肿瘤倍增时间.采用免疫组化法检测移植瘤中Annexin A3和Nm23-H1蛋白的表达水平.结果:未受照射CNE-2R和CNE-2移植瘤倍增时间分别为4.8和3.9d,受照射CNE-2R和CNE-2移植瘤倍增时间分别为6.2和17.1d.未受照射CNE-2R移植瘤组织Annexin A3蛋白表达明显低于未受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.035±0.012和0.062±0.009,P=0.000；受照射CNE-2R移植瘤组织明显低于受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.029±0.007和0.051±0.009,P=0.000.未受照射CNE-2R移植瘤组织Nm23-H1蛋白明显高于未受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.056±0.007和0.043±0.007,P=0.022；受照射CNE-2R移植瘤组织明显高于受照射CNE-2移植瘤组织,MOD值分别为0.079±0.009和0.046±0.007,P=0.000.结论:CNE-2R移植瘤组织Annexin A3蛋白明显低于CNE-2移植瘤组织,受照射CNE-2R移植瘤组织Nm23-H1蛋白明显高于受照射CNE-2移植瘤组织,与体外实验结论一致,提示与鼻咽癌放射抗拒有关,可作为鼻咽癌放射治疗的新标志.
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重组腺病毒Rb94基因转染对Hela细胞辐射敏感性的研究
目的:探讨重组腺病毒Rb94(Ad-Rb94)基因转染对宫颈癌细胞辐射敏感性的影响.方法:将Ad-Rb94基因转染宫颈癌细胞株Hela,进行137Cs γ射线照射,数字随机表法分为空白对照组、Ad-LacZ组、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组.用RT-PCR法和免疫荧光法检测Rb-94基因mRNA和蛋白水平的表达,以MTT法观察细胞的生长曲线和单细胞凝胶电泳( SCGE)实验观察细胞DNA的损伤.结果:RT- PCR法和免疫荧光法检测到在Hela细胞有Rb-94基因的表达,Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组Hela细胞的生长均受到抑制,其中联合照射组的抑制效应强(P＜0.05).照射组和联合照射组细胞照射后出现DNA损伤,联合组损伤程度强于照射组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Ad-Rb94基因联合照射能明显增强人宫颈癌细胞的辐射敏感性.
关键词： 重组腺病毒Rb94基因 基因治疗 放射敏感性 宫颈癌细胞 -
血管内皮生长因子和乏氧诱导因子-1α联合环氧合酶-2在食管鳞癌组织中的表达及与放射敏感性的关系
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、乏氧诱导因子-1oα (HIF-1α)及环氧合酶-2(COX-2)在食管鳞癌组织中的表达及与放射敏感性的关系.方法 选取2015年4月至2017年6月间河南科技大学第一附属医院收治的56例食管鳞癌组织标本(食管鳞癌组)和23例正常食管黏膜组织标本(对照组),采用链霉素-生物素过氧化物酶复合物(SP)免疫组化染色法检测两组人员VEGF、HIF-1α和COX-2的表达,分析食管鳞癌组织中VEGF、HIF-1α和COX-2表达与临床病理特征及放射敏感性的关系.结果 食管鳞癌组患者VEGF、HIF-1α和COX-2的阳性表达率分别为76.8％、66.1％和67.9％,高于对照组的13.0％、0.0％和0.0％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).食管鳞癌患者VEGF表达与淋巴结转移有关,HIF-1α表达与TNM分期和淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(均P ＜0.05);放射敏感组患者的VEGF、HIF-1α和COX-2的阳性表达率分别为67.5％、55.0％和57.5％,低于不敏感组的100.0％、93.8％和93.8％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).TNM分期为Ⅱ期、Ⅲ期及VEGF、HIF-1 α和COX-2阳性表达是食管鳞癌放射敏感性的独立危险因素,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 VEGF、HIF-1α和COX-2在食管鳞癌组织中呈高表达,与肿瘤细胞的放射敏感性密切相关,是放射敏感性的独立危险因素.
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盐酸厄洛替尼联合放射治疗对食管癌放射敏感性的影响
目的 探讨厄洛替尼联合放射治疗对食管癌放射敏感性的影响.方法 选取2012年1月至2016年10月间陕西省宝鸡市中心医院收治的85例食管癌患者为研究对象.其中,43例接受厄洛替尼联合放射治疗的患者纳入观察组,42例接受单纯放射治疗的患者纳入对照组.比较两组患者放射治疗结束1个月后的疗效和治疗前后的环氧和酶-2 (COX-2)和血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达的情况.结果 放射治疗结束1个月后,观察组患者的治疗有效率为76.7％,高于对照组患者的47.6％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗前COX-2和VEGF阳性细胞百分率与治疗一个月后病灶长径总和占出诊时的比例呈正相关,差异均有统计学意义(r =0.849,P=0.02;r =0.811,P=0.03).治疗前,两组患者的COX-2和VEGF阳性细胞百分率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).放射治疗结束1个月后,两组患者的COX-2和VEGF阳性细胞百分率均低于治疗前,差异有统计学意义(P＜0.05).放射治疗结束1个月后,观察组患者的COX-2和VEGF阳性细胞百分率低于对照组患者,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 厄洛替尼联合放射治疗能够提高治疗食管癌的疗效并能增强患者的放射敏感性.
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吉西他滨联合放射线照射对人胆管癌细胞放射增敏作用的实验研究
目的 研究和探讨吉西他滨联合放射线照射对胆管癌细胞的放射增敏作用.方法 取指数生长期的胆管癌细胞(QBC939),采用细胞克隆形成分析法检测吉西他滨单药毒性,确定IC10、IC50和IC90作为下一步实验的药物浓度.将QBC939细胞分为对照组、单纯药物组、单纯照射组及照射前、后吉西他滨IC10、IC50和IC90浓度下作用24 h组,X线照射剂量为0、1、2、4、6、8、10 Gy.采用多靶单击数学模型拟合细胞存活曲线,分别用D0、Dq比计算放射增敏比(SERD0、SERD).结果 吉西他滨对QBC939细胞的Ic10、IC50和IC90值分别为0.1、11.0、21.5 nmol/L.吉西他滨低浓度(IC10)时只在照后给药且较低照射剂量区域(≤2 Gy)表现出放射增敏作用(SERDq=1.52);中浓度(IC50)时照前给药增敏作用广泛(SERD0=1.27,SERDq=116.93),照后给药只在较低剂量区域(≤2 Gy)有放射增敏作用(SERDq=81.85);高浓度(IC90)时照射前后给药均具有一定放射增敏作用,但照前给药的作用明显强于照后给药.结论 吉西他滨与X线联合应用具有一定的放射增敏作用,但应注意药物浓度及给药顺序.
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COX-2抑制剂NS-398对肝癌细胞放射增敏作用的实验研究
目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398对肝癌细胞系HCC-9810的放射增敏作用及其机制.方法 MTT实验测定NS-398对肝癌细胞系HCC-9810细胞毒性;成克隆实验检测NS398对HCC-9810的放射增敏作用;电镜观察细胞形态学改变;流式细胞仪(FCM)分析细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、FCM观察Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达.结果 NS-398对HCC-9810细胞毒性呈现浓度、时间依赖性.10 μmol/L NS-398作用24 h细胞增殖抑制率仅为3%,由Dq计算增敏比(SER)为1.29,细胞存活曲线"肩区"减小.NS-398处理HCC-9810细胞后放射诱导凋亡的敏感性增高,Bax mRNA和蛋白表达上调,呈NS-398剂量依赖性关系,而Bcl-2表达无明显变化,Bax/BcL-2比值增高.结论 NS-398对肝癌细胞系HCC-9810有放射增敏作用,且可能是通过上调Bax基因表达增强放射诱导凋亡作用及抑制亚致死损伤修复实现的.
关键词： 环氧合酶-2 放射敏感性 凋亡 亚致死损伤修复 HCC-9810细胞 -
乏氧状态下外源性野生型p53基因对肺癌细胞照射敏感性的影响
目的 将重组人外源性野生型p53(wtp53)基因的腺病毒转染人肺腺癌细胞系(A549),在乏氧状态下舰察wtp53基因对A549细胞照射后存活的影响.方法 实验分为有氧状态下单纯照射组、照射+wtp53基因转染组,乏氧状态下单纯照射组、照射+wtp53基因转染组.给予9MeV电子束照射0、2、4、6、8、10 Gy,测定克隆形成率,用多靶单击模型拟和生存曲线,计算D0、Dq值和氧增强比(OER)、p53基因照射增敏比(SER).流式细胞仪检测4个组细胞凋亡率.结果 单纯照射时OER=1.75,转染wtp53后OER=0.81.有氧状态下wtp53的SER=1.77,乏氧状态下wtp53的SER=3.84.细胞凋亡率:未转染p53基因时,乏氧照射低于有氧照射组(F=7.92,P=0.048);有氧照射时单纯照射低于照射+wtp53基因转染组(F=52.44,P=0.001),乏氧照射时单纯照射低于照射+wtp53基因转染组(F=82.50,p=0.001);有氧照射+wtp53基因转染组和乏氧照射+wtp53基因转染组的凋亡率相似(t=2.04,P=0.111).结论 乏氧能够增加肺癌细胞埘照射的抗拒性.wtp53基因可以促进乏氧状态下的A549细胞的凋亡和提高放射敏感性.
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RNA干扰HIF-1α增强人肺腺癌SPCA-1细胞放射敏感性的研究
目的探讨RNA干扰乏氧诱导因子1(HIF-1)增强人肺腺癌SPCA-1细胞的放射敏感性 .方法构建干扰HIF-1α质粒pSUPER-HIF-1α,采用荧光定量RT-PCR、Western blot方法观察有氧与乏氧状态下RNA干扰HIF-1α的变化,用成克隆实验观察乏氧时RNA干扰HIF-1α对放射的增敏作用.结果在常氧和乏氧的状态下,RNA干扰HIF-1α引起mRNA的表达水平分别下降64%和76%;在乏氧的状态下,蛋白的表达下降.转染pSUPER-HIF-1α后的细胞存活曲线的 D0值为2.5 Gy,转染空白质粒细胞和空白对照细胞的D0值分别为5.0 Gy和5.1 Gy,增敏比为2.1.结论 RNA干扰HIF-1α可以增加SPCA-1细胞对放射的敏感性.
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敲低miR-221、miR-222表达对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究
R-222共转染组细胞PTEN蛋白表达明显上调,pAkt蛋白表达下调.结论 反义miR-221、AS-miR-222可能通过上调PTEN蛋白表达增强MCF-7人乳腺癌细胞放射敏感性.
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DNA-PKCS反义寡核苷酸转染肺腺癌细胞系A549提高放射敏感性的实验研究
目的 通过DNA-PKCS反义寡核苷酸转染肺癌细胞A549,探讨DNA-PKCS对肺癌细胞放射敏感性影响.方法 设0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0.8.0 Gy放射剂量点处理对照组(与转染无关的寡核苷酸)和实验组(转染DNA-PKCS反义寡核苷酸),用成克隆法分析细胞存活分分数,并分别用线性二次模型和多靶单击模型拟合出细胞存活曲线,求出放射生物学参数α、β、SF2、Do、Dq和N,评价细胞放射敏感性变化.结果 对照组α值为0.14,β值为0.030,SF2值为0.63,Do值为2.38,Dq值为1.43.实验组α值为0.31,β值为0.018,SF2值为0.41,Do值为2.09,Do值为0.60.实验组细胞的α值增大,β、SF2、Do、Dq值均减少.结论 DNA-PKCS反义寡核苷酸可增强A549细胞放射敏感性,DNA-PKCS是治疗肺癌的潜在靶点.
关键词： DNA依赖性蛋白激酶 反义寡核苷酸 细胞系 肺肿瘤 放射敏感性 -
不同放射敏感性的鼻咽癌细胞中ATM/PI3 K区基因突变的研究
目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞(CNE1、CNE2)中ATM/PI3K区基因突变的情况.方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和荧光标记的双脱氧核糖核苷三磷酸(ddNTP)循环测序方法,对不同放射敏感性的鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2中ATM/PI3K关键区域进行突变检测.结果所测CNE1、CNE2中的ATM/PI3K区序列中没有发生突变.结论鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2内在放射敏感性的差异可能由ATM/PI3K区基因突变以外的因素所决定.
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p53基因对食管癌细胞的作用
目的观察野生型p53基因对不同放射敏感性食管癌细胞的作用,探索p53基因治疗与放射治疗联合应用的价值.方法以人食管癌细胞株TE-13及经反复照射后改变了放射敏感性的细胞TE-13R50为实验对象,将载有人野生型p53cDNA并含巨细胞病毒(CMV)启动子的重组腺病毒(Ad5CMV-p53)感染上述两种细胞及肿瘤组织并加用放射,在体、离体实验比较观察Ad5CMV-p53对不同放射敏感性食管癌细胞的影响.结果 TE-13细胞及TE-13R50细胞的放射敏感性明显不同(D0值分别为1.38、2.48*!Gy);当联合应用Ad5CMV-p53时明显增加了它们的放射敏感性,TE-13R50细胞的提高幅度较大,接近了亲代细胞的水平(D0值分别为0.97、1.14*!Gy).放射合并瘤内注射Ad5CMV-p53与单纯放射相比,荷瘤裸鼠的肿瘤生长速度明显受到抑制,对TE-13R50细胞的作用更大.结论 Ad5CMV-p53可提高食管癌细胞的放射敏感性,在一定程度上消除了食管癌细胞的放射抗拒性.
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不同敏感性鼻咽癌细胞株中Ku蛋白表达情况比较
目的比较作为DNA双链断裂修复蛋白DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的调节亚基70 Ku、80 Ku在不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2中的表达情况.方法成克隆实验测定鼻咽癌高分化鳞癌细胞CNE1和低分化鳞癌细胞CNE2不同剂量照射后的存活分数,用线性二次模型拟合剂量存活曲线并求出放射生物学参数α、β、SF2、MID以评价两株细胞的放射敏感性.Western blot检测照射前和后不同时间及不同剂量CNE1、CNE2细胞中Ku的表达,检测蛋白条带的吸光度值做半定量分析.结果 CNE1在各个剂量点的存活分数均比CNE2高,MID也大于CNE2(2.35:1.11),SF2也大于CNE1(0.54:0.37).Western blot显示两株细胞中70 Ku、80 Ku均有表达,蛋白条带的吸光度值测定显示70 Ku在CNE1、CNE2细胞中分别为20.03±7.56和19.36±6.04,80 Ku分别为25.98±12.87和23.74±9.24(P值均>0.05).蛋白表达的定量和定性分析同样显示4 Gy照射后不同时间点及0～16 Gy照射后12 h Ku的表达无统计学差异.结论实验验证了CNE2比CNE1对放射更敏感;照射前后两个细胞均有70 Ku、80 Ku蛋白表达且无差异;CNE1、CNE2放射敏感性的差异与Ku蛋白表达量无明显关系.
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E1A基因对喉癌细胞系放射敏感性的影响及机制的初步实验研究
目的 探讨ElA基因对喉癌细胞系(Hep-2细胞)放射敏感性的影响并初步探讨其机制.方法 以腺病毒为载体将E1A基凶及其空载体转染至人Hep-2细胞,经RT-PCR法鉴定获得含ElA的阳性兜隆.设未转染组(PBS)、转染空载体组(Ad-β-gal)和转染组(Ad-E1A),分别给予6 MVx线单次照射0、1、2、4、6、8、10 Gy,成克降实验绘制细胞存活曲线并计算D0、Dq、α、β值以观察E1A基因对Hep-2细胞放射敏感件的影响.设PBS组、Ad-β-gal组、Ad-E1A组、PBS+照射组、Ad-β-gal+照射组、Ad-E1A+照射组,单次照射6 Gy,流式细胞仪检测细胞凋亡及RT-PCR检测血管内皮牛长因子(VEGF)水平并半定量VEGF以初步探讨机制.结果 转染后的阳性克隆细胞RT-PCR结果显示E1A已整合到细胞基因组中并且稳定表达.Ad-E1A组、Ad-β-gal组、PBS组细胞的D0值分别为0.86、1.96、1.98 Gy,Dq值分别为1.02、1.97、1.99 Gy,α值分别为0.536、0.112、0.104(Gy-1)和β值分别为0.521、0.137、0.125(Gy-2).PBS组、Ad-β-gal组、Ad-ElA组、PBS+照射组、Ad-β-gal+照射组、Ad-E1A+照射组的细胞凋亡率分别为1.26%、1.18%、2.16%、2.55%、2.96%、4.96%.Ad-E1A组、PBS+照射组、Ad-βgal+照射组及Ad-ElA+照射组VEGF的表达水平较PBS组及Ad-β-gal组低,且Ad-E1A+照射组表达低.结论 成功构建了稳定表达E1A基因的喉癌细胞系.EIA基因对人喉癌细胞有放射增敏作用,其机制可能与降低VEGF表达和促进细胞凋亡有关.
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表皮生长因子受体单克隆抗体C225对肺鳞癌细胞系放射增敏作用研究
目的 观察表皮生长因子受体单克隆抗体C225与60Co γ线对人肺鳞癌细胞系(H-520)的杀伤作用,探讨C225联合照射治疗非小细胞肺癌的可行性.方法 细胞成克隆实验中单纯照射(对照组)和照射+100 nmol/L C225组(实验组)给予0、1…2 4 6、8、10 Gy照射,培养10 d后计数≥50个细胞克隆.采用多靶单击模型进行数据处理,拟合细胞存活曲线,计算增敏比(D.值比).细胞凋亡实验均照射0、2、4、8 Gy后继续培养72 h,收集细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡.细胞周期检测设对照组(不处理)、C225组(100 nmol/L)、照射组(8 Gy照射)和C225联合照射组(100 nmol/LC225+8 Gy),照后48 h收集细胞,流式细胞仪检测周期分布.结果 细胞克隆存活实验结果表明,扣除C225毒性影响后实验组存活分数比对照组低(F=6.36,P＜0.05),增敏比为1. 35.细胞凋亡实验结果显示,C225组4个剂量点凋亡百分率分别为13.75%±0.83%、25.12%±1.60%、46.12%.4-2.60%、50.51%±4.06%,对照组的分别为5.56%±0.62%、13.86%±0.80%、25.36%±1.02%、29.89%±2.09%(F=4.72,P＜0.05).细胞周期分布显示100 nmo//L C225可使细胞阻滞于G0+G1期,单纯照射阻滞于G2+M期,两者联合后同时出现G0+G1、G2+M期阻滞,三者均使S期细胞比例下降.结论 C225对H-520细胞具有放射增敏作用,其机制可能与细胞G0+G1期阻滞和诱发凋亡有关;结果 为临床上二者联合治疗非小细胞肺癌提供了理论基础.
关键词： 细胞系 肿瘤 60Coγ线照射 表皮生长因子受体单克隆抗体 放射敏感性 -
人肿瘤细胞系LigaseⅣ基因突变与放射敏感性的关系研究
目的研究人肿瘤细胞DNA-LigaseⅣ基因突变与放射敏感性的关系.方法常规集落形成方法测定人鼻咽鳞癌(CNE)、肺腺癌(SPC-A1)和乳腺腺癌(MCF-7)细胞系不同剂量照射后的细胞存活分数,采用聚合酶链式反应和克隆技术测定3种细胞参与DNA损伤修复的DNA ligaseⅣ基因序列,分析它们的同源性变化和突变对基因产物亲疏水性的影响.结果 3种细胞存活参数比较存在较大差异,CNE细胞较SPC-A1和MCF-7细胞显示出较高的放射敏感性.CNE、SPC-A1和MCF-7细胞LigaseⅣ基因同源性分别为99.95%、99.99%和99.98%,包括碱基转换和颠换突变.部分突变碱基导致氨基酸替代并影响基因产物的亲疏水结构.CNE细胞LigaseⅣp的313aa His→Arg、538aa Gly→Arg、579aa Lys→Arg和585aa Asn→Ser替代与CNE细胞放射敏感性高于SPC-A1和MCF-7细胞有关.结论 LigaseⅣp在非同源性末端连接(NHEJ)途径中起关键和终连接作用,该基因突变影响肿瘤细胞的双链断裂损伤修复能力和放射敏感性.
关键词： 放射敏感性 脱氧核糖核酸连接酶Ⅳ 肿瘤细胞系 人 -
模拟调强技术照射鼻咽低分化鳞癌细胞的生物效应机制研究
目的 探讨延长时间的调强照射对鼻咽低分化鳞癌细胞系(CNE-2)放射生物效应的影响以及初步机制研究.方法 实验分为空白对照组、单次照射组、模拟调强照射组,照射采用6 MVX线照射2、4、6、8 Gy(成克隆实验增加1 Gy剂量点),剂量率3 Gy/min.单次照射组完成时间1～3min,模拟调强照射组各剂量点分别等分割5次,每次间隔8.0～8.5 min.采用克隆分析法检测不同照射模式下CNE-2细胞的放射敏感性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2的转录水平.结果 模拟调强照射组不同剂量的存活分数均高于单次照射组,其α单次照射>α模拟调强照射(0.675 Gy-1:0.538 Gy-1)、β单次照射>β模拟调强照射(0.051 Gy-2:0.027 Gy-2)、D0单次照射
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阻断PI3K/AKT通路对乳腺癌细胞放射敏感性影响的研究
目的 研究抑制磷脂酰肌醇3激酶和(或)蛋白激酶B(PI3K/AKT)生存传导路径是否改变乳腺癌细胞的放射敏感性.方法 用乳腺癌细胞细胞株MCF7为实验对象,分别接受单纯放射、Ly294002(PI3K抑制剂)和二者结合处理.通过Western印记法证实Ly294002可下调AKT活性.采用成克隆法定量分析细胞增殖性死亡.通过半胱天冬酶-3(caspase-3)活性评估细胞凋亡.结果 单纯Ly294002(5 μmol/L)可抑制AKT的磷酸化,而单纯放射对AKT的活性无明显影响,二者结合可提高对AKT活性的抑制作用.Ly294002(5 μmol/L)在放射前与细胞作用1 h及放射后作用10 d均可提高MCF7细胞对放射的敏感性.Ly294002结合放射可增加MCF7细胞增殖性死亡,SF4值的放射增敏比为1.25,D0值的放射增敏比为1.42.Ly294002可增加MCF7细胞放射后诱导的细胞凋亡.结论 抑制PI3K通过降低AKT活性,增加MCF7细胞对放射的敏感性,为筛选放射敏感剂进行临床实验提供了依据.
