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siRNA沉默Annexin A2基因表达对鼻咽癌细胞放射敏感性的影响
目的 探讨siRNA沉默Annexin A2基因表达对鼻咽癌CNE-2(R743)细胞放射敏感性的影响.方法 化学合成Annexin A2基因的siRNA经HiPerFect转染入R743细胞.RT-PCR和蛋白印迹法检测转染前后Annexin A2的mRNA和蛋白表达,克隆形成实验分析转染前后对细胞放射敏感性的影响,流式细胞仪和TUNEL实验分别检测转染前后经X线照射后细胞周期、细胞凋亡情况.结果 RT-PCR和蛋白印迹法结果显示转染组细胞Annexin A2基因及蛋白表达下调.克隆形成实验分析结果表明转染组Do、Dq、SF2值均低于单纯照射组和转染对照组,其相应放射增敏比(Do值比)分别为1.30和1.27.X线照射后转染组细胞G2+M期比例增加并高于单纯照射组和转染对照组(32.46％、9.42％、9.17％,P=0.000、0.000),转染组凋亡率也高于单纯照射组和转染对照组(35.20％、10.87％、11.33％,P=0.000、0.000).结论 siRNA沉默Annexin A2基因表达可增强R743细胞放射敏感性,可能与DNA损伤修复、细胞周期时相分布变化有关.
关键词： RNA干扰 Annexin A2基因 细胞系 鼻咽肿瘤 放射敏感性 -
食管鳞癌细胞HOTAIR mRNA表达水平与放射敏感性之间关系
目的 分析细胞内HOTAIR mRNA表达水平与食管鳞癌细胞放射敏感性之间的关系.方法 以4种食管鳞癌细胞( K150、K450、TE-1、Eca109细胞)为研究对象. 采用qRT-PCR检测细胞中HOTAIR mRNA表达水平,采用平板克隆形成实验检测不同剂量X射线照射下的存活分数( SF).采用t检验或方差分析差异,Pearson法进行相关分析. 结果 4种细胞均呈现HOTAIR mRNA高表达及放射抵抗性,其中 Eca109 细胞表达水平低,每个剂量点 SF 也低, D0、Dq 值也均低.HOTAIR mRNA表达水平和放射敏感性从低至高依次为K150
关键词： HOTAIRmRNA表达 放射敏感性 细胞系 食管鳞状细胞癌 -
原代培养人肺癌相关成纤维细胞对肺癌细胞放射敏感性影响研究
目的 探讨在体外直接接触共培养条件下人肺癌相关成纤维细胞(CAF)对肺癌细胞系放射敏感性的影响.方法 采用人肺癌组织进行原代培养后获取人肺CAF,采用免疫荧光技术鉴定.CAF与肺癌细胞系A549、H1299进行直接接触共培养,采用细胞克隆形成实验观察其对肺癌细胞系放射敏感性的影响.结果 新鲜人肺腺癌经组织块贴壁法原代培养出可稳定传代的CAF,其特异表达α-平滑肌肌动蛋白、波行蛋白和成纤维细胞活化蛋白,而无细胞角质蛋白-18表达.在0 Gy照射时单独组和共培养组A549细胞的克隆形成率分别为(20.0±3.9)％和(32.3±5.5)％(P＜0.05),H1299细胞的分别为(20.6±3.1)％和(35.2±2.3)％(P＜0.05).单独组和共培养组A549细胞的SF2分别为0.727 ±0.061和0.782±0.089(P＞0.05),H1299细胞分别为0.692±0.065和0.782±0.037(P＞0.05);人肺CAF对A549、H1299细胞的放射保护增益比分别为1.29和1.25.结论 人肺CAF与肺癌细胞系直接接触共培养后使肺癌细胞放射敏感性降低,原因可能为CAF促进了肿瘤细胞增殖.
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慢病毒介导的RNAi沉默食管癌Eca109细胞MDC1基因表达对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响
目的 研究抑制MDC1基因的蛋白表达对裸鼠移植瘤的影响,观察裸鼠肿瘤病理组织学和细胞生物学特征的变化.方法 根据MDC1 mRNA序列,设计合成3对有效的干扰序列和阴性对照序列,并与载体pSIH1-H1-copGFP形成重组质粒,RT-PCR和蛋白印迹法测定MDC1 mRNA和蛋白表达水平,筛选出阴性转染组(ECA109-N)、MDC1转染组(ECA109-M)细胞,将其接种裸鼠分为ECA109-M、ECA109-N、ECA109组,上述各组又分为60C0 γ射线照射组和未照射组.观察各组裸鼠移植瘤照射后体积变化,蛋白印迹法检测移植瘤组织中CHK1、CHK2、CHK2T68表达水平,流式细胞仪分析裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和细胞凋亡情况.多组样本均数间的比较采用方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 成功构建pMDC1-shRNA质粒并转染ECA109细胞,获得稳定转染细胞ECA109-M.所有接种裸鼠均成活并在接种后1周左右可见裸鼠爪下形成移植瘤,各组之间肿瘤大小相近(P＞0.05).15Gy照射后单纯照射组和空载照射组裸鼠的肿瘤生长速度慢于未照射组(P＜0.05),其中MDC1转染联合照射组较阴性对照组和空白组肿瘤相对生长速率降低(P＜0.05),生长抑制率升高(P＜0.05).MDC1转染联合照射组q值为1.36.MDC1转染联合照射组裸鼠体内CHK1和CHK2的蛋白表达水平相近(P＞0.05),但CHK2T68磷酸化水平明显降低(P＜0.05),各组裸鼠肿瘤组织中细胞周期分布和凋亡细胞比例也相近(P＞0.05).结论 RNA干扰降低MDC1蛋白表达后可有效增强细胞的放射敏感性,表现为抑制了60Co γ射线照射后裸鼠移植瘤的生长速度.
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miR-20a通过靶向抑制PTEN诱导肝癌细胞放射抵抗
目的 探讨miR-20a在肝癌放射敏感性中的作用及机制.方法 荧光定量PCR检测肝癌细胞系和组织标本中miR-20a的表达;构建稳定过表达miR-20a肝癌细胞系,通过克隆实验探讨miR-20a对肝癌细胞放射敏感性影响;蛋白印记法检测Bcl-2、Caspase-3以及 γ-H2AX的表达;生物信息学预测miR-20a下游调控的靶基因,双荧光素酶报告系统、荧光定量PCR及蛋白印记法进一步验证;在稳定过表达miR-20a的肝癌细胞系中转染pCDNA3.0-PTEN探讨细胞放射敏感性的变化,明确PTEN是否为miR-20a诱导肝癌放射抵抗的一个功能性靶基因.结果 miR-20a在肝癌细胞系和组织标本中表达上调(P<0.05);经过同等条件的放射处理后,与空白及对照组(WT组、LV-con组)相比,过表达miR-20a组(LV-miR-20a组)细胞存活分数升高,放射抵抗增强(P<0.05),Bcl-2表达上调,Caspase-3及 γ-H2AX表达下调;过表达PTEN能够逆转miR-20a引起的放射抵抗.结论 miR-20a在肝癌细胞系及组织标本中表达上调;过表达miR-20a可以促进肝癌细胞放射抵抗,PTEN是miR-20a诱导肝癌放射抵抗的一个功能性靶基因,预示着miR-20a/PTEN位点可能是是肝癌临床放疗相关的有效分子靶点.
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宫颈癌组织IER5与放射敏感性及临床意义研究
目的 探讨宫颈癌患者放疗前后早期快速反应基因5(IER5)蛋白表达特点及其与放射敏感性及临床疗效的相关性.方法 对2014—2015年接受同步放化疗的39例Ⅱb—Ⅲb期宫颈癌患者为研究对象,采集放疗前和接受累积2~6、10、20、30 Gy照射的宫颈癌组织,应用蛋白印迹法技术检测IER5蛋白相对表达水平.IER5蛋白表达与放射剂量相关性采用Pearson相关分析;不同放射剂量间IER5蛋白表达差异采用配对样本t检验;放射敏感组与抵抗组同一指标表达差异采用独立样本t检验;不同放射剂量IER 5蛋白表达变化与各临床指标间相关性采用重复测量方差分析.结果 宫颈癌组织10、20、30 Gy照射后IER5蛋白表达显著高于放疗前(t=3.06、4.01、6.99,P<0.01).IER5蛋白表达与不同放射剂量间存在相关关系(r=0.51,P<0.01).IER5在不同放射剂量下的蛋白表达与疗前肿瘤直径间存在交互作用(F=3.21,P<0.05),且疗前肿瘤直径<4、4~5 cm的IER5表达量随放射剂量显著变化(F=10.49、9.98,P<0.01).结论 宫颈癌患者放疗前和放疗中IER5表达有显著差异,且IER5表达随放射剂量升高而增多,提示 IER5与宫颈癌放射敏感性有关. 肿瘤越小IER5受放射后的表达变化越显著.
关键词： 早期快速反应基因5 放射敏感性 宫颈肿瘤/同步放化疗 -
miR-449a对胰腺癌细胞放射敏感性影响
目的 研究miR-449a对胰腺癌SW1990细胞放射敏感性的影响方法 qRT-PCR检测放疗前后胰腺癌SW1990细胞系中miR-449a的表达变化,利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将miR-449a mimics及miR-NC转染到SW1990细胞中,流式细胞术、克隆形成实验检测放射处理后细胞放射敏感性变化.使用TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证明miR-449a与Cyclin D1的靶向作用,免疫组织化学法观察Cyclin D1在胰腺癌组织和胰腺癌旁5 cm的正常胰腺组织的分布,基因敲除Cyclin D1验证其对胰腺癌细胞放射敏感性的影响.结果 经放射处理后,miR-449a在胰腺癌细胞中的表达量明显降低;过表达miR-449a增加了放射后胰腺癌细胞的凋亡率,并使胰腺癌细胞克隆形成率也明显降低;TargetScan预测及双荧光素酶报告基因实验证实了Cyclin D1是miR-449a的靶标;Cyclin D1蛋白在胰腺癌患者组织中的阳性染色率(70%,35/50)明显高于正常胰腺组织(20%, 2/10),Cyclin D1增加了胰腺癌细胞的放射敏感性.结论 miR-449a通过靶向干扰Cyclin D1的表达,促进胰腺癌细胞的放射敏感性.
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miR-206靶向MAPK-1通路增强胶质瘤细胞放射敏感性
目的 研究miR-206对胶质瘤细胞放射敏感可能作用的信号通路,为深入研究其调控机理奠定基础.方法 将miR-206模拟剂或miR-206抑制剂转染到胶质瘤U87细胞中,使用抑制剂PD98059抑制MAPK通路活性并照射处理细胞,MTT和克隆形成实验检测细胞放射敏感性变化.分别用qRT-PCR和蛋白印迹法检测miR-206和MAPK1的表达变化,TargetScan软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-206和MAPK1的相互作用.结果 胶质瘤细胞放射处理后miR-206表达下调,MAPK1表达上调.miR-206模拟剂过表达miR-206,细胞增殖和克隆形成能力下降,放射敏感性增高;转染抑制剂抑制miR-206表达,细胞增殖和克隆形成能力加强,放射敏感性降低.使用TargetScan软件查找发现MAPK1可能是miR-206的靶基因,双荧光素酶报告实验进一步验证了miR-206和MAPK1具有相互作用.过表达或降低miR-206表达,MAPK1与miR-206呈相反变化趋势.使用抑制剂抑制MAPK信号通路,胶质瘤细胞放射敏感性升高.结论 miR-206可能靶向MAPK1,通过抑制MAPK信号通路活性调节胶质瘤细胞的放射敏感性.
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吡格列酮对结肠癌细胞株放射增敏的作用
吡格列酮是过氧化物酶增殖体活化受体γ( peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)的合成配体之一,研究发现PPARγ配体能通过阻断细胞周期、抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制血管生成等起到抗肿瘤作用[1],还能提高肿瘤放射敏感性[2].本研究探讨吡格列酮对小鼠结肠癌CT26细胞放射增敏作用,并初步探讨其机制.
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脑胶质瘤U251细胞CD133阳性与阴性对放射敏感性影响的初步研究
肿瘤干细胞可能是肿瘤的“起始细胞”和治疗失败的根源[1].但是,肿瘤干细胞和非干细胞放射生物学特性之间的差异仍不十分清楚.为此以CD133为标志物,对脑胶质瘤U251细胞应用流式细胞仪分选出CD133阳性与阴性细胞,观察两者之间放射敏感性差异.
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RNA干扰抑制STAT1基因表达对食管癌细胞放射生物效应影响
目的 利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞(ECA109)信号转导与转录活化因子1(STAT1)基因表达,观察其对放射敏感性和细胞周期影响.方法 针对基因STAT1设计构建干扰质粒pSTAT1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合后共同转染293T细胞,收集病毒液感染ECA109细胞.采用RT-PCR和蛋白印迹法测定STAT1在mRNA水平和蛋白水平的表达,采用克隆形成实验和流式细胞术检测ECA109细胞放射敏感性和周期分布.结果 空白对照、转染阴性、转染阳性细胞的D0值分别为2.98、3.02、2.03,SF2分别为0.88、0.88、0.83,Dq值分别为1.39、1.57、1.20.4 Gy照射后12、24、48 h转染阳性细胞比空白对照和转染阴性细胞的G1+Go期比例增高(34.13％∶22.03％∶22.27％、43.80％∶ 28.40％∶ 28.63％、53.20％∶ 42.2％∶ 41.83％,F=7.56、10.01、10.73,P=0.023、0.012、0.010)和G2+M期比例降低(14.33％∶32.23％∶ 32.23％、27.73％∶43.53％∶44.00％、14.23％∶27.97％∶ 27.93％,F=16.86、26.62、40.34,P=0.003、0.001、0.000).结论 RNA干扰不影响ECA109细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期分布来增加放射敏感性.
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寡核苷酸Dbait乏氧放射双表达对人宫颈癌细胞的乏氧放射增敏效应
基因-放疗是将放射敏感性调控序列与治疗基因和药物相耦联,在肿瘤放疗同时诱导目的基因和药物在肿瘤内高效表达,从而提高肿瘤放射敏感性,它是近年来肿瘤放疗新策略[1].早期生长反应-1(early growth response-1,Egr-1)启动子在电离辐射诱导下能增强下游基因表达,并可提高放疗效果;乏氧反应元件(hypoxia response elements,HRE)在乏氧条件下可增强下游基因表达水平.
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肝激酶B1增强肺癌H460细胞放射敏感性的体内研究
目的 研究肝激酶B1(LKB1)对肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤放射敏感性的影响.方法 构建肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分别给予空载质粒(pEGFP-Ctrl)、照射+空载质粒(IR+pEGFP-Ctrl)、过表达LKB1质粒(pEGFP-LKB1)、照射+过表达LKB1质粒(IR+pEGFP-LKB1)处理;观察移植瘤生长情况,计算抑瘤率及放射增敏比;并采用免疫组织化学和蛋白印记技术检测各组瘤组织中LKB1表达情况,分析LKB1与放射敏感性的关系.结果 相较于pEGFP-Ctrl组,IR+pEGFP-Ctrl组、pEGFP-LKB1组和IR+pEGFP-LKB1组的肿瘤生长都受到不同程度的抑制,抑瘤率分别为31.30%、14.78%和43.48%,其中IR+pEGFP-LKB1组较其他组为明显.IR+pEGFP-LKB1组LKB1的放射增敏系数为1.18.转染pEGFP-LKB1组的LKB1在免疫组织化学和蛋白印记水平上表达增高,其余组未见LKB1表达.结论 成功构建肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤模型,LKB1具有增强肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤放射敏感性作用.
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E1A基因通过抑制NF-κB信号通路增加鼻咽癌细胞放射敏感性实验研究
目的 探讨E1A基因对人鼻咽癌细胞放射敏感性的影响及其可能机制.方法 通过腺病毒载体介导,将E1A基因转染至鼻咽癌CNE-2R细胞,采用RT-PCR鉴定E1A基因的表达;分别给予未转染组(PBS组)、转染空载体Ad-β-gal组(Ad-β-gal组)和转染E1A组(Ad-E1A组)的CNE-2R细胞0、2、4、6、8 Gy照射,应用克隆形成实验检测各组CNE-2R细胞放射敏感性的变化;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;蛋白印迹法检测各组细胞NF-κB、CK2α、Bcl-2及Cleaved caspase-3蛋白的表达.结果 RT-PCR确认E1A基因已整合到CNE-2R细胞中且稳定表达;Ad-E1A组CNE-2R细胞克隆形成率明显少于PBS和Ad-β-gal组的克隆形成率,Ad-E1A组CNE-2R细胞SF2为0.217小于 PBS组和Ad-β-gal组的0.602和0.585(P<0.05),Ad-E1A组α/β值为24.68大于PBS组和Ad-β-gal组的5.268和5.132(P<0.05);流式细胞术显示单独放射可促进CNE-2R细胞的凋亡,当与E1A基因联合使用时,细胞凋亡率明显增加(P<0.05);蛋白印迹法显示E1A基因可下调NF-κB/P65、CK2α、Bcl-2和上调Cleaved caspase-3的表达.结论 E1A基因可以通过抑制CK2的表达阻断NF-κB信号通路以及促进细胞凋亡,来提高鼻咽癌细胞对放射的敏感性.
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miRNA-34a过表达对4种人宫颈癌细胞放射敏感性研究
目的 研究miRNA-34a过表达对4种人宫颈癌细胞放射敏感性的影响.方法 运用脂质体2000转染试剂盒将pGenesil-1-miRNA-34a表达质粒转染宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa和CaSki,通过G418筛选构建过表达miRNA-34a宫颈癌细胞系(miRNA-34a/C33A、miRNA-34a/HeLa、miRNA-34a/SiHa和miRNA-34a/CaSki).细胞经不同剂量60 Coγ射线照射;运用TaqManRT-PCR和蛋白印迹法测定细胞中miRNA-34a表达;运用MTT法和克隆形成实验分别测定细胞增殖抑制率和克隆形成能力,流式细胞仪测定细胞凋亡率和蛋白印迹法测定细胞凋亡相关蛋白表达变化.结果 宫颈癌细胞系中miRNA-34a表达量显著高于阴性对照组(P<0.05),过表达miRNA-34a宫颈癌细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),细胞克隆形成率显著低于阴性对照组(P<0.05).流式细胞仪结果显示过表达miRNA-34a宫颈癌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).蛋白印迹法结果显示4 Gy+过表达miRNA-34a细胞中cleaved caspase 9和cleaved PARP蛋白表达量高于过表达miRNA-34a细胞.结论 本研究成功构建miRNA-34a过表达宫颈癌细胞系,miRNA-34a过表达增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制与激活细胞凋亡通路有关.
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SIRT1基因沉默对DLBCL细胞放射敏感性影响
目的 探究SIRT1基因沉默对DLBCL放射敏感性影响.方法 利用免疫组织化学观察SIRT1在DLBCL组织中的蛋白表达情况,蛋白印迹法检测SIRT1在DLBCL细胞系OCI-Ly3、SU-DHL-2、SU-DHL-4及人正常B细胞永生化细胞系HMy2.CIR中的表达情况.利用Lipofectamine 2000转染试剂盒将si-SIRT1及si-NC转染到SU-DHL-4细胞中并检测转染后SIRT1的表达;MTT法和克隆形成实验检测经放射处理后细胞放射敏感性的变化.成组t检验差异或单因素方差分析.结果 SIRT1在DLBCL组织中的阳性率为72.6%(103/140),明显高于SIRT1在RLH中的阳性率(26.5%,8/25)(P=0.001);SIRT1在DLBCL细胞系中的表达水平显著高于人正常B细胞永生化细胞系HMy2.CIR细胞(P=0.020);SIRT1基因沉默后,SIRT1在SU-DHL-4细胞中的表达量明显降低(P=0.008).放射处理后,SIRT1基因沉默组的细胞增殖率和克隆形成率显著低于对照组(P=0.030).结论 SIRT1基因沉默明显提高了DLBCL细胞的放射敏感性,为DLBCL细胞的治疗提供了一个新的靶标.
关键词： SIRT1基因 基因敲除 弥漫性大B淋巴瘤细胞 放射敏感性 -
外源性野生型p53基因影响肺腺癌XWLC-05细胞放射敏感性研究
云南宣威肺腺癌发病率和死亡率居全国首位,多明显聚集在农村女性中,发病原因、基因突变和机制特殊[1]。由于其p53突变位点与其他肺癌不同,故探讨野生型p53基因转染宣威肺腺癌XWLC-05细胞后对放射敏感性的影响。
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靶向沉默BMI-1表达对食管癌细胞放射增敏实验研究
目的 采用siRNA干扰技术降低食管癌ECA109细胞BMI-1基因表达,观察其对放射线照射后细胞增殖、迁移能力及周期和凋亡影响.方法 针对BMI-1 mRNA序列,设计合成有效的干扰序列命名为BMI-1 siRNA组,阴性对照序列命名为NC组,未转染组命名为对照组.采用RT-PCR和蛋白印迹法检测ECA109中BMI-1在mRNA和蛋白水平的表达;Transwell小室实验检测siRNA干扰BMI-1基因对ECA109迁移能力的影响;MTT、流式细胞术和克隆形成实验检测BMI-1对ECA109放射敏感性的研究.结果 照射后BMI-1 siRNA组BMI-1基因mRNA和蛋白水平显著低于对照组和空载组,且细胞增殖和迁移能力显著降低(P=0.024、0.000、0.025、0.031).克隆形成实验显示对照组、NC组放射敏感性相近(P=0.569),而BMI-1 siRNA组细胞放射敏感性高于对照组和空载组(P=0.000).流式细胞术分析显示照射后,BMI-1 siRNA组G2+M期显著低于对照组和空载组(P=0.000);且细胞凋亡显著增加(P=0.000),而未照射组之间未见明显差异(P=0.350).结论 siRNA干扰联合X线照射有效降低食管癌细胞ECA109中BMI-1基因表达,进而抑制亚致死性损伤修复而增加放射致死效率.
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冬虫夏草雄激素样作用及对人前列腺癌VCaP细胞放射敏感性影响
目的 探讨冬虫夏草雄激素样作用及对人前列腺癌VCaP细胞放射敏感性影响.方法 检测冬虫夏草灌胃后小鼠激素水平及性器官重量指数变化.克隆形成实验方法观察冬虫夏草对VCaP细胞放射敏感性影响.MTS、流式细胞术、裸鼠移植瘤检测冬虫夏草对VCaP细胞(雄激素受体AR阳性)及PC-3细胞(AR阴性)体外及体内增殖能力影响,比较裸鼠血清PSA水平.单因素方差分析或t检验差异.结果 冬虫夏草组裸鼠睾酮水平高于对照组[(8.28±1.94)、(2.08±1.24)ng/ml,P=0.023),前列腺重量指数也增高[(0.53±0.04)、(0.31±0.04) mg/g,P=0.006].放射增敏比(D0值比)为0.80.冬虫夏草处理后VCaP细胞活力高于对照组(1.32±0.07、0.66±0.02,P=0.000),克隆形成能力较对照组增强(57.0％±1.9％、47.0％±0.6％,P=0.005).冬虫夏草组裸鼠VCaP移植瘤有生长加快趋势,血清PSA升高显著[(0.66±0.04)、(0.26±0.06)ng/ml,P=0.000).该浓度冬虫夏草对PC-3细胞无影响.结论 冬虫夏草有雄激素样作用,同时可促进AR阳性的VCaP细胞增殖能力,降低其放射敏感性.
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STAT-3介导的非依赖VEGFR-2通路对NSCLC细胞放射敏感性影响的研究
目的 研究抑制STAT-3对非依赖VEGFR-2通路的NSCLC细胞放射敏感性的影响,并探讨其可能机制.方法 采用Q-PCR及蛋白印迹法检测各组中VEGFR-2、STAT-3相关信号分子及HIF-1α、CyclinD1 mRNA与蛋白表达变化;克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布.结果 经VEGFR-2抑制剂Apatinib处理后,Calu-1细胞中VEGFR-2、STAT-3 mRNA无显著变化,HIF-1α、CyclinD1 mRNA表达降低;联合STAT-3抑制剂S3I-201后,VEGFR-2、STAT-3及下游相关基因mRNA表达降低(F=304.54、118.99,P<0.01);VEGFR-2、STAT-3及下游相关靶蛋白磷酸化水平均降低(F=144.34、529.66,P<0.01);细胞凋亡率与G2+M期阻滞增加,同时抑制STAT-3和VEGFR-2组更明显(F=72.37,P<0.01).与Calu-1细胞相比,A549细胞加Apatinib抑制VEGFR-2细胞放射增敏效果有限,SER=1.39;联合S3I-201抑制STAT-3后,放射增敏效果显著,SER=1.72(t=-48.61,P=0.000).结论 NSCLC细胞VEGFR-2被抑制时,旁路活化的STAT-3直接和间接调控CyclinD1表达,进而影响肺癌细胞的放射敏感性,联合抑制肺癌细胞VEGFR-2和STAT-3,具有良好的放射增敏效果.
