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核糖核酸干扰技术沉默大鼠心肌细胞核因子-κB p65表达的研究
目的:构建核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB) p65亚基特异的核糖核酸干扰腺病毒表达载体,验证其对p65亚基的沉默效应.方法:设计针对大鼠NF-κB p65亚基的不同干扰序列,通过质粒将其导入腺病毒,感染大鼠心肌细胞(H9C2).将感染后的心肌细胞通过RT-PCR方法和Western Blot方法检测各组NF-κB p65的基因水平表达和蛋白质水平表达.结果:成功构建了NF-κB p65亚基特异的RNAi腺病毒表达载体,获得高滴度的腺病毒液;RNAi腺病毒感染H9C2细胞后可以高效抑制NF-κBp65蛋白的表达.结论:RNAi技术能有效的沉默大鼠心肌细胞NF-κB p65的表达.
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化学合成小干扰核糖核酸抑制大鼠血管平滑肌细胞组织因子表达
目的:探讨血管壁组织因子小干扰核糖核酸(siRNA)对大鼠血管平滑肌细胞组织因子基因沉默作用的可行性和有效性.方法:设计并合成针对大鼠组织因子的25 bp双链siRNA分子.使用组织因子siRNA、对照siRNA转染大鼠血管平滑肌细胞,同时设立空白对照,实验共分6组(各组n=5).荧光显微镜观察转染效率.血小板源性生长因子-BB刺激血管平滑肌细胞后逆转录多聚酶链反应检测组织因子信使核糖核酸表达,免疫印迹和免疫组化检测组织因子蛋白表达.结果:siRNA成功转染到血管平滑肌细胞,转染效率约(90.0±2.3)%.3对候选siRNA筛选出基因抑制效率高一对,与阴性对照组相比,转染24 h组织因子信使核糖核酸表达减少(86.0±0.6)%,转染48 h蛋白质印迹分析组织因子蛋白表达减少(92.0±1.0)%,同时免疫组化检测组织因子表达明显减弱.结论:RNA干扰能明显下调大鼠血管平滑肌细胞组织因子表达.
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RNA干扰HIF-1α增强人肺腺癌SPCA-1细胞放射敏感性的研究
目的探讨RNA干扰乏氧诱导因子1(HIF-1)增强人肺腺癌SPCA-1细胞的放射敏感性 .方法构建干扰HIF-1α质粒pSUPER-HIF-1α,采用荧光定量RT-PCR、Western blot方法观察有氧与乏氧状态下RNA干扰HIF-1α的变化,用成克隆实验观察乏氧时RNA干扰HIF-1α对放射的增敏作用.结果在常氧和乏氧的状态下,RNA干扰HIF-1α引起mRNA的表达水平分别下降64%和76%;在乏氧的状态下,蛋白的表达下降.转染pSUPER-HIF-1α后的细胞存活曲线的 D0值为2.5 Gy,转染空白质粒细胞和空白对照细胞的D0值分别为5.0 Gy和5.1 Gy,增敏比为2.1.结论 RNA干扰HIF-1α可以增加SPCA-1细胞对放射的敏感性.
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siRNA抑制肺腺癌细胞DNA-DPKCS表达与放射敏感性关系研究
目的 探讨稳定表达的小干扰RNA(siRNA)抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-DPKCS)表达对非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期及放射敏感性的影响.方法 构建DNA-DPKCS-siRNA莺组质粒转染肺腺癌细胞A549.流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,成克隆实验测定细胞存活曲线.结果 建立了与A549细胞同源的DNA-DPKCS低表达细胞系549pRNA-DNA-DPKCS、阴性对照549pRNA-C细胞、空白549pSUPER细胞.与A549细胞相比549pRNA-DNA-DPKCS细胞的DNA-DPKCS mRNA(0.110:1.000;F=80.55,P<0.01)、蛋白表达水平(0.870:2.967;F=63.96,P<0.01)以及DNA-DPKCS活性(0.004:0.266;F=51.62,P<0.01)均显著降低.549pRNA-DNA-DPKCS细胞2 Gy存活分数、平均致死剂量、亚致死性损伤剂量均较A549细胞明显降低(0.25:0.76;F=996.86,P<0.01;1.42:1.62;F=17.41,P<0.05;0.06:1.00;F=68.92,P<0.01).DNA-DPKCS表达受抑后549pRNA-DNA-DPKCS细胞较A549细胞S期和G_2期细胞比例明显减少(24.5%:35.5%;F=4.83,P<0.05和10.7%:11.0%;F=32.04,P<0.01).结论 抑制DNA-DPKCS表达可提高肺腺癌细胞A549的放射敏感性,同时调控细胞周期时相分布.
关键词： 脱氧核糖核酸依赖蛋白激酶催化亚基 核糖核酸干扰 细胞系 肺肿瘤 放射敏感性 -
小干扰RNA沉默Bcl-2表达增强食管癌细胞放射敏感性研究
目的 探讨Bcl-2基因的特异性小干扰RNA (siRNA)对食管癌细胞(EC9706细胞)Bcl-2蛋白表达和凋亡的影响及放射增敏作用。方法 化学合成Bcl-2基因的siRNA,通过脂质体转染法转入EC9706细胞。流式细胞仪检测转染前后Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡,成克隆分析siRNA联合X线照射对EC9706细胞的放射敏感性影响。结果 Bcl-2 siRNA1、Bcl-2 siRNA2、Bcl-2 siRNA3转染后Bcl-2蛋白在EC9706细胞中的阳性表达率分别为25.13％、38.87％、30.55％,较对照组的84.28％明显下降(t =4.01、3.04、3.64,P均＜0.05)。Bcl-2 siRNA1转染组凋亡率为33.86％,明显高于空白对照组的5.51％(t=6.55,P＜0.01)和阴性siRNA1转染组的5.59％(t=6.54,P＜0.01);Bcl-2 siRNA1联合X线照射的细胞凋亡率为56.76％,明显高于单纯照射组的24.51％(t=3.59,P＜0.05)。成克隆分析的Bcl-2 siRNA1转染加照射组D0、Dq、SF2值均低于单纯照射组,放射增敏比为1.33(D0值之比)。结论 Bcl-2基因的特异性siRNA可明显增强EC9706细胞的放射敏感性,具有良好临床应用前景。
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RNA干扰抑制STAT1基因表达对食管癌细胞放射生物效应影响
目的 利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞(ECA109)信号转导与转录活化因子1(STAT1)基因表达,观察其对放射敏感性和细胞周期影响.方法 针对基因STAT1设计构建干扰质粒pSTAT1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合后共同转染293T细胞,收集病毒液感染ECA109细胞.采用RT-PCR和蛋白印迹法测定STAT1在mRNA水平和蛋白水平的表达,采用克隆形成实验和流式细胞术检测ECA109细胞放射敏感性和周期分布.结果 空白对照、转染阴性、转染阳性细胞的D0值分别为2.98、3.02、2.03,SF2分别为0.88、0.88、0.83,Dq值分别为1.39、1.57、1.20.4 Gy照射后12、24、48 h转染阳性细胞比空白对照和转染阴性细胞的G1+Go期比例增高(34.13％∶22.03％∶22.27％、43.80％∶ 28.40％∶ 28.63％、53.20％∶ 42.2％∶ 41.83％,F=7.56、10.01、10.73,P=0.023、0.012、0.010)和G2+M期比例降低(14.33％∶32.23％∶ 32.23％、27.73％∶43.53％∶44.00％、14.23％∶27.97％∶ 27.93％,F=16.86、26.62、40.34,P=0.003、0.001、0.000).结论 RNA干扰不影响ECA109细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期分布来增加放射敏感性.
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肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶干扰慢病毒表达载体构建及稳定转染PC12细胞株的建立
目的 构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系.方法 人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与pGag/Pol、pRev、pVSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染PC 12细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western blot技术检测PC 12稳定细胞中SERCA基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较.结果 成功构建了针对SERCA基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为3×10s U·mL-1;建立稳定转染的PC 12细胞株.有效干扰验证显示,shSERCA能明显降低SERCA的mRNA及蛋白水平(P＜0.01).结论 成功构建SERCA基因的shSERCA慢病毒表达载体,建立稳定干扰SERCA表达的PC 12细胞株.
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慢病毒介导的RNAi对大鼠SOCS3基因表达的抑制作用
目的 研究慢病毒表达载体介导的RNA干扰(RNAi)对大鼠下丘脑细胞中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的抑制作用.方法 根据大鼠SOCS3基因(NM053565),用Ambion在线软件选择3个靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补单链寡核苷酸,与经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后的慢病毒载体质粒pRNA-lenti-GFP连接产生pRNA-Lenti-SOCS3 -GFP慢病毒重组质粒,与慢病毒包装混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒,收集病毒上清,采取逐孔稀释滴度法测定病毒滴度,然后转染大鼠下丘脑细胞,通过荧光显微镜观察细胞转染情况,利用荧光实时定量PCR方法检测RNAi组(siRNA1,siRNA2,siRNA3)、空白细胞组和阴性序列组(siRNA-Negtive)中SOCS3的表达情况.结果 将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功.系列稀释法检测慢病毒悬液的滴度为1.0×1010 TU/L.荧光实时定量PCR检测显示慢病毒感染大鼠下丘脑细胞后,与空白细胞组相比,3个RNAi组都有不同程度的抑制SOCS3表达,其中siRNA1组的抑制效果好,可使SOCS3 mRNA表达下调达80％.结论 构建的pRNA-Lenti-SOCS3-GFP慢病毒载体可有效地抑制大鼠SOCS3的表达,为以SOCS3基因为靶点的相关疾病的基因治疗研究奠定基础.
关键词： 细胞因子信号转导抑制因子3 核糖核酸干扰 慢病毒载体 下丘脑细胞 -
食管鳞癌中微小核糖核酸let-7的表达及病理生物学意义
目的 探讨微小RNA(miRNA)1et-7对食管鳞癌细胞增殖的影响及食管鳞癌组织中let-7表达水平与临床病理特征间的关系.方法 利用RNA干扰(RNAi)和细胞转染技术将食管鳞癌细胞Eca109分别转染入let-7、let-7抑制剂及随机序列.以正常培养的Eca109细胞为阴性对照组.噻唑蓝(MTT)比色法检测各组Eca109细胞的增殖情况.实时荧光定量聚合酶链反应(qRTPCR)检测各组细胞、45例食管鳞癌组织及其癌旁组织中let-7的表达水平,并分析其与食管鳞癌临床病理特征间的关系.结果 转染后72 h,转染let-7组吸光度(A)值较阴性对照组明显降低(P=0.005),转染let-7抑制剂组A值较阴性对照组明显升高(P=0.029).与阴性对照组let-7表达量比较,转染let-7组表达增加33%(1.33比1.00,P=0.039),转染let-7抑制剂组表达降低50%(0.50比1.00,P=0.014).食管鳞癌组织和癌旁组织中let-7相对表达量的比值为0.66±0.47,差异有统计学意义(P=0.001).汉族患者食管鳞癌组织中let-7相对表达量(0.48±0.43)低于哈萨克族(0.88±0.51,P=0.019).低分化食管鳞癌组织中let-7相对表达量(0.42±0.30)低于高分化食管鳞癌组织(0.84±0.38,P=0.015).有淋巴结转移者食管鳞癌组织中let-7相对表达量(0.50±0.35)低于无淋巴结转移者(0.80±0.52,P=0.032).结论 let-7对食管鳞癌的发生、发展起抑制作用,其表达水平与组织分化程度、淋巴结转移及民族相关.
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短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54基因的干扰效应
目的 研究短发夹核糖核酸(shRNA)表达载体对2型单纯疱疹病毒(HSV-2) UL54基因的干扰效应.方法 针对HSV-2 UL54基因,构建5个靶向HSV-2 UL54基因的短发夹RNA重组表达载体(sh-RNA1081、shRNA1092、shRNA1276、shRNA1407、shRNA1508),同时设计不针对任何基因的序列为阴性对照组(阴性对照组)及不加任何重组表达载体的空白对照(空白对照组).重组表达载体通过脂质体转染人胚胎肾细胞(HEK293)后接种HSV-2,48 h后利用荧光定量RT-PCR检测各组细胞UL54 mRNA的表达水平,终点滴定法测定HSV-2子代病毒滴度.结果 荧光定量RT-PCR结果示,与空白对照组相比,shRNA 1081、shRNA1407和shRNA1508能够降低HSV-2 UL54 mRNA的表达水平(P均＜0.01);对UL54基因的抑制率在阴性对照组(加shRNA NC)、shRNA1081组、shRNA1407组、shRNA1508组分别为7％、69％、56％及55％,以shRNA 1081组为高.终点滴定法结果示,与空白对照组比较,shRNA 1081组、shRNA 1407组、shRNA 1508组病毒滴度不同程度下降(P均＜0.01).结论 成功构建UL54 shRNA重组表达载体,shRNA1081、shRNA1407、shRNA1508能在体外细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL54基因表达,从而抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制.
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RNA干扰对5637膀胱癌细胞生存素基因表达的影响
目的研究RNA干扰(RNAi)对膀胱癌5637细胞生存素(survivin)基因表达的干扰效应.方法化学合成生存素序列特异性双链RNA(dsRNA),用Lipofectamine2000转染5637细胞,采用荧光定量PCR检测生存素基因的表达,用流式细胞仪检测Annexin v标记的凋亡细胞.结果序列特异性dsRNA-生存素可显著抑制生存素基因在转录水平上的表达,和阴性对照组相比,浓度为40nmol/L的dsRNA-生存素在转染5637细胞24、48h后生存素 mRNA表达的抑制率分别为 29%和53%,浓度为100nmol/L时抑制率为46%和86%.生存素基因表达的抑制与5637细胞的凋亡呈正相关.结论转染dsRNA-生存素可明显抑制膀胱癌5637细胞株生存素基因的表达,并伴有细胞凋亡.
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TIMP-1-shRNA基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究
目的 探讨联合应用RNA干扰与干细胞移植技术在肝纤维化治疗中的应用.方法 采用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并进行流式细胞学鉴定.按使用慢病毒包装系统建立沉默基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1)基因不同位点分为三组:BMSCs株SH1组(LV-3-TIMP-1-rat-246),SH2组(LV-3-TIMP-1-rat-142),SH3组(LV-3-TIMP-1-rat-373).同时设立转染空载体组(LV-3-shNC,D组).观察各组细胞转染前后形态和荧光的表达;抽提蛋白,应用Western blot技术检测TIMP-1蛋白的表达.结果 原代培养大鼠BMSCs呈梭形,传代后漩涡状生长.慢病毒转染BMSCs 7 d后,各组均可检测到荧光出现,转染前后细胞形态无改变.在3个实验组中,SH3组TIMP-1蛋白表达低(P＜0.05).结论 应用慢病毒包装系统可以建立沉默TIMP-1基因的BMSCs株,为BMSCs联合RNA干扰技术治疗肝纤维化提供了实验基础.
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RNA干扰沉默Ki67基因对裸鼠肾癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响
目的 应用RNA干扰(RNAi)技术沉默Ki67基因,探讨其对裸鼠人肾癌细胞移植瘤细胞生长及凋亡的影响.方法 建立裸鼠人肾癌细胞移植瘤模型,随机分组,于肿瘤内分别注射生理盐水0.2 ml(C组),pSilencer空质粒20μg/只(P组)、pSilencer-Ki67重组质粒20 μg/只(PK组),每隔2天注射一次,共7次.取肿瘤测量体积,免疫组化染色检测Ki67的表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 PK组移植瘤体积明显小于C、P组,移植瘤细胞Ki67表达率也明显降低,肿瘤细胞凋亡率明显增加(P<0.01).结论 应用RNAi技术沉默Ki67基因可以降低人肾癌细胞裸鼠移植瘤Ki67基因表达,同时引起细胞凋亡进而抑制肿瘤的生长.
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RNAi抑制肺癌细胞H MGA1基因表达对放射敏感性的影响
目的 探讨慢病毒介导核糖核酸干扰(RNAi)抑制高迁移率族蛋白A1(HMGA1)表达对肺癌细胞株SPCA-1放射敏感性的影响.方法 将前期制备的HMGA1 siRNA慢病毒载体转染肺癌细胞SPCA-1;半定量RT-PCR和Western blot分别检测HMGA1 mRNA及蛋白表达情况;细胞克隆形成实验、多靶单击模型拟合绘制细胞存活曲线观察细胞放射敏感性的变化;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 RT-PCR和Western blot证实阳性组细胞HMGA1基因表达下调;细胞存活曲线显示阳性组细胞平均致死剂量(D_0)、准阈剂量(Dq)及2Gy照射后的细胞存活分数(SF_2)均为高于对照组及阴性组(P<0.05);流式细胞术检测阳性组细胞凋亡率则均低于对照组及阴性组(P<0.05).结论 HMGA1 siRNA特异性地下调SPCA-1细胞中HMGA1基因表达,可抑制细胞凋亡,并降低细胞的放射敏感性.
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STAT3基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
目的 构建携带信号传导和转录激活子3(STAT3)基因短发夹状干扰RNA(shRNA)的真核表达载体.方法 从GenBank STAT3 mRNA上寻找到3条符合特征的靶序列,合成靶序列的DNA寡核苷酸链,合成双链DNA,并和BamH Ⅰ和HindⅢ酶切后的pRNAT-U6.1/Neo载体质粒连接产生重组质粒,PCR筛选阳性克隆,并行测序鉴定.重组质粒转染大肠癌LoVo细胞,RT-PCR检测STAT3的表达.结果 PCR和测序证实重组质粒构建正确.3种重组质粒对大肠癌LoVo细胞STAT3的表达有较强的抑制作用.结论 成功构建了携带有STAT3基因的短发夹状干扰RNA的重组质粒.
关键词： 核糖核酸干扰 信号传导和转录激活子3 -
携带大鼠ICAM-1基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
目的 探讨携带大鼠细胞问黏附分子1(ICAM-1)核糖核酸下扰(RNAi)的重组慢病毒构建方法,筛选出基因抑制效率高的重组慢病毒.方法 (1)根据基因序列,设计并合成针对4个靶点的寡核苷酸,将其与双链DNA oligo进行连接反应;将连接产物转化DH5α大肠杆菌,PCR筛选获得阳性克隆并进行基因测序.(2)将重组载体与病毒包装质粒共转染人胚肾293 T细胞,获得病毒颗粒.(3)重组慢病毒体外转染NRK细胞,以RT-PCR法筛选出基因抑制效率高的重组慢病毒.结果 (1)经过酶切、连接、转化后获得阳性克隆;基因测序结果完全正确.(2)经RT-PCR证实,3号病毒在感染复数(MOD=50时,基因抑制率即达到88.4%.结论 成功构建了含有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的大鼠ICAM-1 RNAi慢病毒载体.
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Her-2/neu siRNA表达质粒对前列腺癌裸鼠移植瘤生长的影响
目的 观察Her-2/neu siRNA表达质粒对前列腺癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 40只裸鼠皮下接种人前列腺癌PC-3M细胞,分成4组,每组10只.于形成的肿瘤内分别注射转染试剂FuGene HD与Her-2/neu siRNA表达质粒(A组)或无关非同源性序列质粒(B组)的复合物、转染试剂FuGene HD(C组)及生理盐水(D组),每周给药1次,连用4周.首次给药4周后取出肿瘤,测量肿瘤长短径及重量,流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡,免疫组化方法 检测肿瘤组织中核增殖抗原(Ki67).结果 A组裸鼠移植瘤体积及重量均明显低于其它三组,凋亡指数显著高于其它三组(P<0.05).A组肿瘤细胞增殖指数显著低于C组(P<0.01).A组肿瘤组织中Ki67阳性的细胞数明显少于其它三组(P<0.01).结论 Her-2/neu siRNA表达质粒对裸鼠前列腺癌移植瘤的生长有抑制作用,并显著促进移植瘤细胞的凋亡.
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针对人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒的构建及其对人肝癌细胞生长的影响
目的 构建人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒.并观察其对肝癌细胞生长的影响.方法 将目的 片段亚克隆入慢病毒载体中,包装成病毒后感染人肝癌细胞,检测细胞IKKα、IKKβ的表达,并将感染细胞接种于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况.结果 目的 片段被成功克隆入载体质粒.pLenti-GFP-IKKα-SiRNA慢病毒液感染的细胞中IKKα蛋白表达明显降低,pLenti-GFP-IKKβ-SiRNA慢病毒液感染的细胞中IKKα蛋白表达明显降低.实验组裸鼠皮下肿瘤出现晚且生长缓慢.结论 成功构建了针对人IKKα、IKKβ基因RNA干扰慢病毒质粒,包装成病毒后感染人肝癌细胞后能抑制其生长.
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反义DLC-1基因对结直肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响
目的 应用核糖核酸干扰(RNAi)技术,通过对大肠癌细胞株LoVo中DLC-1基因mRNA表达的抑制,初步探讨DLC-1基因对大肠癌细胞株的生物学行为影响.方法 构建DCL-1的RNAi重组体pGCsiDLC,转染大肠癌LoVo细胞株.采用RT-PCR观察转染前后细胞株中DLC-1 mRNA以及 Bax、Bcl-2基因表达的改变,MTT比色法检测转染前后细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期.结果 成功构建发卡siRNA真核表达载体pGCsiDLC;pGCsiDLC转染LoVo细胞后,电泳显示DLC-1 mRNA表达水平明显下降;LoVo细胞生长曲线增长幅度亦随时间的增加而逐渐增高,在48h为明显,RNAi组细胞比脂质体组及空白对照组细胞增殖明显增高(P＜0.05);干扰后的LoVo细胞株G0/G1期发生阻滞,而G2/M 期细胞数量分布减少.而Bax和bcl-2基因表达在干扰前后未见明显改变.结论 成功构建载体介导的DLC-1靶向RNAi重组体可有效抑制LoVo细胞DLC-1 mRNA表达;DLC-1基因可抑制结直肠癌细胞增殖并且对细胞周期重新分布,其可能与结直肠癌的发生发展有一定关系,可能是一个新的抑癌基因.
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靶向生存素基因的shRNA抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长
目的 观察稳定转染靶向生存素(survivin)基因短发夹RNA(shRNA)对膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 将靶向生存素基因的shRNA真核表达载体转染人膀胱癌细胞T24并获得稳定的单克隆细胞,实时定量PCR检测转染后生存素mRNA表达的变化;分别将转染和未转染细胞种植于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况;通过免疫组化检测肿瘤组织生存素蛋白表达的差异.结果 RNA干扰使T24细胞生存素表达下调92.86%;未转染组在20～29 d均形成体积超过2000 mm3的肿瘤,转染组在43 d时经病理证实3只裸鼠形成肿瘤,大体积62.5 mm3;免疫组化显示转染组形成的肿瘤生存素蛋白表达明显减弱.结论 靶向生存素基因的shRNA明显下调了生存素表达,并抑制了膀胱癌细胞T24裸鼠移植瘤的生长.
