首页 > 文献资料
-
喉鳞癌微环境乏氧的客观评估及有效改善乏氧对喉鳞癌化疗抵抗的影响浅析
目的:客观评估喉鳞癌微环境乏氧,并探讨有效改善乏氧对喉鳞癌化疗抵抗的影响.方法:选取我院在2012年9月至2013年9月收治的16例喉鳞癌患者的病理组织切片为研究对象,随机分为两组,即观察组和对照组,每组各8例.在细胞培养中,观察组采用低氧培养,对照组采用常氧培养,对比两组的Hep-2细胞和HIF-RNAi-Hep-2细胞的增殖抑制率和凋亡率.结果:①观察组的Hep-2细胞抑制率和凋亡率均显著低于对照组(P＜0.05);②两组的HIT-RNAi-Hep-2细胞增殖抑制率差异较小(P＞0.05),但观察组的HIF-RNAi-Hep-2细胞凋亡率显著低于对照组(P＜0.05).结论:有效改善乏氧,可以提高喉鳞癌患者的Hep-2细胞和HIF-RNAi-Hep-2细胞的增殖抑制率和凋亡率,效果显著,值得临床推广.
-
诱导型一氧化氮合酶影响吲哚醌类化合物抗肿瘤活性的实验研究
观察诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)对新型吲哚醌类生物还原化合物630和630Ac的抗肿瘤活性和乏氧选择性的影响.以人纤维肉瘤细胞HT1080及其iNOS基因转染的细胞克隆为研究对象,噻唑蓝法检测不同iNOS活性的细胞克隆对化合物630和630Ac化学敏感性的差异;比较乏氧和有氧条件下半数抑制浓度(IC50)的差异;流式细胞术观察化合物对细胞周期的影响.630Ac和630在实验中均显示出较强的抗肿瘤活性,且630Ac的细胞毒性强于630;而iNOS转染的细胞对630和630Ac敏感性较亲本细胞HT1080有所下降,IC50分别高1～7倍左右.氧对630的细胞毒性无显著影响,而630Ac则具有较好的乏氧选择性细胞毒作用,尤其是对iNOS转基因细胞,有氧和乏氧条件下IC50相差4～7倍.提示iNOS活性的增强会引起肿瘤细胞对化合物630和630Ac敏感性的降低.
-
乏氧对肺癌细胞系HIF家族成员HIF-1α、HIF-2α和HIF-β表达的影响及其相关性
目的 探讨乏氧对不同类型肺癌细胞乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、乏氧诱导因子-2α(HIF-2α)和乏氧诱导因子-β(HIF-β)基因表达的影响及其相关性. 方法 以0.5%低氧培养箱模拟细胞低氧环境,采用定RT-PCR和Western blotting方法 分别检测乏氧处理4～24h人肺癌细胞系SPCA1、A549、H446、SH77、H520和95D中HIF-1α、HIF-2α和HIF-βmRNA和蛋白水平的表达. 结果 1.常氧下不同肺癌细胞系HIF-1α、HIF-2α mRNA表达水平较低,短期乏氧HIF-1α mRNA降低而HIF-2α mRNA增加,随乏氧时间延长两者mRNA表达逐渐增加.2.HIF-1α和HIF-2α蛋白在常氧下表达均较低,乏氧下两者表达增强但变化趋势不一致,HIF-1α蛋白在所有细胞中均有表达,HIF-2α蛋白仅在某些细胞有表达.3.HIF-β mRNA和蛋白在常氧或乏氧下表达无明显变化.4.相关性分析表明,乏氧下HIF-2α mRNA与蛋白表达呈正相关(r=0.989,P=0.011);而HIF-1α和HIF-β mRNA与蛋白无相关性. 结论 肺癌细胞中HIF-1α、HIF-2α和HIF-β对乏氧刺激表现出不同的应答方式且具有细胞特异性,乏氧对HIF-1α和HIF-2α的调控可能分别发牛在翻译和转录水平,而对HIF-β无明显的调控作用.
关键词： 肺癌细胞系 乏氧 乏氧诱导因子 反转录-聚合酶链式反应 免疫印迹法 -
氧对光动力治疗效果的影响
光动力治疗(Photodynamic therapy,PDT)是一种针对恶性肿瘤和一些良性疾病靶向治疗的新兴手段,其基本原理为利用照射光源、光敏剂和氧三个要素联合作用,通过一系列的光化学反应对靶组织进行选择性地治疗.随着研究的深入,氧在PDT中的作用不断受到研究人员的重视.本文在介绍PDT基本机制的基础上,总结分析了氧在人体组织内的分布、PDT过程中的氧消耗和PDT对氧含量的反作用.
-
氧载体对乏氧肿瘤放化疗增敏的研究进展
氧载体除用于血液代用品外,还可以用于肿瘤的治疗,以纠正肿瘤乏氧微环境,增强肿瘤放化疗敏感性,进而改善恶性肿瘤的疗效及预后.目前研究的氧载体主要包括以下几类:高氧液、氟碳化合物氧载体、血红蛋白氧载体、载氧脂质微泡.本文就氧载体的制备、作用机制及其对肿瘤放化疗增敏的研究现状及安全性进行综述.
-
乏氧和去血清通过诱导自噬拮抗KAI1诱导凋亡
目的：观察乏氧和缺血是否通过诱导自噬拮抗肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82（KAI1）的生长抑制作用。方法应用无KAI1表达的人胰腺癌细胞MiaPaCa2，通过感染带有KAI1目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad5-KAI1使细胞表达KAI1蛋白，通过乏氧和去血清培养细胞模拟实体瘤内缺血、缺氧的微环境，根据培养条件不同，将人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2分为4组：对照组（正常培养）、乏氧组、去血清组、乏氧去血清组。Western blot检测细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的改变。3-MA预处理阻断自噬，共聚焦显微镜观察自噬标志颗粒GFP-LC3颗粒。采用Annexin V-FITC/PI实验检测细胞增殖和凋亡的变化。结果 MiaPaCa2细胞不表达KAI1蛋白，感染Ad5-KAI1后表达KAI1蛋白，乏氧和去血清均显著促进LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加和GFP-LC3融合质粒的增加，且均可被3-MA有效阻断。3-MA 预处理后感染Ad5-KAI1，4组细胞（含氧含血清正常培养的细胞、单纯去血清培养的细胞、单纯乏氧培养的细胞、联合去血清和乏氧培养的细胞）的Annexin V表达均显著增长，分别由70%、34%、28%和19%增至86%～90%。提示3-MA预处理可以阻断去血清和乏氧对KAI1引起的Annexin V表达增加的抑制作用。提示乏氧和去血清通过诱导自噬拮抗KAI1诱导的凋亡。结论乏氧和缺血清培养细胞通过诱导自噬拮抗KAI1诱导的凋亡，促进细胞生存。
关键词： 肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82(KAI1) 人胰腺癌 乏氧 去血清 自噬 -
乏氧、去血清抑制KAI1的生长抑制功能
目的：观察乏氧和缺血是否影响KAI1的生长抑制作用。方法应用无KAI1表达的人胰腺癌细胞MiaPaCa2，通过感染带有KAI1目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad5-KAI1,使细胞表达KAI1蛋白,通过乏氧和去血清培养细胞模拟实体瘤内缺血、缺氧的微环境，根据培养条件不同，将人胰腺癌细胞株MiaPaCa-2分为4组：对照组（正常培养）、乏氧组、去血清组、乏氧去血清组。用CCK8和Annexin V-FITC/ PI实验检测细胞增殖和凋亡的变化。结果乏氧和去血清培养细胞明显拮抗KAI1的增殖抑制和诱导凋亡作用，进而促进细胞的生存。结论乏氧和去血清拮抗KAI1的生长抑制作用。
-
试谈衰老、乏氧与脑保健
近20年来,生物学家们从细胞生物学、分子生物学、免疫学、生物化学、生物工程学、临床医学多途径入手,对衰老及抗衰老措施的研究获得了进展.
-
99mTc-HL91乏氧显像监测放疗后荷H22肝癌KM小鼠肿瘤再氧合状态
目的 探讨99mTc-HL91乏氧显像监测肿瘤再氧合状态情况,同时检测肿瘤乏氧诱导因子-1a(HIF-1a)表达,分析两种检查方法的相关性.方法 荷H22肝癌KM小鼠随机分为对照组和实验组,实验组又根据放疗后时间1 d、3 d、5 d进行实验.对照组不进行60Co放疗,实验组接受单次15 Gy的60Co放疗.各组小鼠注射99mTc-HL91显像剂2 h后进行SPECT平面显像.各组小鼠图像通过ROI技术,计算T/NT比值.图像采集结束后立即处死小鼠,完整剥离肿瘤,称重并计算放射性计数,计算肿瘤微分摄取率(DUR).之后迅速将肿瘤组织常规制成蜡块,用免疫组化技术测定HIF-1a的表达.后将DUR、T/NT数值分别与HIF-1a的表达进行等级相关性分析.结果 与对照组相比,随着放疗时间的延长,DUR及T/NT比值呈现先减少后增加的趋势,HIF-1a阳性细胞数量也呈现先减少后增加的表达.结果显示DUR及T/NT比值分别与HIF-1a的表达呈正相关(r值分别为0.75和0.86,P<0.05,双侧).结论 99mTc-HL91乏氧显像与HIF-1a的表达可用于监测肿瘤放疗后的再氧合状态,二者呈正相关.
关键词： 再氧合 99mTc-HL91 乏氧 HIF-1a -
鼻咽癌动态增强MRI参数与临床病理特征的关系
目的 探讨鼻咽癌动态增强MRI(DCE-MRI)相关参数与其临床病理特征之间的关系.方法 对102例经病理确诊的鼻咽癌初诊患者行DCE-MRI,获取ROI的DCE-MRI参数,观察其曲线特征,并分析DCE-MRI相关参数与临床病理特征的关系.结果 不同性别、年龄鼻咽癌患者的曲线大上升斜率(MS)差异无统计学意义(P均＞0.05),而不同T分期、N分期及临床分期MS差异有统计意义(P均＜0.05);达峰时间(TTP)、曲线下面积(AUC)差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 鼻咽癌DCE-MRI相关参数与病变进展密切相关;DCE-MRI技术对辅助诊断鼻咽癌及准确分期有一定价值.
-
99Tcm-HL91乏氧显像在非小细胞肺癌放疗中的初步临床应用研究
目的 通过研究非小细胞肺癌三维适形放疗前后乏氧显像结果与放疗疗效的关系,探讨利用99Tcm-HL91乏氧显像来检测肿瘤乏氧及预测和评价放疗疗效的临床价值.方法 拟接受三维适形放疗的10例非小细胞肺癌患者,在放疗前1～2 天和结束后1～2天各进行一次99Tcm-HL91显像.应用感兴趣区(ROI)技术测定肿瘤/对侧相应部位放射性计数比值(T/N),分析放疗前T/N比值和放疗前后T/N比值的变化与疗效的关系.结果 放疗有效组(CR+PR)与无效组(NC+PD)的放疗前3 h断层显像T/N比值分别为1.90±0.16和2.20±0.21(P=0.040),两组3 h断层显像T/N比值下降率分别为(21.63±5.83)%和(11.40±5.16)%(P=0.031).结论 可利用放疗前99Tcm-HL91断层显像和放疗前后乏氧显像的改变来预测和评价非小细胞肺癌三维适形放疗疗效.
-
颌面部VX2肿瘤DCE-MRI与乏氧程度及VEGF表达的相关性研究
目的分析颌面部VX2肿瘤DCE-MRI动态曲线与肿瘤乏氧染色和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的相关性,探讨DCE-MRI在肿瘤乏氧评价中的价值.方法 8只新西兰大白兔于单侧颌面部咬肌内接种VX2肿瘤细胞0.5 ml,接种后10天开始,每隔2天取一只荷瘤兔行DCE-MRI检查,绘制肿瘤动态增强曲线,计算大强化率(MER)和强化率斜率(SLE)值.对处死的荷瘤兔,取对应层面病理标本行HE染色、乏氧染色和VEGF染色分析.结果 8只实验兔成瘤率达100%,肿瘤位于单侧咬肌内,呈实质性,边缘较清晰;肿瘤MER值与乏氧程度行Spearman's等级相关分析存在显著负相关(P<0.01);肿瘤SLE值与VEGF表达水平存在正相关(P<0.05).对肿瘤乏氧染色及VEGF表达行连续切片对照研究,发现乏氧染色阳性的区域,VEGF表达也相对较高;但VEGF表达阳性区并不完全与肿瘤乏氧区表达一致.结论肿瘤乏氧与VEGF表达关系密切,乏氧可诱导VEGF表达的增高,而VEGF表达能促进肿瘤血管生成.DCE-MRI动态增强参数与肿瘤乏氧程度和VEGF表达水平有很好的相关性.
-
胰腺癌乏氧与血管生成的研究进展
胰腺癌是胃肠道肿瘤中致死率高的恶性肿瘤,确诊时多为晚期,预后差,严重影响患者生活质量.乏氧可以诱导肿瘤新生血管生成,是肿瘤发生重要机制之一.血管生成是实体肿瘤生长和转移的必要因素.近些年大量研究表明乏氧和血管生成在胰腺癌的发病机制中起了重要的作用,本文综述了两者与胰腺癌关系的研究进展.
-
睡眠呼吸暂停综合症致乏氧性脑病5例临床分析
睡眠呼吸暂停综合症近年来渐受耳鼻喉科、呼吸科及神经科医生的重视.重症睡眠呼吸暂停可造成脑因缺氧而致脑组织弥散性病变.
-
微环境乏氧上调胰腺癌细胞HIF-1α表达并诱导凋亡
目的 探讨CoCl2诱导缺氧对体外培养的胰腺癌PC-2细胞缺氧诱导因子-1(HIF-1α)表达变化及诱导凋亡作用.方法 以50、100、150、200μmol/L不同浓度CoCl2处理PC-2细胞模拟肿瘤体内乏氧模型,MTT法检测不同浓度、不同时间CoCl2处理后的PC-2细胞生长情况;透射电镜下观察乏氧微环境作用下的PC-2细胞超微结构的改变;免疫细胞化学和RT-PCR方法 检测乏氧微环境对PC-2细胞HIF-1α基因表达的影响;AnnexinV-FITC/PI双标记染色,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 不同浓度CoCl2对胰腺癌PC-2细胞生长曲线有不同程度的改变,对数生长期和平台期提前,对数期缩短.随着CoCl2浓度增加,曲线越趋于低平.透射电镜下可见线粒体肿胀,染色质边集等凋亡早期表现,少见凋亡小体.免疫细胞化学和RT-PCR结果 显示,化学缺氧剂COCl2模拟的乏氧微环境可引起胰腺癌PC-2细胞HIF-1α表达的上调;流式细胞仪检测结果 显示,正常对照组、100、150、200 μmol/L CoCl2不同浓度组PC-2细胞凋亡率分别为10.77%、34.32%、40.17%和52.30%.结论 CoCl2对胰腺癌PC-2细胞具有一定的凋亡诱导作用,同时也缩短了细胞正常的生长期,细胞形态发生相应改变,可能与上调HIF-1α的表达有关.
-
上皮-间质转化是肝动脉断流后肝癌侵袭转移潜能增加的重要机制
目的 研究肝动脉断流对原发性肝癌(简称肝癌)侵袭转移潜能的影响.方法 采用24只 BALB/c-nu/nu裸鼠,建立转移性人肝癌裸鼠原位移植模型.种瘤术后2周荷瘤裸鼠随机分为2组干预:一组行肝动脉结扎(hepatic artery ligation,HAL);另一组假手术作为对照.每组随机抽取6只裸鼠于干预术后4周进行肿瘤大小和肺转移率的比较,并用免疫组化(S-P法)及Western blot检测移植瘤上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关分子的表达;其余荷瘤动物观察生存时间.体外以100 μmol/L CoCl2模拟乏氧环境,观察MHCC97L肝癌细胞生长和凋亡以及运动和侵袭能力,用免疫荧光和Western blot检测细胞EMT标志分子的变化.结果 HAL抑制肝癌生长[(1996.8±223.6)mm3比(4049.1±596.5)mm3,P＜0.01],但增加肺转移率(6/6比1/6,P＜0.05),因此不能改善荷瘤动物生存期[(56.0±4.6)d比(60.7±5.8)d,P＞0.05].这与乏氧环境中癌细胞运动[(472.7±84.3)μm比(378.8±73.7)μm,P＜0.05]和侵袭能力[(154.4±30.5)个比(45.2±7.6)个,P＜0.01]增强有关,主要涉及E-cadherin下降及N-cadherin和Twist上调的EMT机制.结论 HAL抑制肝癌生长,促进其侵袭转移潜能,与乏氧环境中癌细胞EMT相关.
-
乏氧预测肿瘤放疗疗效的研究进展
乏氧是肿瘤的重要特征,几乎所有的实体肿瘤中均有乏氧细胞存在.乏氧细胞对放化疗都不敏感,是肿瘤难以治愈、容易复发的重要原因.影响放射治疗与肿瘤局部控制的因素很多,肿瘤的氧合状态在放射治疗中的重要作用一直是人们研究的热点.氧电极测定结果能直观地反映肿瘤的含氧情况而被认为是测定肿瘤乏氧状况的"金标准",而其检测点的代表性以及多次检测的重复性问题一直存在较大争议.采用非侵入性方法确定乏氧组织,如乏氧显像核医学技术、DNA"彗星"分析法和核磁共振光谱法,日益受到广泛重视.免疫组织化学法是通过对乏氧诱导的内源性基因表达的测定来检测乏氧.
-
miR-122对肝癌细胞HepG2放疗敏感性影响及其机制研究
目的 miR-122是一种肝脏特异性miRNA,miR-122过表达可以降低肝脏肿瘤细胞的相关特性,并增强化疗药物的敏感性,但是在放疗方面研究较少.本研究探讨miR-122对肝癌细胞放疗敏感性的影响及其可能的机制.方法 通过转染miR-122类似物构建HepG2-miR-122 mimic细胞,利用Q-PCR检测miR-122的表达,通过成克隆分析观察miR-122对肝癌细胞放疗敏感性的影响,ELISA方法检测X射线照射后不同时间点细胞内乏氧因子HIF1-α及ROS的表达;蛋白质印迹法检测X射线照射后48 h各细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Bim的表达变化.结果 Q-PCR检测显示,HepG2-miR-122mimic细胞中miR-122的表达较HepG2细胞增加了约8.2倍.成克隆分析显示,HepG2细胞转染miR-122mimic后放疗敏感性增高,与HepG2组相比,准域剂量Dq的放疗增敏比(SER)为1.52.ELISA分析显示,HepG2细胞在0 h HIF-1α表达量为5.20 ng/mL.X射线照射后HepG2细胞中HIF-1α升高,至48 h升至高,为6.69 ng/mL.而HepG2-miR-122 mimic细胞在0h的表达量为4.7 ng/mL,X射线照射后HIF-1α的含量进一步下降,至48 h下降至3.41 ng/mL.48 h时miR-122 mimic转染情况对HIF-1α的表达差异有统计学意义,F=70.819,P＜0.001;X射线暴露对HIF-1α的表达差异有统计学意义,F=132.436,P＜0.001;miR-122 mimic的转染情况及X射线暴露之间存在交互作用,F=4.290,P=0.039.ROS含量在X射线照射后表现为轻度升高,在0 h HepG2组和HepG2-miR-122 mimic组ROS表达量分别为116.21和121 IU/mL,X射线照射后ROS进一步升高,至48 h升至高,分别为130和192 IU/mL.48 h时miR-122 mimic转染情况对ROS的表达差异有统计学意义,F=98.189,P＜0.001;X射线暴露对ROS的表达差异有统计学意义,F=145.373,P＜0.001;miR-122 mimic的转染情况及X射线暴露之间存在交互作用,F=6.548,P=0.012.蛋白质印迹法检测结果显示,HepG2-miR-122 mimic细胞中BCL-2的表达量为HepG2的56.32％,X射线照射后48 h HepG2细胞中BCL-2的表达量降至原来的55.01％,而HepG2-miR-122 mimic细胞则降至23％.HepG2-miR-122 mimic细胞中Bax和Bim的表达量分别为HepG2细胞的170.21％和140.35％,X射线照射后,HepG2细胞中Bax和Bim的表达量分别升至HepG2的220.12％和178.34％,而HepG2-miR-122 mimic细胞中,Bax和Bim的表达量则分别升至HepG2细胞的240％和260％.miR-122 mimic转染情况对BCL-2、Bax和Bim的表达差异均有统计学意义,均P＜0.01.X射线暴露对BCL-2、Bax及Bim的表达差异均有统计学意义,均P＜0.01.miR-122mimic转染情况及X射线暴露对Bcl-2、Bim及Bax的表达均不存在交互作用.结论 miR-122可以上调肝癌细胞HepG2的放射敏感性,其机制可能与调节HIF-1α和ROS及凋亡相关蛋白有关.
-
乏氧状态干扰Snail对人肺腺癌细胞转移潜能影响及其机制探讨
目的:观察乏氧状态下干扰锌指转录因子Snail对人肺腺癌SPCA1细胞侵袭的影响及其上皮-间质转化(epithelial mesenehymal transition,EMT)相关分子机制.方法:应用靶向人Snail基因的小干扰RNA (Snail siRNA)转染常氧(19％O2)肺癌细胞,48 h后将细胞置乏氧(0.5％O2)培养箱培养,乏氧24 h后采用Real-Time PCR检测细胞Snail mRNA表达,蛋白质印迹法检测Snail和EMT表型分子E-钙黏素蛋白表达,Transwell小室评价细胞侵袭能力.结果:与常氧细胞(设为1)相比,乏氧诱导肺癌SPCA1细胞Snail mRNA(5.31±0.73)和蛋白(4.82±0.67)表达均显著增加,P均＜0.05.与乏氧对照siRNA组(设为1)比较,LOXsiRNA转染后乏氧SPCA1细胞SnailmRNA和蛋白表达分别为0.26±0.08和0.28±0.03.将常氧细胞侵袭力和E-钙黏素表达设为1,则乏氧细胞侵袭力和E-钙黏素表达分别为1.85±0.13和0.45±0.04,与常氧细胞存在显著差异,P值均＜0.05.下调Snail表达后,乏氧细胞侵袭力和E-钙黏素表达分别为0.90±0.08和1.81±0.09,与乏氧对照siRNA组存在显著差异,P值均＜0.05.将乏氧对照siRNA细胞侵袭力和E-钙黏素表达设为1,则Snail siRNA组侵袭力和E-钙黏素分别为0.50±0.03和2.04±0.17,P值均＜0.05.结论:乏氧状态下干扰Snail降低肺癌细胞侵袭,其机制可能与增加E-钙黏素蛋白表达有关.
-
兔VX2肺癌模型多层螺旋CT灌注扫描与肿瘤乏氧显像相关性研究
目的:探讨兔VX2肺癌模型多层螺旋CT灌注扫描图像与肿瘤乏氧标志表达和肿瘤乏氧区间的相对关系.方法:17只新西兰大白兔,肺部原位成瘤后行动态CT灌注扫描,应用Perfusion 3灌注软件行灌注图像重建,在肿瘤高灌注区、低灌注区各选取3个感兴趣区做比较,肿瘤组织标本行免疫组化,检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor1alpha,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)的表达.应用SAS 9.0统计软件包进行数据统计分析.结果:高灌注区与低灌注区比较,HIF-1α的表达差异有统计学意义,P＜0.01;血容量差异有统计学意义,P＜0.01.在高灌注区,HIF-1α和血容量有明显相关性,r=-0.75,P＜0.01;HIF-1α和血流量亦有明显相关性,r=-0.50,P＜0.05.在低灌注区,HIF-1α与血容量(r=-0.50,P＜0.05)、血流量(r=-0.49,P＜0.05)和表面通透性(r=-0.53,P＜0.05)均有相关性.结论:初步提示,CT灌注图像高、低灌注区和乏氧区有一定的相关性.
关键词： 兔 VX2肿瘤 肺癌 多层螺旋CT灌注扫描 乏氧
