冠心病患者脉搏波速度特点研究

目的:探讨冠心病患者臂踝脉搏波速度(Brachial ankle pulse wave velocity,baPWV)变化规律,观察它与冠状动脉疾病严重程度的关系,期望它成为冠状动脉疾病严重程度预测指标之一.方法:选取2007年10月-2008年5月心血管内科住院疑诊的冠心病患者126人,所有患者均接受冠状动脉造影,冠心病患者52人,非冠心病患者74人,将两组患者baPWV进行比较;再将冠状动脉狭窄病变Gensini积分与baPWV进行相关分析.结果:冠心病患者baPWV明显增高,它与冠状动脉狭窄病变Gensini积分明显相关.结论:冠心病患者baPWV明显增高,它与冠状动脉病变严重程度密切相关,因此,baPWV可作为无创预测冠心病患者病变严重程度指标之一.

吸入不同浓度的七氟烷对维库溴铵肌松效应的影响

目的:探讨吸入不同浓度的七氟烷对维库溴铵肌松效应的影响.方法:80例择期开腹手术患者随机分为4组:对照组(I组).吸入七氟烷1MAC(II组),1.5 MAC(III组),2 MAC(IV组).比较不同MAC七氟烷对维库溴铵肌松效应的影响.分别记录各组注入维库溴铵后其抑制时间、T1恢复时间及恢复指数.结果:起效时间Ⅱ组与I组相比较差异无统计学意义(P>0.05),而Ⅲ组和Ⅳ组与I组相比明显缩短(P

抗凝溶栓后大鼠腔静脉内皮扫描电镜变化

目的:观察肝素、尿激酶及肝素加尿激酶治疗急性大鼠下腔深静脉血栓(Deep vein thrombosis,DVT)形成后不同时相腔静脉内皮扫描电镜变化.方法:SD大鼠135只,105只建立大鼠急性下腔静脉血栓模型后随机分为肝素A组、尿激酶B组、肝素加尿激酶C组各35只;另30只为假手术组.各组给药后分别于血栓形成后第1、4、7、14、28 d获取病变段血管.通过扫描电镜观察静脉内皮层变化.结果:7d时扫描电镜结果显示B及C组内皮损伤较轻,内皮损伤分级主要为Ⅱ一Ⅲ级.而C组为Ⅲ～Ⅳ级(P<0.05);28 d时C组内皮损伤较A、B组轻(P<0.05),内皮损伤分级主要为Ⅱ级,而B、C组为Ⅲ～Ⅳ级(P<0.05).结论:肝素联合尿激酶治疗大鼠急性下腔静脉血栓形成较其单独使用有更好的内皮结构保护作用.

热塑支具治疗儿童特发性脊柱侧凸的护理体会

目的:探讨应用矫形支具治疗儿童特发性脊柱侧凸的临床效果及护理体会.方法:对本院2000年1月～2005年1月采用热塑支具治疗或支具辅助治疗的124例儿童特发性脊脊侧凸患儿,穿戴前进行全而评估,解除患儿思想顾虑,做好各项宣教;穿戴后进行连续护理观察,重视患儿的感受和需求,反复强调注意要点,注意预防并发症;治疗期间加强功能锻炼.结果:全部病儿均经过2～4年的随访,绝大多数有不同程度的畸形矫止,基本上达到矫治的预期目的.穿戴前后加强宣教和护理,能有效降低并发症的发生率.结论:由于儿童的病理及生理特点,支具对各种特发性脊柱侧凸均有不同程度的矫正作用,可有效地控制早期脊柱侧凸的发展.但应加强穿戴前后的宣教和护理,及早防治各种并发症,从而提高患儿的生活质量.

微创橇拨复位加ICOS双重加压螺钉治疗跟骨骨折

目的:探讨斯氏针微创橇拨复位加ICOS双草加压螺钉(Ideal compression screw,ICOS)治疗跟骨骨折的疗效.方法:应用斯氏针橇拨复位加ICOS双重加压螺钉治疗跟骨骨折13例(17侧).按Sanders骨折分型,Ⅱ型10侧,Ⅲ型7侧.结果:13例均获得随访,平均随访时间13.4个月.按美国骨科协会之足踝临床评分系统评价术后功能:优12侧(70.6%),良3侧(17.6%),可2侧(1 1.8%).优良率88.2%.结论:采用斯氏针微创橇拨复位加ICOS双重加压螺钉治疗Sandem II、Ⅲ型跟骨骨折具有固定牢靠,并发症少,满意率高等优点,是一种治疗跟骨骨折的有效方法.

Forsus推上颌第一磨牙向远中瞬时移动趋势的力学仿真分析

目的:构建具有一定粘弹塑性的Forsus推上颌第一磨牙向远中三维有限元模型,仿真模拟Forsus推上颌第一磨牙远中瞬时移动趋势,探讨Forsus远中移动上颌第一磨牙有利的加载方式,为临床应用提供一定的参考依据.方法:选择恒牙早期安氏Ⅱ类错殆畸形男性患者1名,螺旋cT扫描头颅后,经Mimics8.0、Abaqus6.5构建Focus推L颌第一磨牙向远中的三维有限元模型,模拟单纯加载Forsus远中力、加载Focus远中力+抗倾斜力矩、复合加载Forsus远中力+抗倾斜力矩+抗旋转力矩三种不同载衙作用下上颌第一磨牙的瞬时移动过程(加载合力大小300 g,作用点位于冠颊而中心,加载时间为1 s),经Abaqus6.5分析上颌第一磨牙远中移动的有利加载方式.结果:Forsus推上颌第一磨牙向远巾时,不同的加载方式所产生的牙周膜应力分布不同.单纯加载Forsus远中力时,上颌第一磨牙发生较严重倾斜移动;加载Fomus远中力+抗倾斜力矩(Mt/F=9)时,上颌第一磨牙发生较严重扭转;复合加载Focus远中力+抗倾斜力矩(Mt/F=9)4-抗旋转力矩(Mr/F=5)时,上颌第一磨牙牙周膜韧带远中面承受的应力小,第一磨牙近似远中平动.结论:Forsus导下颌向前时,在上颌第一磨牙处辅以一定的抗倾斜力矩和抗旋转力矩,可获得较有利的磨牙远中平动效果.

抑郁症男性患者酒依赖的相关因素研究

目的:探讨抑郁症男性患者发生酒依赖的相关因素,为酒依赖的预防和干预提供依据.方法:应用人口学资料、病史一般情况调查、早年(18岁以前)不良家庭环境问卷、社会支持评定量表、应付方式问卷对60例抑郁症伴酒依赖的男性患者(研究组)和60例抑郁症无洒依赖的男性患者者(对照组)进行对照研究.结果:两组问经单因素分析差异有统计学意义的各因子进行Logistic 回归分析.结果显示酒依赖家族史、自杀行为史、家庭暴力行为史、低发病年龄、曾受父母虐待、父母不良教养方式、社会支持总分、丰观支持、客观支持、对支持利用度、退避、幻想、自责和求助是抑郁症男性患者酒依赖的危险因子.结论:两组患者在一般病史资料、早年不良家庭环境及社会支持和应激方式等方面存在差异,以上因素与抑郁症男性患者发生酒依赖具有相关性.存原发抑郁症男性患者进行以上方面评估,对预防其酒依赖的发生及指导干预治疗上都有重要意义.

复方烫疡油促进深Ⅱ0烫伤创面愈合、减少瘢痕形成的实验研究

目的:观察复方烫疡油(Fu fang tang yang you,FTY)促进小鼠创面愈合、减少瘢痕形成的作用,并探讨其作用机制.方法:采用小鼠深Ⅱ0烫伤模型.创面外用复方烫疡油治疗,并用表皮生长因子(Recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)、磺胺嘧啶银霜、芝麻油(赋形剂)作疗效对比,用生理盐水作空白对照.测定创面组织创伤后8、12、24、48、72h干湿重比例以了解组织创伤后水肿情况;透明膜描绘-求积议测定创面伤后3、7、14 h创面愈合情况;并用免疫组织化学法观察I、Ⅲ型胶原、TGF-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的变化;TUNEL法定量观察组织细胞的凋亡指数;原位杂交观察胶原酶(Marlx Metalloproteianse 1,MMP-1)及金属蛋白酶抑制剂(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA的表达.结果:复方烫疡油能减轻创面炎症,降低创伤组织水肿,改善I、Ⅲ型胶原比例,减少瘢痕形成,促进创面愈合.结论:复方烫疡油具有抗炎、抗感染,促进创而愈合,减轻瘢痕形成的作用.

海马脑片氧糖剥离模型中血晶素对脑红蛋白表达的影响

目的:观察血晶素(Hemin)对海马脑片氧糖剥离(Oxygen/glucose deprivation,OGD)模型的保护作用及其对脑红蛋E(Neuroglobin,Ngb)表达的影响.方法:取新生8-10d SD大鼠,制备厚约400um海马脑片,培养2周后筛取完好无特异荧光着色的脑片,随机分为3组:正常培养对照组(HOTC),单纯缺氧缺糖组(OGD),预加Hemin再缺氧缺糖组(Hemin+OGD).除HOTC组外,其余各组在5%CO2、95%N2的混合气体中培养1.5 h,其后恢复培养24 h.冰冻连续冠状切片,分别作尼氏染色、Ngb 的免疫组织化学染色.应用免疫组织化学染色和图像分析处理技术观察海马脑片Ngb蛋白表达,并观察神经元形态学改变.结果:OGD组锥体细胞发生坏死,锥体细胞数量明显减少;Hemin+OGD组坏死较前者轻,锥体细胞数较前者多.OGD组海马脑片中形态结构正常的阳性细胞少,多数阳性神经元结构模糊、肿胀,Ngb的表达强于HOTC组,二者相比有显著性差异(尸<0.05)Hemin+OGD组海马脑片中大部分细胞形态结构正常,少数阳性神经元结构模糊、肿胀,Ngb蛋白的表达较HOTC组和OGD组明显增强(P<0.01).结论:血晶素可减轻海马脑片缺糖缺氧性损伤,其机制可能与其诱导神经元表达Ngb密切相关.

DDR1a在结肠癌细胞株中的表达及与基质金属蛋白酶2,9的关系

目的:探讨结肠癌细胞中盘状结构域受体酪氨酸激酶l(Discoidin domain receptor tyrosine kinasesla,DDRla)的表达和基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinasse9,MMP9)的活性及其相互的关系.方法:用Western blot检测结肠癌细胞株和人正常结肠平滑肌细胞株中DDRla表达,明胶酶谱法检测各细胞株中的MMP2,MMP9的活性.结果:侵袭能力强的结肠癌细胞LOVO中,DDRla呈显著高表达(P<0.01)及MMP2、MMP9呈显著高活性(P<0.01),此外在所测细胞中DDRIa表达与MMP2及MMP9活性呈显著正相关(P

丹参素对转化生长因子β1刺激肝星状细胞信号传导的影响

目的:探讨丹参素对转化生长因子β1(Transformation growth factor,TGFβ1)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)信号传导通路的影响.方法:体外分离、培养大鼠肝HSC,检测丹参素(O.062 5～0.2500 mmol/L)对TGFβ1促进HSC活化、HSC表达α-SMA和HSC表达Smad2、Smad3、Smad7 mRNA的影响.结果:丹参素(0.062 5-0.250 0 mmol/L)对TGFβ1引起的HSC增殖具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P

电刺激小脑顶核对AD大鼠学习记忆能力及海马神经元凋亡的影响

目的:研究电刺激小脑顶核(Fastigial nucleus electrostimulation,FNS)对阿尔茨海默病(Alzheimer's diseases.AD)模型大鼠学习记忆能力及海马神经元凋亡的影响.方法:40只SD大鼠随机分成四组:AB1-40微量注射组(AD组)、假手术组(sC组)、AB1-40微量注射组+电刺激小脑顶核组(FNS组)和Aβ1-40.微量注射组+电刺激齿状核组(DNS组),采用Morris水迷宫检测电刺激小脑顶核对AD大鼠认知功能的的影响;通过尼氏染色观察电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元形态的影响;采用TUNEL凋亡染色法观察电刺激小脑顶核对AD大鼠海马神经元凋亡的影响.结果:与SC组比较,AD组、FNS组和DNS组每天隐匿平台逃避潜伏期明显增长(P

PEDF对大鼠穿透性角膜移植片VEGF影响的实验研究

目的:探讨局部应用色素I:皮细胞衍生因子(Pigment epithelium-derived factor,PEDF)滴眼液抑制大鼠穿透性角膜移植术后植片中VEGF(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及作用机制.方法:建立60只SD大鼠(受体)和30只Wistar(供体)大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,并随机分成实验组(10 nmol/LPEDF滴眼液)和实验对照组(赋形剂滴眼液)各30只;另30只SD大鼠自体穿透件角膜移植模型(赋形剂滴眼液),作为空白对照组,每只动物均行右眼手术左眼为正常对照.自术后第1 d起在显微镜下进行临床观察,每日1次.于术后1、2、3、4、8周5个时间点,每组随机处死6只动物,以免疫组织化学方法检测角膜移植片PEDF和VEGF的表达水平;透射电镜观察超微结构变化.结果:实验组在术后2、3、4、8周VEGF的表达水平显著低于实验对照组(P

pIL-12质粒DNA对细粒棘球蚴感染小鼠脾细胞凋亡的影响

目的:探讨pIL-12质粒DNA免疫对细粒棘球蚴感染小鼠脾细胞凋亡的影响.方法:将pIL-12质粒DNA肌肉注射免疫BALB/C鼠,免疫后8周用Eg原头节进行攻击感染,感染后18周剖杀小鼠,计算减蚴率;取脾并分离脾细胞,用ConA刺激培养脾细胞,流式细胞仪检测脾细胞的凋亡发生率,同时设有BCG和PBS对照.结果:plL-12质粒DNA免疫组的减蚴率为44.85%,脾细胞凋亡发生率明显低于PBS对照组.结论:plL-12质粒DNA可抑制细粒棘球蚴感染小鼠的脾细胞凋亡.

皮质发育障碍模型鼠海马区神经元凋亡机制的研究

目的:探讨皮质发育障碍(Disorder of cortical developments,DCDs)模型鼠海马神经元的凋亡机制.方法:利用卡莫司汀(BCNU)诱导建立SD大鼠皮质发育障碍动物模型,在出生后0 d(P0)、15 d(P15)、30 d(P30)、45 d(P45)和60 d(P60)时,采用TUNEL,检测海马区神经元凋亡,RT-PCR方法和免疫组化分别对8只模型鼠和正常鼠检测海马区Bcl-2和Bax的在mRNA和蛋白水平的表达,并结合图像分析系统进行结果分析.结果:成功建立SD大鼠皮质发育障碍动物模型;与对照组比较,TUNEL、免疫组化和RT-PCR检测结果显示:Po模型鼠组海马区神经元凋亡无明显变化,P15、P30、P45、P60模型组神经元凋亡逐渐加重,有显著差异(P<0.05),且随存活时间延长,模型组海鸟神经元Bax表达逐渐增强,Bax/Bcl=2比值较对照组增高,具有显著统计学意义(19<0.05).结论:皮质发育障碍模型鼠海马区存在显著的神经元凋亡,Bcl-2和Bax参与了其凋亡过程;皮质发育障碍模型鼠海马神经元凋亡可能参与了皮质发育障碍所致的癫痫及难治性癫痫的发病机制.

体外骨对甲状旁腺激素相关蛋白-141的双相反应

目的:通过体外器官培养系统,探讨甲状旁腺激素相关蛋白(Parathyroid hormone-related protein,PTHrP)在新骨生成和骨组织破坏方面的效应.方法:将全长PTHrP(-36-+141)eDNA克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+),并用重组质粒pcDNA3.1-PTHrP转染LCC15-MB乳腺癌细胞,在体外器官培养系统里加不同浓度含PTHrP的条件培养上清液培养小鼠颅盖骨.通过组织学方法检测PTHrPl41在新骨形成和骨组织破坏方面的效应.结果:转染的乳腺癌细胞产生的PTHrP在低剂量时诱导骨的形成,而高剂量时诱导骨的再吸.结论:PTHrP在新骨的形成和骨组织的破坏方面因其浓度的不同而具有不同效应.

人REGγcDNA克隆及其稳定转染细胞株的建立

目的:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ的稳定转染细胞株,为进一步深入研究REGγ的功能奠定基础.方法:提取MCF-7细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR获取全长REGγcDNA,经限制性内切酶EcoR I、EcoR V酶切后与PcDNA3.1连接构建重组体,冉经内切酶酶切及DNA序列分析鉴定重组体构建正确.以Lipofectamine2000将重组体导入HBL-100细胞,南G418筛选出稳定转染细胞株.结果:经免疫细胞化学和RT-PCR检测并证实稳定转染细胞株中有REGγ的高表达.结论:真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ构建成功,并经抗生素筛选获得了稳定高表达REGγ的细胞株,为进一步研究REGγ的功能奠定了基础.

大鼠慢性移植肾肾病模型的建立

目的:建立一种简易、实用的大鼠肾移植慢性移植.肾肾病(Chronic allograft nephropathy,CAN)模型,为研究肾移植术后慢性排斥反应的发病机理、治疗和预防提供平台.方法:F344近交系大鼠和Lewis近交系大鼠作为供、受体,取供体的左肾作为供肾,在裸眼直视下行供体的下腔静脉与受体肾静脉的端端吻合.供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合,进行原位异体肾移植.术后10mg/(kg·d)×10d环孢素口服液灌胃,于4周后分别观察各受体移植.肾组织病理变化情况.结果:手术于2.5h内完成,成功率达97.50%.移植术后4周开始出现移植肾CAN的病理改变,12周可见典型慢性排斥反应病变.结论:该方法手术操作简单、直观,简化了显微外科技术的设备要求,建立了大鼠慢性移植肾肾病模型.

靶向survivin的siRNA联合顺铂抑制肺腺癌A549细胞增殖的实验研究

目的:研究靶向survivin的siRNA和顺铂联用对肺癌细胞A549的增殖抑制作用.方法:将A549细胞分为空白对照组,阴性对照质粒pSilencer2.0-Nc转染组,顺铂处理组,pSileneer2.0-SVV2转染组,pSilencer2.0-SVV2转染+顺铂处理组.转染采用脂质体法.MTT法检测靶向survivin的siRNA和顺铂对A549细胞增殖的抑制作用;RT-PCR法检测A549细胞survivinmRNA转录水平变化情况;流式细胞术和TUNEL.法检测A549细胞凋亡情况.结果:MTT法示:pSilencer2.0-SVV2转染+顺铂处理组增殖抑制率为51.38%±1.35%,与其它各组相比抑制率明显增高,具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测显示空白对照组,阴性对照质粒pSilencer2.0-NC转染组,顺铂处理组survivinmRNA表达无明显变化(P>0.05).pSilencer2.0-SVV2转染组、pSilencer2.0-SVV2转染+顺铂处理组survivin mRNA表达明显下降(P<0.05);流式细胞术和TUNEL法检测pSilencer2.0-SVV2转染+顺铂处理组凋亡率分别为42.48%±2.28%和40.65%4±3.53%,与其它各组相比凋亡率明显增高,具有统计学意义(P<0.05).结论:将靶向survivin的siRNA和顺铂联合应用可以协同抑制A549细胞增殖,共同发挥诱导细胞凋亡作用.

发夹DNA探针检测乙胺丁醇耐药结核杆菌embB基因306密码子突变研究

目的:针对结核杆菌耐乙胺丁醇embB306codon位点,设计发夹DNA探针及其相应的单侧延长臂发夹DNA探针,建立发夹DNA探针芯片技术,并初步运用荧光显微镜观测探针与扩增产物杂交的荧光信号.方法:运用Beacon designer软件,设计embB基因包含306codon的发夹DNA探针及其相应的单侧延长臂发夹DNA探针,荧光显微镜检测embB306codon扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果.结果:通过荧光显微镜观测到结核标准株及embB306codon突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号存在显著差异;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB306codon突变检出率为66%,测序法突变检出率为69%.结论:embB306codon点突变是结核杆菌耐乙胺丁醇的主要原因;发夹DNA探针芯片技术可以有效检测单碱基靶点突变;应用荧光显微镜可以高灵敏地观测荧光芯片杂交靶点.

含川芎嗪的玻璃化液对异体神经移植免疫反应的影响

目的:观察含不同浓度川芎嗪(Tetramethylpyrazine.TMP)的玻璃化保存液对异体神经移植的免疫学变化,以探索含川芎嗪的玻璃化液保存同种异系(体)神经后对其抗原性的影响.方法:在Wistar大鼠的背部和腹部皮下植入经过含川芎嗪的玻璃化液保存的SD大鼠的坐骨神经,对照组植入新鲜自体神经.用免疫组化染色检测异体神经中T淋巴细胞的侵润程度.结果:含320 mg/L川芎嗪的玻璃化液在-20℃保存异体神经3周后.CD4+和CD8+淋巴细胞的侵润程度明显轻于含其他浓度川芎嗪的玻璃化液保存的异体神经移植组,神经组织较好保持原形态,周围仅见极少量淋巴细胞侵润,与自体神经植入组无明显差别.结论:含320mg/L川芎嗪的玻璃化液在-20℃保存同种异体神经3周后的抗原性明显降低,植入体内后免疫排斥反应不明显.

辛伐他汀抑制心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大与RhoA激酶关系

目的:观察辛伐他汀对心肌梗死后大鼠心肌细胞肥大的抑制作用,探讨小G蛋白RhoA激酶(RhoA kinase,ROCK)在辛伐他汀调控心肌细胞肥大中的信号转导作用.方法:雄性Wistar大鼠,分为4组,每组8只.结扎冠状动脉左前降支,建立心肌梗死模型.假手术组(SHAM组)和梗死组(MI组)予生理盐水1 ml/d灌胃.辛伐他汀组(SIM组)予辛伐他汀40mg/(kg·d)灌胃.Fasudil组(F组)予特异性ROCK抑制剂Fasudil 7.5 ms/ks,bid腹腔注射.术后28 d,测定大鼠左室重量指数,心肌细胞横断面积,RT-PCR检测ROCK mRNA表达,免疫组化和Western-Blot检测ROCK活性标志物-磷酸化ERM(Phospho-ERM)蛋白表达水平.结果:术后28 d,MI组大鼠心肌左室重量指数,心肌细胞表面积,ROCK mRNA表达水平以及Phospho-ERM蛋白表达水平较SHAM组明显增高,SIM组和F组前述各项检测指标均较MI组显著降低.结论:辛伐他汀能抑制心梗后心肌细胞肥大,其作用机制可能与他汀抑制ROCK途径有关.

人膀胱移行细胞癌组织中环氧合酶-2基因的表达及临床意义

目的:探索环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)在膀胱移行细胞癌(Transitional cell carcinoma,TCC)组织中的表达及其意义.方法:采用免疫组化技术,对42例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱组织石蜡标本切片进行免疫组化染色,对阳性表达率与肿瘤分级及侵袭性间的相关性进行分析,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究膀胱癌组织中COX-2的表达.结果:COX-2蛋白的阳性表达率与膀胱移行细胞癌分级及侵袭性呈显著相关,在膀胱肿瘤组织中表达率为61.9%(26/42),COX-2在正常膀胱组织中无表达.在I级膀胱移行细胞癌中COX-2蛋白表达率为33.3%(4/12),在Ⅲ级及lII级以上膀胱移行细胞癌中COX-2阳性表达率为87.5%(14/16),I级与Ⅲ级及Ⅲ级以上之间有显著差异(P<0.05). COX-2在表浅及浸润膀胱癌中阳性表达率分别为30%和90.9%,统计分析其表达有显著差异(P

肿瘤特异性hTERT启动子与Survivin启动子在肺癌A549细胞中的转录活性研究

目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据.方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基凶;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED.将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平.结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光.pGL-S-RED质粒在A549细胞巾表达强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34.结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具.

TACE在自体髓核移植背根节致根性神经痛中的作用机制研究

目的:探讨TACE在椎间盘突出致坐骨神经痛发病机制中的作用.方法:采用自体髓核移植至L45,神经节,建立根性神经痛的动物模型.应用Von Frey针丝及RTY-I型热痛测仪对神经行为的改变进行检测,采用免疫组化法检测TACE在神经节及神经根中的表达,采用RT-PCR的方法检测TACE和TNF-amRNA表达,并分析其与神经行为改变之间的相关性.结果:自体髓核移植可以导致明显的机械刺激痛觉过敏现象,而无明显的热刺激痛觉过敏,TACE在自体髓核移植术后4 d表达开始增强(P<0.05),术后1周表达强(P<0.01),术后3周逐渐恢复正常,与TNF-α的表达及TACE的表达之间存在显著相关性.结论:TACE作为释放活性TNF-a的特异性蛋白酶,自体髓核移植至DRG后,其蛋白表达升高,TNF-amRNA、TACEmRNA表达之间存在线性相关,说明TACE可能是抗TNF-α治疗的新靶点,在治疗椎间盘突出引起的根性神经痛中具有重要作用.

GSK-3β参与抑制肺癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)对肺癌A549细胞增殖的影响及可能机制.方法:MTT法检测不同浓度曲古抑菌素A(TSA)和联合GSK-3β抑制剂SB216763对A549细胞增殖的影响;Western Blot法检测各组细胞中GSK-3β和磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)蛋白表达的变化;流式细胞仪分析细胞周期;免疫细胞化学法检测p27蛋白水平.结果:TSA以剂量依赖性抑制A549细胞生长,使细胞周期阻滞于GdG1期,用SB216763预处理后明显减弱了TSA对A549细胞的生长抑制作用和细胞周期阻滞.TSA对细胞GSK-3β蛋白表达无明显影响,却降低了pGSK-3β蛋白水平.p27蛋白表达增加;抑制剂SB216763使pGSK-3β表达增加,下调p27蛋白水平.结论:GSK-3β参与并促进了TSA对肺癌细胞的生长抑制和细胞周期阻滞效应,其机制可能与GSK-3β对p27蛋白的调节有关.

HPLC法同时测定蓝芩口服液中盐酸小檗碱与黄芩苷的含量

目的:建立同时测定蓝芩口服液中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:Zorbax XDB-C18柱(4.6x150 mm,5um),流动相:甲醇-0.5%磷酸溶液梯度洗脱,比例为0-16.5min,甲醇38%-40%,流速1 ml/min;16.8～18min,甲醇99%.流速1.6ml/min;18.1-22min,甲醇38%,流速1.6ml/min;22.1~23min.甲醇38%,流速1 ml/min.检测波长为275 nm,柱温30℃.结果:盐酸小檗碱在6.8～65.281ug/ml,黄芩苷在31.2-299.521~g/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系.加样回收率在97.O%-101.3%,RSD小于2.O%.结论:本法操作简便、结果准确、分离效果好,可用于蓝芩口服液中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的测定.

改良超声波萃取-高效液相色谱法分离、检测川楝树皮提取物中川楝素

目的:建立改良的快速分离、检测川楝树皮提取物中川楝素(Toosendanin,TSN)的超声波萃取-高效液相色谱法.方法:采用超声波乙醇提取-氯仿萃取制备川楝树皮提取物,高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)分析提取物中的TSN含量,以乙腈-水(45:55)为流动相,检测波长215 nm,流速1 ml/min,柱温:25"C,色谱柱为XDB Ct8柱04.6×250mm,5um).结果:TSN在4.64.88.2ug/ml浓度范围内有良好的线性关系(r=0.9996),测定方法平均加标回收率为100.83%,精密度试验RSD为1.42%,稳定性试验RSD为2.26%.提取物中TSN经HPLC分离提纯后纯度达96.32%.结论:本方法简便、快速、准确,所得结果稳定、重复性好,可作为实验室少量制备和鉴定TSN纯品的方法.

现场快速检测青蒿药材质量的方法研究

目的:建立一种简便、快速、准确、灵敏的现场测定青蒿药材中青蒿素含量的检测方法.方法:以索氏提取-高效液相色谱法为对照,采用超声波提取-紫外分光度法进行现场快速检测青蒿药材质量.结果:得出现场快速检测青蒿素的含量关系式为:MRD(mg/g)=(A×V X 2.2984)/(As×3)+1.2067.结论:超声波提取-紫外分光度法测定青蒿质量,简化了操作程序,缩短了提取时间,在1.5h内就可完成青蒿素的含量测定,是日前快检速测青蒿药材质量较理想的方法.

99mTc-SC淋巴显像在乳腺癌前哨淋巴结定位中的临床价值

目的:回顾性评价99mTc-硫胶体(99mTc-SC)淋巴显像对乳腺癌前哨淋巴结(Sentinel lymph node,SLN)的定位准确性,为乳腺癌SLN活检技术提供准确的定位依据.方法:对50例乳腺癌患者行99MtC-SC前哨淋巴结显像,并进行体表定位;术中行γ探测仪探测定位SLN,并与显像体表定位结果作比较.患者均行腋窝淋巴结清扫,统计其检出率、准确率、假阴性率、假阳性率.结果:50例病人共有45例前哨淋巴结清晰显影,检出率为90.00%(45/50).共显示SLN 72个,平均1.60枚;淋巴显像检出的SLN与.γ探针检测符合率为91.11(41/45枚);用淋巴显像检出的前哨淋巴结预测腋窝淋巴结转移的准确率为93.33%,特异度为100%,假阴性率为6.67%,假阳性率为0%.结论:99MTc-SC前哨淋巴结显像体表定位能较准确预测腋窝淋巴结转移情况,可用于指导乳腺癌SLNγ探测定位及活检手术.

1例术中诊断为嗜铬细胞瘤患者的麻醉处理

1临床资料徐××,男,56岁,体重63kg,身高165cm.ASA II,NY-HF1.Mallampati分级2级.因上腹部隐痛不适1月入院.既往身体健康,否认高血压病史.实验室检查:红细胞、红细胞压积和血红蛋白稍增高,其余均正常.腹部B超:(1)胆结石;(2)第一肝门旁异常低回声(肿大淋巴结).

肺软骨瘤1例

1临床资料患者男性,53岁,因"咳嗽、胸闷、盗汉3周余"入院.病程中无发热,无咯血及痰中带血表现.

重庆市1220名高级知识分子脂肪肝患病率及相关因素分析

目的:对重庆市1220名正高职称人员脂肪肝患病率与相关因素进行分析,为脂肪肝的防治提供依据.方法:2006年重庆市参加健康体检的正高职称人员,先筛选并排除患有肝癌、慢性病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、肝脓肿等疾病(B超表现与脂肪肝相似的疾病)的人员.然后将经肝脏B超诊断为脂肪肝的患者作为研究组(302人),同时把余下的非脂肪肝组(918人)做为对照组,两组年龄、性别分布相似.后将两组的血压、血脂、血糖、血尿酸等检测结果进行对比分析.结果:重庆市1220名高级知识分子脂肪肝检出率为24.75%,男性检出率(30.47%)明显高于女性(8.04%);脂肪肝组的空腹血糖(FBG)、胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白(IDLC)、血尿酸(UA)水平显著高于非脂肪肝组,高密度脂蛋白(HDLC)水平低于非脂肪肝组;多因素logistic回归分析显示:尿酸(OR=273.47)、甘油三酯(OR-4.13)、空腹血糖(OR=2.92)、收缩压(OR=1.68)、血清总胆同醇(OR=1.68)、低密度脂蛋白(OR=1.44)、舒张压(OR=1.34)这8项指标与脂肪肝的发生密切相关.结论:重庆市高级知识分子脂肪肝患病率较高,与多因素综合作用相关.强调定期体检,加强健康教育,提倡健康的行为和生活习惯将有利于其健康水平的提高.

重庆及四川三峡外迁移民的心理健康现状与心理应激的相关性研究

目的:分析重庆市三峡库区外迁至本市其他区县和四川省移民的心理健康现状与心理应激的相关性.方法:对调查对象进行问卷测量.包括基本情况调查表、症状自评量表(SEL-90)和团体用心理社会应激凋查表(PSSC).结果:根据SCL-90的测评结果,外迁移民的心理问题阳性症状检出率高于当地居民(x2=17.143,P<0.00),外迁移民的lO个因子得分和总分均高于当地居民,差别有统计学意义(P<0.05);PSSG各维度得分和应激总分在两组人群间的差别均有统计学意义(P<0.01);外迁移民中SCL-90的lO个因子得分及总分与生活事件、消极情绪体验、消极应对方式及应激总分呈明显正相关(P<0.01 o结论:外迁移民的总体心理健康状况较差,且心理健康水平与经历的心理社会应激密切相关.

重庆市城区体检人群幽门螺杆菌感染的血清流行病学调查

目的:通过分析重庆市城区体检人群幽门螺杆菌(Helicobactor pylofi,Hp)感染的血清学资料,以探索重庆市城市人群幽门螺杆菌感染的流行情况.方法:使用免疫胶体金法对2008年1月至2008年6月来我院进行健康体检的各单位体检人群(共3254人)进行幽门螺杆菌感染的血清学筛查.结果:重庆市城区体检人群幽门螺杆菌总感染率分别为37.12%.其中男性为39.26%;女性为32.97%,有统计学差异(P<0.05);各年龄段的幽门螺杆菌感染率随年龄的增加而增加(除60岁以上年龄段外),50～59岁年龄组为Hp感染率高峰组,部分年龄段组之间有统计学差异(P<0.05).结论:重庆市城区的幽门螺杆菌感染率与性别、年龄段有关,与季节的变化无关.

正颌外科患者健康相关生命质量评价的初步研究

目的:通过问卷调查评估正颌患者治疗过程中健康相关生命质量指数的变化,初步探讨正颌外科治疗对正颌患者健康相关生命质量状况的影响.为今后正颌治疗提供一定的参考依据.方法:于正颌外科治疗安放矫治器前(T1)-正颌外科手术前1周(T2)-正颌外科术后正畸完成后1周(T3),采用改良的正颌患者生命质量问卷(Health-related quality of life,HRQOL)对58例正颌患者进行问卷调查,PEMS3.1软件包对正颌治疗三阶段四因子分及HRQOL总分进行统计分析.结果:HRQOL总分及颜面、口颌功能、社交因子分T3阶段明显低于T1、T2(P<0.01),正颌治疗后患者HRQOL改善明显,但自我关注因子分改变未见统计学差异;T1-T2,各因子未见统计学差异.结论:正颌外科治疗能明显改善正颌患者的健康相关生命质量水平,但患者自我关注水平不随身体、心理和社交生活质量的改善而降低,在临床治疗中要合理引导患者的审美观和心理状态,以达到更好的治疗结果.

大黄和泽泻提取物对二甘醇致小鼠肝脏损伤的保护作用

目的:考察大黄和泽泻提取物对二甘醇(Diethylene glycol,DEG)致肝脏损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法:采用DEG(18.7 ml/kg,ig)造成小鼠肝脏损伤模型.大黄醇提物0.8及0.4 g/ks、大黄水提物0.8及0.4 g/ks和泽泻醇提物3.6及1.8g/kg连续灌胃给药4 d,第5 d DEG染毒造模后1 h,再分别灌胃给药1次,染毒24 h后观察小鼠中毒表现;测定血清中丙氨酸基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransfease,AST)、总胆红素(Total billirubin,TBIL)水平;取肝脏制备匀浆.测定超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶活性(Glutathion peroxidase,GSH-PX)、丙二醛含量(Malondialdehyde,MDA)变化.结果:小鼠二甘醇染毒后,出现明显中毒表现,肝脏体重比增加,血清中ALT、AST和TBIL水平显著升高,肝组织SOD和GSH-PX活性降低、MDA含量增加;大黄醇提物、大黄水提物和泽泻醇提取物给药组小鼠中毒表现明显减轻,肝脏体重比减少,血清中ALT、AST和TBIL水平明显降低,肝组织SOD和GSH-PX活性升高、MDA含量降低.结论:大黄和泽泻提取物对DEG所致的小鼠急性肝脏损伤具有明显的保护作用,该作用与其改善肝脏抗氧化酶活性及抑制脂质过氧化反应有关.

复元胶囊对肝纤维化大鼠肝脏中的TIMP-1和TGF-β1表达的影响

目的:研究复元胶囊对猪血清所致大鼠肝纤维化的保护作用及其机制.方法:将大鼠随机分为正常组,模型组,复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组(复方鳖甲软肝片水溶液组)6组,每组8只.除正常组外,其余各组用猪血清,0.5 ml/只,腹腔注射,每周两次(星期一,星期四)共10周,复制大鼠免疫性肝纤维化模型,以此同时给予复元胶囊低、中、高剂量组,阳性对照组相应药物干预.造模、给药结束后观察各组动物的肝组织病理学变化,并检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,检测血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(IV-C)及层粘连蛋白(LN)的含量.免疫组化显示基质金属蛋白酶组织抑制因子1(Tissue inhibitor of metalloproteinases-1,TIMP-1)及转化生长因子β1(Transforming growth factor β-1,TGF-β1).结果:复元胶囊组血清中ALT、AST、HA、LN、IV-C、PCⅢ比模型组低,特别是复元胶囊高剂量组,差异有统计学意义(P

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