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不同时相移植人骨髓间充质干细胞对人脐血CD34+细胞植入NOD/SCID小鼠的影响
为了观察不同时相移植人骨髓间充质干细胞(MSC)对脐血(UCB)CD34+细胞移植的NOD/SCID小鼠造血重建的影响,明确佳的移植时机,将体外培养扩增的人骨髓MSC分别于UCB CD34+细胞移植同时、移植前48小时及移植后48小时输入经60 Co γ射线照射的NOD/SCID小鼠,观察共移植后42天内小鼠外周血白细胞和血小板变化,并于移植后42天处死小鼠,用FACS检测外周血、骨髓和脾脏人源细胞含量.结果表明:(1)MSC和UCBCD34+细胞同时输注可明显降低外周血白细胞和血小板下降幅度,缩短白细胞和血小板恢复时间;二者不同时输注均不降低白细胞和血小板下降幅度,且输注UCB CD34+细胞后48小时输注MSC时外周血血小板恢复时间明显晚于同时输注者.(2)与单纯UCB CD34+细胞移植相比较,不同时相输注MSC均可促进UCB CD34+细胞的植入,三个共输注组间促进骨髓各系造血植入效应无明显差异.结论:人骨髓MSC与UCB CD34+细胞共移植时,以同时移植效果佳,此结果为MSC的临床应用提供了实验依据.
关键词： 间充质干细胞 脐血CD34+细胞 共移植 NOD/SCID小鼠 -
行外周血干细胞移植患者全身照射的护理
外周血干细胞移植(PBSCT)是当前白血病根治的有效方法.全身照射(TBI)已成为外周血干细胞移植(HSCT)预处理的重要手段.我科自1999年1月～2001年7月共移植患者22例,全部选择了含全身照射(TBI)的预处理方案.我们成功地进行了护理.现总结如下.1临床资料与照射方法1.1临床资料共22例患者,男15例,女7例.年龄18～62岁.其中:急性淋巴细胞白血病5例,急性非淋巴细胞白血病(ANLL)6例,霍奇金氏淋巴瘤(HD)6例,非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)4例,再生障碍性贫血(AA)1例.
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不同方法共移植的嗅鞘细胞和雪旺氏细胞在损伤脊髓内的迁移和对轴突再生的影响
目的:观察经不同方法共移植的嗅鞘细胞和雪旺氏细胞在脊髓内的迁移特点和对轴突再生的影响.方法:将8只75±1d雌性SD大鼠随机分为2组,每组4只,利用NYU打击器制作TIO脊髓损伤模型,打击高度25mm,打击杆重量10g.造模后2周,一组采用联合移植,雪旺氏细胞移植于损伤鄢位中心,嗅鞘细胞移植于距离损伤中心0.5mm处的头侧和尾侧的脊髓中线上;另一组采用混合移植,将嗅鞘细胞和雪旺氏细胞混合后移植于距离损伤中心0.5mm处的头侧和尾侧的脊髓中线上.每个部位注射4个点,深度为1.75mm,1.25mm、1mm、0.5mm.注射速度为0.1μl/min.联合移植组嗅鞘细胞晕每点0.5μl含5×10~4个,雩旺氏细胞晕为每点1μl含10~5个雪旺氏细胞;混合移植组为每点1μl含嗅鞘细胞和雪旺氏细胞各5×10~4个.细胞移植后1周和8周时各组分别取2只大鼠.以损伤部位为中心取包含细胞移植部位的脊髓,荧光和共聚焦显微镜下观察细胞迁移情况,利用神经丝(neurofilment,NF)和乍长相关蛋白-43(growth associated protein-43,GAP-43)免疫荧光染色观察移植细胞对轴突再生的影响.结果:两组中均可见嗅鞘细胞迁移,主要在灰质和白质内沿脊髓纵轴向损伤部位迁移,还分别有一小部分沿中央管和蛛网膜下腔迁移;但雪旺氏细胞仅存与嗅鞘细胞混合移植于距离损伤中心0.5mm处的头侧和尾侧脊髓时才可见有限距离的迁移.联合移植时,NF阳性(NF+)和GAP-43阳性(GAP-43+)纤维伴随嗅鞘细胞迁移而沿脊髓纵轴延伸,雪旺氏细胞移植处可处NF+纤维从各个方向长入损伤部位(移植部位)并互相缠绕;混合移植时,大量NF+纤维伴随移植细胞迁移而延伸,损伤部佗虽然NF+纤维较少,但没有互相缠绕现象.结论:雪旺氏细胞在损伤脊髓内迁移能力差;嗅鞘细胞不仅具有良好的迁移能力,而且可促进雪旺氏细胞迁移.无论是联合移植还是混合移植,移植细胞均能促进轴突再生,但联合移植时雪旺氏细胞移植处再生纤维互相缠绕、无法延伸.
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骨髓间充质干细胞在造血干细胞移植中的应用研究
造血干细胞移植(HSCT)后,干细胞的成活、分化、增殖及造血功能的恢复,影响治疗的效果,移植过程中难免会遇到诸多问题.如造血微环境的破坏,干细胞归巢问题及移植后的移植物抗宿主反应(GVHR)均影响移植成败.近年研究发现骨髓间充质干细胞(MSC)为造血微环境的重要组成成分,可分泌多种细胞因子,能够促进造血,加速干细胞归巢,还能参与免疫反应,降低T淋巴细胞反应.而MSC的这些特性恰好可以减少HSC中的以上问题.因此,国内外已将HSC与MSC共移植治疗恶性肿瘤应用于临床,并取得了良好的临床效果.
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自体或异体间充质干细胞移植对造血重建的影响
目的 初步探讨自体或异体间充质干细胞(MSC)移植对造血重建的影响.方法 采用含血清培养体系培养扩增自体或供者骨髓以及来自胚胎的MSC,例1为系统性红斑狼疮(SLE);例2为非霍奇金淋巴瘤(NHL),患者在造血干细胞移植(HSCT)前先输注自体MSC,然后进行自体HSCT;例3为阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH),在HSCT前先输注供者MSC,然后进行同基因异体HSCT;例4为慢性粒细胞白血病(CML),行异基因HSCT;例5为淋巴瘤行自体HSCT,在移植后造血恢复缓慢(分别为+129天,+78天)移植来自胚胎的MSC.结果 例1、例2和例3患者MSC和HSCT联合无明显不良反应.中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的时间分别为移植后1、10、10和1、8、33 d.粒细胞缺乏时间分别为0、7、12 d;输注来自胚胎MSC的患者(例4、例5),1个月内造血仍无恢复,MSC移植失败.结论 MSC移植时机掌握很重要,与HSCT同时进行,可以促进造血重建,而在移植后一些造血重建缓慢的患者再进行MSC移植的疗效还有待进一步研究.
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1例腹腔多器官联合移植病人的手术配合
胃肠道息肉是指突出于结肠、直肠黏膜表面的隆起性病变.分为非肿瘤性息肉和肿瘤性息肉.2004年我院收治了1例"全胃肠道腺瘤性息肉综合征"的病人,结肠与十二指肠已恶变.2004年12月14日医护人员为病人施行了首例腹腔多器官的联合移植,共移植了肝脏、胰腺、脾脏、胃、十二指肠、全小肠和结肠7个脏器,手术历时14 h,取得了成功.现将手术配合及护理总结如下.
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嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠海马生长相关蛋白-43表达的影响
目的 探讨嗅成鞘细胞(OECs)与神经干细胞(NSCs)共移植对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马生长相关蛋白(GAP)-43表达的影响.方法 雄性SD大鼠双侧穹隆-海马伞切断,建立AD大鼠模型.实验动物分为4组:NSCs移植组、NSCs与OECs共移植组、AD模型组、正常对照组,每组30只.从SD胎鼠(孕16～18 d)取材,在体外分别培养和共培养OECs与NSCs,并将共培养的OECs与NSCs移植于AD大鼠大脑侧脑室;观察各组大鼠行为学、宿主脑海马GAP-43和NOS阳性神经元表达的变化.结果 ①NSCs与OECs共移植组潜伏期明显缩短、通过平台次数明显增加,与NSCs移植组、AD模型组差异有统计学意义(P<0.05).②反转录聚合酶链反应(RT-PCR)与Western Blot分析,NSCs与OECs共移植组宿主脑海马GAP-43 mRNA和GAP-43蛋白的表达量高于NSCs移植组、AD模型组(P<0.05).③NSCs与OECs共移植组NOS阳性细胞(22.2±1.7)较NSCs移植组(13.1±1.9)、AD模型组(7.1±0.9)明显增多(P<0.05).结论 嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植能促进宿主脑海马GAP-43的表达,其可能在AD大鼠中枢神经系统损伤时具有促进神经再生和修复的作用.
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嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植对阿尔茨海默病大鼠海马生长相关蛋白-43表达的影响
目的 探讨嗅成鞘细胞(OECs)与神经干细胞(NSCs)共移植对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马生长相关蛋白(GAP)-43表达的影响.方法 雄性SD大鼠双侧穹隆-海马伞切断,建立AD大鼠模型.实验动物分为4组:NSCs移植组、NSCs与OECs共移植组、AD模型组、正常对照组,每组30只.从SD胎鼠(孕16～18 d)取材,在体外分别培养和共培养OECs与NSCs,并将共培养的OECs与NSCs移植于AD大鼠大脑侧脑室;观察各组大鼠行为学、宿主脑海马GAP-43和NOS阳性神经元表达的变化.结果 ①NSCs与OECs共移植组潜伏期明显缩短、通过平台次数明显增加,与NSCs移植组、AD模型组差异有统计学意义(P<0.05).②反转录聚合酶链反应(RT-PCR)与Western Blot分析,NSCs与OECs共移植组宿主脑海马GAP-43 mRNA和GAP-43蛋白的表达量高于NSCs移植组、AD模型组(P<0.05).③NSCs与OECs共移植组NOS阳性细胞(22.2±1.7)较NSCs移植组(13.1±1.9)、AD模型组(7.1±0.9)明显增多(P<0.05).结论 嗅成鞘细胞与神经干细胞共移植能促进宿主脑海马GAP-43的表达,其可能在AD大鼠中枢神经系统损伤时具有促进神经再生和修复的作用.
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羊皮作为烧伤创面覆盖物的临床应用
大面积烧伤的救治必须具备有创面覆盖物,临床应用效果好的是异体皮,但是异体皮来源困难,储存条件要求较高,价格昂贵,不利于基层医院的推广应用.我院1994～2000年探讨羊皮作为烧伤创面覆盖物,共移植31例收到满意效果,现报告如下.
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残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体内软骨的形成
背景:先天性小耳畸形残耳软骨细胞从细胞数量和质量上难以作为种子细胞构建出正常人耳郭大小的同质耳软骨支架.目的:探讨残耳软骨细胞能否在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源的干细胞向软骨分化并形成组织工程软骨,从而为解决组织工程化人耳郭软骨支架制备做基础准备工作.方法:①实验分为4组:第2代残耳软骨细胞与第3代脂肪来源的干细胞以3:7比例混合作为共移植组,单纯残耳软骨细胞作为阳性对照组(残耳软骨细胞组),单纯脂肪来源的干细胞作为阴性对照组(脂肪干细胞组),以上3组接种细胞终浓度为5.0×1010 L-1,低浓度残耳软骨细胞对照组细胞终浓度为1.5×1010 L-1;②按照实验分组将0.2 mL细胞-Pluronic-F127复合物注射到裸鼠背部皮下,体内培养8周后对新生组织进行大体观察、湿质量测量、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色检测.结果与结论:①共移植组平均湿质量达到残耳软骨细胞组的80%以上;低浓度残耳软骨细胞对照组平均湿质量低于残耳软骨细胞组的30%;②共移植组和残耳软骨细胞组的平均湿质量和糖胺多糖平均含量均显著高脂肪干细胞组和低浓度残耳软骨细胞对照组(P<0.05);③组织学染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组标本均有成熟的软骨陷窝形成,低浓度残耳软骨细胞对照组软骨陷窝松散排列不均,胞外基质着色淡;脂肪干细胞组为纤维样组织,未见软骨陷窝形成;④Ⅱ型胶原免疫组化染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组可见成熟软骨陷窝周围有不同程度的棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达;脂肪干细胞组未见Ⅱ型胶原表达;⑤结果提示,残耳软骨细胞能够在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪干细胞向软骨分化并生成组织工程软骨.
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神经干细胞与雪旺细胞共移植后对阿尔茨海默病大鼠行为学及脑组织形态学的影响
目的 探讨神经干细胞与雪旺细胞共移植后对阿尔茨海默病(AD)大鼠行为学及脑组织形态学的影响.方法 建立AD大鼠模型,分别将神经干细胞、神经干细胞与雪旺细胞以及等量的生理盐水注入AD模型大鼠脑内.1个月后,与正常组一起进行morris水迷宫实验观察实验大鼠学习记忆能力的改变.35d后,处死实验鼠,通过HE染色观察各组实验鼠脑组织形态学改变.结果 细胞移植后AD大鼠的学习记忆能力明显改善,与生理盐水对照组相比差异显著(P＜0.01),具有统计学意义.共移植组表现为明显,与正常组相比无明显差异(P＞0.05).与生理盐水对照组相比神经干细胞移植后海马与额叶受损细胞的恢复明显减轻,以共移植组的改变尤为明显,其形态学表现接近于正常组.结论 雪旺细胞与神经干细胞共移植后AD大鼠的学习记忆能力增强,脑组织病理改变减轻,学习记忆能力明显改善,对AD大鼠的治疗作用优于神经干细胞单独移植组.
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异基因间充质干细胞和造血干细胞联合移植治疗难治白血病的初步临床研究
目的初步探讨异基因间充质干细胞(MSC)联合造血干细胞移植(HSCT)治疗难治白血病的安全性、疗效,以及对移植物抗宿主病(GVHD)和造血重建的影响.方法采用无血清体系培养扩增供者骨髓MSC,联合移植3例难治白血病,其中1例联合HLA匹配、2例联合HLA半匹配HSCT.植活证据采用短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)、染色体核型或荧光原位杂交技术(FISH)检测.结果联合移植无明显不良反应.中性粒细胞≥0.5×109/L和血小板≥20×109/L的时间分别为移植后13、16、15天和25、30、39天.分别于移植后16、23、28天骨髓检查显示完全供者型植入.发生Ⅰ、Ⅲ度急性GVHD各1例,经甲基泼尼松龙治疗后有效控制.3例患者移植后均获完全缓解(CR),2例持续CR 248和156天,1例移植后94天复发,经供者淋巴细胞输注(DLI)治疗后再获CR.结论 MSC联合HLA匹配和半匹配HSCT治疗难治白血病安全、有效,MSC对异基因造血干细胞移植(Allo-HSCH)造血重建和GVHD的影响有待进一步研究.
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自体骨髓间充质干细胞与造血干细胞共移植治疗恶性血液病患者的护理
目的 探讨自体骨髓间充质干细胞(MSCs)与造血干细胞共移植治疗恶性血液病患者的护理.方法 从无骨髓浸润的恶性血液病患者本人骨髓中分离、培养间充质干细胞.经放化疗等预处理后,与造血干细胞共移植治疗恶性血液病患者5例,并对其进行全程共移植护理.结果 在移植过程中5例患者均未出现感染,无移植并发症.自体骨髓间充质干细胞和造血干细胞输注过程中未见明显不良反应.移植后造血功能恢复,中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间为9.4(8～11)d,血小板≥20×109/L的中位时间为12.2(10～14)d.结论 自体骨髓闻充质干细胞与适血干细胞共移植治疗恶性血液病安全性好,不良反应小;做好移植护理是减少感染和并发症的重要措施.
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他克莫司在活体小肠移植患者体内的药代动力学
1999年5月20日我院胃肠外科为一短肠综合征患者实施了亲属活体小肠移植术，术后免疫抑制治疗选用他克莫司（FK506）和霉酚酸酯（MMF）。为防止发生排斥反应和感染，我们研究了FK506在亲属活体小肠移植患者体内的药代动力学特征，并以此对患者实施了1年多的个体化用药，迄今患者未出现严重的排斥反应和FK506中毒反应。现将我们的结果报告如下。 一、资料与方法 1. 患者：男性，18岁，体重48!kg，肝、肾功能正常。因肠梗阻切除大段坏死小肠，仅余近端空肠40!cm。1999年5月20日在我院实施亲属活体小肠移植术，供者为其亲父，共移植小肠1.5!m。 2. 主要用药情况：FK506口服，5!mg/12!h，9时30分和21时30分各1次，以避免饮食影响；MMF口服，1!g/12!h；并给予皮质激素、氟康唑、大蒜素、头孢他啶及维生素C等。
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第三方动员的外周血干细胞及其他细胞在脐血移植术中的应用
脐血移植(CBT)具有移植后血象恢复慢,感染发生率高,移植相关的死亡率高等缺点.促进脐血植入的方法有多种,其中脐血联合第三方动员的外周血干细胞共移植时,能够明显缩短移植后的粒缺期,使移植后感染发生率减低,同时也降低急性移植物抗宿主病的发生率,而且终脐血能够达到完全嵌合.脐血移植的另一个缺点是不能获得供者的其他类型细胞,当脐血联合第三方动员的外周血干细胞共移植时,第三方的供者能够提供其他类型细胞,用于受者移植后感染,急性移植物抗宿主病等的治疗.
关键词： 脐血移植 第三方动员的外周血干细胞 共移植 -
神经干细胞与血管内皮祖细胞共移植治疗缺血性脑卒中的研究进展
目的 探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)共移植治疗缺血性脑卒中应用的可能.方法 检索并分析医学和生物医学数据库中与脑卒中干细胞治疗相关的NSCs与EPCs基础研究文献,并进行综述. 结果 NSCs与EPCs能向脑卒中损害区域趋化,局部微环境诱导两者启动神经新生与血管新生修复损伤,并且血管新生与神经新生能相互促进.结论 NSCs和EPCs共移植为有效的解决缺血性卒中后神经元缺失与血管闭塞这两个病理损害提供了一种新的途径.
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子宫肌瘤合并宫内宫外同时妊娠1例
1 病例报告患者,31岁,停经65天,因阴道流血伴下腹痛1天于2012年5月21日就诊我院.患者平素月规律,周期5/28天,末次月经:2012年3月16日.因原发不孕症于2012年4月3日行体外受精-胚胎移植(invitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET),共移植2个胚胎,停经40天自测尿妊娠试验阳性,移植后予以黄体酮60 mg每天1次肌内注射保胎治疗.当地医院于停经50天行超声检查,提示:官内早孕合并子宫肌瘤.5月20日晨起无明显诱因出现阴道少量流血,同时伴下腹痛,就诊当地医院,超声检查提示:妊娠合并子宫肌瘤,子宫肌瘤变性?患者急诊来我院.
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睾丸支持细胞介导局部免疫耐受的进展
机体的某些特殊部位在植入异体组织后不会发生排斥反应,且这些移植组织可长期存活,如眼、睾丸、脑等特殊区域,这些区域称为免疫豁免区[1].免疫豁免区的组织若移植到其他部位,能抵抗排斥反应而存活,诱导局部产生免疫耐受.睾丸是天然的免疫豁免区,研究证实睾丸支持细胞(Sertolicells,SC)是维持其免疫豁免功能的主要细胞[1],共同移植SC可延长同、异体移植物的存活时间,因而,SC的免疫豁免特性倍受关注.现就SC共移植在同、异体移植方面的进展综述如下.
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Schwann细胞促进共培养和共移植的胆碱能神经元的存活和生长
移植神经细胞的低存活率是目前制约脑内移植临床应用的主要因素.本研究采用胚胎大鼠隔核神经元和新生大鼠Schwann细胞的联合培养和联合移植技术,分析了Schwann细胞促进胆碱能神经元存活和生长的可能性.结果显示,胆碱能神经元的存活及其突起生长与共培养或共移植Schwann细胞的存在与多少明显相关.分别与密度为6×103/cm2、1.8×104/cm2、5.4×104/cm2(密度比为1: 3:9)的Schwann细胞联合培养,存活的乙酰胆碱酯酶阳性细胞数之比为1:2.3:3.9;阳性细胞的突起总长度分别为281、428和640 μm.在与Schwann细胞混合移植的胚胎隔核细胞中存活的乙酰胆碱酯酶阳性细胞是单独移植的2.2倍,共移植的阳性细胞也有较密集的突起生长.结果提示,共培养和共移植Schwann细胞能显著提高胆碱能神经元的存活能力,促进其生长.
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表皮移植治疗白癜风影响因素的探讨
自80年代国外采用负压吸引起疱法对白癜风进行自体表皮移植取得成功后[1,2],90年代随着国产表皮分离机的诞生,国内一些省市也逐渐开展了此项手术,并取得了一定的疗效[3,4].我们采用此法观察了35例白癜风,其中局限型29例,节段型5例,泛发型1例,共移植56个白斑区,植入直径0.5～0.8cm皮片1 120块,皮片存活率95.09%,有效色素细胞恢复率90.00%,其中治愈24例,显效8例,有效2例,无效1例,总有效率为97.14%.
