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淫羊藿苷含药血清对兔软骨细胞增殖及糖胺聚糖分泌的影响
目的:观察不同浓度淫羊藿苷含药血清对兔膝软骨细胞增殖率及糖胺聚糖(GAG)分泌的影响.方法:将3周龄健康新西兰大白兔后肢膝关节分离培养软骨细胞进行鉴定,用制备低、中、高浓度淫羊藿苷(ICA-L、ICA-M、ICA-H)及低剂量仙灵骨葆胶囊(XLGB)含药血清干预分离培养软骨细胞,形态学观察软骨细胞及MTT检测细胞增殖率,邻联甲苯胺(DMB)染色法检测细胞内GAG含量.结果:与对照组比较,空白血清组及含药血清组均使兔软骨细胞大量增殖(P<0.01);XLGB组和ICA-L组细胞增殖率较空白血清组显著增高(P<0.01),ICA-L组明显.与对照组比较,空白血清组及XLGB组、ICA-L组、ICA-M组均使兔软骨细胞GAG分泌增多(P<0.01),其中,ICA-L组分泌GAG多.结论:低浓度淫羊藿苷含药血清对兔软骨细胞增殖率及其分泌GAG功能强大,单纯淫羊藿苷原液对软骨细胞生长有抑制作用,经过生物转化后的含药血清药效与浓度非正比关系.
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CD3AK细胞在临床的应用与护理
CD3AK细胞是由IL-2和CD3单抗激活的具有高度抗肿瘤活性的淋巴细胞,体内外试验抗肿瘤活性均显著高于LAK细胞[1].CD3AK细胞可通过其表面各种识别分子与肿瘤表面配体分子相互识别结合,并释放多种杀伤介质,直接杀伤肿瘤细胞,对正常组织无害,与其他治疗肿瘤的生物疗法相比,具有肿瘤杀伤力强,效应细胞增殖率高,减少外源性IL 2用量.从而避免了严重的副作用.我院1996年~1999年底共输注CD3AK细胞589人次,有效地控制了肿瘤的转移与复发.现将回输CD3AK的护理报告如下.
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老年乳腺癌诊断治疗基本原则和新进展
乳腺癌是威胁女性健康的常见恶性肿瘤,其发病率随年龄增长而增加.近1/3的乳腺癌发生于年龄超过65岁的老年女性,在多数发达国家这个比例可以超过40%[1].多数老年乳腺癌恶性程度较低,表现为肿瘤细胞增殖率低、组织学分级低、表皮生长因子受体2(HER2)表达低、雌激素受体(estrogen receptor, ER)和(或)孕激素受体(progestogen receptor, PR)受体多为阳性和预后较好等特征.
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积雪草甙对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的探讨积雪草甙外用脱色素的作用机制.方法体外观察积雪草甙对蘑菇酪氨酸酶活性的作用并进行酶促反应动力学分析.进一步以系列浓度的积雪草甙作用于体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率.结果积雪草甙能剂量依赖性抑制蘑菇酪氨酸酶活性,酶促动力学分析提示积雪草甙为蘑菇酪氨酸酶混合型抑制剂.进一步研究发现,积雪草甙能抑制体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑素合成,但对细胞增殖无明显影响.与氢醌相比,积雪草甙抑制酪氨酸酶活性低于相同浓度的氢醌.结论积雪草甙可直接作用于黑素细胞,抑制黑素合成,是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂.
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重离子与X射线辐照细胞的敏感性比较
离体的肿瘤细胞和正常细胞的固有辐射敏感性的研究表明,不论同种组织间还是不同种类组织间,它们的敏感性均存在明显差别[1].在肿瘤的放射治疗中,正常组织的敏感性限定着肿瘤的辐射量,而肿瘤组织细胞的敏感性又限定着该剂量杀灭肿瘤的程度,所以肿瘤及其周围正常组织的固有细胞辐射敏感性的区别很可能是影响肿瘤疗效的重要因素之一.影响辐射敏感性的因素有许多,其中,包括DNA损伤及其修复,细胞增殖率及细胞周期不同时相的细胞比例,细胞周期的检查点,DNA含量,等等.为此,我们研究了重离子与X射线辐照细胞的敏感性比较.
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大肠腺瘤及癌变组织增殖基因和细胞凋亡调控基因的表达
据<中华病理学杂志>2000年12月29卷第6期报道浙江医科大学附属第一医院王慧萍等,为了解大肠腺瘤癌变转化过程中细胞增殖与凋亡相关基因表达在癌变过程中的作用,并寻求判断腺瘤癌变的分子生物学指标,采用免疫组织化学SP法检测61例大肠腺瘤癌变标本中p53、bcl-2、Fas、bax在腺瘤癌变区及腺瘤轻、重度异型增生区的表达;Ki-67和TUNEL法计量细胞增殖率及凋亡率.
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急性髓系白血病患者外周血Th22细胞水平的变化
研究已经证实,急性髓系白血病(AML)患者免疫功能低下,体内树突细胞(DC)、浆细胞样DC(pDC)、Th17细胞等数量减少、功能减低,而调节性T细胞(Treg)数量增加、功能增强[1-2].Th22型细胞是一种新发现的独立的辅助性T细胞亚群,是体内分泌IL-22的主要细胞,具有促进机体固有免疫和适应性免疫应答,使肿瘤细胞的周期停滞在G2/M期,降低细胞增殖率的作用[3-4].在DC、pDC刺激的条件下,IL-6和TNF-α可以促进人CD4+初始T细胞向Th22型细胞的分化.转化生长因子β( TGF-β)显著抑制Th22细胞的分化和IL-22产生[5-6].对于AML患者体内Th22细胞变化情况目前尚无文献报道,我们通过检测Th22细胞比例、IL-22和IL-22相关转录因子的表达水平在AML初诊组、化疗缓解组及正常对照组外周血中的变化,为进一步研究Th22细胞在肿瘤免疫机制中的作用提供资料.
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西玛津对MN9D细胞增殖影响
目的 探讨西玛津(Simazine)对多巴胺能神经前体细胞系(MN9D)细胞增殖的影响.方法 选择MN9D细胞,分别以50、300、600μmol/L西玛津染毒,同时设溶剂对照及空白对照,采用噻唑蓝(MTT)法检测西玛津对MN9D细胞生存率影响;利用倒置显微镜观察染毒后细胞形态改变.结果 西玛津能破坏体外培养MN9D细胞形态、抑制其生长和分化;高剂量西玛津染毒12、24、36、48、60、72 h时,MN9D细胞存活率分别为(85.62±1.07)%、(71.92±0.43)%、(67.42±0.45)%、(60.04±0.11)%、(48.71±0.76)%、(40.63±0.86)%,与溶剂对照组比较,高剂量西玛津染毒组在染毒各时段细胞存活率均降低(P<0.01);各剂量组细胞存活率随染毒时间增大而下降,并具有剂量-反应关系(P<0.01).结论 除草剂西玛津对MN9D细胞有增殖毒性.
关键词: 西玛津 除草剂 多巴胺能神经前体细胞系(MN9D) 细胞增殖率 -
当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响随机平行对照研究
[目的]观察当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响.[方法]使用随机平行对照方法,将60只清洁级C57BL/6小鼠编号按随机数字表法随机分为6组,空白组、模型组、促红细胞生成素组(EPO组)、当归多糖组(当归组)、黄芪多糖组(黄芪组)、当归加黄芪多糖组(当归+黄芪组),10只/组.实验第1d,各组小鼠称体重,模型组、EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组,腹腔注射环磷酰胺380mg/kg·d-1,连续3d,空白组注射等量生理盐水.实验第4d(造模第4d),颈椎脱臼处死小鼠,无菌取股骨和胫骨,置入培养基中,调整细胞浓度为1×105/mL,然后将混合液加入96孔板(200uL)/孔和24孔板(1L/孔)中,每组设3个复孔,周围孔分别加入相应量的无菌超纯水,将细胞板置于5%CO2,37℃孵育箱中培养.实验第4d(造模第4d),各组分别干预.观测外周血象、细胞增殖率-(MTT法),EPO、IL-3(免疫蛋白法),细胞内转录因子JAK2、STAT5(RT-PCR法).[结果]细胞培养24h、48h和72h,细胞增殖率EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组均高于空白组(P<0.05,P<0.01),组间无显著差异(P>0.05);模型组低于空白组(P<0.05,P<0.01).细胞培养7d,IL-3、EPO表达模型组低于空白组(P<0.01),各干预组均高于模型组(P<0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P<0.01),EPO组高于当归组(P<0.01),当归组高于黄芪组(P<0.01).细胞培养7d,单核细胞STAT5、JAK2mRNA模型组低于空白组(P<0.01),各干预组高于模型组(P<0.05或P<0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P<0.01),EPO组与当归组无显著差异(P<0.05),当归组高于黄芪组(P<0.01).[结论]当归/黄芪多糖、促红细胞生成素干预腹腔注射环磷酰胺小鼠,均可升高骨髓细胞增殖率、IL-3、EPO表达及单核细胞STAT5、JAK2mRNA,当归多糖与黄芪多糖联合应用更明显.
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新型输尿管支架材料的生物相容性
背景:有研究表明,聚乙烯高分子合成的输尿管支架在体内实验中具有良好的生物相容性,但实验发现其毒副作用,诱导机体产生的炎症、热原、过敏反应均较明显,故对于新研发的L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架在生物相容性、毒副作用、机体炎症反应等方面的探索是实验研究的重点内容。目的:通过对临床上使用的聚乙烯高分子合成输尿管支架和L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架在细胞毒性试验、动物体植入后引起的炎症反应以及过敏反应、热原反应、致死率等生物相容性方面的比较,为临床上引入新型输尿管支架材料提供一定的参考依据。方法:实验分为3组,空白对照组不作任何处理,使用正常培养基培养;新型材料组细胞采用L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成材料浸提液进行培养;聚乙烯组细胞采用聚乙烯浸提液进行培养。结果与结论:活细胞数目检测结果显示,在尿道上皮细胞培养皿中加入两种输尿管支架浸提液后,与空白对照组相比,毒性反应均明显增强(P <0.05),但两组毒性差异无显著性意义。苏木精-伊红染色结果显示,将两种材料植入大鼠体内2,6周后,肌肉组织均有明显的炎性浸润、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞增加,但植入新型材料组的炎性浸润和组织损伤明显少于植入聚乙烯组(P<0.05)。酶联免疫吸附试验结果显示,植入两种材料6周后,大鼠血清中炎性因子白细胞介素10,23的含量均明显增高(P<0.05),但植入新型材料组的炎性因子表达量明显低于植入聚乙烯组(P<0.05)。支架植入6周后,新型材料组的大鼠在实验过程中出现过敏反应和热原反应的数量均少于聚乙烯组。结果证实,L-乳酸、乙交酯、硫酸钡合成的新型输尿管支架材料能减少组织对于材料的炎症反应、过敏反应、热原反应,具有比聚乙烯合成材料更好的生物相容性。
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体外扩张增大皮下组织厚度、促进细胞增殖和血管重建的小鼠模型
背景与目的 脂肪移植是一种有效的软组织重建方式;然而,关于移植受床处理的科学事实并未被完全理解.脂肪移植前利用吸力进行的体外扩张已应用于临床,以改善移植物成活的可行性和稳定性.笔者通过小鼠模型来探讨体外扩张的潜在机制.方法 笔者制作了一个连于25mmHg真空负压的软硅胶碗状外扩张装置,将其置于小鼠背部,并将其反应的效果与封闭包扎治疗的效果进行对比.利用MRI成像监测治疗区域.处理后7d采用血管灌注的方法研究微血管重塑情况.处理后28d分析组织厚度、脂肪细胞数量、细胞分化和血管密度的改变情况.结果 宏观分析(大体观察)显示,外扩张部位处理后21d局部组织肿胀.28d,外扩张使皮下脂肪层厚度倍增,MRI下也可观察到同样结果.扩张部位皮下层次的细胞增殖率倍增,脂肪细胞数增加2.2倍;血流灌注研究显示血管网重塑,表现为血管的重定位和管径增大,同时血管密度增大1.9倍.结论 体外扩张的小鼠模型显示,扩张可诱导皮下组织高度增殖和血管化.利用外扩张装置进行受区预处理可能成为提高细胞和组织移植效果的重要步骤.
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珍珠提取物对黑色素细胞酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响
研究珍珠提取物对小鼠黑素瘤细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响,为珍珠提取物在美白领域的应用提供理论依据.实验对珍珠提取物进行了成分分析,并以小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16F10)为细胞模型,采用CCK-8法测定珍珠提取物对黑色素细胞活力的影响,以L-DOPA为底物测定细胞内酪氨酸酶活性,采用比色法测定细胞中的黑色素含量.实验结果:在一定添加量下,珍珠提取物对B16F10细胞没有毒性,且能抑制酪氨酸酶活性,减少黑色素的生成.表明珍珠提取物能有效抑制黑色素合成,达到美白的效果.
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细菌感染对动脉粥样硬化形成的影响
目的:粪链球菌是人体正常的肠道菌群,而伤寒杆菌是重要的致病杆菌,两者感染机体后均可引起抗原抗体复合物形成.免疫因素对动脉粥样硬化有何影响观点不一.有的认为可损伤动脉,有的认为可减轻动脉粥样硬化病变形成.为此我们用粪链球菌和伤寒杆菌感染大鼠,观察它们对动脉粥样硬化形成的影响.方法:取SD大鼠30只,随机分为3组:①粪链球菌口服组;②伤寒杆菌免疫组;③对照组.测定全血和血浆粘度,血脂,HDL,血小板聚集活性,细胞介导免疫力和动脉粥样硬化斑块面积.结果:①粪链球菌组和伤寒杆菌组TC,TG,全血和血浆粘度均明显降低(P>0.01);②伤寒杆菌组血小板聚集活性明显降低,淋巴细胞增殖率明显增高(P>0.05),动脉粥样硬化斑块面积明显减少;③HDL两组都无明显改变.提示细菌感染可改善机体免疫状态,菌苗免疫比口服活菌效果更显著.伤寒杆菌可增加细胞免疫功能,降低血小板聚集和血液粘度,减少动脉粥样硬化斑块形成.粪链球菌也有类似作用,尤其降脂效果明显,但减轻动脉粥样硬化形成作用略差于伤寒杆菌.因此,适当给予小剂量无毒的细菌制剂免疫机体,不失为一种值得探索防治动脉粥样硬化形成的途径.
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Veliparib和多柔比星联合作用对人肝癌耐药细胞株BEL-7404增殖抑制的影响
目的:检测PARP抑制剂veliparib与抗癌药多柔比星联用对肝癌耐药细胞株BEL-7404增殖抑制的作用。方法:以BEL-7404细胞为研究对象,经多柔比星和(或) veliparib处理24 h后,通过MTT法观察细胞增殖率变化,采用流式细胞术分析细胞凋亡水平,通过单细胞凝胶电泳实验评价DNA损伤程度,通过Western blotting法检测细胞线粒体和胞浆中cytochrome C水平变化。结果:多柔比星和veliparib联用组细胞增殖率明显低于对照组和多柔比星单独处理组,细胞凋亡率则显著高于对照组和多柔比星单独处理组;同时,多柔比星和veliparib联用组细胞DNA损伤水平较对照组和多柔比星单独处理组亦明显加重,而cytochrome C在胞浆中的水平则显著高于对照组和多柔比星单独处理组。结论:veliparib与多柔比星联合处理,可以抑制BEL-7404细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其凋亡可能是与DNA损伤及胞内cytochrome C改变有关。
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富血小板血浆对人脂肪来源干细胞增殖率的影响
目的:探讨不同比例富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)对人脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)的增殖及周期蛋白Cyclin D1表达的影响。方法:分离培养ADSCs细胞,传代至第3代,流式细胞仪鉴定。全血中分离PRP。采用随机数字表法将将细胞分为4组(n=24):C组不做任何处理,PRP10组、PRP20组和PRP30组在ADSCs中加入PRP使其容积比分别为10%、20%和30%,于37℃、5% CO2培养箱中培养。应用MTT法检测各组细胞的增殖率,蛋白免疫印迹法(Western blot)测细胞周期蛋白Cyclin D1的表达。结果:与C组比较,PRP10组、PRP20组、PRP30组ADSCs细胞增殖率及Cyclin D1蛋白的表达明显增高(P<0.05);组间比较PRP30组ADSCs细胞增殖率及Cyclin D1蛋白的表达高于PRP10组和PRP20组(P<0.05)。结论:PRP以浓度依赖性方式促进ADSCs细胞内周期蛋白Cyclin D1的表达,从而促进ADSCs的增殖。
关键词: 脂肪移植 脂肪来源干细胞 细胞增殖率 富血小板血浆 Cyclin D1蛋白 -
成人新生肝细胞移植诱导耿氏大鼠非结合性高胆红素血症长期缓解
Crigler-Najjar综合征I型是一种由尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶完全失活所致、以非结合胆红素水平极度升高为特征的罕见遗传性代谢病。目前,肝细胞移植(HT)被认为是一种治疗Crigler-Najjar综合征的可选治疗方案,但这一治疗方法仍然受移植细胞的质量、较低的植入率以及增生能力所限制。由于其附着能力及黏附分子的表达以及更高的肝前体细胞增殖率,新生肝细胞的移植效果可能会更加优于成年肝细胞。成年以及新生肝细胞将被移植于患有Crigler-Najjar综合征的模型耿氏大鼠,而细胞的植入效果以及增殖情况可以通过免疫荧光来进行研究和对比。此外,大鼠血清中结合性胆红素的水平以及肝脏标本中尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)的表达都可以检测到。研究人员展示了新生肝细胞移植对耿氏大鼠的长期纠正作用。相比较于成年细胞,新生细胞在移植后第3天和第6周都分别显示出了良好的植入率以及增殖能力。在整个实验后续6个月的追踪中,移植动物的尿胆红素血症发生率明显下降,而血液中也可以检测到胆红素结合物的表达。蛋白免疫印迹试验以及免疫荧光试验检测也确定了肝脏中UGT1A1的表达。研究人员在本实验中首次论证了在活体内使用新生肝细胞治疗Crigler-Najjar综合征的优势。