首页 > 文献资料
-
UDP-糖基供体的生物合成途径分析
糖基化是生物体中重要的生化反应,它可发生于大分子化合物,如蛋白质的糖基化[1];也可发生于小分子化合物,如各种天然产物苷元的糖基化[2]。执行化合物糖基化反应的催化酶为糖基转移酶。糖基转移酶的底物分为糖基受体和糖基供体。糖基受体可以为生物大分子化合物如蛋白质、核酸,还可以为小分子化合物如各种植物或微生物的次生代谢产物[3-5]。糖基受体通常含一些活性基团,如羟基、氨基、羧基、巯基等用于形成糖苷键,同时有少数糖基转移酶还可以催化 C-C键的形成,生成碳苷类化合物[6-7]。糖基供体为糖的活化形式,通常糖基供体中存在一个或多个高能磷酸键,这些高能磷酸键在糖基转移酶执行催化反应时能通过能量转移而形成化合物与糖的糖苷键。常见糖基供体为尿苷二磷酸糖(UDP-糖)、胸腺苷二磷酸糖(TDP-糖)、鸟苷二磷酸糖(GDP-糖)、一磷酸糖等。这些糖基供体之间可以通过不同的代谢酶进行相互转化(图1)。
-
伊立替康致尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1 A1基因无突变患者严重腹泻1例Δ
伊立替康为半合成的可溶性喜树碱衍生物,通过抑制Ⅰ型DNA拓扑异构酶阻碍DNA的合成,可特异性作用于细胞周期s期,抑制肿瘤细胞DNA的合成。伊立替康是治疗晚期或转移性结直肠癌的一线选择。然而,迟发性腹泻是伊立替康主要的不良反应,具有剂量依赖性,于用药后24 h发生,发生率可达90%,严重者可致命。尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1 A1(uridine-diphosphoglucuronosyl transferase 1A1,UGT1A1)基因多态性与伊立替康的不良反应相关,使用伊立替康化疗前行UGT1A1基因多态性检测,可以筛查高危人群、预测伊立替康的严重不良反应,从而指导临床用药[1]。但在临床实践中, UGT1A1基因无突变患者使用伊立替康也会发生严重腹泻。现结合临床实际案例,从药学角度分析UGT1A1基因多态性检测预测临床结果时可能存在的问题,为临床治疗决策提供参考。
-
核苷酸对大鼠心肌[3H]格列本脲结合位点的影响
目的:研究核苷酸类物质对心肌膜[3H]格列本脲([3H]Gli)特异性结合位点的影响.方法:制备心肌膜标本,采用竞争结合和/或动力学试验,分别研究ATP、ADP、UDP、AMP和腺苷(Ade)等核苷酸物质对心肌[3H]Gli结合特性的影响.结果:[3H]Gli与心肌膜标本呈特异性、可逆性结合,非标Gli可剂量依赖性地取代[3H]Gli与心肌膜标本的结合,IC50值为195 nmol/L.在相同条件下,ATP、ADP和UDP均可抑制[3H]Gli结合,IC50值分别为1.68、0.80和2.08 mmol/L;而AMP和Ade对心肌[3H]Gli结合无明显影响.动力学试验表明:[3H]Gli与心肌膜标本的结合和解离均符合一级动力学,ATP、ADP和UDP能减慢[3H]Gli与心肌膜结合,并降低大结合容量,但不影响解离动力学过程.结论:ATP、ADP和UDP可诱导SUR构象的改变,从而对心肌[3H]Gli特异性结合位点具有负性变构调节作用.
-
尿苷二磷酸与尿苷三磷酸两种佐剂对HAV抗原及HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响
目的 探讨尿苷二磷酸(Uridine diphosphate,UDP)与尿苷三磷酸(Uridine triphosphate,UTP)两种佐剂对HAV抗原和HBsAg诱导小鼠体液免疫应答的影响.方法 分别在HBsAg(1 μg)和HAV抗原(18 EU)中加入不同浓度的UDP和UTP(HBsAg组:UDP和UTP均500μg及1、2、5、10 mg,HAV抗原组:UDP和UTP均500 μg及1、2mg),均经腹部皮下多点注射免疫ICR小鼠(HBsAg组:2针,间隔2周,0.1ml/只;HAV抗原组:单针免疫,0.2ml/只),并设空白对照组(生理盐水100μl)、抗原组对照组(HBsAg 1 μg;HAV抗原18 EU)、铝佐剂组对照组(铝佐剂300μg)、UDP+铝佐剂复合组(HBsAg 1μg+铝佐剂300 μg+UDP 2 mg;HAV 18 EU+铝佐剂300 μg+UDP 2 mg)和UTP+铝佐剂复合组(HBsAg 1 μg+铝佐剂300 μg+ UTP 2 mg;HAV 18 EU+铝佐剂300 μg+ UTP 2 mg),分别于末次免疫后(HBsAg组:第4、8、12和16周;HAV抗原组:第4、8、12周)采血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清中抗-HBsAg IgG和抗-HAV IgG水平.免疫18周后,分别取HBsAg组中UDP和UTP佳浓度组及空白对照组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏及肺组织进行病理观察.结果 除空白对照组小鼠血清检测不到抗-HBsAg IgG外,其余各组小鼠血清抗-HBsAg IgG及抗-HAV IgG水平均在第8周达到峰值,以后逐渐下降.末次免疫后,UDP及UTP各组抗-HBsAg IgG及抗-HAV IgG水平均高于抗原对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05).HBsAg组UDP+铝佐剂复合组产生的IgG水平明显高于抗原对照组、铝佐剂对照组及UDP和UTP各浓度组(P<0.05);HAV抗原组UTP+铝佐剂复合组产生的IgG水平明显高于抗原对照组、铝佐剂对照组及UDP和UTP各浓度组(P<0.05).在两种抗原中,UDP和UTP的佳浓度均为2 mg/只.在设置的浓度范围内,UDP和UTP佐剂均未观察到毒性反应.结论 UDP和UTP均能明显增强HBsAg及HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答.
-
胆红素尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶分子生物学研究进展
胆红素尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶(B-UGT)是一种主要存在于肝细胞内质网,对胆红素进行生物转化的重要代谢酶,它是一个超基因家族,该酶含量下降或缺乏将导致胆红素葡萄糖醛酸化修饰障碍,引起血浆胆红素升高,导致相关疾病发生[1].
-
尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A7基因多态性与抗结核药致肝损伤易感性的关系
目前,结核病仍是威胁人类健康的重要传染性疾病之一,结核病控制的策略主要是药物的化学疗法.抗结核药物引起的肝毒性已位居药源性肝损伤的第1位[1].尿苷葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是一种重要的Ⅱ相反应代谢酶,对外源性化合物具有解毒作用.在UGT17已知的9个等位基因中,UGT1A7-131G/A和UGT1A7-208T/C携带者UGT1A7酶活性降低,而UGT1 A7-129T/G携带者酶活性与野生型等位基因相似.
-
新生儿黄疸与胆红素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶和有机阴离子转运因子2基因突变的关系
目的 探讨胆红素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT1A1)基因Gly71Arg突变和有机阴离子转运因子2(OATP 2)基因Asn130Asp突变与新生儿黄疸发病的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性长度多态性方法测定无亲缘关系的汉族新生儿黄疸组与健康对照组的UGT1A1 Gly71Arg和OATP 2 Asn130Asp基因多态性的基因型,并检验两组基因型分布、等位基因频率差异,应用logistic多元回归分析两种基因突变对新生儿黄疸的OR值和95%CI.结果 新生儿黄疸组UGT1A1 Gly71Arg和OATP 2 Asn130Asp基因多态性的基因型分布与对照组差异有统计学意义(χ2=9.47和6.16,P=0.002和0.046),Arg和Asp等位基因频率明显高于对照组(χ2=10.34和6.85, P=0.001和0.009);logistic多元回归分析UGT1A1基因Gly71Arg和OATP 2基因Asn130Asp突变对新生儿黄疸的OR值和95%CI分别为2.66(1.38~4.51)和2.32(1.23~3.95)(P=0.011和0.024).结论 UGT1A1基因Gly71Arg和OATP 2基因Asn130Asp突变可能参与新生儿黄疸的发病.
-
成人新生肝细胞移植诱导耿氏大鼠非结合性高胆红素血症长期缓解
Crigler-Najjar综合征I型是一种由尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶完全失活所致、以非结合胆红素水平极度升高为特征的罕见遗传性代谢病。目前,肝细胞移植(HT)被认为是一种治疗Crigler-Najjar综合征的可选治疗方案,但这一治疗方法仍然受移植细胞的质量、较低的植入率以及增生能力所限制。由于其附着能力及黏附分子的表达以及更高的肝前体细胞增殖率,新生肝细胞的移植效果可能会更加优于成年肝细胞。成年以及新生肝细胞将被移植于患有Crigler-Najjar综合征的模型耿氏大鼠,而细胞的植入效果以及增殖情况可以通过免疫荧光来进行研究和对比。此外,大鼠血清中结合性胆红素的水平以及肝脏标本中尿苷二磷酸葡糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)的表达都可以检测到。研究人员展示了新生肝细胞移植对耿氏大鼠的长期纠正作用。相比较于成年细胞,新生细胞在移植后第3天和第6周都分别显示出了良好的植入率以及增殖能力。在整个实验后续6个月的追踪中,移植动物的尿胆红素血症发生率明显下降,而血液中也可以检测到胆红素结合物的表达。蛋白免疫印迹试验以及免疫荧光试验检测也确定了肝脏中UGT1A1的表达。研究人员在本实验中首次论证了在活体内使用新生肝细胞治疗Crigler-Najjar综合征的优势。