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095 维药驱虫斑鸠菊治疗白癜风的研究与应用
白癜风是由于皮肤和毛囊内的黑素细胞内酪氨酸酶活性减低或消失,导致黑素颗粒(即黑素体)生成的进行性减少或消失而引起的局限性或泛发性脱色素性病变,是一种后天的原发性皮肤色素脱失症,而非继发于其他皮肤病之后遗留的脱色素性病变.维吾尔医称为"白热斯"、"阿克拜来斯",维吾尔医在防治"白热斯"方面积累了丰富经验.目前国内外有关中医药研究白癜风的研究报道很多,但对维吾尔医防治白癜风的报道甚少,本文对维药驱虫斑鸠菊治疗白癜风的研究和应用情况作一简述.
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277复方卡力孜然酊治疗小儿白斑及白癜风的疗效观察
白癜风是由皮肤及毛囊的黑素细胞内酪氨酸酶活性减退或消失,导致黑素粒(即黑色体)生成进行性减少或消失而引起的一种后天性原发性皮肤色素脱失症.维吾尔医称"白热斯",在治疗白癜风方面维吾尔医积累了丰富的经验.
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中药调控酪氨酸酶活性的现状分析
酪氨酸酶是黑素生成途径中的主要限速酶[1],体现在酪氨酸生成多巴和多巴醌的过程均需酪氨酸酶的参与.近年来,色素性皮肤病防治的研究热点趋向于中药对酪氨酸酶的抑制或激活作用,并有望通过这一途径取得突破性的进展.现对目前国内外有关中药调控酪氨酸酶活性的实验报道分析如下.1 酪氨酸酶与色素性皮肤病色素性皮肤病可分为色素减退和色素增加两大类,分别表现为皮肤颜色变白和变黑.白癜风是常见的色素减退性皮肤病[2],发病率为0.5%~2%[3],发病原因复杂.而其发病机制则是由于人体皮肤和毛囊的黑素细胞内酪氨酸酶的活性减低或消失,导致黑素体生成的进行性减少或消失而引起的局限性或泛发性脱色素病变[4].补骨脂素是目前国内外治疗白癜风的有效药物之一[2],用药后能增强紫外线的作用,使酪氨酸酶活性增加,从而增加黑素合成.
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复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响
目的 研究复方木尼孜其颗粒对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法 培养小鼠B16黑素瘤细胞,采用MTT法测定不同浓度复方木尼孜其颗粒对细胞增殖的影响,采用L-DOPA氧化法测定其对细胞酪氨酸酶活性的影响,采用NaOH裂解法检测细胞黑素含量.结果 复方木尼孜其颗粒高剂量组能明显抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,但是对酪氨酸酶活性无影响.结论 复方木尼孜其颗粒能抑制小鼠B16黑素瘤细胞黑素的合成,在治疗色素性皮肤病中有一定前景.
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积雪草甙对酪氨酸酶活性的抑制作用及对Cloudman S91黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的探讨积雪草甙外用脱色素的作用机制.方法体外观察积雪草甙对蘑菇酪氨酸酶活性的作用并进行酶促反应动力学分析.进一步以系列浓度的积雪草甙作用于体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率.结果积雪草甙能剂量依赖性抑制蘑菇酪氨酸酶活性,酶促动力学分析提示积雪草甙为蘑菇酪氨酸酶混合型抑制剂.进一步研究发现,积雪草甙能抑制体外培养的Cloudman S91黑素瘤细胞酪氨酸酶活性和黑素合成,但对细胞增殖无明显影响.与氢醌相比,积雪草甙抑制酪氨酸酶活性低于相同浓度的氢醌.结论积雪草甙可直接作用于黑素细胞,抑制黑素合成,是一种无细胞毒性的皮肤脱色剂.
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维吾尔医治疗白癜风专用复方药对酪氨酸酶活性的影响
目的 研究维吾尔医治疗白癜风十二种专用复方药乙醇、水提取物的不同测试浓度对酪氨酸酶(TYR)激活率的影响.方法 通过计算机排序选定临床应用频次较高的维吾尔医治疗白癜风十二种专用复方药材,并稀释浓度配制为1 000μg/ml、500μ g/ml、100μg/ml等三种不同浓度,应用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶激活率.结果 十二种专用复方药材水提取物和乙醇提取物各处方与各浓度之间,以及各提取物之间均有显著性差异(P<0.05),其中乙醇提取物激活率明显高于水提取物(P<0.05).结论 十二种专用复方药乙醇、水提取物对酪氨酸酶活性均有激活及黑色素合成的作用.
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日本刺参胶原肽对B16黑素瘤细胞黑素合成的影响
目的:研究不同分子量日本刺参胶原肽A1(6 000U<Mr<10 000U)、A2(Mr<6 000U)对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成、酪氨酸酶活性及酪氨酸酶基因表达的影响.方法:采用MTT法测定细胞增殖活性,NaOH裂解法测定黑素生成量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定酪氨酸酶mRNA表达.结果:不同分子量日本刺参胶原肽均能显著促进B16细胞增殖,抑制B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性,下调酪氨酸酶mRNA表达,且剂量效应关系明显.结论:不同分子量日本刺参胶原肽均具有显著抑制B16黑素瘤细胞黑色合成的作用.其中,A1的抑制效果较A2显著.
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菟丝子、骨碎补提取物体外对酪氨酸酶活性的影响
[目的]考察菟丝子、骨碎补提取物体外对酪氨酸酶活性的影响.[方法]采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法检测菟丝子、骨碎补对酪氨酸酶的激活率.[结果]菟丝子、骨碎补提取物对酪氨酸酶活性具有激活作用.[结论]菟丝子、骨碎补提取物能够激活酪氨酸酶活性,为其外用治疗白癜风提供了药学依据.
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熟地、川芎提取物对酪氨酸酶活性的影响
[目的]研究熟地、川芎提取物对酪氨酸酶活性的影响.[方法]用50%(V/V)乙醇提取川芎、熟地中的有效成分,以邻苯二酚为底物,利用可见分光光度法在390nm波长下测定酪氨酸酶活性的变化.[结果]熟地、川芎50%乙醇提取物对酪氨酸酶均有较强的激活作用,激活率EC50分别为1.76 mg/ml,1.42 mg/ml.[结论]熟地、川芎提取物可增强酪氨酸酶的活性.
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驱白艾力勒思亚散对酪氨酸酶激活作用的实验研究
目的:观察驱白艾力勒思亚散提取物对酪氨酸酶活性的作用,并进行其动力学研究,探讨其治疗白癜风的作用机理.方法:分别测定驱白艾力勒思亚散水提取液和乙醇提取液对酪氨酸酶的激活率,Matsuda法测定多巴色素自动氧化生成的黑素量,计算黑素生成上调率,并对酪氨酸酶激活作用进行动力学观察.结果:驱白艾力勒思亚散水提取液和乙醇提取液对酪氨酸酶均有明显的激活作用,其激活作用随着药量的增加而增强,黑素生成的上调率也呈剂量依赖性;动力学研究证实此激活作用显著,且醇提液效果优于水提液.结论:驱白艾力勒思亚散是治疗白癜风的有效药物,激活酪氨酸酶是其作用机制之一.
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马钱苷对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型黑素合成的影响
目的:探讨马钱苷对黑素瘤细胞A375与角质形成细胞Hacat共培养模型黑素合成的影响.方法:将A375细胞和Hacat细胞构建共培养模型,以不同浓度马钱苷进行干预,通过MTT法、NaOH裂解法、多巴氧化法分别测定共培养模型的细胞增殖率、黑素含量和酪氨酸酶活性.结果:与阴性对照组相比,马钱苷10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L组对共培养细胞增殖率无显著性差异(P>0.05).马钱苷10-6mol/L和10-7mol/L组对共培养模型黑素合成及酪氨酸酶活性有极显著性差异(P<0.01).与阳性对照组相比,马钱苷10-7mol/L组对共培养模型酪氨酸酶活性有极显著性差异(P<0.01),马钱苷10-6mol/L和10-7mol/L组对共培养模型黑素合成无显著差异(P>0.05).结论:马钱苷可能通过抑制酪氨酸酶活性减少共培养模型黑素合成.
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三种美白剂对皮肤黑素细胞内酪氨酸酶活性抑制的探讨
[目的]探讨3种常用美白剂(对苯二酚、熊果苷、曲酸)对皮肤黑素细胞内酪氨酸酶活性的抑制作用.[方法]利用B-16黑素瘤细胞株,分别加入美白剂5 d后,采用丙酮酸比色法测定细胞培养上清液胞浆酶(乳酸脱氢酶,LDH)释放水平,探讨美白剂的细胞毒性.采用冻融法提取培养细胞内酶液后,用L-酪氨酸作底物,测定美白剂对培养细胞内酪氨酸酶活性的影响. [结果]加入不同剂量(8、16、24、32、40、48μg/mL)美白剂后,对苯二酚对细胞有明显的毒性,影响细胞的生长.熊果苷、曲酸对培养细胞无明显的毒性,但对细胞内酪氨酸酶活性有明显的抑制作用. [结论]3种美白剂均能不同程度地抑制皮肤黑素细胞内酪氨酸酶活性,达到美白作用.
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橙皮苷对人黑素细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响
目的:观察橙皮苷对人原代黑素细胞酪氨酸酶及黑素合成的影响,探讨其作用机制.方法:选择50、100、200、300、400、500 和600 mg/L 7 个浓度的橙皮苷作用于体外培养的人表皮黑素细胞72 h,分别测定细胞增殖活性、酪氨酸酶活性及黑素含量.结果:橙皮苷显著抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,且呈浓度依赖性.结论:橙皮苷可抑制黑素合成和酪氨酸酶活性.
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淫羊藿苷抑制正常黑素细胞黑素合成的研究
目的:观察中药单体淫羊藿苷对体外培养的正常黑素细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响.方法:选择高、中、低3浓度的中药单体作用于体外培养的黑素细胞,测定细胞酪氨酸酶活性、黑素含量和细胞增殖率.采用间接免疫荧光染色法对药作用的黑素细胞和对照的酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(tyrosinase related protein-1,TRP-1)、TRP-2进行标记然后采用激光共聚焦显微镜半定量分析淫羊藿苷作用后细胞内3种成分表达量的变化.结果:淫羊藿苷明显抑制酪氨酸酶活和黑素的生成(P<0.01),且呈浓度依赖性,但淫羊藿苷抑制黑素生成的作用较氢醌弱(P<0.01);淫羊藿苷以浓度依赖的方式进细胞的增殖,氢醌则抑制了细胞的增殖;淫羊藿苷对黑素细胞内TYR和TRP-2的表达没有明显影响,但是对TRP-1的表达明显增加了.结论:淫羊藿苷能够抑制黑素合成和酪氨酸酶活性,这种抑制可能主要通过抑制酪氨酸酶活性起作用.
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白术及茯苓提取物对豚鼠皮肤酪氨酸酶 mRNA基因表达水平的影响
哺乳动物黑素细胞黑素生成受多种因素调控。紫外线、促黑素、 8-甲氧补骨脂素等对黑素生成具有刺激作用 [1,2],而氢醌、熊果苷、甘草酸等对黑素生成则有抑制作用。我们发现中药茯苓、白术能抑制酪氨酸酶活性 [3],使黑素细胞和黑素颗粒减少 [4]。为了研究它们对酪氨酸酶 (TYR) mRNA基因表达的影响,我们应用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术,检测药物干预前后豚鼠皮肤中 TYR mRNA表达水平。 一、材料与方法 (一 )动物:健康雄性棕黄色豚鼠 10只 (南京军区医学实验动物中心提供,普通级 ),体重 332~ 425 g,平均 380.2 g。每只实验动物背部取 6个相离区域, UVB照射后外涂药物。阳性对照外用 3%氢醌。
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珍珠提取物对黑色素细胞酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响
研究珍珠提取物对小鼠黑素瘤细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响,为珍珠提取物在美白领域的应用提供理论依据.实验对珍珠提取物进行了成分分析,并以小鼠皮肤黑色素瘤细胞(B16F10)为细胞模型,采用CCK-8法测定珍珠提取物对黑色素细胞活力的影响,以L-DOPA为底物测定细胞内酪氨酸酶活性,采用比色法测定细胞中的黑色素含量.实验结果:在一定添加量下,珍珠提取物对B16F10细胞没有毒性,且能抑制酪氨酸酶活性,减少黑色素的生成.表明珍珠提取物能有效抑制黑色素合成,达到美白的效果.
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治疗黄褐斑的中药复方对酪氨酸酶活性的影响
目的研究中药对酪氨酸酶活性的影响,筛选有治疗作用的中药方剂,为应用中药治疗色素障碍性皮肤病提供实验依据.方法通过计算机排序选定5个应用频次较高的治疗黄褐斑的复方中药,采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定酪氨酸酶活性.结果治疗黄褐斑中药复方中六味地黄丸、补中益气汤组酪氨酸酶活性降低(水提物P<0.05,醇得物P>0.05),逍遥丸、桃红四物汤增高(P<0.01),金匮肾气丸降低(P>0.05).六味地黄丸组方中药水提物熟地黄、牡丹皮组酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸降低;醇提物中牡丹皮、泽泻增高,茯苓、山药、山茱萸降低.结论六味地黄丸、补中益气气汤使酪氨酸酶活性降低(水提物);六味地黄丸组方中药熟地黄、牡丹皮使酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸使酪氨酸酶活性降低,泽泻组醇提物增高,水提物降低.
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刺梨不同提取成分对B16细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响
[目的]评价刺梨不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性的影响,为刺梨在美白化妆品领域的开发应用奠定基础.[方法]分别采用水提法、醇提法和超声提取法获得刺梨多糖、黄酮和多酚,分别采用苯酚-硫酸法、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法和Folin-Ciocaltean法检测其纯度.以刺梨多糖(200、400、800、1600μg·mL-1)、刺梨黄酮(30、60、120、240μg·mL-1)、刺梨多酚(40、80、160、320μg·mL-1)及维生素C干预B16细胞,采用MTT法检测B16细胞增殖活性,倒置显微镜观察B16细胞形态和数量,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性.[结果]刺梨多糖的提取率高,可达45.33%;刺梨黄酮的纯度高,可达52.50%.刺梨不同提取成分对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,且呈现显著的浓度依赖性,与正常组比较,具有统计学差异(P<0.05).刺梨不同提取成分各剂量组均可抑制B16细胞的增殖,增加细胞碎片,且呈显著的浓度依赖性;药物处理48h后,刺梨多糖、刺梨黄酮和刺梨多酚抑制B16细胞增殖的IC50分别为649.83、105.87、134.16μg·mL-1,抑制酪氨酸酶活性的IC50分别为376.13、57.51、82.42μg·mL-1,其中刺梨黄酮(60、120、240μg·mL-1)和刺梨多酚(80、160、320μg·mL-1)对B16细胞酪氨酸酶的抑制作用优于阳性对照维生素C,具有统计学差异(P<0.05).[结论]刺梨的不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,其中刺梨黄酮的活性佳,刺梨多酚次之,提示刺梨在皮肤美白等方面具有潜在的研究价值.
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c-Met在胃癌中的表达及临床意义
目前认为胃癌的发生是多基因(ms、c-Met、bcl-2等)变异累积及幽门螺杆菌(hp)[1]等高危因素综合作用的复杂过程.原癌基因c-Met是一种具有酪氨酸酶活性的生长因子受体.研究表明c-Met过度表达能赋予肿瘤细胞一种生长优势,被认为与胃癌的发生、发展、恶性程度、侵袭、转移及不良预后有密切关系.下面就c-Met的生物学特征及其与胃癌的关系作一综述.
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六味地黄丸及其组方中药对酪氨酸酶活性影响的实验研究
目的:为了研究中药对酪氨酸酶活性影响,用中药治疗色素障碍性皮肤病提供实验依据.方法:采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法体外测定六味地黄丸及其组方中药对酪氨酸酶活性的影响.结果:六味地黄丸组酪氨酸酶活性降低(水提物P<0.05,醇提物P>0.05),其组方中药水提物熟地、丹皮组酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸降低;醇提物中丹皮、泽泻增高,茯苓、山药、山茱萸降低.结论:六味地黄丸使酪氨酸酶活性降低(水提物);六味地黄丸组方中药熟地、丹皮使酪氨酸酶活性增高,茯苓、山药、山茱萸使酪氨酸酶活性降低,泽泻组水提物增高、醇提物降低.