首页 > 文献资料
-
霍乱弧菌在离体人胆汁中长期存活及L型变异的研究
霍乱弧菌流行株对温度较为敏感,在每年寒冷季节中不能从外环境中发现其存在,构成了所谓病原体的隐蔽性特点.以往认为人是霍乱弧菌的唯一宿主,其慢性带菌者至今长报道为10年.我们以离体人胆汁方式进一步探讨了其带菌期限与有关机制.
-
人胆汁中罗红霉素代谢产物的研究
目的:研究人胆汁中罗红霉素的代谢转化产物.方法:采用高效液相色谱-离子阱质谱法,对患者po罗红霉素后的胆汁样品进行了分析.结果:发现了13个代谢产物,分别为罗红霉素的(9Z)-异构体及其(9E)-,(9Z)-N-去甲基和N-双去甲基衍生物和(9E)-及(9Z)-脱克拉定糖衍生物,(9E)-和(9Z)-红霉素肟及其(9E)-和(9Z)-N-去甲基及N-双去甲基衍生物,其中9种为新发现的代谢物.结论:罗红霉素及其代谢物均可在体内发生几何异构化.
关键词: 罗红霉素 代谢物 人胆汁 高效液相色谱-离子阱质谱法 -
人胆汁双向凝胶电泳分离技术的建立与优化
背景:双向凝胶电泳是目前好的蛋白质分离方法,然而胆汁样品中的盐,脂和蛋白酶对双向凝胶电泳干扰较大,影响电泳图谱的蘑复性.目的:通过对胆汁样品双向凝胶电泳的几个关键环节的分析,建立起一种适合于有效分离胆汁蛋白质的双向凝胶电泳分离方法.设计、时间及地点:胆汁双向凝胶电泳图谱对照实验.于2008-03/11在重庆市神经病学重点实验室完成.材料:胆汁标本取自于重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,于肝移植过程中从供体中取得.方法:将标本分别按3种不同方法进行处理:(D2D-Clean-up试剂盒处理胆汁标本:用裂解液,7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,质量浓度为0.4 g/L的过硫酸铵,65 mmol/L二硫苏糖醇,质量浓度为0.2 g/L的载体两性电解质溶解沉淀过夜.②在胆汁标本中加入4倍体积的预冷丙酮,用预冷的丙酮洗涤沉淀,然后用真空冻干机抽干,用裂解液溶解沉淀过夜.③在胆汁标本中加入4倍体积的预冷三氯乙酸/丙酮混合液,用预冷的丙酮洗涤沉淀,然后用真空冻干机抽干,用裂解液溶解沉淀过夜.经过一维等电聚焦和二维SDS-PAGE电泳分离人胆汁蛋白质组.将切取的蛋白质点进行脱色,酶解,萃取,冷冻抽干后,进行质谱鉴定.主要观察指标:胆汁双向电泳图谱上蛋白质点数目,位置及重复性的比较.结果:3种方法均能得到理想的-向电泳等电聚焦,与单纯的丙酮沉淀法相比较,但三氯乙酸,丙酮沉淀法损失了较多的中小分子量的蛋白质,因此不适合于胆汁标本的处理.与2D-Cleanup试剂盒处理法相比,丙酮沉淀法纯化胆汁内盐、脂较丰富,去除干扰成分,具有较好的效果,具有成本低廉、操作简便等优势.结论:通过优化胆汁蛋白质提取、上样量和双向电泳重复件检测等步骤,建立了人胆汁双向凝胶电泳的方法,丙酮沉淀与双向凝胶电泳技术的结合足获取人胆汁蛋白质组的一种有效方法.
-
原发性胆汁性肝硬变的肝移植治疗现状
原发性胆汁性肝硬变(primary biliary cirrhosis,PBC)是成人胆汁淤积性肝硬变的常见类型,目前病因尚不十分清楚,大多认为是自身免疫性疾病,好发于中年女性,其病变主要累及肝内小胆管,造成胆管的慢性非化脓性破坏性炎症(chronic nonsupprative destruction cholangitis,CNDC),可引起长期持续性肝内胆汁淤积,终演变为再生结节不明显性肝硬变,继而出现黄疸、门静脉高压症,通常在发病10年左右死亡.迄今为止,除了熊脱氧胆酸(UDCA)可在一定程度上延缓病程进展外[1~3],尚无有效的药物治疗方法.近20余年来针对终末期PBC施行的肝移植治疗取得了良好的疗效[4~7],但仍有必要对其进行重新认识.
-
原发性肝内外胆管结石病人胆汁、胆石细菌培养及药敏分析
原发性肝内外胆管结石是我国的常见病、多发病,虽然近几年来其发病率不断下降,但由于其病情复杂,常引起胆道感染、肝脓肿、胆源性脓毒血症等并发症,且治疗效果不够彻底,因此成为肝胆外科治疗上的重点和难点.本文通过对原发性肝内外胆管结石病人的胆汁和胆石进行细菌培养和药敏试验,明确引起胆道感染的常见细菌种类及对临床常用抗生素的耐药性,从而指导临床治疗.
-
血清酶与总胆汁酸联合测定在肝胆疾病诊断中的意义
血清总胆汁酸(Total bile acid,TBA)是人胆汁中的主要成分,是胆固醇经肝组织代谢的终产物.胆汁酸的生成和代谢与肝脏关系密切,是惟一可以同时反映肝脏分泌、合成与肝损害三种状态的血清学指标.肝胆疾病时胆汁酸代谢发生紊乱,测定血清总胆汁酸主要用于肝脏疾病的诊断,是敏感的肝功能试验之一[1].
-
旋磁场对胆结石病人胆汁中胆红素钙胆固醇 pH影响的研究
探讨旋磁场与磁板对置对胆结石病人胆汁中总胆红素 (BIT)、直接胆红素 (BID)、间接胆红素 (BII)、钙 (CA)、胆固醇 (CH)和 pH的影响, 为肝内外胆管结石病人治疗、预防和降低复发、再生和再手术率提供临床实验资料. 方法 : 设旋磁组和空白对照组二组, 对象为胆管结石行胆道探查 " T" 型管引流病人. 样本为胆汁, 旋磁组 30例, 测定旋磁处理前后 65对胆汁样本. 空白对照组 15例, 不外加旋磁处理, 时间前后与对照组相同, 留取前后 30对胆汁样本. 将直径 12mm圆形稀土永磁片 110块, 表面磁感应强度 210mT, 分别间隔 10mm贴于 210× 220mm铁皮上形成一个大面积磁板与旋磁头表面静磁感应强度 160mT, 旋转平均表面磁感应强度 100mT呈异名极对置, 磁板置肝区背侧, 旋磁头置剑突下处理 40分钟. 留取处理前后胆汁样本 5ml, 送检测 BIT、 BID、 BII、 CA、 CH和 pH. 结果 : 旋磁组、旋磁场与磁板对置处理胆结石病人胆汁前后对照, t值分别为 BIT 3.60、 BID 2.46、 BII 3.37、 CA 4.87、 CH 3.36、 pH 0.3. 空白对照组胆汁时间前后对照, t值分别为 BIT 1.14、 BID 1.06、 BII 0.30、 CA 0.50、 CH 0.94和 pH 0.84. 结论 : 在本项磁场类型、强度和时间处理条件下, 旋磁场与磁板对置能明显影响胆结石病人胆汁中的 BIT、 BID、 BII、 CA和 CH的浓度变化, 且有显著降低的作用. BID降低差异有显著性 (P< 0.05). BIT、 BII、 CA和 CH降低差异有高度显著性 (P< 0.01), 胆汁 pH变化差异无显著性 (P >0.05). 空白对照组胆汁前后对比 BIT、 BID、 BII、 CA、 CH和 pH变化均无显著性差异 (P >0.05). 旋磁组与空白对照组均数比较 BIT、 BII和 pH差别有高度显著性 P< 0.01, CA差别有显著性 (P< 0.05). 而 BID和 CH两组均数比较差别无显著性 P >0.05. 本临床实验结果证实, 旋磁场与磁板对置能影响肝内外胆结石形成, 为胆石病的预防提供了临床应用依据.
-
熊去氧胆酸对肝细胞凋亡作用的分子机制
熊去氧胆酸足人胆汁的生理成分,占正常人总胆汁酸的1%~3%[1].它是一亲水性强,去垢性差,几乎无毒件的胆汁酸.具有利胆、细胞保护和拮抗疏水性胆汁酸的细胞毒性等作用.已广泛在临床上用于治疗原发性硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬变和妊娠肝内胆汁淤积症等.近年来发现UDCA具有抗肝细胞凋亡作用,并对其作用机制有了一定了解.
-
人胆管癌与正常人胆汁蛋白质组学研究
背景与目的:胆管癌是目前常见的消化道恶性肿瘤,由于大多数患者确诊时疾病已属中晚期,总体5年生存率极低,所以改善预后的关键在于早期诊断.近年来,蛋白质组学的迅猛发展,为检测肿瘤标志物提供了一种新技术.本研究采用蛋白质组学的相关技术,建立胆汁蛋白质组双向电泳图谱,筛选胆管癌患者胆汁和正常人胆汁中的差异表达蛋白,以发现可能用于早期诊断胆管癌的肿瘤标志物.方法:收集胆管患者和正常人胆汁标本,经脱盐、脱脂纯化处理后提取蛋白,进行二维电泳,应用PDQuest 8.0 2D图像软件对银离子染色的双向电泳图像进行分析,并对差异表达的蛋白质行质谱鉴定.结果:成功建立胆管癌和正常人胆汁的双向凝胶电泳图谱,其图谱上平均蛋白质点数分别为(352±23)个和(317±26)个.选取其中表达差异超过2倍的蛋白质斑点10个,行质谱分析和数据库检索,鉴定出5种有意义的蛋白质,包括(angiopoien-related protein 1)、(fibroblast growth factor substrate 2)、(catenin,beta 1)、(kertain,type I cytoskeletal 16)和(ras-related protein 37).从功能上分析这些差异蛋白质与癌细胞的发生、增殖、分化、转移等相关.结论:蛋白质组学能很好地显示胆管癌患者与正常人胆汁间的差异表达蛋白,研究鉴定的5种差异表达蛋白质可能为研究胆管癌的生物学行为提供新的分子标志物.
-
病毒性肝炎合并胆道感染35例胆汁需氧菌培养结果分析
胆道感染是病毒性肝炎的常见的并发症之一.临床中及时了解引起胆道感染的主要病原菌对治疗非常重要.既往检测胆汁中感染的细菌,常需手术中取得胆汁,但是病毒性肝炎病人往往不能承受手术治疗.我们通过逆行胰胆管造影(ERCP)注射造影剂前,通过导管抽吸胆汁进行细菌培养,了解病毒性肝炎伴胆道感染病人胆汁中的主要致病菌情况.报告如下.
-
从胆汁中培养出布氏枸橼酸杆菌1例
枸橼酸杆菌是人和动物肠道的正常菌群,可引起机会感染.近年来分子生物学研究证明,枸橼酸杆菌属至少含有11个基因种(DNA杂交群)各基因种现均已命名,并已有从各类标本检出的报道.2002年10月20日我院从1例慢性结石性胆囊炎病人胆汁中检出1株布氏枸橼酸杆菌(C.braakii)特此报道.
-
血清总胆汁酸测定在肝胆疾病中的临床价值
胆汁酸是胆汁中存在的一类胆烷酸的总称,是人胆汁中的主要成分,是胆固醇经肝组织代谢的终产物.肝脏是合成胆汁酸的唯一场所,胆道是胆汁酸排泄主要的途径.因此胆汁酸代谢变化可直接反映肝脏的功能状态.临床研究表明TBA测定对肝病诊断具有较高的敏感性,是评价肝功能的一项既灵敏又十分重要的临床指标[1,2].本文采用了循环酶速率法检测了208例肝胆疾病患者血清TBA,以探讨该指标在肝胆疾病诊断中的应用价值.
-
人胆汁灌肠治疗粘连性肠梗阻250例疗效观察
我院外科于1991年以来,采用新鲜人胆汁灌肠治疗粘连性肠梗阻,取得了较好的效果,现报道如下.
-
霍乱弧菌小川型在人胆汁中存活和变异及其血清型别转换的分子生物学研究
[目的]追踪观察霍乱弧菌小川型流行株在离体人胆汁样本中的存活和L型变异状况;探索小川型在其抗体作用下对转换为稻叶型的发生频度和其对Ctx基因的影响;为改善当前霍乱防治工作提供实验依据.[方法]对保存染菌胆汁样本进行细菌和L型测数、鉴定.以抗体软琼脂法诱导血清型别转换;以蔗糖半固体平板检测细菌趋化性.用PCR和测序法比较转型前后的肠毒素基因改变.[结果]在2份染菌人胆汁中,发现1份存活达22年,其总菌数为2.5×10 3cfu/ml,其中L型构成比为32%.3株小川型流行株在人胆汁及抗体作用下,转换为稻叶型发生频度为2%~6%;酶切电泳显示转型前后其Ctx基因图型相似,经CtxAB测序后,差异7Nt(7/1226),显示有一定的变异.3株转型前后细菌的化学趋化性未见显著改变.[结论]为霍乱弧菌在某些患者胆囊中长期存活而成为慢性带菌者提供了实验依据.
-
各种肝病患者血清总胆汁酸水平测定
血清总胆汁酸(Total bile acid,TBA)是人胆汁中的主要成分,是胆固醇经肝组织代谢的终产物.胆汁酸的生成和代谢与肝脏关系密切,可以同时反映肝脏分泌、合成与肝损害三种状态,测定TBA主要用于肝脏疾病的诊断,是敏感的肝功能试验之一[1].本文检测各种肝病的TBA和ALT,结果报道如下.
-
46例胆管结石病人胆汁细菌感染及药敏分析
胆管结石病人常合并胆道感染,随着抗生素的应用,胆汁中的病原菌菌株及药敏试验发生了变化.笔者对我院2002年1月至2003年12月间52例胆管结石病人的胆汁送细菌培养,46例胆汁培养阳性及其药敏试验结果总结分析如下.
-
ABCB4基因与胆汁脂类转运
肝脏是脂类代谢的中心,肝细胞通过其细胞膜的毛细胆管面,每天分泌约1g胆固醇和4g卵磷脂(磷脂酰胆碱phos-phatidyl-choline,PC)进人胆汁.胆汁中的卵磷脂有助于胆固醇的溶解,防止疏水的胆固醇分子在胆道内形成胆固醇性结石.胆盐是一种天然的离子型去垢剂,卵磷脂可灭活其去垢活性,防止对肝脏和胆道上皮细胞的损伤[1].
-
血清总胆汁酸在慢性肝病诊断中的应用
胆汁酸是胆汁中存在的一类胆烷酸的总称,是人胆汁中的主要成分,是胆固醇经肝组织代谢的终产物[1].肝脏是合成胆汁酸的唯一场所,胆道是胆汁酸排泄主要的途径.测定血清总胆汁酸主要用于肝脏疾病的诊断,是敏感的肝功能试验之一,血清总胆汁酸(TBA)的测定是目前研究的热点之一[2,3].本文用OlympusAU2700全自动生化分析仪及其配套试剂,监测各型肝炎病人的TBA和丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及天门冬酸氨基转移酶(AST),比较分析TBA在慢性肝炎中的诊断作用.