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HPLC法同时测定速克感冒胶囊中5种成分的含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定速克感冒胶囊中绿原酸、马来酸氯苯那敏、乙酰水杨酸、蒙花苷和次野鸢尾黄素..方法:采用Venusil XBP C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈(A)-0.5％磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长327 nm(绿原酸)、260 nm(氯苯那敏)、276 nm(乙酰水杨酸)、334 nm(蒙花苷)和266nm(次野鸢尾黄素).结果:5种待测成分分离度良好,阴性无干扰;绿原酸、马来酸氯苯那敏、乙酰水杨酸、蒙花苷和次野鸢尾黄素进样量分别在0.078～0.388 μg(r=0.999 9)、0.196～0.978 μg(r=0.999 7)、4.066～20.332μg(r=0.999 9)、0.165～0.825 μg(r=-0.999 9)和0.048～0.238 μg(r=0.999 0)范围内线性关系良好;平均回收率分别为96.8％、101.2％、96.8％、100.0％和101.3％,RSD分别为1.8％、2.4％、1.1％、1.9％和3.9％.3批样品中绿原酸、马来酸氯苯那敏、乙酰水杨酸、蒙花苷和次野鸢尾黄素的平均含量分别为0.88～1.00、2.05～2.20、110.02～116.00、2.18～2.45和0.06～0.10 mg,粒-1.结论:该方法可作为评价和监控速克感冒胶囊质量的方法.
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HPLC法同时测定利胆排石片中14个成分的含量
目的:建立同时测定利胆排石片中绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚共14个成分的高效液相色谱法.方法:采用Phenomenex Luna 5u-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.5％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL· min-1,柱温30℃,检测波长:254 nm.结果:各待测组分分离度良好;绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚14个成分在相应的范围内线性关系良好,相关系数(r)不低于0.999 1,精密度试验的RSD均小于2.0％;平均回收率为97.8％～100.7％.样品中14个测定成分的含量范围分别为0.05～0.25、0.00～4.30、0.28～1.03、1.39～34.45、2.85～5.71、0.32～0.97、0.89～1.43、0.06～0.33、0.05～0.26、0.43～0.95、0.09～0.38、0.04～0.12、0.03～0.14、0.22～0.54 mg·片-1.结论:经方法学验证,本方法可用于利胆排石片中绿原酸、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、木香烃内酯、去氢木香内酯、大黄酚14个成分的含量测定.
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HPLC法同时测定牛黄清感胶囊中6个成分的含量
目的:建立同时测定牛黄清感胶囊中绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷6个成分的方法.方法:采用Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30 cC,以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～20 min,10％A→16％A;20～40 min,16％A→30％A;40～60 min,30％A→40％A;60～80 min,40％A),流速1 mL· min-1,变换波长检测(278 nm处检测绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素;210 nm处检测连翘苷).结果:绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷的线性范围分别为0.016 4～0.328 μg(r=0.999 6)、0.106～2.12 μg(r=0.999 6)、0.042～0.84 μg(r=0.999 7)、0.026 3～0.526μg(r=0.999 8)、0.015～0.3 μg(r=0.999 4)、0.033 3～0.666 μg(r=0.999 4),平均回收率(n=9)分别为99.6％(RSD=1.2％)、99.3％(RSD=1.1％)、100.7％(RSD=1.4％)、99.6％(RSD=1.2％)、100.2％(RSD=1.5％)、99.6％(RSD=1.8％).3批样品中绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷的含量分别在0.755～0.762、34.218～34.230、1.401～1.404、0.774～0.788、0.511～0.522、0.732～0.740 mg· g-1.结论:经方法学验证,本法可作为牛黄清感胶囊质量控制的一个有效的方法.
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HPLC法测定甜叶菊中6个酚酸类成分含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定甜叶菊叶中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C6个酚酸类成分.方法:采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长327 nm.结果:6个酚酸质量浓度在10～196 μg·mL-1范围内线性关系良好;6个酚酸的加样回收率分别为98.3％、95.2％、100.1％、97.3％、95.6％和96.1％,加样回收率、精密度、重复性、稳定性均符合有关规定;9批样品中6个酚酸类成分的含量分别为新绿原酸0.062％～0.725％,绿原酸0.277％～2.450％,隐绿原酸0.096％～0.694％,异绿原酸B 0.046％～0.867％,异绿原酸A0.157％～0.772％,异绿原酸C 0.135％～1.821％,6个酚酸之和在1.182％～6.668％.结论:该方法可为甜叶菊进一步开发利用提供质量控制方法.
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基于HPLC-MS/MS比较不同产地山楂叶中8个成分含量
目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定山楂叶中表儿茶素、绿原酸、牡荆素、金丝桃苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷、芦丁、山楂叶苷A8个成分含量,比较它们在不同产地山楂叶中的含量.方法:采用Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm),以0.1％甲酸水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.15 mL· min-1,柱温30 cC,检测波长320 nm;采用电喷雾离子源(ESI),负离子采集,多反应监测(MRM)模式,对牡荆素葡萄糖苷等8个成分进行指认和含量测定.结果:指认了表儿茶素、绿原酸、牡荆素、金丝桃苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷、芦丁、山楂叶苷A8个成分,并对其进行含量测定,线性范围分别为0.719～23.0、0.688～22.0、0.344～11.0、0.625～20.0、4.44～142、2.31～74.0、1.03～33.0、0.625～20.0μg·mL-1;R2分别为0.996 7、0.998 9、0.999 6、0.993 5、0.997 3、0.998 6、0.997 7、0.995 6.平均加样回收率(n=6)分别为101.7％(RSD=0.89％)、99.41％(RSD=2.6％)、96.20％(RSD=2.4％)、99.56％(RSD=2.7％)、101.3％(RSD=1.5％)、103.8％(RSD=1.8％)、99.82％(RSD=1.6％)、100.2％(RSD=1.5％).8个成分在33批样品中含量差别较大,表儿茶素、牡荆素、芦丁和山楂叶苷A在有的样品中检测不到,绿原酸、金丝桃苷、牡荆素葡萄糖苷和牡荆素鼠李糖苷在样品中均能检测到.结论:该方法准确可靠,尤其增加了紫外吸收弱、不宜采用HPLC-UV检测的表儿荼素和山楂叶苷A的测定,为不同产地山楂叶质量控制提供依据.
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毛冬青根中4个绿原酸类及4个皂苷类成分的含量测定
目的:建立HPLC法同时测定毛冬青根中绿原酸,异绿原酸A、B、C,毛冬青皂苷A1、B1、B2,冬青素A共8个成分含量.方法:采用Inertsil ODS-4 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈为流动相A,0.1％磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,检测波长327 nm(绿原酸类成分)、210 nm(皂苷类成分).结果:在上述条件下,绿原酸,异绿原酸B、A、C,毛冬青皂苷B2、A1、B1,冬青素A的质量浓度分别在1.25～12.5、2.96～29.6、3～30、3.45～34.5、13.05～130.5、32.4～324、16.95～169.5、72.8～728 μg· mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=9)均高于95％,RSD均小于3.0％.3批样品中上述8个成分测定结果分别为0.13～0.15、0.23～0.27、0.31～0.37、0.27～0.28、1.24～1.65、2.42～2.86、2.18～2.81、8.29～10.44 mg·g-1.结论:该方法适用于同时测定毛冬青根中8个成分的含量.
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HPLC-DAD-ESI-TOF/MS鉴别和测定前列欣胶囊中多种成分及其多指标定量指纹图谱研究
目的:高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(HPLC-ESI-TOF/MS)联用技术用于前列欣胶囊多种化学成分快速鉴定和测定及多指标定量指纹图谱研究.方法:采用Kromasil 100-5C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.8％甲酸流动相体系进行梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温25℃,检测波长300 nm;利用ESI-TOF/MS法对前列欣胶囊提取物中多种化合物进行鉴别,对已知的活性成分进行定量测定,并建立前列欣胶囊的HPLC指纹图谱.结果:应用HPLC-DAD-ESI-TOF/MS指认了前列欣胶囊提取物中的8个成分(没食子酸、绿原酸、咖啡酸、王不留行黄酮苷、异槲皮苷、丹酚酸B、丹酚酸A、隐丹参酮),定量测定结果表明各化合物线性关系良好(r=0.999 0～0.999 7);平均回收率分别为95.25％、96.85％、98.10％、96.71％、97.87％、95.80％、97.57％和96.74％.10批样品中上述各化合物的质量分数分别为194.39～209.43、242.65～253.32、82.79～86.46、132.45～146.80、169.08～188.13、402.36～429.87、595.75～637.11、112.78～122.92 μg·g-1;10批样品的相似度在0.999 6～1.000 0之间.结论:本研究所建立的活性成分快速鉴别和多指标定量指纹图谱测定方法,为提高前列欣胶囊的质量控制水平提供了技术支持.
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HPLC法测定藏药独一味及其伪品糙苏中7个成分含量
目的:采用高效液相色谱法同时测定藏药独一味及其伪品糙苏中胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和毛蕊花糖苷7个成分的含量,并比较两者成分的差异.方法:采用HSS T3 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～11 min,9％A;11～35 min,9％A→18％A;35～50 min,18％A),流速1.0 mL·min-1,检测波长为235 nm,柱温30℃.结果:50 min内独一味和糙苏的主要色谱峰能够达到完全分离,胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和毛蕊花糖苷质量浓度分别在2.026～81.04 μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)、2.064～82.56μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)、1.924～96.20 μg· mL-1(r=0.999 8,n=6)、1.912～76.48μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)、1.874～74.96 μg· mL-1(r=0.999 8,n=6)、1.948～77.92 μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)和1.890～75.60 μg· mL-1(r=0.999 9,n=6)范围内线性关系良好.11批独一味中胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和毛蕊花糖苷含量范围范围分别为0.265％～0.872％、0.354％～1.058％、0.124％～0.641％、0.182％～ 1.426％、0.121％～0.719％、0.138％～1.301％和0.091％～1.173％;12批糙苏中胡麻属苷、山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B和毛蕊花糖苷含量范围分别为0.196％～0.751％、0.358％～0.652％、0.204％～0.822％、0.101％～0.761％和0.024％～0.682％,均未检出绿原酸和木犀草苷.结论:所建立方法操作简单,具有较好的重复性和稳定性,结合伪品的同时测定,可用于独一味药材的质量控制.
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加速溶剂萃取-高效液相色谱法同时测定全叶千里光中3种成分的含量
目的:建立加速溶剂萃取-高效液相色谱法同时测定全叶千里光药材中绿原酸、芦丁和金丝桃苷3种活性成分的含量.方法:运用正交设计试验优化加速溶剂萃取法(ASE法)的提取工艺,提取样品中的有效成分,比较ASE法、回流提取法和超声辅助提取法的提取效果;采用C18色谱柱,以乙腈-0.3％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1,柱温为25℃,检测波长为350 nm,以高效液相色谱进行分析.结果:正交试验设计优化ASE法,优化得到的佳萃取条件为:以体积分数60％甲醇为提取溶剂,在4.8 MPa和65℃下,静态提取2次,每次17 min,提取液经旋转蒸发浓缩近干,以甲醇溶解并定容.经条件优化后ASE萃取得到的全叶千里光药材中3种主要活性成分的提取效果均高于传统的回流提取法和超声提取法;全叶千里光中绿原酸、芦丁和金丝桃苷3种被测成分的质量浓度分别在1.5～100.0、0.5～80.0和0.5～80.0 mg·L-1范围内与其峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数均大于0.999 0,检出限为0.08～0.15mg·L-1,样品的加标平均回收率为93.5％～102.0％,RSD为0.73％～3.47％(n=3).变种全叶千里光和原变种麻叶千里光中绿原酸、芦丁和金丝桃苷的平均含量分别为1.65和0.77、0.09和0.10、0.68和0.45 mg·g-1.结论:该方法可用于全叶千里光药材中3种主要化学成分的含量测定,其结果可为全叶千里光药材质量控制、合理用药及进一步研究开发提供参考.
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HPLC-DAD同时测定左归丸药液中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、马钱苷、阿魏酸含量
目的:建立同时测定左归丸药液中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、马钱苷、阿魏酸5种化学成分含量的分析方法.方法:采用HPLC-DAD多波长切换-梯度洗脱技术.色谱柱:Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-1％醋酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL· min-1;分别以各成分的大吸收波长为检测波长;柱温:30℃.结果:左归丸药液中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、马钱苷、阿魏酸5种成分均具有良好的线性关系(r≥0.999),平均加样回收率为97.76％～101.8％(RSD＜3％,n=6).3批样品中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、马钱苷、阿魏酸含量分别为0.489 0～0.500 6、0.104 4～0.108 4、0.048 56～0.050 66、1.042～1.061、5.287×10-3～5.369×10-3 mg·mL-1结论:该方法经方法学验证,可用于左归丸药液及其制剂的质量控制.
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HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸的含量
目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸)的含量,并对其在3种不同植物来源的药材中的含量进行比较.方法:采用Shiseido Capcell Pak-C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,加柱后分流器,使约30％洗脱液进入质谱仪,柱温30℃,进样量5μL;质谱采用ESI-多反应监测(MRM)模式扫描,以水杨酸为内标,脱溶剂温度350℃,脱溶剂气流(N2) 600 L· h-1,雾化器压力0.2 MPa,毛细管电压4 kV.结果:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸质量浓度分别在0.032～32.224μg·mL-1(R2=0.999 5)、0.168～16.800μg· mL-1(R2=0.999 4)、0.038～15.104μg·mL-1(R2=0.999 8)、0.010～4.064μg· mL-1(R2=0.999 2)、0.013～5.372μμg·mL-1(R2=0.999 5)、0.079～39.840 μg·mL-1(R2=0.999 5)和0.041～16.208μg·mL-1(R2=0.999 3)范围内线性关系良好;定量限(LOQ)为10.0～19.9 ng· mL-1,平均回收率在94.01％和105.0％之间.样品测定结果显示,山银花中绿原酸和3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸含量较高,分别为1.262％～7.408％和0.636％～4.803％;咖啡酸含量较低,为0.003％～0.022％.通过比较不同植物来源的样品,发现其在有机酸的含量和比例方面存在较大差异.结论:本实验建立的方法灵敏、准确,可用于山银花药材中有机酸的含量测定,测定结果可为该药材质量标准的完善提供依据.
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苹果花粉中异鼠李素和绿原酸鉴别及总黄酮测定
目的:建立苹果花粉的定性定量分析方法以应用于质量研究.方法:采用电镜鉴别观察花粉形态;采用薄层色谱法,以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶0.2)为展开剂,鉴别异鼠李素;以乙酸丁酯-甲酸-水(7∶2.5∶2.5)上层溶液为展开剂,鉴别绿原酸.以芦丁为对照,采用紫外-可见分光光度法测定总黄酮含量,以NaNO2-Al(NO3) 3-NaOH体系显色,在500 nm波长处测定.结果:苹果花粉电镜特征明显;薄层鉴别斑点清晰、易于识别、专属性强;芦丁的质量浓度在0.004～0.048 mg·mL-1范围内与吸光度线性关系良好,r=0.999 3,平均回收率(n=9)为100.4％,苹果花粉总黄酮含量在13.56～46.96 mg·g-1之间.结论:建立的定性、定量分析方法经方法学验证,可有效评价苹果花粉的质量.
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HPLC法同时测定维吾尔药材百里香中6种成分的含量
目的:建立HPLC法同时测定维吾尔药材百里香中绿原酸、咖啡酸、百里香酚、芦丁、迷迭香酸和蒙花苷的含量.方法:采用Agilent ZORBX SB-C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm),以乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,90％B→85％B;10～16 min,85％B→80％B;16～25 min,80％B→50％B;25～35 min, 50％B→30％B;35～40 min, 30％B→20％B;40～45 min, 20％B→10％B;45～60 rmin,10％B→90％B),流速1.OmL·min-1,检测波长300 nm,柱温30℃,进样量10 μL.结果:绿原酸、咖啡酸、百里香酚、芦丁、迷迭香酸和蒙花苷线性范围分别为0.033～0.198 mg·mL-1(r=0.999 9)、0.034～0.204 mg· mL-1(r=0.999 9)、0.008～0.048 mg· mL-1(r=0.999 7)、0.015 5～0.093 mg· mL-1(r=0.999 6)、0.030 2～0.181 2 mg· mL-1(r=0.999 1)和0.090 1～0.540 6 mg· mL-1(r=0.999 4),加样回收率在99.25％～101.4％之间,RSD为0.8％～1.9％.3批百里绿原酸5.009、5.106、5.185 mg·g-1,咖啡酸4.006、4.152、4.220mg·g-1,香药材中百里香酚含量分别为1.024、1.036、1.106 mg·g-1,芦丁1.822、1.863、1.879 mg·g-1,迷迭香酸7.004、7.054、7.164 mg·g-1,蒙花苷20.001、20.16、20.926 mg· g-1.结论:该方法专属性强,能够快速、准确地测定百里香药材中6种指标性成分含量,为更好地控制维吾尔药材百里香的质量并评价其药用价值提供科学数据.
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HPLC-UV-ELSD联用同时测定痰热清注射液中6种成分的含量
目的:建立HPLC-UV-ELSD联用法同时测定痰热清注射液中6种有效成分(原儿茶酸,绿原酸,咖啡酸,黄芩苷,熊去氧胆酸,鹅去氧胆酸)的含量.方法:在相同色谱条件下,采用不同检测器同时测定痰热清注射液中6种有效成分,HPLC-UV法测定原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、黄芩苷,HPLC-ELSD测定熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸.采用Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-4％醋酸水(B)为流动相,线性梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,紫外检测波长300 nm,ELSD漂移管温度70℃.结果:原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、黄芩苷、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸质量浓度分别在0.02～0.42μg·mL-1(r=0.999 6)、0.31～6.12μg·mL-1(r=0.999 3)、0.59～11.84 μg· mL-1(r=0.999 1)、33.24～664.75μg·mL-1(r=0.999 6)、32.02～640.50μg·mL-1(r=-0.999 4)和5.58～111.60 μg·mL-1(r=0.999 8)范围内呈良好的线性关系;平均回收率在97.8％和101.5％之间.结论:该方法专属性强,耐用性好,可用于痰热清注射液中6种成分的含量测定和质量控制.
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一测多评法测定艾叶中6个有机酸类成分的含量
目的:建立同时测定艾叶中6个有机酸类成分含量的一测多评法.方法:采用Thermo Syncronis C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,检测波长325 nm,柱温30℃.以绿原酸为内参物,分别计算与新绿原酸、隐绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸的相对校正因子,实现一测多评.同时利用外标法和一测多评法测定6个有机酸类成分的含量.比较2种方法的测定结果是否存在差异.结果:一测多评法与外标法测定结果无显著差异.实验所测得的相对校正因子重复性良好.6批不同产地艾叶样品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸的含量范围分别为0.15～0.58、0.50～2.65、0.27～0.89、0.62～4.29、1.18～10.72、0.99～6.69 mg·g-1.结论:一测多评法可以用于艾叶中6个有机酸类成分的含量测定,且具有可行性与经济性.
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黑骨藤超高效液相色谱特征图谱的研究
目的:建立黑骨藤(Periploca forrestil Schltr.)超高效液相色谱(UPLC)特征图谱分析方法,为黑骨藤药材品质鉴别提供依据.方法:采用Aglient C18(2.1 mm×100 mm,2.7μm)色谱柱,以甲醇-0.1％磷酸水溶液为流动相,线性梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,柱温40℃,检测波长221 nm,进样量1μL.结果:以杠柳苷和绿原酸为参照物峰,标识出21批样品中有12个共有峰,其相似度均在0.9～1.0之间;四川产地标识15个共有峰,贵州地区标识16个共有峰,广西地区标识19个共有峰,云南地区标识21个共有峰.经过聚类分析和主成分分析,可知四川产地自成一类,贵州产地自成一类,广西和云南自成一类,同一类地区样品之间化学成分种类相差不大.结论:该方法高效、快速,重现性好,能够有效地区别黑骨藤4个产地植物的差异.
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HPLC结合化学计量学对不同产地菊花中化学成分的比较分析
目的:建立一种分析药用菊花中14个成分的HPLC方法,并结合化学计量学方法对不同产地菊花的化学成分进行比较分析.方法:样品以70％甲醇超声提取,采用TC-Cl8色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长348 nm,柱温30℃;应用高效液相色谱法同时测定菊花中14个化合物(绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、槲皮苷、芹菜素、黄芩苷、芦丁、咖啡酸、蒙花苷、香叶木素)的含量,并建立指纹图谱,运用主成分分析与聚类分析对指纹图谱进行模式识别研究.结果:14个化合物的线性范围为0.01～150.0 μg· mL-1,线性相关系数均大于0.999,3个浓度水平加样回收率为91.6％～100％,RSD为0.40％～3.36％.28批样品中绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸含量分别为2.38～7.27、1.98～32.66、3.66～14.01 mg·g-1.聚类分析结果表明28批样品可分为两大类(昆仑雪菊与其他品种菊花),或依据不同品种细分为8小类;主成分分析(PCA)结果显示不同来源的菊花在化学成分的组分和含量上存在不同程度的差异,同时验证了上述分类结果.结论:通过对菊花样品的指纹图谱进行聚类分析和主成分分析,为菊花药材的化学计量学及其质量评价提供参考.结果表明:不同产地菊花中化学成分及含量的差异不仅与菊花品种有关,还与产地、成熟度、储存及加工条件有关.
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HPLC波长切换测定小儿鼻敏口服液中9个成分的含量
目的:建立HPLC波长切换法同时测定小儿鼻敏口服液中绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸共9个成分的含量.方法:采用Insertsustain C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇-0.3％磷酸为流动相,进行梯度洗脱;流速为1.0 mL· min-1,柱温25℃,检测波长327 nm(0～15.5 min,检测绿原酸)、250 nm(15.5～23 min,检测马钱苷)、280 nm(23～41.5 min,检测甘草苷和黄芩苷)、245 nm(41.5～46 min,检测哈巴俄苷)、215 nm(46～50.5 min,检测黄芩素)、250nm(50.5～53 min,检测甘草酸)、276 nm(53～72 min,检测汉黄芩素)、250 nm(72～80 min,检测甘草次酸).结果:各待测组分分离度良好;绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸9个成分的线性范围分别为1.408～140.8 μg·mL-1(r=0.999 9)、3.060～306.0 μg·mL-1(r=0.999 9)、1.984～198.4 μg·mL-1(r=0.999 9)、8.187～818.7 μg· mL-1(r=1.000 0)、5.146～514.6 μg·mL-1(r=0.999 9)、1.172～117.2 μg· mL-1(r=0.999 9)、3.318～331.8μg·mL-1(r=0.999 9)、1.072～107.2μg· mL-1(r=0.999 9)和2.121～212.1 μg· mL-1(r=0.999 8);加样回收率(n=6)分别为99.1％(RSD=1.7％)、98.7％(RSD=1.8％)、98.1％(RSD=2.5％)、100.2％(RSD=1.2％)、97.0％(RSD=2.2％)、99.2％(RSD=2.5％)、98.6％(RSD=1.9％)、99.1％(RSD=2.2％)、99.6％(RSD=2.6％).3批中试样品中绿原酸、马钱苷、甘草苷、黄芩苷、哈巴俄苷、黄芩素、甘草酸、汉黄芩素、甘草次酸9个成分的含量范围依次为0.813～0.827、298～0.312、2.014～2.174、4.125～4.339、0.706～0.712、0.417～0.421、1.025～1.098、0.412～0.425和0.173～0.182 mg· mL-1.结论:本试验建立的含量测定方法符合方法学验证要求,可用于小儿鼻敏口服液的9个指标性成分的同时测定.
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中药菊花基原特征成分的分析
目的:建立菊花药材中6种化合物(绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、山柰酚以及金合欢素)的HPLC含量测定方法及其指纹图谱检测方法,并对所收集到的市售5种药用菊花样品利用主成分分析获取能反映不同菊花样本间基原远近的关键成分.方法:含量测定部分采用YMC-Park ODS-AQ C1s(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.01％磷酸为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,检测波长330 nm,柱温25℃;结合SPSS 16数据分析软件及SIMCA-P主成分分析软件对含量测定的数据进行分析,筛选出对菊花基原判定影响大的特征成分组.结果:含量测定方法学验证结果良好,并且通过含量测定结果的数据分析,确立了与菊花基原判别相关的特征成分组为木犀草素及木犀草苷.结论:本研究所建立的含量测定方法可以用于菊花药材中6种成分的定量分析,主成分分析所筛选出的基原远近的决定性成分因子,能大体上将不同来源的菊花样品按基原归类,为市售菊花基原鉴定提供参考依据.
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独一味的HPLC指纹图谱研究
目的:建立独一味的指纹图谱分析方法用于该药材的质量评价.方法:采用HPLC法,选用Welchrom C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,5％A→8％A;10～ 27 min,8％ A→12％ A;27～35 min,12％ A;35 ～ 70 min,12％ A→17％ A;70 ～ 80 min,17％ A→19％ A;80～110 min,19％ A→36％ A;110～120min,36％ A→50％A),流速1.0 mL· min-1,检测波长235 nm,柱温30℃;用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A”处理分析.结果:对23批独一味地上部分样品指纹图谱进行评价,确定了14个共有峰,指认了第3、4、5、8、9、10、11、12号色谱峰分别对应为胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、马钱苷、8-0-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和麦角甾苷.结论:本研究可更全面、准确地评价独一味药材质量,为该药材的质量控制提供科学依据.
