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藏药独一味药理作用及临床应用新进展
简要综述了独一味及其制剂的药理作用和临床应用研究的新进展,并对其今后的研究方向提出了建议.认为独一味有良好地利用价值和开发潜力,对其研究开发的前景广阔;对其药效的物质基础及作用机理的研究有待深入,尤其应重点关注其疗效确切的镇痛活性.
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HPLC测定青海野生和栽培藏药独一味中山栀苷甲酯
目的:对野生和栽培藏药独一味中山栀苷甲酯成分进行高效液相色谱的含量测定.方法:采用色谱柱WelchromTM Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～11min,9%A;11～35 min,9%～18%A;35～45min,18%A),流速1.0 mL·min-1,检测波长235 nm,柱温为25℃.结果:山栀苷甲酯的线性范围0.25～2.12 mg(r=0.999 8);平均回收率为100.7%,RSD为0.89%.结论:野生和栽培独一味的山栀苷甲酯的含量分别为1.81,0.75 mg·g-1.
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独一味环烯醚萜苷胶囊质量标准研究
目的:制定独一味环烯醚萜苷胶囊的质量标准.方法:以薄层色谱法对本品主成分进行定性鉴别,采用一阶导数法测定总环烯醚萜苷含量,高效液相色谱法测定山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯的含量.结果:薄层色谱法样品与对照品在相同位置斑点清晰;一阶导数分光光度法测得3批总环烯醚萜苷含量均＞50％;山栀苷甲酯、8-O-乙酰山栀苷甲酯与其他组分基线分离且峰形较好,测得3批样品平均含量为73.96,72.43 mg·g-1.结论:该方法可以用于独一味环烯醚萜苷胶囊的质量控制.
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独一味不同提取物中总环烯醚萜苷、总黄酮和总苯乙醇苷的测定
目的:考察独一味不同提取物中总环烯醚萜苷、总黄酮和总苯乙醇苷的含量.方法:独一味水提物经聚酰胺和大孔树脂通过串联及并联方法,分别富集得到水洗脱物、70％乙醇溶液洗脱物Ⅰ(70％乙醇溶液洗脱聚酰胺柱)、70％乙醇溶液洗脱物Ⅱ(70％乙醇溶液洗脱大孔树脂柱),采用一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量;双波长紫外分光光度法、硝酸铝-亚硝酸钠显色分光光光度法测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量.结果:建立的一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量,在252 nm波长处加样回收率为104.40％,RSD分别为0.64％;建立的紫外分光光度法可以测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量,总黄酮在268,363 nm波长处平均加样回收率分别为96.23％,104.48％,RSD分别为7.27％,3.61％;总苯乙醇苷在332 nm波长处加样回收率为100.26％,RSD 2.92％.结论:一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷的含量可行;紫外分光光度法可以测定总黄酮和总苯乙醇苷的含量.
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独一味镇痛止血有效部位的富集工艺
目的:对独一味镇痛止血有效部位的富集工艺进行研究.方法:采用二甲氨基苯甲醛法测定总环烯醚萜含量、HPLC测定8-epideoxyloganic acid含量,以正交试验法和单因素试验法筛选提取工艺和大孔吸附树脂分离条件.结果:佳提取工艺为用10倍60%乙醇渗漉提取,浸泡36 h,渗漉速度5 mL·min-1·kg-1.纯化工艺为将提取物上聚酰胺柱,水洗脱部分上XDA-7大孔吸附树脂,收集30%醇洗脱部分.结论:XDA-7型树脂对独一味中环烯醚萜苷的富集能力优于其他树脂.洗脱溶剂30%乙醇能较好地洗脱环烯醚萜苷类成分.
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工业化提取分离纯化独一味总环烯醚萜苷类成分
目的:应用大孔吸附树脂结合聚酰胺柱色谱法富集分离独一味中总黄酮、总环烯醚萜苷类极性成分,实现工业化生产.方法:用系列色谱设备进行分离富集,一阶导数紫外分光光度法测定总环烯醚萜苷含量、高效液相色谱法测定山栀苷甲酯,8-O-乙酰山栀苷甲酯,并考察不同洗脱条件下有效成分总环烯醚萜苷的变化.结果:采用70%乙醇溶液为溶媒.大孔吸附树脂柱用"下进上出"的进样方式和"上进下出"的洗脱方式时,得率为20.80%,总环烯醚萜苷、山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯的转移率分别为70.77%,76.36%,68.74%.结论:生产工艺方法及参数可以成功地将实验成果转化为工业化生产.
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8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯在大鼠体内的药代动力学分析
目的:建立超高效液相串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测大鼠体内8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯血药浓度的方法,并考察二者在大鼠体内的药代动力学过程.方法:利用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品,检测条件为流动相乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～1.5 min,20％～60％A;1.5～2 min,60％ ～ 95％A;2～2.5 min,95％A;2.5 ～2.6 min,95％ ～20％A;2.6～3 min,20％A),流速0.4 mL· min-1,柱温40℃,进样量2 μL,内标物为芦丁;采用正离子多离子反应监测(MRM)扫描.结果:血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯的线性范围均为1～250 μg· L-1,定量下限均为0.2 μg·L-1.低、中、高质量浓度8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯质控样品的日内、日间精密度RSD均＜8.8％;8-O-乙酰山栀苷甲酯的相对回收率依次为(103.89±9.18)％,(99.34±6.63)％和(95.88±3.69)％;山栀苷甲酯的相对回收率分别为(105.33±8.64)％,(101.55±1.22)％和(96.89±5.42)％.结论:该方法操作简便、快捷、灵敏度高,适用于大鼠血浆中8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯的药代动力学研究.
关键词： 独一味 8-O-乙酰山栀苷甲酯 山栀苷甲酯 药物代谢 超高效液相串联质谱法 -
独一味幼苗生理特性和次生代谢产物对遮阴的响应
目的:研究遮阴处理对独一味幼苗生长和化学成分的影响,探索独一味对光照环境变化的适应机制,为幼苗期合理管理提供科学依据.方法:以二年生独一味幼苗为研究对象,测定遮阴处理处理后幼苗形态指标(叶面积、根长),生理指标[丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)活性等]和主要次生代谢产物8-O-乙酰山栀苷甲酯和山栀苷甲酯含量.结果:遮阴处理显著降低了独一味幼苗根长、单株叶片数目、叶面积、生物量和根冠比(P＜0.05),并显著增加了地上叶部分的生物量分配,全光照使更多的生物量分配至地下根.遮阴处理不仅显著降低了独一味叶片中叶绿素、脯氨酸和可溶性糖的含量(P＜0.01),还极显著地增加了叶片中过氧化物酶的含量(P＜0.01).遮阴处理显著降低了独一味根及地上部分中8-O-乙酰山栀苷甲酯的含量及山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯总含量(P＜0.05).结论:遮阴管理显著增加了独一味地上即药用部位的生物量;高原光照可能为独一味带来逆境效应,有利于独一味生物量积累,并促进2种环烯醚萜苷化合物的代谢,因此育苗管理应注意控制遮阴强度和时间.二年生独一味幼苗中化学成分含量符合2015年版《中国药典》规定,表明通过栽培可以满足资源供给.
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LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中6种独一味成分
目的:开发建立独一味药材中芹菜素、木犀草素、木犀草苷、绿原酸、毛蕊花糖苷和连翘酯苷B6种成分在大鼠血浆中的同步定量分析方法.方法:采用蛋白沉淀法进行样品前处理,选用安捷伦ZORBAXSB-C18(2.1mm × 150mm i.d.,3.5μm)色谱柱及梯度洗脱法进行色谱分离,运用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术在多重反应监测(MRM)模式下进行样品测定,并从专属性、线性范围、准确度、精密度、回收率、介质效应和稳定性等方面对方法学进行了系统的验证.结果:在13min的分析时间内,能够实现对6种目标化合物的准确定量,方法学验证中的各项指标均符合生物样品分析的要求.结论:所建立的分析方法准确、灵敏、可靠,可用于研究独一味药材给药后相应成分在大鼠血浆中的暴露情况,为药材的质量分析和控制提供科学依据,也为该药材体内过程和效应机制的研究奠定了基础.
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独一味颗粒对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的:探讨独一味颗粒对实验性肝纤维化大鼠TGF-β 1/Smads信号通路的影响.方法:78只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、独一味高、中、低剂量组共6组,每组13只.用CCL诱导大鼠肝实质损伤性纤维化模型,模型组及各给药组皮下注射40％ CCL4油剂(首剂5ml/kg,其后3mL/kg),正常对照组注射等量橄榄油,每3 d1次,连续8周,同时模型组及各给药组进食高脂饲料,正常对照组进食普通饲料.独一味治疗组自实验开始分别给予高(2.4 g/kg)、中(1.2 g/kg)、低剂量(0.6 g/kg)独一味颗粒灌胃,模型组和对照组灌等量生理盐水.用药至第8周CCl4造模结束.实验结束后,全部大鼠股动脉放血处死,离心分离血清,放射免疫法测定血清中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、血清层黏连蛋白(Laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagentype Ⅲ,PCⅢ)及Ⅳ型胶原(IV-C)的含量.迅速切取大鼠肝脏标本,光学显微镜下观察肝脏组织形态和纤维增生等情况,免疫组化测定肝组织中TGF-β 1、Smad 3蛋白表达.结果:独一味治疗组肝小叶结构存在,排列欠整齐,可见少量炎细胞浸润,程度较模型组减轻,纤维增生不明显.与模型组比较,独一味治疗组模型大鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C含量明显降低(P＜0.01～0.05),肝组织中TGF-β 1、Smad 3蛋白表达显著下降(P＜0.01).结论:独一味具有较好的抗纤维化作用,其机制可能抑制TGF-β 1的表达,干扰TGF-β 1/Smad信号通路对靶基因的激活,下调Smad 3表达而抑制ECM的合成和沉积,进而发挥抗纤维化作用.
关键词： 肝纤维化 独一味 TGF-β1/Smads 免疫组化法 -
独一味对大鼠佐剂性关节炎防治作用的实验研究
目的:观察独一味对大鼠佐剂性关节炎的防治作用.方法:用完全弗氏佐剂制作大鼠关节炎模型,观察独一味的影响.结果:独一味预防给药可减轻大鼠致炎侧足肿胀,也能抑制对侧足肿胀.与模型组比较,足客积差异有统计学意义(P＜0.05).致炎第19天大鼠关节炎综合评分,独一味组和模型组差异有显著统计学意义(P＜0.01),独一味治疗性给药可使大鼠致炎对侧足的肿胀明显减轻.结论:独一味能明显抑制大鼠佐剂性关节炎原发病变和继发病变的形成,对继发病变有较显著的治疗效果,其减轻肿胀的作用可能与抑制炎性组织PGE2的释放有关.
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前列安通片治疗慢性前列腺炎100例疗效分析
2002年1月～2002年12月间,我院应用前列安通片(甘肃独一味生物制药有限责任公司产品,批号047414)治疗慢性前列腺炎,并设前列康胶囊(甘肃河西制药厂产品,批号020810)为对照.按设计要求,治疗组(前列安通片)观察病例100例,对照组(前列康胶囊)观察病例50例,已完成各项观察指标,现总结如下.
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脉平片治疗冠心病心绞痛113例疗效分析
2001年4月～2002年4月,笔者应用脉平片(甘肃独一味药业有限责任公司生产,生产批号:0109306121)治疗冠心病心绞痛,症见左胸憋闷疼痛,伴心悸,舌黯瘀斑,中医证属瘀血闭阻型胸痹患者113例,取得较好疗效,现将临床疗效分析如下.
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参芪五味子片合化疗对恶性肿瘤术后患者的影响
目前,根治性手术切除为治疗多种恶性肿瘤的有效方法.术后辅助性放、化疗在少数肿瘤治疗上取得了一定的疗效,但对于多数肿瘤并未取得提高术后无瘤生存率的效果[1].因放化疗在杀伤肿瘤细胞的同时,也损伤正常组织,使患者生存率难于提高,而中药制剂在这方面已初步显示了一定的治疗价值[2].笔者应用甘肃独一味生物制药有限公司生产的参芪五味子片合化疗治疗恶性肿瘤根治术后患者46例,取得了较满意疗效,现总结如下.
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大孔树脂富集纯化藏药独一味总环烯醚萜苷
目的:进行藏药独一味止血活性成分总环烯醚萜苷的富集纯化.方法:以一阶导数分光光度法检测,以总环烯醚萜苷含量为跟踪指标,比较10种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分的吸附与解吸附条件,优选佳的纯化工艺.结果:富集后总环烯醚萜苷的含量达到67.53%.结论:XDA-1型大孔吸附树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分有较好的吸附能力,50%乙醇溶液解吸附快速有效.树脂重复利用度高.
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藏药独一味及其伪品HPLC特征图谱和4种成分含量测定
采用高效液相色谱法建立独一味及其伪品的特征图谱,并同时测定4种主要成分的含量.以绿原酸、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷和木犀草苷为对照品,采用Waters XSelect C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5μm),乙腈-0.5％磷酸水溶液(18∶82)为流动相,检测波长332nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃进行试验,采用CHEMPATTERN化学计量学软件对结果进行处理分析.不同批次的独一味特征图谱相似度高,和伪品比较相似度均小于0.65,采用聚类分析和主成分分析均能将伪品区分.所建立的独一味特征图谱专属性强,可结合4种主要有效成分含量测定全面控制独一味的质量,为规范独一味药材的使用提供科学依据.
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独一味化学成分及其活性的研究
目的:研究独一味的化学成分及其活性.方法:采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱分离纯化化合物,运用理化鉴别及波谱分析技术鉴定化合物结构.采用醋酸扭体法、小鼠断尾止血时间和二甲苯致耳肿胀抗炎试验,测定化合物活性.结果:从独一味乙醇渗漉提取物中分得5个化合物,其中化合物8-epideoxyloganic acid为从该属植物中首次分得.与中成药独一味片组比较,8-epideoxyloganic acid的低、高剂量组均有明显的镇痛、止血作用,高剂量组有明显的抗炎作用.结论:8-epideoxyloganic acid为独一味中镇痛、止血、抗炎的有效成分之一.
关键词： 独一味 8-epideoxylogmc acid 镇痛 -
HPLC同时测定独一味中7种成分含量
目的:建立高效液相色谱法同时测定独一味中7种成分含量的方法.方法:采用HPLC,Welchrom C18色谱柱,乙睛-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱系统,体积流量1.0 mL·min-1,检测波长为238,330,350 nm,柱温30℃.结果:7种成分的分离度良好,标准曲线在线性范围内相关性良好,加样回收率均值为96.47％ ～ 102.2％,RSD为0.70％～2.2％.结论:地上部分各成分组间具有较好的相关性,地上部分样品中山栀苷甲酯和8-O-乙酰山栀苷甲酯总量的均值为1.44％.地上部分比地下部分成分种类更多,含量更高,以地上部分入药更合理.所建立方法操作简单,具有较好的重复性和稳定性,可用于独一味药材的鉴别及质量评价.
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基于UPLC的独一味中8种成分测定及其含量影响因素初步研究
建立同时测定独一味中胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、咖啡酸、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷和麦角甾苷8种成分含量的方法.采用Kinetex XB-C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,2.6 μm)以乙腈(A)-O.1％磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0 ～ 10 min,6％ ～14.5％ A;10～18.5 min,14.5％ ～17％ A;18.5～23 min,17％ ～ 18％A),流速1.0 mL·min-1,检测波长238,320,350 nm,柱温30℃.结果发现8个成分分离度良好,在线性范围内呈现良好的线性关系(r≥0.999 8),平均加样回收率96.61％ ～ 100.4％.该方法操作简便,专属性好,精密度高,可用于独一味药材的鉴别及质量评价.研究表明,独一味各类成分之间具有相关性;产地是影响独一味成分含量的主要因素;退化梯度对其含量影响不明显;样品储藏一年后胡麻属苷含量显著降低.
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不同产地独一味中苯乙醇苷类的含量测定与品质评价
独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo为唇形科独一味属植物,主要分布于西藏、青海等省,为藏族和蒙古族等民间传统常用草药.具有消炎止痛,活血化瘀等功效,用于治疗跌打损伤,外伤出血,筋骨疼痛,骨质疏松等症.独一味主要含有黄酮类、环烯醚萜类、苯乙醇苷类等成分.目前尚未见有关独一味中苯乙醇苷类含量测定方法的报道.作者建立了独一味中苯乙醇苷类的HPLC含量测定方法,并且分别对不同产地的独一味药材进行了苯乙醇苷类的含量测定和比较,为药材的选优及临床用药提供一定的参考依据.
