首页 > 文献资料
-
独一味颗粒对实验性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的:探讨独一味颗粒对实验性肝纤维化大鼠TGF-β 1/Smads信号通路的影响.方法:78只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、独一味高、中、低剂量组共6组,每组13只.用CCL诱导大鼠肝实质损伤性纤维化模型,模型组及各给药组皮下注射40％ CCL4油剂(首剂5ml/kg,其后3mL/kg),正常对照组注射等量橄榄油,每3 d1次,连续8周,同时模型组及各给药组进食高脂饲料,正常对照组进食普通饲料.独一味治疗组自实验开始分别给予高(2.4 g/kg)、中(1.2 g/kg)、低剂量(0.6 g/kg)独一味颗粒灌胃,模型组和对照组灌等量生理盐水.用药至第8周CCl4造模结束.实验结束后,全部大鼠股动脉放血处死,离心分离血清,放射免疫法测定血清中透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、血清层黏连蛋白(Laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagentype Ⅲ,PCⅢ)及Ⅳ型胶原(IV-C)的含量.迅速切取大鼠肝脏标本,光学显微镜下观察肝脏组织形态和纤维增生等情况,免疫组化测定肝组织中TGF-β 1、Smad 3蛋白表达.结果:独一味治疗组肝小叶结构存在,排列欠整齐,可见少量炎细胞浸润,程度较模型组减轻,纤维增生不明显.与模型组比较,独一味治疗组模型大鼠血清中HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C含量明显降低(P＜0.01～0.05),肝组织中TGF-β 1、Smad 3蛋白表达显著下降(P＜0.01).结论:独一味具有较好的抗纤维化作用,其机制可能抑制TGF-β 1的表达,干扰TGF-β 1/Smad信号通路对靶基因的激活,下调Smad 3表达而抑制ECM的合成和沉积,进而发挥抗纤维化作用.
关键词： 肝纤维化 独一味 TGF-β1/Smads 免疫组化法 -
中医药对肝纤维化TGF-β1／Smads信号转导通路的调控作用
目的：研究中医药对肝纤维化TGF-β1/Smads信号转导通路的作用。方法查阅近年文献资料，汇总中医药抗肝纤维化的作用机制，阐述TGF-β1/Smads信号转导通路在肝纤维化中的作用及中医药对其调控。结果 TGF-β1/Smads信号转导通路是肝纤维化发生发展的重要机制，中医药对其有调控作用。结论中医药抗肝纤维化的作用机制之一为其对TGF-β1/Smads信号转导通路的调控。
关键词： 中医药 肝纤维化 TGF-β1/Smads -
三七对酒精肝大鼠肝组织TGF-β1/Smads,CTGF表达量的影响
目的:研究三七对酒精性肝损害大鼠肝脏TGF-β1/Smads,CTGF的影响,探讨三七对酒精性肝硬化的保护作用机制.方法:50只SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、三七高、低剂量组、异甘草酸镁组,除对照组外大鼠灌服白酒-玉米油-吡唑混合液14周建立酒精性肝病模型,造模同时三七高、低剂量组分别灌服12,3 g·kg-1,异甘草酸镁组腹腔注射24 mg·kg-1,每天给药1次,连续14周.测定肝功能、大鼠肝脏Masson染色病理学检查,以及各组大鼠肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7,CTGF mRNA的表达量.结果:与模型组比较,治疗组能明显降低肝脏ALT,AST,抑制胶原纤维沉积,减少肝组织TGF-β1,Smad3,CTGF mRNA的表达量,增加Smad7 mRNA的表达量,三七组不同剂量组之间存在显著性差异,高剂量三七组与异甘草酸镁组之间无显著性差异.结论:三七可以影响TGF-β1/Smads信号通路,减少CTGF表达.
关键词： 三七 酒精性害 TGF-β1/Smads CTGF -
血塞通对AMI后心肌重塑及TGF-阻/Smads通路的干预研究
目的 通过研究血塞通在大鼠急性心梗后心肌重塑中的干预作用及对TGF-β1/Smads通路的影响,探讨血塞通对急性心梗后心肌重塑的效应机制,为血塞通治疗急性心梗后心肌重塑提供实验依据.方法 清洁级Wistar雄性大鼠50只随机分为5组,分别为正常组、模型组、假手术组、血塞通组、基质细胞衍生因子-1受体阻断剂(AMD3100)组,每组10只.血塞通组大鼠术前3天给药,1次/d.7d后,实时荧光定量RT-PCR检测心肌组织转化生长因子(TGF)β1 mRNA、Smad3mRNA、Smad7mRNA表达,分析各组非梗死区心肌胶原含量,并观察心肌组织HE染色结果.结果 与假手术组相比较,模型组心肌组织TGF-β1 mRNA、Smad3mRNA表达均增加(P＜0.05),而Smad7mRNA表达降低(P＜0.05).与模型组相比较,血塞通组能降低心肌组织TGF-β1 mRNA、Smad3mRNA表达(P＜0.05),增加Smad7mRNA表达(P＜0.05),降低心肌胶原含量,并能减轻心肌组织的病理损伤.血塞通组与AMD3100组相比较,TGF-β1 mRNA、Smad3mRNA、Smad7mRNA表达均无明显差异(P＞0.05).结论 血塞通对急性心梗后心肌重塑有一定抑制作用.
关键词： 血塞通 急性心肌梗死 心肌重塑 TGF-β1/Smads 大鼠 -
PGD2调控TGF-β1/Smads在支气管哮喘中的实验研究
目的：观察PGD 2对小鼠肺成纤维细胞生物学特性的影响，利用其受体特异性抑制剂Laropiprant调控TGF-β1/Smads在支气管哮喘中的研究。方法根据Laropiprant的浓度将细胞分组，每组分别加入TGF-β2（2.5 ng/mL）培养24 h后用Laropiprant刺激24 h，分别用PCR法、WB法检测细胞TGF-β1、smad 3和smad 4的表达。采用不同浓度的Laropiprant作用于细胞不同时间，通过MTT法检测Laropiprant对细胞生长的抑制作用。结果随着Laropiprant的浓度增加，细胞中TGF-β1、smad 3及smad 4的mRNA和蛋白的表达呈下降趋势，与正常对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同浓度的Laropiprant作用于细胞不同时间后，其抑制率随浓度增高和作用时间增长呈下降趋势。结论 L-929小鼠肺成纤维细胞的中PGD2-DP 1的表达可能与TGF-β1/Smads的调节相关。Laropiprant作用于细胞后，其抑制率随浓度增高和作用时间增长呈下降趋势。
-
TGF-β1/Smads信号通路失调控与肝胆胰纤维化疾病
转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)是目前已知的与组织纤维化形成关系为密切的细胞因子,它通过胞浆中的中介分子Smads将刺激信号传递至细胞核,发挥生物学作用.
关键词： TGF-β1/Smads 肝星状细胞 成纤维细胞 胰腺星状细胞 纤维化 -
CHIP调节UUO再通大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路的研究
目的:利用基因芯片研究Carboxyl terminus of Hsc70 - interacting protein(CHIP)对肾间质纤维化TGF- β1/Smads信号通路的抑制性调节.方法:将18只SPF级SD大鼠中6只行unilateral ureteral occlusion (UUO)模型,6只植入弹性管脂肪垫加压梗阻,7天后再通定为reverse of unilateral ureteral occlusion(RUUO)组,6只UUO在7天处死留取左肾组织,另外6只为假手术组.6只RUUO大鼠在再通7天后处死,留取左侧肾组织,运用Westem blotting检测肾组织CHIP的表达,免疫组化检测肾组织中α- SMA、CD68的阳性表达面积,定制芯片研究TGF- β1/Smads信号通路的基因变化.结果:UUO组TGF - β1、smad2、smad3、COLla2、JunB基因显著上调,和假手术组比较上调超过1.5倍,肾组织中的α- SMA、CD68表达面积和假手术组比较有显著统计学意义P＜0.01.而RUUO组CHIP表达量较UUO组更是显著增强P＜0.01,TGF - β1、smad2、smad3、COL1a2、JunB基因显著下调,和UUO组比较下调超过1.5倍,肾组织中的α- SMA、CD68表达面积减小和UUO组比较有显著统计学意义P＜0.01.结论:发现CHIP的过量表达能显著降低细胞内,TGF-β1、Smad2/3、COL1a2、JunB基因水平,Western blot 结果也表明CHIP蛋白表达能明显降低Smads介导的基因转录活性,进一步的基因芯片结果显示CHIP蛋白能明显下调TGF-β1所诱导的下游基因JunB的表达.结果提示CHIP蛋白能抑制性调节TGF -β1/Smads信号通路,抑制肾纤维化.
-
白藜芦醇对小鼠肾纤维化TGF-β1/Smads信号转导通路的干预研究
目的:观察白藜芦醇对单侧输尿管梗阻(UUO)构建的小鼠肾纤维化模型TGF-βJSmads信号转导通路的影响,探讨其对肾纤维化的干预作用及其机制.方法:40只雄性ICR小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,UUO模型(UUO)组,UUO+白藜芦醇低剂量(20 mg/kg)治疗(ResL)组,UUO+白藜芦醇高剂量(40 mg/kg)治疗(ResH)组,UUO+氯沙坦(10 mg/kg)治疗(Los)组,每组8只.均于术后当天灌胃给药,每24h 1次.14 d时处死小鼠,留取血清检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾组织行HE和Masson染色,观察病理结果,实时荧光定量PCR检测肾组织TGF-β1、Smad2、Smad7mRNA的表达.结果:白藜芦醇可以减轻肾组织纤维化的病理损害,使肾组织TGF-β1、Smad2 mRNA表达降低,Smad7 mRNA表达升高(P＜0.05,部分P＜0.01),以高剂量组改善显著.结论:白藜芦醇可呈剂量相关性下调TGF-β1、Smad2及上调Smad7来抑制TGF-β1/Smads信号转导通路,从而发挥抗肾间质纤维化的作用.
关键词： 白藜芦醇 肾纤维化 TGF-β1/Smads UUO -
替米沙坦对4%高盐饮食诱导肾脏纤维化的保护作用
目的 探讨替米沙坦对4%高盐饮食诱导肾脏纤维化的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠36只,随机分为普食组(0.5%正常盐);高盐组(4%高盐);高盐+替米沙坦组(4%高盐+替米沙坦40 mg·kg-1·d-1),每组12只.每4 w用鼠尾无创测压仪测量鼠尾动脉压;24 w末用代谢笼收集尿液,测定24 h尿微量白蛋白(MAU)、血尿肌酐(Cr)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肾皮质形态,Masson染色观察肾小球纤维化;Western印迹法检测皮质区α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、转化生长因子(TGF)-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad7蛋白的表达.结果 与普食组相比,高盐组及高盐+替米沙坦组大鼠尾动脉收缩压显著升高(P<0.05),双肾重/体重、24 h尿MAU显著增高(均P<0.05),内生肌酐清除率(Ccr)显著降低(P<0.05);肾小球的纤维化指数明显增高(P<0.05);肾脏皮质区的TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达显著增高(P<0.05).与高盐组比较,高盐+替米沙坦组大鼠尾动脉收缩压明显降低(P<0.05),24 h尿MAU显著下降(P<0.05),肾小球的纤维化指数明显降低(P<0.05),上述各蛋白表达也显著降低(均P<0.05).结论 长期4%高盐摄入可诱导Wistar大鼠TGF-β1/Smads信号通路表达增高导致肾脏纤维化;替米沙坦可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路减轻肾脏损伤.
关键词： 高盐 TGF-β1/Smads 肾脏纤维化 替米沙坦 -
川芎嗪对人肝癌细胞TGF-阻/Smads通路的影响
目的:研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对人肝癌细胞TGF-β1/Smads通路的影响,以探讨其抑制肝癌的原因.方法:将人肝癌细胞分为4个组,即对照组和不同质量浓度的TMP组(0.04、0.2、1.0 mg·ml-1),各组给予对应药物干预24 h,CCK-8细胞计数法测定细胞增殖水平的变化,real-time PCR方法检测各组肝癌细胞TGF-β1、Smad4及Smad7 mRNA表达,Western blotting方法检测各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达.结果:在TMP干预24 h后,肝癌细胞的增殖明显受到抑制,肝癌细胞TGF-β1及Smad7的mRNA及蛋白表达明显下调,而Smad4的mRNA及蛋白表达明显上调(均P＜0.05),呈现浓度依赖性.结论:TMP的抗肝癌作用可能与它对肝癌细胞TGF-β1/Smads通路的调控有关.
关键词： 肝癌 TGF-β1/Smads 川芎嗪 -
TGF-β1/Smads信号通路与肝纤维化
肝纤维化是肝脏对各种刺激的创伤性愈合,主要表现为细胞外基质的过量沉积.肝星形细胞(HSC)被认为是引起肝纤维化的主要细胞,它的活化受到多种细胞因子的调节.TGF-β1在启动和促进HSC向肌成纤维细胞转化的过程中有着重要作用,是目前已知重要的敛肝纤维化细胞因子之一.此文就TGF-β1/Smads信号通路在肝纤维化发病机制及其治疗方面的作用进行综述.
关键词： 肝硬化 TGF-β1/Smads 信号通路 -
疏肝健脾活血方对大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的 探讨疏肝健脾活血方含药血清对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)的转化因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路相关基因表达的影响.方法 利用病毒转染得到沉默Smad4基因(Smad4 RNAi)的HSCs-T6细胞株(Smad4 RNAi HSCs-T6).HSCs-T6细胞株随机分为空白对照组、TGF-β1模型组、TGF-β1+含药血清组;Smad4 RNAi HSCs-T6细胞株随机分为Smad4 RNAi组、Smad4RNAi+TGF-β1模型组、Smad4 RNAi+TGF-β1+含药血清组.各组干预后酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HSC-T6细胞Smad2、Smad3、Smad4、Smad7 mRNA相对表达量.结果 TGF-β1促进HSC的Ⅰ型胶原表达[(40.88 ±5.49) pg/mL比(26.42±3.33)pg/mL,P＜0.05]及Smad2、Smad3、Smad7表达[TGF-β1模型组:(1.51±0.10)、(1.27±0.21)、(3.76±0.59);空白对照组:(1.07±0.10)、(1.00±0.09)、(1.00±0.09),P＜0.05],含药血清干预下HSC的Ⅰ型胶原表达下调[(26.40±3.30)pg/mL比(40.88±5.49)pg/mL,P＜0.05]及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7表达下调[TGF-β1+含药血清组:(0.31±0.02)、(0.16±0.09)、(0.31±0.30)、(0.38±0.30);TGF-β1模型组:(1.51±0.10)、(1.27±0.21)、(1.28±0.26)、(3.76±0.59),P＜0.05],沉默Smads4基因后得到相同结果(P＜0.05).结论 疏肝健脾活血方在离体条件下可以延缓肝纤维化的进程,其机制可能与阻断TGF-β1/Smads信号通路有关.
-
TGF-β1/Smads信号通路在泌尿系疾病中作用的研究进展
转化生长因子β1 (TGF-β1)/Smads信号通路在众多疾病发病过程中发挥着重要的作用,除影响细胞的生长发育、组织修复外,还导致肿瘤的发生.近年来,其在泌尿系疾病中的作用越来越受到人们的重视,本文对TGF-β1/Smads信号传导通路在泌尿系疾病作用的研究进展作一综述.
-
苯肾上腺素对腹主动脉缩窄诱导心肌间质纤维化的影响
目的 观察苯肾上腺素对腹主动脉缩窄导致心肌纤维化的作用及可能机制.方法 雄性昆明(KM)小鼠42只,体重24～30 g,其中28只采用腹主动脉缩窄术(AAC)建立压力超负荷诱导心肌反应性纤维化的动物模型,8周后将模型小鼠随机分为4组,AAC组、苯肾上腺素(PE)组(AAC+PE组)、哌唑嗪(Praz)组(AAC+Praz组)和普萘洛尔(Prop)组(AAC+Prop组),每组7只,其中AAC+PE组给予PE 0.65 mg/(kg·d)腹腔注射,AAC+Praz组予Praz 5 mg/(kg·d)灌胃,AAC+Prop组给予Prop 10 mg/(kg·d)灌胃,AAC组给等量生理盐水灌胃,连续4周;另设空白对照组及假手术组各7只,其中假手术组只分离腹主动脉而不结扎,二组均给予等量生理盐水持续灌胃.给药4周后处死动物,取左心室游离壁组织,HE染色观察组织细胞形态学变化,胶原容积分数(CVF)、羟脯氨酸(Hyp)含量测定及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白免疫组化染色观察心肌胶原,Western blot方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达.结果 ACC术后12周小鼠心脏均发生明显纤维化,与空白对照组相比,CVF、Hyp含量显著升高(P＜0.01),Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增多(P＜0.01),α-SMA、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白表达增加(P＜0.01),假手术组CVF、Hyp含量以及α-SMA、TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化不明显.与AAC组比较,AAC+PE组和AAC+Prop组左心室CVF、Hyp含量及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达均明显减少(P＜0.01),α-SMA、TGF-β1、p-Smad2和p-Smad3的蛋白表达水平降低(P＜0.05),而AAC+Praz组上述各指标无明显变化(P＞0.05);AAC+PE组与AAC+Prop组相比,上述指标均无统计学差异(P＞0.05).结论 苯肾上腺素可能通过TGF-β1/Smads信号通路改善压力超负荷介导的小鼠心肌间质纤维化,其作用与普萘洛尔相似.
关键词： 苯肾上腺素 α1-肾上腺素能受体 心肌纤维化 信号通路 TGF-β1/Smads -
针刺对气道重塑小鼠TGF-β1/Smads通路的影响
目的 探讨针刺对气道重塑小鼠肺组织TGF-β1/Smads信号通路的调控作用.方法 将30只SPF级小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组,10只/组.模型组、针刺组制作小鼠哮喘模型.针刺组自造模之日起第10天行针刺操作,穴取肺俞、大椎、足三里(两侧),每次留针20 min,隔日针刺1次,共治疗7次.并于后1次针刺结束后24 h行1％卵蛋白雾化吸入3 d,后1次激发后24 h于不同浓度乙酰甲基氯化胆碱(Mch)吸入下通过无创体积描计器检测小鼠肺阻力,然后采用HE染色法观察小鼠肺组织的病理变化,ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中TGF-β1的表达,Western blot对各组气道平滑肌中差异蛋白进行检测.将针刺组分离提取气道平滑肌细胞,空白组加入PBS液,抑制组加入TGF-β1抑制剂(LY2157299)分别进行培养,然后Western blot检测两组细胞type-I及Smads蛋白表达相对量.结果 模型组小鼠气管痉挛明显,管腔狭窄,支气管黏膜增厚,部分上皮细胞脱落,肺泡隔增厚,气道平滑肌明显增厚;针刺组较模型组有明显改善;不同浓度Mch激发后模型组小鼠肺阻力高,较其它两组均差异有统计学意义(P<0.05).且3组小鼠的肺阻力都随着Mch的浓度加大而增加.模型组血清中TGF-β1阳性表达OD值较空白组增加(P<0.05);针刺组阳性表达低于模型组(P<0.05).针刺组BALF中TGF-β1含量低于模型组(P<0.05)高于空白组(P<0.05).模型组气道平滑肌中α-SMA、TGF-β1及Smads蛋白表达相对量均高于针刺组及空白组(均P<0.05),抑制组细胞中type-I及Smads蛋白表达相对量较空白组高(P>0.05).结论 针刺能通过抑制气道TGF-β1的表达,下调Smads及α-SMA的表达来抑制气道重塑,减轻哮喘气道炎性反应,且抑制TGF-β1后,type-I及Smads蛋白表达相对量较高,针刺可以通过TGF-β1/Smads通路来控制哮喘进展,为临床上哮喘的治疗提供理论依据.
关键词： 针刺 气道重塑 TGF-β1/Smads 哮喘 -
PPAR-α/γ激动剂对代谢综合征大鼠模型心室重构中MMP-9表达和TGF-β/Smads通路的影响
目的 探讨PPAR-α/γ激动剂对代谢综合征(Metabolic syndrome,MS)大鼠模型心室重构中MMP-9表达和TGF-β Smads通路的影响及意义.方法 60％果糖饮食喂养雄性SD大鼠构建MS大鼠模型并随机分组:模型对照组(MC组,n=10)、非诺贝特组(FEN组,n=11)、吡格列酮组(PIO组,n=10)、非诺贝特+匹格列酮组(FEN+PIO组,n=11),正常对照组(NC组,n=6).NC组大鼠用普通标准饲料喂养,FEN组和PIO组大鼠分别加用非诺贝特30 mg/(kg·d)及吡格列酮3 mg/(kg·d)灌胃;FEN+PIO组大鼠加非诺贝特30 mg/(kg·d)和吡格列酮3 mg/(kg·d)灌胃,干预4周后RT-PCR方法检测PPAR-α/γmRNA水平,免疫组化方法检测MMP-9和TGF-β1蛋白表达.结果 MC组PPAR-α/γmRNA的结果均低于NC组,差异具有统计学意义(P＜0.05).FEN组PPAR-α mRNA (0.59±0.03)和PPAR-γmRNA(0.61±0.03)均高于MC组,低于NC组,差异具有统计学意义(P＜ 0.05); PIO组PPAR-α (0.57±0.04)和PPAR-γ mRNA(0.54±0.02)均低于NC组,且低于MC组,具有统计学意义(P＜0.05);FEN+PIO组PPAR-α mRNA(0.63±0.02)和PPAR-γmRNA (0.67±0.03)均高于MC组,差异具有统计学意义(P＜ 0.05);MMP-9和TGF-1在各组大鼠心肌均有表达.与NC组大鼠比较,MC组、FEN组、PIO组和FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9和TGF-β1/Smads蛋白明显增强,差异具有统计学意义(P＜0.05);与MC组比较,FEN组、PIO组、FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9和TGF-β1/Sma蛋白均减弱,差异具有统计学意义(P＜0.05); FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9OD值(0.43±0.04)低于FEN组和PIO组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 FEN和PIO均上调了PPAR-α/γ mRNA表达、使TGF-β1和MMP-9蛋白明显下降,对心室重构改善有明显的意义,其可能通过TGF-β/smads通路发挥作用.
-
狗肝菜多糖对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响
目的:以二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化为模型,研究狗肝菜多糖对DMN诱导的肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响.方法:将96只大鼠随机分为对照组、模型组、狗肝菜多糖(300 mg/kg,200 mg/kg,100 mg/kg)组和秋水仙碱组(0.12mg/kg).除对照组以外,其余各组大鼠均腹腔注射0.5％ DMN溶液(1.5 ml/kg),隔天1次,在首次注射DMN同时,各组大鼠灌胃给予相应的药物,而正常组和模型组灌胃给予相应体积的生理盐水溶液,每天给药1次,连续5周,5周末眼球取血,脱臼致死,收取肝脏.生化法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰氨基转移酶(GGT)水平;酶联免疫法检测(ELISA)血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)含量.苏木精-伊红染色(HE染色)进行肝组织病理学检查;蛋白质印迹法(Westem blot)检测肝组织a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad2/3/7的蛋白表达情况.结果:与模型组比较,经狗肝菜多糖(300 mg/kg,200 mg/kg,100 mg/kg)组干预后,血清中ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C水平显著降低;肝组织中a-SMA、TGF-β1、Smad2/3的蛋白表达被抑制,而Smad7的表达得到促进;病理切片显示肝纤维化大鼠肝组织炎症坏死程度和肝纤维化病变程度较模型组明显减轻.结论:狗肝菜多糖具有抗DMN诱导的大鼠肝纤维化的作用,其机制与TGF-β1/Smads信号通路相关因子的表达有关.
关键词： 狗肝菜多糖 肝纤维化 TGF-β1/Smads 信号通路 -
表柔比星联合川芎嗪对人肝癌细胞TGF-β1/Smads通路的影响
目的:研究表柔比星(epirubicin,EPI)联合川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对人肝癌细胞TGF-β1/Smads通路的影响,以探讨联合用药的效果.方法:人肝癌细胞分为4个组,即对照组、EPI6.0μg/mL组、TMP0.2mg/mL组、EPI6.0μg/mL+TMP0.2mg/mL组,各组给予对应药物干预24h,CCK-8细胞计数法测定细胞增殖水平的变化,real-time PCR方法检测各组肝癌细胞TGF-β1、Smad4及Smad7 mRNA表达,western-blot方法检测各组细胞TGF-β1及Smad4蛋白表达.结果:在EPI、TMP及EPI+TMP干预24h后,肝癌细胞的增殖明显受到抑制,肝癌细胞TGF-β1及Smad7的mRNA及蛋白表达明显下调,而Smad4的mRNA及蛋白表达明显上调,联合用药的效果较单一药物效果强(均P＜0.05).结论:EPI及TMP的抗肝癌作用机理之一可能与它们对肝癌细胞TGF-β1/Smads通路的调控有关,联合用药的效果较单一药物效果强.
关键词： 肝癌细胞 TGF-β1/Smads 表柔比星 川芎嗪 人 -
丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠肝星状细胞TGF-β1/Smads通路的影响
目的:研究丹参酮ⅡA对体外培养的血管紧张素Ⅱ诱导的肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)转化生长因子β1 (TGF-β1)/Smads通路中TGF-β1、Smad2、Smad4的mRNA和蛋白表达的作用,探讨丹参酮ⅡA治疗肝纤维化的机理.方法:对大鼠肝星状细胞分别使用血管紧张素Ⅱ(1×10-5mol/L)及血管紧张素Ⅱ(1×10-5mol/L)联合丹参酮ⅡA(25μg/ml)干预48h,分别用real-time PCR及western blot方法检测各组细胞TGF-β1、Smad2、Smad4的mRNA及蛋白表达.结果:血管紧张素Ⅱ上调肝星状细胞TGF-β1、Smad2、Smad4的mRNA及蛋白表达(P＜0.01),而丹参酮ⅡA对血管紧张素Ⅱ在肝星状细胞中的这种诱导作用具有明显的抑制(P＜0.01).结论:丹参酮ⅡA抗肝纤维化的机制之一可能是通过对肝星状细胞TGF-β1/Smads通路的调控实现的.
关键词： 肝星状细胞 TGF-β1/Smads 丹参酮ⅡA 血管紧张素Ⅱ 大鼠
