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注射用青霉素钠稳定性考察
青霉素钠为广谱半合成抗生素,对敏感的革兰阳性球菌和杆菌均有明显的抑制作用.由于不稳定,会逐渐产生降解物和高分子聚合物,不仅含量下降,疗效降低,还可能引起临床上的过敏反应,影响患者的健康.
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酶联免疫吸附技术 在食品农药残留检测中的应用
农药残留是指农药使用后残存在生物体、食品以及环境中农药原体、有毒代谢物与降解物、杂质等的总称。作为农业大国,我国农药残留问题比较突出,严重危害到人们的健康,也影响着国家的声誉。长期以来用于农药残留检测的方法较多,有气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)等[1]。上述方法仍存在一些局限性,有的需对样品进行前处理,且操作复杂,耗时长,难以满足现场快速检测样品的要求。ELISA技术具有检测快速、灵敏性好、特异性强等优点,成为快速检测食品中农药残留的有效手段。
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RP-HPLC测定西洋参叶皂苷碱降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量
目的:对西洋参叶皂苷碱降解物中20(S)-人参皂苷Rh2进行含量测定.方法:采用RP-HPLC,ZORBAXEXTEND C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相甲醇-水(85:15),流速1.2 mL·min-1,检测波长203nm,柱温25℃.结果:20(S)-人参皂苷Rh2的进样量在0.5~25μg有良好的线性关系,r=0.9999;平均加样回收率为99.7%,RSD1.0%.结论:该方法测定20(S)-人参皂苷Rh2简便快捷,准确度高,测定结果证实该降解方法20(S)-人参皂苷Rh2的转化率高.
关键词: 西洋参叶皂苷 降解物 20(S)-人参皂苷Rh2 RP-HPLC -
硝苯地平片含量测定方法的改进
硝苯地平片是一种心血管疾病常用药物,<中国药典>2000年版二部硝苯地平片含量测定项下规定[1],应避光操作,除去糖衣,置乳钵中,加氯仿2ml研磨,照分光光度法进行测定.由于硝苯地平遇光极不稳定,分子内部发生光化学歧化作用[2],其降解物不但对人体有害,对含量测定也有影响.药典规定含量测定时的祛除糖衣及称样后在乳钵中研磨的过程都增加了光照的时间,再者,操作繁琐容易造成误差,为此,我们对硝苯地平片的含量测定方法进行了改进,操作简单,结果可靠.
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HPLC法测定西洋参茎叶总皂苷降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量
20(S)-人参皂苷Rh2对多种癌细胞具有较强的抑制作用,且能使癌细胞在其增殖过程中产生一种诱导作用,诱导癌细胞逆转为正常细胞.但20(S)-人参皂苷Rh2在自然界存在甚少,红参中仅为十万分之一.为了获得大量20(S)-人参皂苷Rh2,一般采用总皂苷提纯,制备二醇组皂苷,再进行降解制备20(S)-人参皂苷Rh2.本文采用HPLC法测定西洋参降解物中20(S)-人参皂苷Rh2的含量,取得满意结果.
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蔬菜中15种农药残留量的气相色谱法同时测定
农药包括农药本身、农药的代谢物和降解物以及有毒杂质会对健康构成危害.许多国家以农药残留限量为技术壁垒,限制农副产品出口,保护本国农业生产.因此,食品中农药残留快速检测已势在必行.本文通过凝胶渗透色谱技术对样品进行前处理,采用气相色谱法(电子捕获-氮磷串联检测器),建立了同时测定蔬菜中15种有机磷、氨基甲酸酯以及除草剂等农药残留量的方法.现报告如下.
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RP-HPLC法测定西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20(S)-原人参二醇的含量
目的:利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定西洋参茎叶皂苷酸、碱降解物中20(S)-原人参二醇含量.方法:RP-HPLC法具体条件为:ZORBAX extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水[90:10],流速1.2 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温25℃.采用以上方法分别测定西洋参茎叶皂苷盐酸、醋酸和氢氧化钠降解物中20(S)-原人参二醇含量.结果:20(S)-原人参二醇对照品溶液的进样量在0.2~23μg范围内有良好的线性关系,回归系数r为0.999 9(n=7);测定西洋参茎叶皂苷的盐酸、醋酸和氢氧化钠降解物中20(S)-原人参二醇含量的准确度,以平均加样回收率表示分别为98.4%、96.7%和100.2%,RSD分别为1.24%、1.08%和0.91%;测定西洋参茎叶皂苷的盐酸、醋酸和氢氧化钠降解物中20(S)-原人参二醇含量的精密度,以重现性实验考察,其RSD分别为0.65%、0.79%和0.27%;经测定,醋酸、盐酸和氢氧化钠降解物中20(S)-原人参二醇的含量分别为0.93%、0.88%和25.40%.结论:RP-HPLC法测定西洋参茎叶皂苷降解物中20(S)-原人参二醇的含量,方法简便快捷,精密度高、准确度高,可为20(S)-原人参二醇的制备及质量控制提供可靠的检测方法;利用碱降解方法制备20(S)-原人参二醇的效率高于酸降解方法.
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超滤法纯化C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物的工艺优化
目的 优化超滤法纯化C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物的工艺.方法 以截留分子量为300 000的超滤膜对C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物进行超滤分离,以膜通量和多糖回收率为评价指标,优化方法中的超滤膜材质(300 kDa的聚醚砜膜和再生纤维素复合膜)、透析次数(1~6次)、超滤缓冲液(0.15 mol/L NaC1、0.5 mol/L NaC1、50 mmol/L的PBS和H2O)、多糖初始溶解浓度(0.25、0.5和1 mg/mL)和超滤方式(浓缩补液超滤和恒体积超滤).采用佳条件对C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物进行检测.结果 C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物的佳超滤条件为:以再生纤维素复合膜为超滤膜,0.15 mol/L NaC1为超滤缓冲液,透析次数为5次,多糖初始溶解浓度为1.0 mg/mL,超滤方式为浓缩超滤.该方法可有效去除C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物中较大分子量的多糖组分,多糖回收率在80%以上,且可在一定程度上降低多糖水解物的内毒素含量.结论 成功优化了超滤法纯化C群脑膜炎球菌荚膜多糖降解物的工艺,显著提高了工作效率.
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电位滴定法测定氨苄青霉素钠及降解物的含量
氨苄青霉素含量测定方法为咪哇法,降解物的测定方法为碘量法,这两种方法操作程序繁琐,条件要求严格,结果极易出现误差,用电位滴定法代替咪唑法和碘量法可避免因上述因素产生的误差,从而达到定量准确的目的.
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免疫相关的三磷酸鸟苷酶家族结构及其在细胞自噬过程中的作用进展
自噬是细胞通过单层或双层膜包裹待降解物形成自噬体,然后运送到溶酶体形成自噬溶酶体并进行多种酶的消化及降解,以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新.细胞对这种合成与降解的精细调节,对维持细胞的自身稳态有重要意义[1-2].同时,通过自噬,真核细胞也可以抵御病原菌的入侵,在机体的免疫、感染、炎性反应过程中以及肿瘤、心血管病、神经退行性病的发病中起着十分重要的作用.
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自噬与肿瘤治疗
??自噬(autophagy)是细胞在饥饿、缺氧和能量应激状态下细胞通过膜结构降解胞质细胞器和大分子的动态过程,自噬通过清除功能异常或已受损伤的细胞器,与泛素-蛋白酶体降解系统互补,共同调控机体的稳态[1]。比利时科学家Christian?de?Duve 在上世纪50年代通过电镜观察到自噬体架构并首先提出“自噬”[2],而在酵母中发现 Atg 蛋白则把对自噬的研究推向了一个高潮[3]。自噬分为大自噬、小自噬及分子伴侣介导的自噬三种[4]。大自噬,即由内质网来源的膜包绕待降解物形成自噬体,然后与溶酶体融合并降解其内容物;?小自噬指溶酶体或液泡内膜直接内陷将底物包裹并降解的过程;?分子伴侣介导的自噬是指胞质内蛋白先结合到分子伴侣后被转运到溶酶体腔中,然后被溶酶体酶消化的过程。本文主要讨论大自噬,以下简称自噬。
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尿内荧光物检测方法及临床意义
尿内荧光物是肿瘤病人排出的叶酸降解物中的一类喋呤物质.尿内荧光物作为一种肿瘤标志物,用于诊断恶性肿瘤具有灵敏度高、特异性强的特点.因此我们采用活性炭吸附分析技术,作了125例肿瘤、非肿瘤及正常人的尿内荧光物检测分析,结果如下.
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农药残留解惑
当我们餐桌上果蔬的种类越来越丰富、产地越来越广时,有关农药残留的问题就再也没间断过.农药的确是把双刃剑,可以防虫治病除草,在保障和提高农作物产量中起到了重要的作用.然而,残存于环境、生物体和食品中的农药母体、衍生物、代谢物、降解物等对人体健康也带来威胁.因蔬菜农药残留超标、使用工业盐等发生的群体性食物中毒事件,已成为比较严重的公共安全问题.
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营养师眼里的“深海鱼油”
什么是深海鱼油?要想了解这个问题,我们首先要知道什么是鱼油.鱼油是用鱼或鱼加工的下脚料制取的油脂,它包括体油、肝油和脑油,它含有甘油三酯、多不饱和脂肪酸、磷脂、类脂、脂溶性维生素以及蛋白质降解物等.由于某些寒冷地区深海里的鱼,如三文鱼、沙丁鱼等体内EPA(二十碳五烯酸)、DHA(二十二碳六烯酸)含量很高,由它们提取的油脂也富含EPA和DHA,有一些特殊的保健功效,所以把这些特定鱼类提取的鱼油称为深海鱼油.而且也是人类在海洋鱼类中首先发现的天然DHA.
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自噬与神经退行性疾病
自噬是细胞通过单层或双层膜包裹待降解物形成自噬体,然后运送到溶酶体形成自噬溶酶体并进行多种酶的消化及降解,以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新,细胞对这种合成与降解的精细调节,对维持细胞的自身稳态有重要意义.自噬分为三种类型:巨自噬、微自噬、分子伴侣介导的自噬.细胞的自噬清除或降解异常聚集的蛋白对神经退行性疾病有重要作用.
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替硝唑注射液中亚硝酸盐的检查
替硝唑为抗厌氧菌及抗滴虫药,它是甲硝唑结构中1位乙醇基被2-(乙基磺酰基)-乙基取代的产物.据文献[1]报道,甲硝唑注射液中在灭菌后出现降解物NO2-,但对替硝唑注射液尚未见报道.为此,本文对不同厂及不同等渗剂的替硝唑注射液进行了考察, 结果发现,替硝唑注射液中均有不同程度的降解物NO2-,同时发现替硝唑注射液中以葡萄糖调等渗的NO2 、NO含量远较以氯化钠调等渗为低,现介绍如下.
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D二聚体和FDP测定在血栓性疾病方面的应用
近年来,血栓性疾病的发病率呈逐年增长的趋势,血栓性疾病已经占据全球疾病总死亡率的第一位,其致残率也很高.筛选和判断血栓高危人群,预防血栓形成,降低近远期总死亡率和其它重要的心血管事件,是血栓或血栓相关性疾病现代预防和治疗的核心,因此,实验室对血栓性疾病的检测和抗栓的监测倍显重要[1].为了探讨D二聚体和纤维蛋白降解物(PDF)在血栓性疾病诊断及预后判断中的价值,我院对56例血栓性疾病患者血浆D二聚体、FDP进行检测,并以30名健康体检者作为对照.先将具体情况汇报如下.
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D-二聚体的研究进展
D-二聚体(DD)是已交联的纤维蛋白的降解产物,它的生成或增高反映了凝血和纤维系统的激活,可以作为体内血栓前状态和血栓形成的分子标志物之一.因此,在血栓前状态及血栓形成性疾病的诊断、疗效观察、预后判断及病理研究中有着广泛的应用价值.现着重对D-二聚体的形成机理、方法学和临床意义作一综述.
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人D-二聚体分离纯化及鉴定
目的 分离纯度较高和人D-二聚体(D-dimer),为制备抗人D-二聚体单克隆抗体提供可靠抗原.方法 以凝血酶、凝血因子Ⅻ等处理人纤维蛋白原,得到交联纤维蛋白,经纤溶酶消化,得到交联纤维蛋白降解产物(FDP);对FDP作Sephacryl S-300凝胶过滤层析和聚焦层析,分离纯化得到D-dimer.采用免疫比浊法测定D-dimer 含量、染料结合法测定纯化蛋白含量,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察D-dimer的纯化情况,Weston Blot法确认D-dimer的存在.结果 制备得到的FDP SDS-PAGE图谱显示有多条蛋白条带,1条分子量为180 ~250kD蛋白条带在Western Blot图谱中显示可以被D-dimer单克隆抗体特异性地识别.FDP经Sephacry S-300凝胶层析和聚焦层析后得到纯度较高的D-dimer(n=3):总蛋白含量比为(77.82±7.98)%,蛋白回收率(25.27±6.35)%;SDS-PAGE图谱显示:经过两步层析得到的终产物为分子量180~250 kD的蛋白;Westem Blot证实:经过Sephacryl S-300凝胶层析和聚焦层析处理,终得到分子量为180~250 kD的终产物可被D-dimer单克隆抗体特异性识别.结论 采用Sephacryl S-300凝胶层析和聚焦层析能够分离纯化获得较高纯度的D-dimer,可作为制备D-dimer单克隆抗体的抗原.
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苯唑西林钠碱性降解物的分析研究
目的:借助液相色谱-三四重极杆质谱对苯唑西林钠的碱性降解物进行综合性分析。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流速1.0ml/min;流动相:0.01mol/L醋酸铵溶液-乙腈(75:25);柱温30℃;检测波长225nm。结果通过研究显示苯唑西林钠碱性降解物质中的主要成分包括:6-APA与苯甲异噁唑的缔合物、苯唑西林的脱羧青霉噻唑酸、苯唑西林的青霉噻唑酸及其异构体。结论研究所示方法快速可靠,能够为工艺改进和杂质控制提供帮助,对于苯唑西林钠的质量控制指标的和质量的提高有很重要的指导意义。