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桂枝汤和黄连解毒汤对 GK 大鼠心肌炎症因子及基膜影响的差异研究
目的:观察桂枝汤及黄连解毒汤对自发性糖尿病大鼠(GK 大鼠)心肌基膜厚度、心肌核因子-κB(NF -κB)、Ⅳ型胶原表达的作用,探讨有关炎症损伤的机制。方法以 Wistar 大鼠10只作为正常对照组,40只 GK 大鼠随机分为 GK 对照组、二甲双胍组、黄连解毒汤组、桂枝汤组,分别以相应药物灌胃给药12周,检测各组血糖、NF -κB、Ⅳ型胶原阳性表达程度及基膜厚度。结果 GK大鼠血糖升高,NF -κB 阳性表达增强,Ⅳ型胶原蛋白表达增强,基底膜厚度增加。二甲双胍、黄连解毒汤均可降低 GK 大鼠血糖(P ﹤0.01)。黄连解毒汤和桂枝汤均能降低 NF -κB 及Ⅳ型胶原蛋白表达、降低基底膜厚度与 GK 大鼠对照组比较差异有统计学意义(P ﹤0.01,P ﹤0.05)。在抑制 NF -κB阳性表达方面,桂枝汤和黄连解毒汤疗效无统计学意义。在抑制Ⅳ型胶原蛋白表达、降低基底膜厚度方面,桂枝汤作用强于黄连解毒汤(P ﹤0.01,P ﹤0.05)。结论桂枝汤和黄连解毒汤均可以抑制 NF-κB 阳性表达,抑制Ⅳ型胶原蛋白表达,降低基膜厚度,且桂枝汤优于黄连解毒汤,显示了其调和营卫治法的独特作用。
关键词: 基膜 Ⅳ型胶原蛋白 核因子-κB(NF-κB) 桂枝汤 黄连解毒汤 -
N-乙酰-L-半胱氨酸对矽肺模型大鼠肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶2、9表达的影响
在SiO2粉尘引起的矽肺纤维化过程中,肺泡巨噬细胞具有重要作用.基质金属蛋白酶(MMP)是降解细胞外基质的主要酶类.肺泡巨噬细胞分泌的MMP-2和MMP-9能够降解肺泡基膜,从而启动肺间质纤维化[1].目前,阻断肺泡巨噬细胞氧化损伤对其分泌MMPs影响的研究尚不多见.本研究以N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)为抗氧化剂,应用免疫细胞化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,探讨NAC对矽肺纤维化模型大鼠肺泡巨噬细胞MMP-2和MMP-9表达的影响.
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Alport综合征病理分析及文献复习
目的:复习总结电镜下Alport综合征的表现,加强对Alport综合征的认识. 方法:搜集2005~2010年我科的32例Alport综合征的病史及病理(包括光镜、免疫组化及电镜). 汇总各项结果并进行分析讨论. 结果:患者以浮肿,肉眼血尿为首发症状而就诊,平均年龄12. 6岁. 5例有阳性家族史,4例患者曾做过肾穿刺活检, 6例有治疗史. 光镜及免疫组化无特异性表现,电镜下肾小球基底膜出现特征性的厚薄不均,分层撕裂及颗粒状致密物沉积. 肾小管、Bowman' s囊壁及小动脉壁也可见分层撕裂,致密物沉积. 结论:AS在电镜下有特异性表现,在诊断过程中具有重要诊断价值.
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慢性颈脊髓压迫症大鼠髓内基膜超微结构变化及其与MMP-9表达的相关性
目的:观察慢性颈脊髓压迫症大鼠模型髓内基膜(basement membrane,BM)、基膜与星形细胞接触面(basement membrane-astrocyte contacts,BM-AC)的超微结构变化,并探讨其与基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的相关性.方法:72只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=36)和实验组(n=36),对照组仅切除C5左侧椎板;实验组在切除C5左侧椎板后将吸水可膨胀聚氨酯薄板置入C6水平左侧椎板下硬膜外,建立慢性颈脊髓压迫模型,应用BBB(Basso Beattie Bresnahan)评分评价大鼠脊髓神经功能,并分别于造模后1d、14d、21d、28d、42d、70d取C5~C6段脊髓组织制备标本,用HE染色观察脊髓形态学变化、用MMP-9免疫组化染色检测脊髓MMP-9表达量,用透射电镜观察脊髓BM及BM-AC的变化.结果:对照组各时间点间BBB评分和实验组造模后1d的BBB评分无显著性差异,实验组造模后14d~70d的5个时间点BBB评分均显著性低于同时间点对照组(P<0.05).HE染色显示对照组各时间点及实验组造模后1d的脊髓未见受压,脊髓形态结构正常;实验组造模后1d可见脊髓白质区轻度水肿;造模后14d脊髓受压变形,灰质区血管增生,灰质、白质水肿,神经元细胞核碎裂;造模后21d和28d损伤逐渐加重;造模后42d脊髓水肿减轻,髓内空泡化,前角大运动神经元数目减少、胞浆稀少、胞核萎缩,突触减少,神经纤维稀疏,髓鞘层变薄;造模后70d仍见白质区水肿、神经元细胞核碎裂,灶性胶质细胞增生等退行性变,神经元数目增多.MMP-9免疫组化显示对照组各时间点及实验组造模后1d、70d脊髓MMP-9均呈弱表达,实验组造模后14d呈较强表达,21d呈强表达,28d呈较强表达,42d呈中度表达.对照组各时间点及实验组压迫后1d的BM电子密度及BM-AC均正常,实验组造模后14d~28d BM电子密度、BM-AC比率与对照组比较显著性降低(P<0.05);实验组造模后42d、70d两者较前升高(P<0.05),但仍显著低于对照组水平(P<0.05).MMP-9表达与BM电子密度及BM-AC变化呈负相关,相关系数分别为-0.892(P<0.001)和-0.664(P<0.001).结论:慢性颈脊髓压迫性损伤后早期髓内BM降解、BM-AC分离,后期部分修复.MMP-9可能通过降解BM及BM-AC影响脊髓压迫后血脊髓屏障的完整性.
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人绒毛膜滋养层细胞的分离培养及DC-SIGN的表达研究
胎盘屏障主要由滋养层细胞、微血管内皮细胞以及二者之间的基膜构成.它是母体血与胎儿血进行物质交换的结构,也是母体有害物质进入胎儿的必经之路.滋养层细胞为屏障的外层,直接浸浴于母血中,可能与母体的病毒颗粒直接接触而成为病毒侵入胎盘的关键部位.
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不同日龄胎鼠肺血管基膜特点研究
目的研究不同日龄胎鼠肺血管基膜IV型胶原及层黏连蛋白的发育情况,以探讨早产鼠易发生肺出血的原因.方法分别用免疫组化法及原位杂交法检测日龄17、18、19、21 d胎鼠肺血管基膜IV型胶原、层黏连蛋白蛋白水平及mRNA水平的差异.结果①17 d胎鼠肺血管基膜IV型胶原及层黏连蛋白阳性产物的平均面积明显小于21 d胎鼠;②17 d胎鼠肺血管内皮细胞中IV型胶原mRNA和层黏连蛋白mRNA的表达明显弱于21 d胎鼠.结论早产胎鼠肺血管基膜IV型胶原及层黏连蛋白的发育明显不成熟,且IV型胶原和层黏连蛋白在蛋白水平的表达受mRNA的调控.这种发育不成熟是早产胎鼠易发生肺出血的原因之一.
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乙醇对角膜上皮瓣活性及基底膜分离定位研究
目的 探讨不同乙醇作用时间对角膜上皮瓣活性的影响,并确定角膜上皮瓣的解剖分离层面.方法 按标准准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(LASEK)方法制备7只尸体眼角膜上皮瓣,其中对照组1只眼,其余6只分为A、B、C 3个组,每组2只眼,乙醇浸润时间分别为20、30和40 S.对7只眼进行HE、增殖细胞核抗原(PCNA)、层黏连蛋白免疫组化及Ⅶ型胶原免疫荧光染色,评价角膜上皮瓣细胞活性,确定LASEK手术中角膜上皮瓣的解剖分离层面,采用X2检验分析.结果 角膜上皮瓣为复层上皮细胞组织,没有Bowman's层和角膜基质成分,PCNA阳性细胞率为A组B组C组,其laminin染色在角膜床和上皮瓣基底膜一侧均有呈片段样棕色条纹状,其collagenⅦ染色阳性反应呈一条绿色线形,而且只存在于角膜床,上皮瓣基底膜侧不着色.结论 角膜上皮瓣活性随乙醇浸润时间延长而降低;乙醇浸润法制备角膜上皮瓣的组织分离层面位于角膜上皮基底膜内,并且定位于基底膜的透明层和致密层之间.
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角膜上皮层基底细胞及其基底膜的研究进展
角膜上皮细胞底层的柱形细胞称为基底细胞,其细胞质内含有由角蛋白构成的中间丝,该结构在基底细胞分泌基底膜中起到重要作用。糖尿病及眼科手术后(如白内障、屈光手术)发生的角膜上皮功能障碍,均与基底细胞的异常密切有关。角膜上皮层基底膜是一种高度特异的细胞外基质,由透明层与致密层组成,在角膜上皮更新及损伤后修复中发挥重要的桥梁作用。临床上常见的外伤后反复性角膜上皮病变、角膜营养不良、大泡性角膜病变及圆锥角膜等的发病,均与基底膜的功能异常有关。本文对角膜上皮层基底细胞及其基底膜的研究及其进展进行总结,以期为临床工作提供参考。(中华眼科杂志,2016,52:703-707)
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Ⅳ型胶原在病变颞下颌关节盘组织中的表达
颞下颌关节盘前移位和穿孔是临床上常见的颞下颌关节紊乱病,病理学变化主要是关节组织的退行性改变.Ⅳ型胶原是一种基膜胶原,主要存在于上皮和内皮的基板或基膜上.我们利用免疫组织化学方法检测在病变关节盘和盘后组织中Ⅳ型胶原的表达,探讨Ⅳ型胶原与颞下颌关节紊乱病之间的关系.
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血清明胶酶(MMP-2、MMP-9)与子宫内膜癌
明胶酶(MMP-2和MMP-9),又叫Ⅳ型胶原酶,能水解基膜(BM)和细胞外基质(ECM)中的Ⅳ型胶原,引起内皮细胞的迁移和组织的重建.因此其在肿瘤细胞浸润基膜的过程中起关键的作用.
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基质金属蛋白酶与肿瘤血管生成相关性研究进展
恶性肿瘤的侵袭和转移是肿瘤细胞和宿主细胞之间相互作用的连续过程,它包括了多个步骤,涉及到多个因素和多个基因的综合作用.在这一过程中,肿瘤血管的生成(tumor angiogenesis,TA)以及基膜(basement membrance,BM)和细胞外基质(extracellar matrix,ECM)的降解是两个必要的步骤.
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层粘连蛋白总糖肽的抗癌细胞转移作用及其作用机制
增殖失控及侵袭与转移是恶性肿瘤细胞的根本特性,也是夺去癌患者生命的根本原因.不单在癌症发展过程中可自发的发生广泛转移,而且在癌症常规诊疗过程中也有可能人为的促进癌细胞的转移(医源性转移),如诊疗操作中的种植及对患者免疫功能的损伤等.癌细胞转移是一个多步骤的复杂过程.然而,大量动物实验证明只要阻断转移过程中的某个或某几个关键性环节,就可能有效的阻止癌细胞的转移.癌细胞转移的全过程实质上是细胞与细胞之间及细胞与胞外基质之间相互作用的一系列过程.而这些相互作用多由糖蛋白(细胞粘附分子及其受体)介导.换言之,在此过程中细胞表面的以及细胞外基质成分的糖复合物的糖链具有关键性作用.例如,癌细胞在转移过程中至少需三次穿过基膜(basement membranes).层粘连蛋白(laminin,LN)是基膜中的主要功能性糖蛋白,对癌细胞转移具有促进作用.
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卵泡基膜在卵泡生长发育中的研究进展
卵泡周期性生长发育是一个十分复杂的过程,生长因子和激素在该过程中的调控作用一直是研究的热点.而有关细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在此过程中的研究也逐渐引起重视.ECM有多种类型,是细胞完成若干生理功能所必须依赖的物质.将以卵泡基膜为主,综述ECM的一般特点及其在卵泡生长发育过程中的功能、变化和细胞起源.
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电磁辐射对血脑屏障通透性的影响及其机制研究进展
血脑屏障(blood-brain-banjer,BBB)是存在于血液与脑组织之间的屏障结构,由脑微血管内皮细胞、基膜和星形胶质细胞足突组成.脑的毛细血管属连续型,毛细血管内皮细胞之间以紧密连接(tight junction,TJ)封闭,内皮外有基膜、周细胞以及星形胶质细胞突起的足突围绕.与机体其他部位的微血管相比,BBB的通透性极低,其目的是防止血液中的有害物质通过BBB而对神经元造成损伤,维持大脑微环境的相对稳定.
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星形细胞在血-脑屏障构成中的研究进展
血-脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是脑毛细血管所独有的特征性结构,它对一些能透过周围血管的物质具有屏障作用从而保护脑组织,对维持脑组织内环境的稳定性起着重要作用.其形态学基础包括一系列结构:脑毛细血管内皮细胞(endothelial cells)及内皮细胞间紧密连接(tight junctions,TJs)、基膜及毛细血管周围星形细胞突起.其中,血管内皮细胞及其紧密连接是血-脑屏障的主要形态学基础.而星形细胞在血-脑屏障的构成中虽然不占主导地位,但许多观察表明,它在内皮细胞由非屏障细胞向屏障细胞转变的诱导和维持中扮演着重要的角色.
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他克莫司治疗膜性肾病进展
膜性肾病(membranous nephropathy,MN)是肾病综合征的一种常见类型,以肾小球基膜外侧上皮下免疫复合物沉积,基膜增殖致使“钉突”形成和基膜弥漫性增厚为其主要病理特征,病因未明确者称为特发性膜性肾病( idiopathic membranous ne-phropathy,IMN)[1,2]。目前 IMN 的治疗多采用免疫抑制剂,以糖皮质激素联合烷化剂较为经典,但这一方案存在较多的副作用[3]。近年,他克莫司( tacrolimus,TAC)在治疗 MN 中取得了一定的疗效,本文就此综述如下。
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几种重要肾小球肾炎的免疫组化诊断与鉴别诊断及其进展
肾活检病理诊断的特殊性在于它由光镜、免疫病理及超微病理三部分组成.三种手段相辅相成,有时缺一不可.免疫荧光或免疫组化技术对肾脏疾病的诊断及其分类具有重要作用,因而在肾活检病理诊断中占有极为重要的地位.许多肾病的诊断通常需要证实有无免疫球蛋白、轻链或补体成份的特征性沉积,如膜性肾病、IgA肾病、抗肾小球基膜肾炎、轻链肾病以及定义不明确或有争议的疾病如免疫触须样肾小球肾炎、IgM肾病和C1q肾病等.
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大鼠阿霉素肾病中Podocin Laminin和Fibronectin的表达及意义
大鼠阿霉素肾病(adriamycin-induced nephropathy.AND)是通过阿霉素及其代谢产物诱发肾小球上皮细胞脂质过氧化,破坏肾小球滤过膜结构和功能,终导致滤过屏障的通透性而引起蛋白尿[1].近年来研究证实Podocin是与足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)结构功能相关的重要蛋白分子,对维持正常肾小球功能发挥着重要作用.除了裂孔隔膜之外肾小球基膜(glomerulus basement membrane.GBM)也是选择性滤过的主要屏障.层黏连蛋白(laminin,LN)是基膜(basement membrane,BM)的主要成分,参与基膜的构建及细胞黏附、增殖和分化,对肾脏的正常发育至关重要.
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血脑屏障的研究进展
血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的概念是1913年由E.E.Goldman正式提出的[1].直止20世纪60年代,应用电子显微镜才揭示了BBB的解剖学基础:BBB是一层连续覆盖在99%脑毛细血管腔表面的内皮细胞膜,细胞之间有紧密连接(tight junction,TJ)[2],并认为TJ是BBB的主要的结构[3].近年的研究显示:BBB是一个复杂的细胞系统,它主要由内皮细胞(endothelial cell,EC)、EC的TJ、星形细胞(astrocyte)、周皮细胞(pericyte)和血管周围的小胶质细胞(perivascular microglia)以及基膜( basement membrane)等结构构成并维持了BBB的特殊功能,保持了中枢神经系统(CNS)内环境的稳定.随着细胞生物学及分子生物学研究的深入,对BBB的结构和功能有了进一步的了解.下面就人的BBB研究现状加以综述.
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肾小体的发生和发育
肾小体(renal corpuscle)似球形,故又称肾小球,由血管球和肾小囊组成.肾小体有两个极,微动脉出入的一端称血管极(vascular pole),与近端小管相连接的一端称尿极(urinary pole).血管球是入球微动脉与出球微动脉之间蟠曲成球的毛细血管袢.血管极处有少量结缔组织细胞,随血管进入血管球,分布于毛细血管袢之间,构成血管系膜(mesangium),血管系膜又叫球内系膜,由系膜细胞和系膜基质组成.肾小囊(Bowman capsule)有壁、脏两层,脏层上皮细胞又称足细胞,足细胞与毛细血管内皮细胞之间或足细胞突起与血管系膜之间存有较厚而完整的基膜.肾小体的功能是超微滤过.滤过屏障由毛细血管内皮、血管球基膜以及足细胞的裂孔膜构成.