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固肾方对糖尿病大鼠足细胞及其裂隙膜蛋白的作用
目的:探讨固肾方对糖尿病大鼠足细胞及其裂隙膜蛋白的影响.方法:选取雄性SD大鼠50只,用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型,造模成功后,将大鼠随机分成5组,每组10只进行实验.大鼠于造模后第24h,8、28d分别收集尿液,做24h尿蛋白定量.于给药12周后处死,取血液做肾功能检测,取肾脏组织做光镜、免疫组化检测,用电镜观察肾小球足细胞形态改变.免疫组化观察肾组织裂隙膜蛋白nephrin、podocin、CD2AP的蛋白表达.结果:造模后28d,模型组与其它各组比较尿量和蛋白量显著增高(P＜0.01).血糖、肌酐和尿素氮显著升高,白蛋白显著降低(P＜0.05,P＜0.01).光镜、电镜各组与模型组比较有明显不同.免疫组化显示模型组nephrin、podocin、CD2AP的蛋白表达降低,其他各组均有升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论:中药固肾方能减少蛋白尿,降低血糖,改善肾功能,其功效可能通过保护足细胞,升高裂隙膜蛋白nephrin、podocin、CD2AP表达而改善肾小球滤过膜的通透性,从而减少蛋白尿,延缓肾功能的进展.
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肾络通对糖尿病肾病大鼠podocin、 CD2AP的影响
目的:探讨肾络通(益气养阴消癥通络为法)对糖尿病肾病大鼠24 h尿白蛋白定量(UAlb)及肾组织podocin、CD2AP的影响.方法:70只大鼠随机选取10只作为正常对照组,其余60只大鼠均行腹腔注射STZ(55 mg·kg-1·d-1)1次,3d后测空腹血糖≥16.7 mmol/L者按随机数字表法分为模型组、中药组及厄贝沙坦组,按各组相应药物剂量灌胃.于第24周末检测各组大鼠24 h UAlb定量,免疫组化法测肾组织podocin、CD2AP蛋白表达.结果:各治疗组与模型组比较24 h UAlb明显减少,podocin、CD2AP蛋白表达显著增加.结论:益气养阴、消癜通络中药肾络通可能通过减少podocin、CD2AP蛋白的丢失,使肾小球滤过膜的完整性得到一定程度的恢复,而减轻糖尿病肾病大鼠蛋白尿.
关键词： 肾络通 糖尿病大鼠 24 h尿白蛋白定量 Podocin CD2AP -
左归降糖益肾方对2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin与podocin表达的影响
目的：观察左归降糖益肾方对MKR转基因2型糖尿病肾病(DN)小鼠足细胞nephrin、podocin表达的影响,探讨其作用机制。方法8周龄MKR小鼠40只随机分为4组,空白组(A组)、DN组(B组)、DN＋中药组(C组)、DN＋糖适平＋贝那普利组(D组)。B、C、D组给予高脂饮食联合右侧肾切除造模。手术4周后,各给药组给予相应药物,4周后处死小鼠。电化学法观察小鼠空腹血糖,全自动生化仪检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN), ELISA 法测定尿微量白蛋白(UmAlb),RT-PCR 法检测 nephrin、podocin mRNA 表达,Western Blotting 法测定nephrin、podocin蛋白表达,电镜观测足细胞形态结构。结果与A组比较,B组小鼠空腹血糖、SCr、BUN及UmAlb均明显升高(P＜0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显下调(P＜0.01)。给药后,与B组比较,用药组小鼠血糖、SCr、BUN及UmAlb明显下降(P＜0.01),肾小球足细胞nephrin、podocin mRNA及蛋白表达明显上调(P＜0.01,P＜0.05)。电镜结果显示,给药组小鼠肾小球足细胞较B组明显改善。结论左归降糖益肾方通过恢复2型糖尿病肾病小鼠足细胞nephrin和podocin的表达而保护肾脏。
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化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用
目的 探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的调节作用.方法 40只大鼠采用高糖高脂饲料联合1％链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)35 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的36只大鼠按随机数字表法分为模型组、化瘀通络组和厄贝沙坦组,每组12只.另取10只正常大鼠作为正常组.化瘀通络组和厄贝沙坦组分别给予化瘀通络中药和厄贝沙坦灌胃,同时正常组和模型组等量蒸馏水灌胃.采用ELISA法检测不同时间点各组大鼠24 h尿蛋白定量;连续干预16周后分别检测各组大鼠体重(body weight,BW)、肾重(kidney weight,KW)、肾脏指数(kidney index,KI)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和尿酸(uric acid,UA);光镜和电镜下观察肾组织病理形态学变化;采用Western blot和Real-time PCR法检测肾脏足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达.结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显升高(P＜0.01),造模后大鼠BW减轻,KI、FBG、SCr、BUN和UA水平均升高(P＜0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组第4、8、12、16周24 h尿蛋白定量明显降低,且化瘀通络组24 h尿蛋白定量较厄贝沙坦组减少更明显(P ＜0.05,P＜0.01);造模后化瘀通络组和厄贝沙坦组BUN水平降低(P ＜0.05,P＜0.01).(2)肾脏病理显示:模型组肾脏结构紊乱,基底膜明显增厚,系膜重度增生,足突广泛融合;化瘀通络组和厄贝沙坦组肾脏病理改变均有不同程度减轻.(3) Western blot和Real-Time PCR显示:与正常组比较,模型组大鼠肾组织podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均降低(P＜0.01);与模型组比较,化瘀通络组和厄贝沙坦组podocin、CD2AP蛋白和mRNA表达水平均升高(P＜0.01);化瘀通络组podocin、CD2AP蛋白和CD2AP mRNA 表达均明显高于厄贝沙坦组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 化瘀通络中药可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白,保护肾功能,改善肾脏病理改变,其机制可能与上调裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达有关.
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参芪地黄汤对IgA肾病大鼠肾组织nephrin、podocin蛋白及其mRNA表达的影响
目的 探讨参芪地黄汤治疗IgA肾病的可能作用机制. 方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、雷公藤组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组12只,采用“白蛋白十脂多糖十四氯化碳”联合法建立IgA肾病大鼠模型.中药低、高剂量组分别给予参芪地黄汤1.4、2.8g/100g灌胃,雷公藤组给予雷公藤多甙片0.625mg/100g灌胃,模型组、正常组给予等量生理盐水灌胃,每日1次.12周末处死大鼠,检测各组血肌酐、尿蛋白定量、血清白蛋白水平；免疫组化和Western-blot法检测肾组织nephrin、podocin蛋白表达；RT-PCR法检测肾组织nephrin mRNA、podocin mRNA表达. 结果 与正常组比较,其余各组尿蛋白定量均明显升高(P＜0.05)；与模型组比较,各给药组尿蛋白定量均明显下降(P＜0.05).与正常组比较,其余各组大鼠肾组织nephrin、podocin蛋白及mRNA表达均明显下降(P＜0.05)；与模型组比较,各给药组大鼠肾组织nephrin、podocin蛋白及mRNA表达均明显升高(P＜0.05).结论 参芪地黄汤能有效降低IgA肾病大鼠尿蛋白定量,其机制可能是通过上调肾组织nephrin和podocin表达.
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血管生成素样蛋白2对糖尿病肾病足细胞损伤的影响及雷公藤甲素干预研究
目的：通过观察血管生成素样蛋白2（ANGPTL2）在2型糖尿病大鼠肾脏中的表达，探讨其对足细胞损伤的影响及雷公藤甲素的干预机制。方法50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（NC，10只）和实验组（40只），实验组予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素（STZ 30 mg/kg）建立2型糖尿病大鼠模型，成功建立模型（32只）再随机分为2组：糖尿病对照组（DM，16只）及雷公藤甲素组（DT，16只）。雷公藤甲素干预8周后，测体重、血压、肾重、血糖、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN），24 h尿蛋白（UAL）的排泄量；镜下观察肾组织病理改变；免疫组化染色技术、实时定量PCR及Western blot法检测肾组织ANGPTL2、Nephrin及Podocin mRNA及蛋白表达的变化。结果 DM组24 h UAL排泄量明显高于NC组（9.07±0.13，0.73±0.03，P＜0.01），同时ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量明显升高（P均＜0.01）， Nephrin及Podocin 的mRNA及蛋白表达量明显降低（P＜0.01），DT组较DM组24 h UAL排泄量降低（5.51±0.07，9.07±0.13，P＜0.01），足细胞损伤改善，ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量降低（P＜0.01）， Nephrin及Podocin的mRNA及蛋白表达量升高（P＜0.01），且ANGPTL2 mRNA及蛋白表达量与尿白蛋白呈正相关（r＝0.768，r＝0.989，P＜0.01），其与 Nephrin及 Podocin的 mRNA及蛋白表达量呈负相关（r＝-0.711，r＝-0.700；＝-0.983，r＝-0.945；P均＜0.01）。结论 ANGPTL2可能通过下调Nephrin及Podocin表达参与足细胞损伤机制，雷公藤甲素可下调ANGPTL2在肾脏的表达，保护足细胞。
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温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响
目的 观察温肾健脾方对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin表达的影响.方法 将链脲佐菌素诱导的30只糖尿病肾病模型大鼠分为五组,每组各6只,即模型对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg-1·d-1)、阳性对照组(缬沙坦25 mg·kg-1·d-1)及低剂量组(温肾健脾方7.5 g·kg-1·d-1)、中剂量组(温肾健脾方15 g·kg-1·d-1和高剂量组(温肾健脾方30 g·kg-1·d-1,并以6只正常大鼠作正常对照组(等渗NaC1溶液10 mL·kg1·d-1).各组大鼠连续灌胃8周后,分别采用免疫组织化学法和荧光定量PCR检测各组大鼠肾小球足细胞nephrin和podocin蛋白及mRNA的表达.结果 免疫组织化学结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=6.656、8.667,P=0.016、0.007).进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin蛋白表达量均较正常对照组降低(P均＜0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组nephrin和podocin蛋白表达量均升高(P均＜0.05),而低剂量组仅podocin蛋白表达量较模型对照组有所升高(P＜ 0.05);与阳性对照组相比,低、中、高剂量组仅podocin蛋白表达量均较阳性对照组升高(P均＜0.05).荧光定量PCR结果显示,六组大鼠肾脏组织足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=5.412、3.308,P=0.034、0.015);进一步两两比较发现,模型对照组足细胞nephrin和podocin mRNA相对表达量较正常对照组均显著降低(P均＜0.05);与模型对照组比较,中、高剂量组及阳性对照组nephrin和podocin mRNA的相对表达量均显著升高(P均＜0.05),而低剂量组仅podocin mRNA相对表达量有所升高(P＜0.05);与阳性对照组相比,仅低剂量组nephrin mRNA相对表达量有所降低(P＜0.05).结论 温肾健脾方对肾小球足细胞nephrin和podocin有不同程度的保护作用,从而维持肾小球的正常滤过功能,减轻尿蛋白排泄率,以达到防治糖尿病肾病的目的.
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雷公藤多苷对糖尿病大鼠肾脏的保护作用
目的 探讨不同剂量雷公藤多苷(TWP)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用. 方法 高糖高脂喂养联合小剂量STZ (30 mg/kg)构建T2DM大鼠模型,予不同剂量TWP治疗8周,测定大鼠24 hUAlb及血液生化指标,并观察肾脏病理变化,检测肾脏nephrin、podocin和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化. 结果 DM组24 hUAlb高于NC组[(253.7±53.0)vs(45.7±14.5)μg/24 h];与DM组比较,TWP干预后,24 hUAlb减少[(253.7±53.0)vs(183.5±78.7)、(123.8±74.8)、(119.0±52.0) μg/24 h],TWP可改善糖尿病大鼠肾脏病理改变,并使nephrin和podocin表达量增高,VEGF表达量下降. 结论 TWP通过上调nephrin和podocin及下调VEGF的表达,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用.
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NPHS2基因多态性与中国北方IgA肾病患者的相关性
目的 分析中国北方地区IgA肾病患者NPHS2基因多态性及其与IgA肾病患者蛋白尿和肾功能的关系。方法 将IgA肾病患者按临床表现分为肾病综合征组和单纯血尿组(各16例)。通过基因测序法筛查与中国北方IgA肾病患者蛋白尿水平相关的NPHS2基因的多态性。根据筛查结果，采用PCR-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测537例原发性IgA肾病患者NPHS2基因的C357T多态性，比较不同基因型之间临床表现的差异。结果 (1)检测到8种基因多态性：-931A＞T、-601C ＞T、19G＞T、171A＞G、357C＞T、IVS3-21C＞T、1023C＞T和1107A ＞G。(2)上述测序结果提示NPHS2基因357T等位基因频率在肾病综合征组明显低于单纯血尿组(0.038比0.125,P＜0.05)，说明此多态性可能和IgA患者发生大量蛋白尿相关。故选择C357T多态性做大样本分析。(3)在537例有临床资料的IgA肾病患者中，比较357CC基因型和357CT/TT基因型的患者在性别、肾穿时年龄、血压、肉眼血尿、蛋白尿、发病时肾功能的差别，结果显示携带NPHS2 357CT/TT 基因型的患者24h尿蛋白定量程度较轻(P =0.023)。与肾病综合征组相比，携带T等位基因的患者蛋白尿小于3.5 g/d的比例明显增多(P=0.017)。多因素logistic回归分析表明NPHS2的C357T基因型CT/TT是除高血压病史、发病年龄外，IgA肾病患者发生大量蛋白尿的独立保护因素(P =0.012，OR =0.485,95％ CI0.275 ～0.854)。结论 本研究检测到8种基因多态性，其中NPHS2基因C357T 的T等位基因是中国北方IgA肾病患者发生蛋白尿以及大量蛋白尿的保护因素。
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槐杞黄对IgA肾病大鼠蛋白尿及肾组织nephrin及podocin的影响
目的 观察槐杞黄对IgA肾病(IgA nephropathy, IgAN)大鼠蛋白尿及肾组织nephrin及podocin的影响,探讨槐杞黄对IgA肾病大鼠蛋白尿的治疗作用及其机制.方法 将24只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、槐杞黄组,每组8只.模型组和槐杞黄组建立IgA肾病模型,槐杞黄组给予槐杞黄颗粒治疗.应用定量尿沉渣计数法检测尿红细胞个数,考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测血生化指标.应用直接免疫荧光法检测肾小球IgA沉积强度,间接免疫荧光法检测肾小球nephrin及podocin蛋白的表达及分布,采用实时荧光定量PCR技术检测肾皮质nephrin mRNA和podocin mRNA的表达.结果 ①槐杞黄组大鼠的尿红细胞计数、尿蛋白,较模型组显著减少,差异有显著意义(P<0.05);②槐杞黄组大鼠肾组织病变,较模型组减轻;③槐杞黄组大鼠肾小球nephrin表达量,较模型组显著升高,差异有显著意义(P<0.01),podocin表达量较模型组稍有下降,但差异无显著意义(P>0.05);槐杞黄组大鼠肾皮质nephrin mRNA及podocin mRNA的表达,较模型组显著升高,差异有显著意义(P<0.01);④槐杞黄组大鼠肾小球nephrin及podocin的不连续斑片状、团块状异常分布,较模型组改善.结论 IgA肾病大鼠肾组织nephrin及podocin出现表达变化及分布异常,槐杞黄能降低IgAN大鼠尿蛋白,其作用可能与调节nephrin及podocin的表达及分布有关.
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嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系中podocin表达与分布的影响及其意义
目的 Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关.本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系.方法 将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组.实验组采用嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN) 刺激(剂量为50 μg/mL), 分别于8 h,24 h和48 h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布.对照组用含10% FBS的RPMI 1640培养液培养.细胞图像应用Image J图像处理软件,计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积,半定量RT-PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化.结果 对照组呈星形伸出树枝状突起,相邻细胞间形成相互连接.实验组细胞体缩小,足突回缩、消失, 细胞间失去相互连接.上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较,差异无显著意义(P>0.05).Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜;在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布,刺激后8 h和24 h细胞质有少许分布,刺激48 h后出现细胞膜、细胞质分布缺失.结论 Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关,损伤早期即有变化;podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应.
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Podocin与nephrin在多柔比星诱导肾病大鼠模型肾皮质部的表达及共定位分布
docin与nephrin在大鼠肾小球内分布,且随病变进展而增加,由正常的沿肾小球血管襻呈均匀线性分布转变为呈不连续分布,而且重叠程度减少.结论 Podocin和nephrin在多柔比星肾病大鼠肾病进展过程中出现表达及分布异常,导致两者不能形成正常的复合体结构,这可能是蛋白尿发生的重要分子机制.
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益气养阴消癥通络中药对早期糖尿病肾病大鼠24h尿蛋白及nephrin、podocin基因表达的相关性分析
目的 观察早期糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白(U Pro)及肾组织中nephrin、podocin基因表达,探讨nephrin、podocin分子在糖尿病肾病蛋白尿发生过程中的相互作用.方法 将SD雄性大鼠随机分为6组:肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量组,各组相应药物剂量灌胃.于第6周末检测各组大鼠24 h UPro量、肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测肾皮质nephrin、podocin表达水平.结果 厄贝沙坦组、中药低、中剂量组与模型组比较,U pro量显著下降(P＜0.05).各治疗组与模型组比较,Scr、BUN明显降低(P＜0.05),且nephrin、podocin表达显著增加(P＜0.01);24 h U Pro与nephrin、podocin表达量呈负相关,nephrin与podocin表达量呈正相关.结论 糖尿病大鼠肾小球上皮细胞足突nephrin、podocin表达的减少可能是糖尿病肾病蛋白尿发生的机制之一.
关键词： 糖尿病大鼠 益气养阴消癥通络中药 nephrin Podocin 蛋白尿 -
MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白表达的影响
目的 探讨MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白的表达影响.方法 采用嘌呤霉素(PAN)诱导的足细胞体外模型,将足细胞分成4组,即空白组、PAN组、阴性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN组.通过LipofectamineTM 2000瞬时转染MiR-30c-2-3p mimic.通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞活力、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MiR-30c-2-3p表达、Western blot检测Nephrin和Podocin蛋白的表达.结果 ①CCK-8结果提示PAN组足细胞活力明显低于空白组,差异有高度统计学意义(P＜0.01),阴性质粒+PAN组较PAN组差异无统计学意义(P＞0.05),阳性质粒+PAN组足细胞活力与PAN组和阴性质粒+PAN组相比均有所提高,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).②qRT-PCR显示PAN组MiR-30c-2-3p的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P＜0.01);阴性质粒+PAN组较PAN组表达差异无统计学意义(P＞0.05),而阳性质粒+PAN组MiR-30c-2-3p的表达较PAN组和阴性质粒+PAN组均提高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).③Western blot提示PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P＜0.01);与PAN组相比,阴性质粒+PAN组两者蛋白的表达差异无统计学意义(P＞0.05),而阳性质粒+PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较单纯PAN组和阴性质粒+PAN组均增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PAN对足细胞的活力,MiR-30c-2-3p含量及Nephrin和Podocin蛋白的表达有抑制作用,而通过外源性增加MiR-30c-2-3p表达后可提高足细胞的活力,同时可增加Nephrin和Podocin蛋白的表达.
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足细胞蛋白Nephrin、 Podocin与肾小球疾病
肾小球疾病是指累及两侧肾小球的一类疾病,多以蛋白尿为主要临床表现,由于发病机理尚不明确,因此疾病早期缺乏准确有效的检测和诊断手段.近来研究发现足细胞蛋白Nephrin和Podocin在多种肾小球疾病发生发展和诊断预测中起重要作用.本文就近几年Nephrin、Podocin与肾小球疾病的相关研究进行综述.
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五味子复方减轻阿霉素肾病小鼠蛋白尿的实验研究
[目的]观察五味子复方(SM)对阿霉素肾病(ADN)小鼠肾皮质WT1蛋白、Nephrin和Podocin mRNA的影响,探讨SM减轻蛋白尿的可能机制.[方法]雄性BALB/c小鼠27只随机分为对照组、ADN模型组和SM治疗组,单次尾静脉注射阿霉素法建立ADN模型,收集尿及肾组织,检测体质量、右肾质量、24 h尿白蛋白排泌率(UAER);光镜下观察肾组织形态改变;免疫荧光检测各组肾小球WT1;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组肾皮质Nephrin和PodocinmRNA.[结果]治疗组的右肾质量、UAER低于模型组(均P＜0.05);治疗组Nephrin mRNA和Podocin mRNA表达水平高于模型组(均P＜0.01);肾小球荧光染色示WT1在对照组正常,模型组呈节段性缺失,治疗组缺失较轻.[结论]SM可以通过上调WT1蛋白、Nephrin和podocin mRNA的表达,保护足细胞,减少ADN小鼠的蛋白尿.
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糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及其机制研究
目的 观察糖肾一号胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠的作用及可能机制.方法 SD大鼠采用ip链脲佐菌素(STZ)方法制备DN模型,造模成功大鼠随机分为模型组,贝那普利组(1.04 g/kg),糖肾一号胶囊高、中、低剂量(9、6、3 gg/kg)组,每组15只,另设对照组15只,各组连续ig给药8周,测定各组大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、血清固醇元件结合蛋白1c(SREBP-1c)、SREBP-2c水平,进行尿微量白蛋白定量,检测各组大鼠肾组织IRS-1、PI3K、podocin蛋白表达水平.结果 与模型组比较,糖肾一号胶囊高、中剂量组大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、尿微量白蛋白明显降低(P＜0.05、0.01),血清SREBP-1c和SREBP-2c水平显著降低(P＜0.05),肾脏组织IRS-1、PI3K及podocin蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),而糖肾一号胶囊低剂量组升高不明显(P＞0.05),高剂量组与中剂量组比较差异显著(P＜0.05).结论 糖肾一号胶囊对DN大鼠具有一定保护作用,其能够降低DN大鼠血糖、血脂、血胱抑素C、尿微量白蛋白水平,作用机制可能与提高肾组织podocin蛋白表达、改善肾足细胞损伤、延缓肾脏纤维化有关.
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阿魏酸对糖尿病大鼠肾脏足细胞nephrin、podocin蛋白表达的影响
目的:研究阿魏酸(FA)对链脲佐菌素(STZ)致糖尿病大鼠肾脏足细胞损伤的影响,并探讨其可能的机制.方法:雄性SD大鼠尾静脉一次性注射STZ(40 mg/kg,i.v.),72 h后将血糖高于16.7 mmol/L者视为糖尿病造模成功,将其随机分为模型组、阿魏酸组,每组10只;另取10只雄性SD大鼠作为对照组;阿魏酸组(100 mg/kg,i.g.,qd),从大鼠血糖升高第5周开始给药,连续8周.测定空腹血糖、体重、肾脏脏器系数、血清尿素氮、肌酐含量;HE染色观察肾组织病理变化;免疫组化测定肾组织nephrin、podocin蛋白表达.结果:与对照组比较,模型组肾脏脏器系数增大,肾功能下降;病理学显示肾脏细胞萎缩,排列不整齐,并伴有间质增生;足细胞nephrin、podocin蛋白表达明显减少,阿魏酸组明显改善上述指标.结论:阿魏酸具有改善STZ致糖尿病大鼠肾脏功能的作用,其机制可能与上调肾脏足细胞nephrin、podocin蛋白表达有关.
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Podocin与糖尿病肾病
Podocin是新近发现的肾小球裂隙隔膜上的一个蛋白,参与肾小球滤过屏障的形成并维持其正常功能.在糖尿病肾病(DN)患者中存在其编码基因nphs2的异常和podocin蛋白的表达下降.Podocin蛋白表达下降可使nephrin诱导的肾小球足细胞内信号转导功能障碍,肾小球足细胞减少,肾脏裂隙隔膜结构与屏障功能的完整性破坏,肾小球蛋白滤过增加.Podocin在DN的发生、发展中可能起关键作用.对podocin的进一步研究可能对DN的诊治有重要的指导意义.
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左归降糖益肾方含药血浆对高糖培养小鼠足细胞podocin及nephrin表达的影响
[目的]探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞podocin及nephrin表达水平的变化,及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用.[方法]将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组(A组)、高糖组(B组)、左归降糖益肾方含药血浆组(C组)、4-苯基丁酸含药血浆组(D组).采用间接免疫荧光细胞化学法鉴定足细胞podocin及nephrin蛋白的表达;噻唑蓝(MTT)自动比色法检测足细胞活力,蛋白质印迹法,逆转录-聚合酶链反应法分别检测podocin及nephrin蛋白或mRNA表达水平的变化.[结果]与A组相比,B组足细胞活力,podocin及nephrin蛋白或mRNA的表达水平均降低(P＜0.01);与B组相比,C组、D组足细胞活力,podocin及nephrin蛋白或mRNA的表达水平均升高(P＜0.01);与C组相比,D组足细胞活力升高(P＜0.05).[结论]podocin及nephrin蛋白或mRNA表达水平的降低,是足细胞损伤的分子机制之一;左归降糖益肾方含药血浆可以通过升高podocin及nephrin蛋白或mRNA的表达水平,从而保护足细胞.
