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口腔幽门螺杆菌感染的研究
幽门螺杆菌(helicobacter pylori简称Hp)是一种营养要求高,微需氧的革兰氏阴性细菌.研究表明Hp是慢性活动性胃炎和胃十二指肠溃疡的主要病因,是人类胃癌的第一类致癌因子.Hp的致病因素包括鞭毛、尿素酶、粘附蛋白和毒素等.近来,口腔中Hp的存在逐渐引起人们的重视.
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空肠弯曲菌粘附蛋白PEB1的克隆表达及免疫保护性初步探索
空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni, Cj)已成为近年引起腹泻常见病原,而其某些菌株更被证实是诱发格林-巴利综合征(GBS)的主要前驱感染因子.Cj的可溶性蛋白(PEB1)是该菌侵袭肠道的重要致病因子,其抗原性在各个菌株间相对保守[1],使它可望成为Cj疫苗候选抗原成分.
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壶腹癌中微血管密度和E-粘附蛋白表达与肿瘤浸润转移及预后的关系
壶腹癌是一种生长、转移均较缓慢的肿瘤,但其所处部位和局部浸润转移复杂,较早浸润十二指肠壁,向上漫延至胆总管下端,并向胰头及其周围腹膜后组织浸润。本组共检测36例壶腹癌中微血管密度(intratumoral microvessel density,IMVD)和E-粘附蛋白(E-cadherin,E-cd)的表达,探讨其与壶腹癌浸润转移及预后关系。临床资料 本组病例为本院1991年1月至1997年7月行手术切除、并有完整资料的壶腹部癌36例,其中男24例,女12例,平均年龄(54±10)岁。本组壶腹癌32例,十二指肠乳头癌4例。标本经10%中性甲醛溶液固定12~24h,常规石蜡包埋、切片,片厚4~5μm,行HE染色,ABC法免疫组化。本组T1 4例,T2 12例,T3 4例,T4 14例;N0 24例,N1 10例。 本组E-cd、FⅧRAg为ZYMED公司生产,购于中山生物技术公司。 光镜下选择癌浸润区,每张切片观察10个视野(10×40倍),计数每个视野内小静脉和微血管,取其均值为每张切片的IMVD。 本组采用t检验、χ2检验和方差分析。
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膀胱移行细胞癌E-钙粘附蛋白和α连接素表达的定量研究
目的:定量地检测E-钙粘附蛋白(E-cad)及α-连接素(α-CTN)在膀胱移行细胞癌的表达,并探讨它们与肿瘤生物学行为的关系.方法:应用流式细胞术,检测30例膀胱癌冰冻组织的E-cad和α-CTN的表达量.结果:肿瘤细胞E-cad(0.5677±0.3194),α-CTN(0.5726±0.2895)的表达量(荧光指数,FI)均明显低于正常粘膜(P<0.01).浸润型肿瘤二者表达量低于表浅型肿瘤(P<0.01),复发者E-cad表达量低于初发者(P<0.05).E-cad和α-CTN表达量呈正相关(P<0.01).结论:膀胱移行细胞癌E-cad和α-CTN表达均下调,并以浸润型肿瘤为显著,肿瘤复发后,其E-cad表达量降低.E-cad和α-CTN表达量呈正相关.二者下调可能具有因果关系.
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claudin-7与E-cadherin在肝癌中的表达及相关性研究
肿瘤的侵袭和转移是重要的生物学行为,claudin一7属于claudins蛋白家族,是构成细胞紧密连接的重要成分,其异常表达与肿瘤的发展及预后相关.上皮粘附素(E-cadherin)是重要的粘附蛋白,在多种肿瘤的转移中起重要作用.我们于2006年1月至2009年12月用流式细胞术半定量检测claudin-7与E-cadherin在肝癌及正常肝组织中的表达,分析其表达意义及相互关系,为探讨肿瘤的生物学行为提供依据,报告如下.
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急性脑血栓形成患者血小板膜糖蛋白临床研究
血小板的功能依赖其膜表面的糖蛋白受体和血浆蛋白质、血管壁上粘附蛋白的相互作用.血小板膜糖蛋白发生异常变化时,可引起血栓形成[1],采用流式细胞术的方法可以敏感、特异地分析血小板膜糖蛋白的表达量变化[2],因此我们采用流式细胞术对69例急性脑血栓住院患者进行了血小板内α-颗粒膜糖蛋白(CD62p)、溶酶体膜糖蛋白(CD63)测定,结果报告如下.1 病例与方法1.1 病例选择1997年8月~1999年8月69例急性脑血栓住院患者,男28例,女23例,平均年龄(55.74±7.62)岁.诊断符合第二次全国脑血管病学术会议制定的诊断标准,均经头颅CT检查证实.对照组为健康自愿者,男11例,女10例,平均年龄(53.63±9.84)岁.检查前10d内未服用阿斯匹林、潘生丁等影响血小板功能的药物.1.2 方法患者在发病2 d内检查,抽空腹血1 ml,EDTA抗凝,离心10 min(800 r/min),取上清液100 μl,加等量2%甲醛室温下固定10 min,加PBS 2 ml,离心10 min(2 500 r/min),弃上清,留取沉淀500 μl,洗2次,调整血小板浓度为300×109/L,加入20 μl荧光单抗(法国国际免疫技术有限公司)至100 μl 血小板混悬液中,以美国Coulter公司XL型流式细胞仪进行检测.1.3 统计学处理采用SPSS统计软件包.结果以均数±标准差表示,组间比较行t检验.
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人参皂甙Rb1改善转基因扩张型心肌病模型小鼠的心功能和心脏重构
目的 利用cTnTR141W转基因扩张型心肌病小鼠,研究人参皂甙Rb1对遗传性扩张型心肌病心功能及心脏重构的作用及其可能机制.方法 将cTnTR141W转基因小鼠随机分为模型组和人参皂甙Rb1治疗组(70 mg/kg/d),连续给药7个月,取野生型小鼠作为对照组.心脏超声检测心脏功能及几何构型.HE染色观察心肌细胞变化.透射电镜分析心肌超微结构.RT-PCR检测心肌粘附蛋白的表达.免疫荧光激光共聚焦观察心肌粘附分子Itga8的表达与分布.结果 Rb1长期给药能显著改善该模型的心脏功能及几何构型.光镜和透射电镜观察显示Rb1能减轻心肌细胞排列紊乱及超微结构的破坏.RT-PCR结果显示,在模型中Cx40表达降低,E-cad、itga8 和itgb1bp3表达升高,但在Rb1组中接近正常水平.免疫荧光激光共聚焦结果显示Rb1可降低Itga8的表达量并调节其分布.结论 Rb1可改善扩张型心肌病模型的心功能,抑制心脏重构,其作用可能部分通过调节粘附蛋白的表达而实现的.
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骨桥蛋白和粘附蛋白CD44v6在肺癌组织的表达及临床意义
目的 探讨骨桥蛋白OPN和粘附蛋白CD44v6在肺小细胞癌和肺鳞状细胞癌进展中所起的作用及其对患者预后的影响.方法 应用免疫组织化学法检测134例肺癌组织标本中OPN和CD44v6的表达情况,比较分析肺小细胞癌患者和肺鳞状细胞癌患者的3年生存率.结果 OPN和CD44v6在肺小细胞癌中的表达均明显低于在肺鳞状细胞癌中的表达,差异有统计学意义(P<0.01);在肺鳞状细胞癌中,OPN和CD44v6的表达呈正相关(r=0.395,P<0.01);在肺鳞状细胞癌中仅CD44v6 的表达差异有统计学意义(P<0.05).两种肺癌患者3年生存率差异有统计学意义(P<0.05).结论 提示CD44v6可作为判断肺鳞状细胞癌预后的独立指标,而OPN不可作为其预后的独立指标,但二者可以联合作为判断肺鳞状细胞癌预后的参考指标.
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组织工程弹簧圈与组织工程支架
弹簧圈和支架是脑血管病血管内介入治疗的主要材料,以弹簧圈、支架为机械栽体,以生物可降解材料或病毒为生物栽体,携带体外制备的蛋白、细胞、基因、粘附蛋白或细胞因子,借助常规导管技术引入血管内,治疗相应脑血管病,即弹簧圈和支架的组织工程技术.组织工程弹簧图和组织工程支架,有的还处在动物实验或临床前期试验阶段,有的已应用到临床,并取得了良好效果.该技术具有高度生物相容性、可生长性、可塑性及不对机本产生损定等优点,预计临床应用前景良好,将有可能逐渐取代裸弹簧围和裸支架,成为神经介入领域的材料进展新亮点.
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空肠弯曲菌粘附蛋白PEB1原核表达、纯化及多克隆抗体制备
[目的]克隆、表达空肠弯曲菌表面蛋白PEB1,并制备针对该蛋白的多克隆抗体.[方法]采用PCR方法从空肠弯曲菌Penner19标准株基因组中扩增出PEB1蛋白基因,用限制性内切酶消化后插入到pUC-19克隆载体中,测序正确后,再亚克隆到融合表达载体pPro-EXHTb中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的PEB1蛋白,并经Western-blotting证实.然后,在非变性条件下用Ni-NTA亲和色谱柱纯化目的蛋白.用纯化的PEB1蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,用ELISA法检测抗体效价.[结果]在非变性条件下用Ni2+-NTA亲和色谱柱纯化PEB1融合蛋白,纯化获得的蛋白纯度大于90%.用该融合蛋白免疫小鼠后,得到抗PEB1抗体,效价达1:2× 105.[结论]成功构建了空肠弯曲菌PEB1基因原核表达载体,并获得了高纯度的PEB1蛋白及其高效价多抗,对进一步制备肠粘膜高亲和力的过敏原重组BCG打下了坚实的基础.
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粘附分子和粘附蛋白在DVT和PTE发生发展中的作用
粘附分子和粘附蛋白通过介导细胞之间的粘附作用,从而在促进深静脉血栓形成和肺栓塞发生发展中起重要作用.
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血小板的生理和血小板减少的发病机制
1血小板的生理1.1血小板的形态、数量和功能血小板(platelet或thrombocyte)是从骨髓中成熟的巨核细胞(megakaryocyte)胞浆裂解脱落下来的具有生物活性的小块胞质.正常情况下呈两面微凹的圆盘状,直径平均2~4μm,体积平均8μm3.电子显微镜下的超微结构有:α-颗粒、致密体、溶酶体、过氧化物酶体、开放管道系统、致密管道系统及微管等.α-颗粒是血小板中数量多的细胞器,其中含有生长调节物、粘附蛋白、凝血因子及其他蛋白质;致密体(dense body,δ-颗粒)含有ADP、ATP、5-羟色胺、Ca2+及肾上腺素等,血小板中的ADP和ATP约有65%储存在致密体中;开放管道系统是血小板向外分泌物质及血浆物质进入血小板的通道;致密管道系统内含有Ca2+,与血小板聚集及前列腺素的合成有关.
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哮喘患儿血清嗜酸细胞趋化酞白细胞介素-5的测定及其临床意义
支气管哮喘是一种涉及多种炎性细胞的慢性炎症性疾病,其中嗜酸粒细胞(Eos)是关键的效应细胞.因此与嗜酸粒细胞炎症相关的蛋白、细胞因子和粘附蛋白的研究日益受到重视.本研究应用ELISA测定支气管哮喘患儿血清嗜酸细胞趋化酞(Eotaxin)、白细胞介素-5(IL-5)的质量浓度,旨在加深对这两种趋化因子的分子学特性和在哮喘发病机制中作用的认识,并探讨其评价哮喘气道嗜酸粒细胞炎症的临床价值.
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成纤维细胞在PHB可降解材料上的粘附与生长研究
聚羟基丁酸酯(PHB)多孔材料可作为组织工程用的支架,然而细胞在此材料表面不易粘附生长,这与粘附蛋白在聚合物材料表面的吸附有关.基于材料表面的粘附与细胞生长、增殖、分化和组织发育密切相关,粘附强度可影响工程组织的终结构与功能,本文通过对PHB材料进行多聚赖氨酸衣被,有效地实现了在PHB可降解支架上种植细胞来构建工程组织.
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血管内膜粘附功能在缺血性血管病中的作用
缺血性血管病严重威胁着人民的健康,许多血管病的共同表现为细胞活化、血流减少、血栓形成,使局部组织急性缺血以致造成严重后果如急性心梗、脑卒中等。炎症,动脉粥样硬化(AS),血栓形成是许多血管病的共同特点。要提高对血管病的治疗效果,应该在对维持血管正常结构、内环境稳定功能调节及造成病理异常过程机制的深入认识的基础上提出新的途径。 正常血管衬覆一层内皮细胞(VEC),通过整合素与内皮下细胞外基质连接构成血管内膜,其下为平滑肌中层及外周结缔组织的外膜。VEC位于血液与血管壁的界面,能感知微环境的各种信号,通过合成释放种种活性物质,调节血管张力、凝血状态、血管通透性及细胞生长。VEC还起着门卫作用,调控着各种血细胞的出入。正常状态下,血管内膜是非粘附与非致栓表面,流动的血细胞不与VEC相互作用,保持着血液正常流动。但在一些因素作用下,血细胞与VEC或内皮下基质的异常粘附,在形成病理过程,如炎症血栓及血管病发生发展机制中起着作用。本文介绍在缺血性血管病中内皮细胞与白细胞、血小板相互作用的有关内容。 细胞间粘附是通过细胞膜上表达粘附蛋白的介导,体内血细胞在切应力作用下与VEC相互作用,不仅取决于粘附分子表达并与作用的切应力有密切关系。血细胞与VEC粘附经过多个步骤,初两种细胞间呈可逆性粘附(或称依附)、依附细胞活化,而引起细胞间紧密粘附,此时能对抗剪切力的去粘附作用,而后血细胞伸展穿膜迁移进入组织间,在这个过程中除了粘附分子参与外,还需有趋化因子或趋化物参与。
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血小板的止血功能与出血性疾病
在初期止血和血栓形成过程中血小板起着重要作用.当血管内皮损害暴露内皮下组分时血小板就会被活化,发生血小板的粘附和聚集.血小板的粘附、聚集和活化反应是通过血小板膜糖蛋白的功能而实现的.目前进行深入研究的有下列3类血小板膜糖蛋白:(1)糖蛋白(GP)Ib-IX作为粘附蛋白vWF受体参与血小板粘附于受损血管壁的反应.(2)GPIIb-IIIa作为粘附蛋白纤维蛋白原(Fbg)的受体在血小板聚集和血栓形成中起重要作用.(3)GMP-140(亦称P-Selectin)在血小板活化后暴露在血小板膜表面,并作为PSGL-1的受体参与血小板粘附白细胞的反应.
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细胞粘附蛋白与大肠癌浸润、转移的关系
本文探讨细胞粘附蛋白与大肠癌的关系,以了解肿瘤的发生、浸润和转移的机理.材料和方法一、材料:经病理证实的大肠癌80例,其中结肠癌34例,直肠癌46例;男性44例,女性36例.平均年龄51.2岁(32~75岁).采用目前国内分型标准,按大体分型分为隆起型35例,溃疡型37例,浸润硬化型8例.按组织学分类分为乳头状腺癌和管状腺癌(高、中分化)38例,低分化腺癌37例,粘液腺癌和印戒细胞癌5例.
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vW因子与糖尿病微血管并发症
vW因子(von Willebrand因子,vWF)是内皮细胞与巨核细胞合成的一种重要的内皮下粘附蛋白,参与血小板粘附、聚集,是血小板粘附于受损微血管的一个重要因子,在微血管内皮细胞受到刺激时释放至血浆,其水平升高已经成为微血管内皮损伤标志之一.
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梅毒螺旋体Tp 0751重组蛋白的表达及鉴定
目的 表达梅毒螺旋体粘附蛋白Tp 0751,纯化表达产物并对其抗原性进行鉴定. 方法通过生物信息学分析,去除Tp 0751信号肽序列,构建原核表达体并在大肠埃希菌(E.coli)R2566中进行诱导表达;Ni-NTA法纯化重组蛋白;蛋白质印迹法(WB)鉴定重组蛋白.结果 成功构建了PET-28a(+)/Tp 0751原核表达载体;经表达、纯化后获得了相对分子量约为26 kD的融合蛋白;经WB分析能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应. 结论重组表达的Tp 0751重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步研究Tp 0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定了基础.
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牙骨质基质提取物促进牙龈成纤维细胞在光滑钛表面上粘附及移行的实验研究
目的:了解牙骨质基质提取物能否促进牙龈成纤维细胞在金属钛表面的粘附与移行,以改善种植体的龈界面.方法:选用表面光滑的金属钛片作为细胞粘附的底物,检测各时间点牙骨质基质提取物对牙龈成纤维细胞在钛片上贴壁率的影响,并着运用图象分析法分析1、3、6天钛片周围牙龈成纤维细胞的粘附指数和3、6天钛片周围牙龈成纤维细胞的移行指数.结果:随牙骨质基质提取物作用时间的延长牙龈成纤维细胞的贴壁率不断上升,且牙骨质基质提取物无论是牙龈成纤维细胞在钛片周围的粘附指数还是移行指数均明显高于对照组.结论:牙骨基质提取物可作为种植体表面的生物涂层材料以在种植体周围获得良好的牙龈封闭.