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关于实验性尘肺研究问题的访谈
编者按:近不少读者反映在实验性尘肺研究中存在许多诸如实验方法和评价指标等具体问题.我编辑部特邀请中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所前所长、博士生导师邹昌淇研究员就尘肺实验的一些问题谈谈他的看法,敬请广大读者阅后提出意见和建议.
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参麦注射液中人参皂苷含量测定
参麦注射液由人参、麦冬提取制成,临床上用于治疗休克、冠心病、病毒性心肌炎、慢性肺心病、粒细胞减少症等。人参皂苷是其主要成分之一,我们采用柱层析提取及分光光度法,测定参麦注射液中人参皂苷的含量,比较不同厂家参麦注射液的质量。1 仪器及药品 2401型紫外可见分光光度计(日本岛津公司);ZTC-Ⅰ型大孔吸附树脂(天津正天成澄清技术有限公司);人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所);参麦注射液(浙江某药厂及四川某药厂,以下分别称A厂和B厂);化学试剂均为分析纯。2 实验方法2.1 对照品溶液的制备:配制人参皂苷Re 2mg/mL的甲醇溶液。2.2 标准曲线的制备:精密取对照品溶液0,10,20,40,80,120,160μL,分别置10 mL具塞试管中,热风吹干,加5%番草醛冰醋酸溶液-高氯酸(2:8)(临用新配)的混合液1.0 mL,于60℃恒温水浴放置15 min,取出后冰水冷却,加入冰醋酸5.0 mL,混匀,立即分光光度法544 nm测定,以第一管空白为对照。绘制标准曲线,计算得回归方程为:A=
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匙羹藤种子的鉴别研究
匙羹藤种子来源于萝摩科植物匙羹藤Gymnema sylvestre (Retz.) Schult。该植物分于印度、非洲、越南和我国广东、广西、福建、台湾和云南等省区。中医传统认为其叶性平,味苦。有止痛、生肌和消肿之功效[1]。国内对其研究报道不多,前已报道[2]叶和茎的生药鉴定。本文对其种子进行鉴别研究,现报道如下。1 实验仪器与材料1.1 仪器:UV-160 A紫外分光光度计(日本岛津);三用紫外分析仪(日本岛津)。1.2 材料:样品匙羹藤种子采自广西南宁郊区,经本院刘寿养副教授鉴定为萝摩科植物匙羹藤Gymnema sylvestre (Retz.) Schult的种子。所用试剂均为分析纯。2 实验方法2.1 药材性状:种子呈卵圆形,扁平,长8~9 mm,宽4~5 mm;顶端有白色种毛,有的长达3.5 cm。种皮墨绿色,质脆,剥去种皮后可见类白色胚乳,子叶二枚,黄白色,油润。气香浓郁,味苦。2.2 粉末显微鉴别:粉末褐黄色,种皮表皮细胞成片存在,表面观多角形,垂周壁不均匀增厚;断面观偶见,可见细胞1例,壁增厚。胚乳细胞(见图1),内含油滴和糊粉粒,多见1个草酸钙方晶存在于1个胚乳细胞中。子叶细胞呈多角形、类圆形或类方形,胞腔内充满细小糊粉粒和脂肪油滴,有的含草酸钙簇晶(图1)。
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人参、西洋参气味的色谱指纹鉴别
人参、西洋参鉴别的方法有许多,如TLC法及HPLC法等[1~4]。这些方法的共同特点是部骤较多,耗时较长,且检品本身在被鉴定的同时也被破坏。许多有经验的老药师凭外观及气味进行鉴别,但总是有主观性,不太科学,受此启发,我们根据其气味的不同用科学仪器进行鉴别。1 材料与方法1.1 试验材料:当年产4年生人参(产自吉林)及西洋参(产自吉林、北京)生晒品。1.2 试验仪器:岛津GC-9A气相色谱仪;氢火焰离子检测器;顶空进样装置:PEG-200弹性石英毛细管柱;气体样品扑集装置1.3 实验方法:分别将人参和西洋参置于密闭容器中,用取样器抽取气体样品。用GC顶空进样法对样品进样分析。进样口温度:150 ℃;柱温:程序升温 50 ℃→230 ℃ (5 ℃ / min);检测器温度:180 ℃;空气:300 mL/min;氢气:20 mL/min;氮气:20 mL/ min。2 结果 人参或西洋参不同产地的样品比较,其GC图指纹轮廓一致,而人参与西洋参比较,GC图指纹轮廓则有显著差异(见图1)。
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特发性血小板减少性紫癜患儿Th1/Th2相关细胞因子的检测
特发性血小板减少性紫癜(ITP)是一种自身免疫性疾病,其发病机制尚未完全明确,目前认为其发生与患者机体Th1/Th2细胞的平衡失调有关[1, 2].我们参考Sewell等的实验方法[3],建立了流式细胞术检测单个淋巴细胞内细胞因子方法,检测了12例儿童ITP患者的Th1/Th2细胞相关细胞因子IFN-γ和IL-4的表达情况,并与正常儿童相比较.
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35倍浓肾透析液配料中有关问题的研究
随着血液净化技术的普及,35倍浓人工肾透析液在临床的用量日趋增加.我院制剂室在配该溶液时发现,因为溶液浓度过高不能按通常溶解法配制时规定的溶解药物用溶媒加入量的1/2或3/4进行配制,溶媒用量偏少,使药物难溶解,造成配制时费时费力.溶媒用量偏多,则留下荡洗配制容器及滤材;溶媒太少,无法荡洗干净容器和滤材.同时发现配料过程中温度变化对体积的影响较大.针对上述问题,研究了溶解药物需加入的小溶媒量计算方法及体积受温度影响时的校正方法,从而解决了放置过程难以保持稳定的问题.实验方法和结果如下:
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药物溶出度及其测定方法的进展
溶出度测定法是在体外对体内药物生物利用度进行研究和评价的有效的替代方法,也是保证和衡量固体口服制剂生产工艺及质量是否合理和稳定的一项重要手段.它以科学先进的测定手段替代了过去的崩解时限检查,从而提高了药品质量控制方法的科学性,保证了药品的临床疗效.本文就溶出度与崩解时限的关系、溶出度与生物利用度的关系、溶出度及其测定法的影响因素、溶出度实验方法的研究内容以及在药物分析上的应用及新进展等综述如下:
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应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法学及形态学探讨
近年来国内外陆续报道了应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法,这对于初步鉴别血尿来源具有一定的临床价值[1,2].但由于目前各实验室的方法学尚不规范,对于肾小球性红细胞(肾内红细胞)和非肾小球性红细胞(肾外红细胞)的形态学认定标准不统一,从而出现了不同实验室检验结果的不一致性,贻误临床诊断.因此亟待规范实验方法,统一畸形红细胞的认定标准.
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论文投递中关于统计学方法应用的一点体会
总结多次投稿经验,其中在统计方法上用到关于病例随访资料分析,结合统计学基本内容,谈一点体会.下面简单介绍实验的背景及存在的问题.1 本实验方法将种瘤后5天的40只大鼠随机分为5组,每组8只,A组为Ad.hTNF组;B组为Ad.hIL-2组;C组为Ad.hTNF+Ad.hIL-2组;D组为标记基因重组腺病毒(Ad.LacZ)对照组;E组为培养液对照组.
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“有机磷酸酯类中毒及解救”实验方法的改进
通过“有机磷酸酯类中毒与解救”实验,使学生掌握相关的“中毒及解救”知识,这有助于医学生将来的临床实践。传统实验采用家兔,因采血方式等问题而影响了实验的成功率。用小鼠取代家兔进行实验,方法简便易行,结果可靠。同时符合动物福利,节约实验成本。
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强直性脊柱炎患者早期诊断及免疫功能的研究
强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis AS)是一种多部位关节受累的自身免疫性疾病,病程长,临床上早期误诊率较高,疾病中、晚期致残率高。为提高该病的早期诊断率及了解患者免疫状况,我们对165例AS患者进行了12项免疫指标的检测,现报告如下。1 材料与方法1.1 材料 1996年2月-1999年12月,对可疑AS患者常规做骶髂关节X线平片和[或]CT和[或]ECT检查,化验白细胞抗原-B27(HLA-B27)、抗链O(ASO)、类风湿因子(RF)、C-反应蛋白(CRP),对依诊断标准[1,2]确诊的患者做T淋巴细胞亚群CD3、CD1、CD8,免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及补体C3、C1检查,资料完整者共165例,其中男144例,女21例,年龄6~51岁,平均25岁;病程3个月~21年,另以正常健康体检者30例作对照,其中男18例,女12例,年龄20~35岁。1.2 实验方法 取患者静脉血约8ml分装于2个试管中,1试管用肝素抗凝,常规方法分离淋巴细胞,洗涤备用,用微量法做HLA-B27检查,剩余淋巴细胞按APAAP方法进行洗涤、制片、冷冻保存,批量检测T淋巴细胞亚群,试剂来源于军事医学科学院。另一份全血标本分离血清后做ASO、RF、CRP,将剩余血清低温冻存,批量检测免疫球蛋白、补体,实验采用美国Beckman Array全自动特定蛋白分析系统,进口试剂,速率散射比浊法,结果以均数加减标准差表示,对照组以同样方法处理,用t检验统计,结果以x±s表示。
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超声提取酵母菌中多糖的实验方法研究
大量的研究表明酵母多糖具有免疫活性和抑制肿瘤生长等作用.据报道[1]酵母多糖主要成分为大分子的甘露聚糖,具有类似抗生素的作用,可取代抗生素添加于动物饲料中,同时可调整肠道活动,对肉鸡、仔猪、出生犊牛均有促生长、抗病作用.因此酵母多糖的多种功效引起人们的广泛关注,并对其研究更深入、更多元化.我们采用正交试验设计法对酵母多糖的提取工艺进行研究,运用超声波技术辅助提取酵母多糖,提取速度快,可有效提高目标成分的提取率.
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血管钠素肽对大鼠血流动力学影响
血管钠素肽(vasonatrin peptide,VNP)是Wei[1]等于1993年首次合成的一种具有利钠利尿作用的类心房肽物质,其结构是心房利钠尿肽和C型利钠利尿肽的嵌合体。本研究以正常及心肌缺血SD大鼠为动物模型,初步观察了VNP对大鼠血流动力学影响,以探讨其生理及病理学意义。1 材料与方法1.1 实验动物与分组SD大鼠16只,雌雄不限,体重270~300g,随机分为两组,分别用于观察VNP对正常及心肌缺血大鼠左室收缩末压(left ventricular end systolic pressure,LVSP)、心输出量(cardiac output,CO)、平均动脉压(meamartery blood pressure,MAP)、心率(heart rate,HR)及总外周阻力(total peripheral resistance,TPR)影响。1.2实验方法SD大鼠用戊巴比妥钠(40mg/kg)常规麻醉后,气管插管,正压人工呼吸。其中正常组大鼠采用常规血流动力学方[2]分别测定计算给药(VNP5μg/kg,iv)前后LVSP、CO、MAP、HR和TPR的变化。心肌缺血组大鼠则以0号丝线结扎左冠状动脉,造成结扎以下部位急性心肌缺血模型。待动物稳定20min后再给药观察各指标变化。1.3统计学处理所有结果均表示为x±s,用配对t检验统计学分析。
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雷公藤多甙对正常动物体内NO的影响
雷公藤多甙(TWP)是从雷公藤去皮根中提取的甙类有效成分,临床广泛用于类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、肝炎及血小板减少性紫癜等疾病的治疗.雷公藤多甙治疗类风湿性关节炎,可显著改善关节炎性疼痛症状,抑制外周血单核细胞在体外产生IgM及IgM类风湿因子,且未发现有糖皮质激素样副作用[1].因此,临床有用雷公藤多甙取代激素治疗关节炎的趋势.但其机制方面的研究尚少,对NO的影响未见报道,因此,本研究主要应用镉还原柱层析和Griess比色法,来测定NO的稳定代谢产物NO-2/NO-3,分析雷公藤多甙对正常动物体内NO的影响,以初步探讨其作用机制,并建立一套实验方法,为进一步研究具有抗炎、抗免疫作用的中药有效成份的作用机制打下基础.
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癌胚抗原、胆固醇、乳酸脱氢酶在鉴别胸腹水性质中的意义
我们通过检测146例患者胸腹水及血清癌胚抗原(CEA)、胆固醇(Ch)、乳酸脱氢酶(LD)等项指标,探讨此数值的改变在鉴别胸腹水中的意义。1 资料与方法1.1 病例选择 146例胸腹水患者均为我院住院患者,男性96例,女性50例,年龄27~78岁。其中确诊为恶性肿瘤的胸腹水患者(恶性渗出液)56例,非肿瘤的胸腹水患者90例;根据比重和总蛋白将90例非肿瘤患者的胸腹水分为漏出液(比重<1.018,总蛋白<30g/L)48例和良性渗出液(比重>1.018,总蛋白>30g/L)42例。以上诊断均经病理学和B超影像学 确诊。1.2 实验方法 抽取胸腹水的同时抽血,胸腹水以3 000r/min,离心10min,取上清液与血清同时测定且当日完成。比重按常规法,总蛋白、Ch、LD用贝克曼生化分析仪测定,CEA由雅培免疫分析仪测定。胸腹水测定值与血清测定值之比简称为比值。恶性胸腹水阳性标准为CEA>15μg/L、Ch>1.42mmol/L、LD>423IU/L[1~3]。1.3 统计学方法 R×C表卡方检验,P<0.05为差异有显著性意义。
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谈谈血液标本采集的干扰因素及其控制
随着医学科学技术的不断发展,给临床检验的质量提出了更高层次的要求,虽然临床实验室具备了精密的仪器,可靠的实验方法,但对于标本的正确采取技术要求越来越高,因此,对于临床护士如何排除标本采集的干扰因素,正确掌握标本采集技术,保证临床实验室检测结果的准确性,是一个值得探讨的问题,笔者谈谈血液标本采集的干扰因素及其控制,供同道们参考.
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急性(牙合)干扰对下颌髁突软骨影响的计量组织学研究
加高咬合造成局部高点接触,是常用的探讨咬合异常对颞颌关节影响的动物实验方法[1~3].本实验采用过度充填的方法,造成兔双侧第一前磨牙高点接触式急性(牙合)干扰,以计量组织学方法分析髁突软骨的变化,探讨这类咬合异常对髁突软骨组织形态影响的规律.
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生理学教学实验中的干扰现象及其排除方法
干扰是生理学实验中对正常的实验现象和结果产生影响多见的也是严重的因素.不同的实验内容、实验仪器及实验方法产生干扰的原因各不相同,其干扰现象及排除方法也不同.识别不同的干扰现象和掌握其排除方法,是保证实验结果准确及提高教学质量的重要环节.
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ELISA法检测梅毒的必要性研究
梅毒是以梅毒螺旋体为病原体的一种危害性很大的传染病,其主要传播途径是性接触和输血.梅毒螺旋体的抗体检测作为输血安全的必测指标,其实验方法的选择尤为重要.本文对上甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)及酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法进行了比较,并用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)作了确证,报告如下.
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临床检验标本留取对检验结果准确性的影响
医学检验结果互认问题是目前卫生界探讨的热门话题.但是我们不能把实验室互认简单地理解为实验方法、仪器、试剂的统一.它涉及到临床医生和护理人员的密切配合,目前各二级以上医院实验室都开展了室内质量控制,并积极参加了卫生部及省级临检中心开展的室间质评活动,对分析中、分析后的质量控制,同行们都开展得很好,由于分析前质量存在一些检验人员无法控制的因素,如住院患者标本采集前的准备,标本采集、贮存及送检过程等,这些因素直接影响检验结果的准确性.我们现将几年来遇到因标本采集因素对检验结果影响问题探讨如下,供同仁借鉴,引起重视.