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气相色谱-质谱测定尿液中的克伦特罗
拉贝洛尔、克伦特罗属于肾上腺类-受体激动剂(神经兴奋剂),即β2-受体激动剂.我国和欧盟已经禁止其作为生长促进剂,并且规定了克伦特罗在动物组织中的大残留浓度为0.5μg/kg.这些物质在动物性食品中往往以痕量水平(μg/kg)存在,检测样品基质(如尿液和肝脏等)本身也具有复杂性[1~3],本文旨在建立一种简单、快速、灵敏度高、特异性强的分析方法,以满足目前其在生物样品中的检测需要.
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AQP-4研究进展
AQP-4是一种选择性水通透的内在膜蛋白,属于主体内在蛋白家族的成员,是目前哺乳动物组织中已被鉴定的十种水通道蛋白中的一种.大多数水通道蛋白活性可被汞抑制,而AQP-4为汞不敏感水通道蛋白(MIWC),现已发现AQP-4主要存在哺乳动物的脑组织中,而眼、肾、胃肠、肺组织等则表达较少.但在不同器官组织中,其作用及调节水转运机制不同.研究AQP-4分子结构、生化、病理生理变化及水代谢障碍疾病的关系,对于指导临床水代谢障碍疾病如脑水肿、肾衰竭等的治疗及其新药的开发具有十分重要的意义.
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透明质酸在角膜保存及干眼病治疗方面的研究进展
透明质酸(Hyaluronan acid HA)又名玻璃酸,其钠盐为透明质酸钠(SH),是由葡糖醛酸和乙酰氨基己糖组成的双糖单位聚合而成的直链高分子粘多糖,广泛存在于动物组织细胞间质中.
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动物组织中土霉素四环素金霉素残留量测定方法初探
目前,在畜、禽、牧、水生生物等产业应用药物进行诊断、预防和治疗某些疾病,促进动物生长、提高饲料转化率等日益普遍.兽药及饲料添加剂致动物性食品的药物残留和污染已经构成对人类健康的潜在危害.因此,对动物性食品中兽药残留量的检测技术,受到国内、外学者的关注.笔者在简便、快速、高灵敏度下实现了土霉索、四环素、金霉素的同时测定,结果令人满意.
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冠状动脉粥样硬化PCI术后肝素诱导血小板减少症的诊治
肝素是一种常用的药物并且在世界范围内有着较为广泛的应用,肝素在机体中少量自然产生,其活动机制是通过抑制等离子体辅助因子及凝血酶,从而使凝血酶及 X因子、IX因子失活[1]。而在临床上,则是将从动物组织中提取的肝素应用于人体,以达到治疗和预防血栓栓塞性疾病的目的。
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GGT及其同工酶检测的临床应用
γ-谷氨酰转移酶(GGT,EC2.3.2.2)又称γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT),是一种广泛分布于哺乳动物组织中的质膜结合糖蛋白.自1950年Hanes等首先发现以来,众多学者不断进行深入的研究,其临床价值倍受关注.本文就GGT及其临床应用概述如下.
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牛磺酸对心血管系统作用的研究进展
牛磺酸(Taurine)是一种含硫的β-氨基酸,广泛存在于人及哺乳动物组织细胞内,对维持人和动物正常的生理功能具有重要意义,它在平衡细胞渗透压,维持细胞膜的稳定性,调节氧自由基损伤和细胞钙稳态等方面起到细胞保护作用.如果体内缺乏牛磺酸, 可导致多种疾病的发生.牛磺酸在心血管组织中含量丰富,对改善心血管系统的功能将起到重要作用.在心血管功能异常状态下,补充牛磺酸可改变疾病的发生、发展,起到预防和治疗疾病的作用.
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微波辐射固定和微波辐射与甲醛结合固定动物组织方法
利用微波辐射固定组织和微波辐射与固定液结合固定组织的报道已有不少[1-4],但多是某一具体方法的报道,而很少对在利用微波辐射固定组织中起决定作用的因素进行探讨,也很少有对微波辐射与固定液结合固定组织的方法进行全面性探讨.为此,我们进行了微波辐射固定动物组织和微波辐射与甲醛固定液结合固定动物组织的实验,现报道如下.
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显示钙质、纤维和细胞的组合染色法及其应用
在人体和实验动物组织病变的情况下,含有多种不同形态特点的钙盐沉积物.为了能够更好证明钙质和其它的组织成分,经过改进与选用的茜素红(Alizarinred S)、碘绿(Iodine green)、亮绿(Brilliant green)和马汀氏黄(Martius yellow)染色剂进行组合染色,能够分别显示钙质呈红色,胶原纤维呈蓝绿色、细胞核呈绿色和红细胞呈黄色,色彩鲜艳,对比清晰,是较为可靠的染色方法.
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改良酸性硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取动物组织RNA
提取组织中的RNA是分子生物学实验的基本操作,高质量的RNA是许多分子生物学研究成功与否的关键.我们实验室在实验过程中,对目前常采用的RNA酸性硫氰酸胍-酚-氯仿一步提取法[1]进行了改良,从而建立起一种较为简便、高效、经济的提取组织RNA的方法,其RNA的完整性、纯度及RT-PCR结果均令人满意.现介绍如下,供大家参考.
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神经元特异性烯醇化酶与脑损害
烯醇化酶普遍存在于哺乳类动物组织中,参与糖酵解过程.烯醇化酶由α、β、γ三种亚基组成,以αα、ββ、γγ、αγ、αβ五种形式存在.其中αγ和γγ两种亚基特异性地存在于神经系统中成熟的神经元和神经内分泌细胞中(线粒体内).γγ型是神经元中的主要亚型,故命名为神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)[1].
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免疫组化技术在实验动物组织中的应用体会
医学研究领域中常应用实验动物建立具有人类疾病模拟表现的疾病动物模型,这是人类认识自身疾病发生、发展规律和研究防治措施的重要途径.当科研人员利用实验动物完成疾病造模后,往往采用免疫组化技术对动物组织进行鉴定,以检测疾病造模效果,并从中总结出规律性的东西为人类健康服务.但是在以往实验动物组织的免疫组化实验中存在一些问题,下面就相关问题谈点我们的思考和体会.
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盐酸克伦特罗(瘦肉精)的检测方法进展
本文对动物组织、尿液及饲料中盐酸克伦特罗的各种分析方法给予综述介绍.
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弓形虫分子遗传学研究概况
弓形虫是寄生于人类和多种脊椎动物组织和细胞内的机会性致病原虫,广泛地分布于世界各地,能导致胎儿或婴幼儿发育畸形、智力障碍、脑炎、脑膜炎甚至死亡,近年来又发现它是人艾滋病脑炎的重要病原体[1],从多个病例的系统研究中证实弓形虫病与爱滋病有密切关系[2].周梅等(2001)对我国新疆不同民族的50例HIV抗体阳性血清进行弓形虫抗体检测,结果表明HIV阳性病人中合并弓形虫感染的显著高于正常人群[3].在畜牧业,弓形虫可以引起畜禽疾病,尤其给猪、羊、牛养殖业带来严重经济损失.因此,国内外学者开展了一系列弓形虫和弓形虫病的基础性研究.其中,弓形虫分子遗传学的研究涉及到弓形虫的分布以及虫株毒力等特征,是弓形虫病预防和治疗的重要基础工作,各国学者为此展开了全面的研究.
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抗血栓药--生化药物研发的一个热点
抗血栓药是目前增长较为迅速的一个药物类别,也是生物化学制药企业关注的领域.在这一类药物中,从各种动物组织中提取分离的药物占据了本类产品近70%的市场份额.
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高效液相色谱法测定动物组织中壬基酚、辛基酚和2,4-二叔丁基酚
目的 建立动物组织中壬基酚(NP)、辛基酚(OP)和2,4-二叔丁基酚(2,4-DTBP)的高效液相色谱测定方法.方法 组织样品经匀浆后,加入甲醇涡旋混匀提取,离心后,取适量上清液室温下氮气吹干,残渣用甲醇溶解后离心过滤,采用高效液相色谱-荧光检测器测定.分离柱为Waters Symmetry(@) C18色谱柱(3.9 mm×150 mm,5μm),柱温30℃,流动相为含1%乙酸的乙腈-水(体积比为7∶3,pH值为5.50),流速为1.0 ml/min,荧光检测器的激发波长为220 nm、发射波长为302 nm.结果 NP、OP及2,4-DTBP的浓度为0.005 mg,/L~1 mg/L时,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r)均为0.999 9.NP、OP及2,4-DTBP的日内精密度分别为1.8% ~3.5%、1.8% ~ 5.2%、2.0% ~5.0%;日间精密度分别为2.2% ~3.6%、2.5% ~4.4%、2.4%~5.1%;加标回收率分别为93.0% ~ 96.0%、90.0% ~95.5%、87.0% ~ 94.2%.结论 本法准确、简便,适用于动物组织中NP、OP和2,4-DTBP的同时测定.
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LC/MS/MS电喷雾正负离子切换同时检测动物组织中的性激素
目的:固相萃取高效液相色谱-串联质谱电喷雾正负离子切换同时测定禽畜组织中已烯雌酚(DES)、甲基睾酮(MET)、丙酸睾酮(TES)的残留量.方法:样品经甲醇提取,Alltech Extract-clean columns C18,200 mg/6 ml小柱净化和富集.通过Waters SunFireTMC18 3.5 μm 100×2.1 mm色谱柱分离,流动相为:甲醇:水=85:15(V/V),ES-、ES+切换,MRM方式测定,外标法定量.结果:低检出限分别为:已烯雌酚0.15μg/kg;甲基睾酮0.15μg/kg、丙酸睾酮0.33μg/kg;同收率在94.5%-105%之间,相对标准偏差3.2%-10.2%.结论:该方法操作简便、快捷,是动物组织激素残留的快速而准确的榆测方法.
关键词: 高效液相色谱-串联质谱 固相萃取 激素 动物组织 -
氘代同位素稀释液相色谱-质谱法快速检测动物组织中11种β2兴奋剂
目的 建立LC/MS/MS法同时检测动物组织中11种β2兴奋剂的方法.方法 食品样品添加内标溶液后经酶水解、乙酸钠溶液提取,MCX阳离子交换柱净化,在MRM模式下用LC/MS/MS测定动物组织中11种β2兴奋剂的含量.结果 11种β2兴奋剂在猪肉中的加标回收率为80% ~ 107%,相对标准偏差为5.5% ~11.8%;在0.5 μg/L ~200 μg/L浓度范围内相关系数>0.9961;方法检出限<0.05 μg/kg、定量限<0.2μg/kg.结论 该法具有简单、快速、灵敏等优点,并可同时对动物性食品中多种β2受体激动剂进行定性确证和定量测定,回收率达到较好水平,适合对动物性食品中β2受体激动剂残留的分析检测.
关键词: 三重四级杆液质联用仪 动物组织 β2-兴奋剂 氘代同位素 -
超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱法检测动物组织中20种β2-兴奋剂残留
目的:应用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱联用技术,建立动物组织中20种β2-兴奋剂残留的多组分检测方法.方法:样品经酶解、高氯酸沉淀蛋白,MCX柱净化和富集.选择沙丁醇胺-d3,克伦特罗-d9,莱卡多巴胺-d9为内标,通过Waters ACQUITY UPLCTM BEH Shield RP C18色谱柱分离,以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,MRM方式测定.结果:该方法的检出限为0.01~0.33 μg/kg,低定量限为0.04~1.11μg/kg.添加水平为0.5、1.0、2.0μg/kg时,20种β2-兴奋剂的加标回收率为75.5%~108.4%,相对标准偏差为2.9%~19.0%.结论:该方法灵敏度高、回收率好,能够快速准确地对动物组织中20种β2-兴奋剂进行检测.
关键词: 超高效液相色谱-串联质谱 β2-兴奋剂 动物组织 -
GC/MS法同时测定动物组织中4种β-兴奋剂残留量
目的:应用气相色谱-质谱法(GC/MS)同时测定动物肝脏、肾脏和肉中的特布它林、沙丁胺醇、克伦特罗和莱克多巴胺4种β-兴奋剂的残留量.方法:样品剁碎混匀后用甲醇提取,SLS固相萃取柱净化,N,O双三甲基硅烷三氟乙酰胺-1%三甲基氯硅烷(BSTFA-1%TMCS)衍生,采用GC/MS分析,选择离子监测(SIM)方式测定,以D3-沙丁胺醇和D9-克伦特罗同位素为内标定量.结果:测定4种β-兴奋剂标准的相对标准偏差为2.24%~8.00%(n=7),加标回收率76.1%~112%(n=3),方法检出限0.2~1.0μg/kg.结论:方法简便,灵敏度高,选择性好,适用于动物组织中特布它林、沙丁胺醇、克伦特罗和莱克多巴胺残留量的分析.