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神经源性痛诱发大鼠背根神经节细胞电生理学变化
动作电位的异常爆发和编码是痛觉信号传递的电生理学基础.越来越多的证据表明,外周感觉神经元的敏化是慢性痛发生的重要机制之一.本次实验通过结扎大鼠单侧L5和L6脊神经诱发神经源性痛,经Von Frey Hair机械痛敏测量法筛选后,运用全细胞膜片电流钳技术研究急性分离的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞电生理学特征,结果发现:①对照组大鼠背根神经节小直径神经元(细胞直径<30μm)的动作电位阈值为-11.12±1.06 mV(n=11),神经源性痛后小直径神经元动作电位阈值降低了7.82 mV(-18.98±0.69,n=9),二者有显著性差异(P<0.01);与对照组相比,神经源性痛后中等直径DRG神经元(30 μm≤细胞直径≤40μm)兴奋性升高,其动作电位爆发阈从-14.55±1.81 mV(n=8)降低至-19.44±2.22 mV(n=9),差异显著(P<0.05).
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流式细胞仪进行干细胞绝对计数的方法
干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义,而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗技术为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。本文介绍利用流式细胞仪进行干细胞绝对计数的原理、方法及意义。 1 流式细胞仪简介 流式细胞仪是对悬浮状态的细胞逐个计数并记录其有关参数的细胞分析仪器,因其测量速度快,在很短时间内可以分析大量细胞,并能测出多个参数,在临床上有广泛的应用。流式细胞仪能测量细胞的五个参数:前向角散射光(FSC)、侧向角散射光(SSC)、绿色荧光(FL-1)、黄色荧光(FL-2)和红色荧光(FL-3)。FSC和SSC是细胞对激发光的散射信号,分别反映了细胞的大小和细胞的粒度:细胞越大,胞内颗粒越多,则FSC和SSC越强。例如在外周血中,根据细胞大小及胞内所含颗粒性物质的多少,可区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。粒细胞有较大的核或较多的颗粒,细胞直径也比淋巴细胞大,因而其FSC和SSC均比淋巴细胞强。
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磁酶免方法检测甲状腺激素及临床应用
1磁酶免方法简介该方法是磁性微珠(红细胞直径大小)分离技术和酶联免疫技术综合而成的定量测定系统.磁性微珠连接的单克隆抗体(免疫磁珠)与相应的标本抗原结合后,在磁铁磁力的作用下,特异性结合的抗原与其它物质分离,再通过酶联免疫显色反应测定抗原含量,从而克服了放免和普通96孔酶联免疫测定方法的缺点,该方法具有以下优点:
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显微CT在口腔种植研究领域中的应用
空间分辨率达到1~10 μm的医学CT称为显微CT(micro CT),与之对应的是肉眼分辨水平的CT,称为宏观CT.细胞直径平均为10~50 μm,而细胞器约为0.2~1 μm.所以,micro CT是"能看见组织和细胞图像的CT".由于普通CT无法满足科学研究对分辨率的苛刻要求,学术界开始研发micro CT.其主要构造由六部分组成(图1).micro CT与普通CT不同之处是采用微焦点线球管.
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超声微泡造影影像学及治疗作用的研究进展
包裹型气体微泡已经发展为临床应用的超声造影剂.微泡造影剂不仅已广泛用于血池和组织灌注显像,其治疗作用也日渐突显,例如溶栓和作为药物或基因的载体.造影剂微泡的平均直径小于红细胞直径,因而能够自由运行于微循环.微泡能将生物活性物质(例如药物或基因)结合在其内或其外膜表面,并将此物质转运于体内特定组织,例如将抗肿瘤药物转运并结合于特定肿瘤组织.靶向性微泡能将肽段等特定性配体结合于其微泡表面,这种特定性配体可特异性地与血管壁表达的受体相结合,微泡因而在靶组织区域积聚[1].
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肝脏卵圆细胞
0引言Farber于1950年发现,乙硫氨基酪酸、2-氨基乙酰芴及3-甲基-4-二甲基胺苯等致癌物质可导致大鼠肝脏门脉周围区的上皮细胞增生,因这些增生的上皮细胞细胞核呈卵圆形,故将其命名为卵圆细胞(oval cells).后来研究发现其他组织器官在某些病理条件下也出现细胞核为卵圆形的细胞,为与其他组织器官的卵圆形细胞相区别,常将肝脏的这种卵圆形细胞称为肝脏卵圆细胞(hepatic oval cells,HOC).一般认为,肝脏卵圆细胞直径为10-15 tm,表达OV-6、细胞角蛋白19、谷氨酰转肽酶、部分表达白蛋白及甲胎球蛋白,但不表达过氧化物酶[1],近年来研究发现,肝脏卵圆细胞膜表面也表达造血干细胞标志Thy-1[2],并被认为是肝脏祖细胞[3,4].随着干细胞技术及研究的迅速发展,肝脏卵圆细胞已成为肝脏病学中的研究热点之一,本文将近年来的有关研究进行综述.
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尼曼-匹克病2例
例1 女,4岁,患儿因腹部膨隆2年入院.查体:营养发育中等,智力正常,全身皮肤未见黄染及出血点,面色苍黄,颈部可触及数个黄豆大小淋巴结,心肺未见异常,腹部膨隆,肝肋下8 cm,质韧,边缘清楚,触之有压痛,脾达髂窝,质硬.神经系统查体未见异常.实验室检查:血常规WBC 5.7×109/L,Hb 83 g/L,PLT 187×109/L,淋巴细胞及单核细胞胞浆中可见空泡.胸片示双肺点片状浸润,腹部B超示肝脾大,未见占位性病变.骨髓增生活跃,易见泡沫样细胞,该细胞直径20~100 μm,核呈圆形或椭圆型,单核或双核,胞浆丰富,充满桑椹状或泡沫状透明小泡.糖原染色阳性,过氧化物酶、苏丹黑染色阴性.诊断为尼曼-匹克病.
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实验诊断学讲座[4]
1.13红细胞平均直径(MCD)正常红细胞直径为6.7~7.7μm.其直径增大或减小的临床意义如下:1.13.1红细胞直径增大见于营养性巨细胞性贫血、肺气肿、阻塞性黄疸及重症肝病所致的黄疸.
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白细胞过滤器清除浓缩红细胞悬液中肿瘤细胞的效果
术中自体血网输虽然可避免异体输血导致的多种并发症[1-5],但对于肿瘤切除术患者,经自体血液回收机漂洗后的血液中仍存在肿瘤细胞[6],自体血回输可导致肿瘤的血道转移.红细胞直径小、无核且具有变形性,可通过过滤网.漂洗后的回收血经白细胞过滤器过滤能否清除红细胞悬液中肿瘤细胞及对红细胞形态及其细胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影响,有待进一步探讨.本研究拟评价白细胞过滤器清除浓缩红细胞悬液中肿瘤细胞的效果,为临床提供参考.
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低温制剂保存对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响
背景:脂肪干细胞在GMP洁净车间制备完成后需要做成制剂才能给患者输注.低温制剂相比于冻存制剂有很多优势,然而关于低温短期保存对干细胞生物学特性影响的研究较少.目的:评价用含5%人血白蛋白的复方电解质低温保存24 h对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响.方法:取第3-6代人脂肪间充质干细胞,以5×109 L-1的细胞浓度重悬在含5%人血白蛋白的复方电解质注射液中,将细胞悬液转移至冻存管中,置于冷链运输箱,2-8℃低温保存24 h.观察低温保存前后的细胞形态、贴壁能力、细胞活率、细胞直径及细胞免疫表型变化.结果与结论:①脂肪间充质干细胞低温保存24 h后,死细胞增多,细胞活率显著下降,但细胞活率仍大于80%,活细胞直径显著增大;②脂肪间充质干细胞低温保存24 h后,少量细胞为圆形,失去贴壁能力,大部分细胞能贴壁生长,形态为梭形,与细胞保存前贴壁形态相似;③脂肪间充质干细胞低温保存24 h后,HLA-DR、CD34和CD45均为阴性表达,阳性率低于2%;CD29、CD73和CD105均为阳性表达,阳性率高于95%,但保存后的细胞显著地由一群分为两群,部分细胞体积增大,向右移动;④结果表明,低温制剂保存未明显影响脂肪间充质干细胞的贴壁生长能力、存活率及免疫表型等干性生物学特性.
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间日疟原虫异常形态一例报告
患者,男性,35岁,贵州籍民工.因发冷、发热、头痛和全身无力3 d,在村医疗所就诊,按感冒治疗症状未见好转,疑诊疟疾,来我站采血检查.患者曾患过疟疾.镜检发现疟原虫环状体(小滋养体图1~5)和大滋养体(图6).环状体有单核单环(图1)、单核双环(图2)、双核双环(图3,4)和三核三环(图5).环状体较大,约占被寄生红细胞直径的1/3,核大、色红,胞浆宽厚、呈蓝色,红细胞胀大、退色.大滋养体体积大,几乎充满整个红细胞,核一个、红色,胞浆蓝色、呈阿米巴样、有空泡、并有黄褐色疟色素,被寄生的红细胞大约是正常的1.5倍,红细胞退色.根据上述形态特征,确诊该疟原虫是间日疟原虫.经采用"氯伯”四天双疗程治疗后,症状消失,采血复查疟原虫阴性.在薄血膜中,恶性疟原虫常可见1个红细胞寄生2个或几个环状体,间日疟原虫异常寄生形态则很少见,国内已有报道(钱永乐,戴祖瑞,李从军,等.安徽省淮北地区间日疟原虫的异常形态.第二军医大学学报,1984,5(1):67.),本文一例情况类似,但环状体双重感染的红细胞均胀大.
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不同孔径微孔滤膜对肿瘤细胞滤过的影响
目的 探讨不同孔径微孔滤膜对不同直径大小的肿瘤细胞的滤过作用及其对过滤后细胞活性的影响.方法 选择不同孔径(1、3、5、8、10 μm)的聚碳酸酯微孔滤膜分别过滤浓度相同但细胞直径不同的Jurkat、K562和A549细胞,测定细胞通过滤膜的滤过率;光学显微镜测量3种细胞(包括甲醛固定后的K562)的直径及其经不同孔径的滤膜过滤后的细胞直径;台盼蓝染色法检测经滤膜过滤后的K562细胞活性,对细胞进行再培养,并用生长曲线分析其细胞增殖能力.结果 Jurkat、K562和A549细胞均不能通过1μm孔径的滤膜,通过3、5、8、10 μm孔径滤膜的滤过率均依次升高.经3μm孔径滤膜滤过的K562细胞存活率为92.0%,且滤过后的细胞再培养后的细胞增殖能力仍较强.经甲醛固定的K562细胞的滤过率明显降低,且细胞平均直径无明显变化.结论 活细胞能穿过孔径小于其直径的滤膜;穿过滤膜的细胞仍保持活性增殖,但甲醛固定可明显减少细胞通过滤膜.
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发热1~12 h患者外周血白细胞、中性粒细胞直径及百分率、CRP水平观察
病毒感染可使外周血白细胞数减少,严重细菌感染而抵抗力低下时也可能有白细胞减低[1]。西班牙学者[2]报道了41例儿童链球菌中毒综合征,51.2%的患儿出现白细胞减少。针对这些情况,在患者发热初期仅用一次血细胞分析和CRP结果很难准确判定引起发热的病原体是细菌还是病毒,给临床治疗带来一定的困难。我们观察了112例患者急性发热8 h内和8~12 h时的白细胞数、中性粒细胞直径及百分率、CRP水平变化,并探讨其意义。
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肥大细胞数量及脱颗粒变化在小鼠妊娠早期子宫中的观察
为了观察小鼠妊娠早期子宫中肥大细胞的变化,我们采用改良的甲苯胺蓝染色法对肥大细胞进行特殊染色:1.昆明小鼠,体重25~30g,雌雄1:1合笼,次日晨检见阴栓者定位妊娠第1d(D1),分别取未妊娠、D3、D4、D7、D8小鼠子宫,10%甲醛PBS(pH7.3)固定24hs,石蜡切片.2.甲苯胺蓝染30sec,双蒸水洗去浮色,30%酒精PBS分色1min,蒸馏水终止反应.3.光镜下对妊娠不同天数的小鼠子宫中的肥大细胞进行计数,同时比较肥大细胞脱颗粒的百分率.结果显示:肥大细胞多散布于小鼠子宫的浆膜、浆膜下层以及系膜内,肌层中很少见,不存在于内膜.细胞较大 ,呈圆形或椭圆形;核小,圆形,浅绿色;异染性颗粒紫红色,紧密围绕在细胞核周围.脱颗粒的肥大细胞形态不规则,颗粒排列松散.比较每张未妊娠、D3、D4、D7、D8的小鼠子宫切片,把大细胞平均数目分别为:19个、16个、12个、41个、32个;肥大细胞脱颗粒率分别为:42.71%、45.07%、52.63%、61.93%、6 6.74%.以上数字表明把大细胞数目以及脱颗粒率在胚胎植入后明显增多.应用显微镜测微尺测量妊娠前后肥大细胞的细胞直径,发现妊娠小鼠子宫内的肥大细胞体积略有增加.我们的体会是:1.改变固定液的种类显著影响肥大细胞的染色反应:比较10%甲醛PB S(pH7.3)、4%多聚甲醛、Carnoy以及Bouin等几种常用固定液,以1 0%甲醛PBS的固定效果为佳;2.不同染液的染色效果有差异:甲苯胺蓝法与阿尔辛蓝-藏花红(AB-S)法比较,甲苯胺蓝能清晰地显示肥大细胞的紫红色颗粒,使在浅绿色的组织背景下的肥大细胞容易辨认.AB-S虽然能区分成熟(红色)、未成熟(蓝色)和混合型(红蓝两色)的肥大细胞,但着色的肥大细胞数目明显减少;3.分色剂的选择:30% 酒精PBS分色,肥大细胞颗粒呈紫红色,颜色鲜艳明亮,不易褪色;而90%酒精分色, 颗粒多呈蓝紫色,易褪色.4.植入期间肥大细胞数量变化尤其是脱颗粒率升高,引起局部毛细血管扩张、通透性增加,这可能有利于胚胎植入.
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不同直径牙胚细胞增殖和骨向分化能力的评估
目的:比较大鼠不同直径牙胚细胞增殖和骨向分化能力的差异。方法:酶消化法分离、培养SD大鼠牙胚细胞,经13μm标准细胞筛分选后获得大、小2种直径的细胞;并分别采用MTT法检测2种细胞的增殖能力;碱性磷酸酶( ALP)试剂盒、茜素红染色法及qRT-PCR检测两者的骨向分化能力。结果:小细胞的增殖能力较低(P<0.05);培养3、7 d后,小细胞组的ALP活性均明显高于大细胞组(P<0.05);培养14 d后,小细胞组钙化结节数量明显高于大细胞组;qRT-PCR检测结果显示,小细胞组中Ocn、Osx、Runx2各矿化相关基因的表达水平均明显高于大细胞组(P<0.05)。结论:牙胚细胞中直径小于13μm 的细胞比直径大于13μm的细胞增殖活性低,分化能力强。
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血常规检验报告中细胞分布图意义
1 白细胞分布图血液中的白细胞大小直径相差不多,嗜中性粒细胞直径10~15μm,嗜酸性粒细胞直径11~16μm,嗜碱性粒细胞直径10~12μm,淋巴细胞直径6~15μm,单核细胞直径10~20μm.用机器计数分类时容易混淆.于是在血液标本中加入特殊试剂作用于白细胞膜,将其破坏成网状结构,胞浆中的液态成分溢出,剩下细胞核和细胞膜.成熟的淋巴细胞体积在35~98fL,中性粒细胞体积在135~450fL.单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及多数的幼稚细胞体积在98~135fL.全自动血细胞分析仪根据细胞微粒的大小进行鉴别和计数.