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流产小鼠子宫中细胞因子的表达:GM-CSF对母体免疫活性的影响
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肥大细胞数量及脱颗粒变化在小鼠妊娠早期子宫中的观察
为了观察小鼠妊娠早期子宫中肥大细胞的变化,我们采用改良的甲苯胺蓝染色法对肥大细胞进行特殊染色:1.昆明小鼠,体重25～30g,雌雄1:1合笼,次日晨检见阴栓者定位妊娠第1d(D1),分别取未妊娠、D3、D4、D7、D8小鼠子宫,10%甲醛PBS(pH7.3)固定24hs,石蜡切片.2.甲苯胺蓝染30sec,双蒸水洗去浮色,30%酒精PBS分色1min,蒸馏水终止反应.3.光镜下对妊娠不同天数的小鼠子宫中的肥大细胞进行计数,同时比较肥大细胞脱颗粒的百分率.结果显示:肥大细胞多散布于小鼠子宫的浆膜、浆膜下层以及系膜内,肌层中很少见,不存在于内膜.细胞较大 ,呈圆形或椭圆形;核小,圆形,浅绿色;异染性颗粒紫红色,紧密围绕在细胞核周围.脱颗粒的肥大细胞形态不规则,颗粒排列松散.比较每张未妊娠、D3、D4、D7、D8的小鼠子宫切片,把大细胞平均数目分别为:19个、16个、12个、41个、32个;肥大细胞脱颗粒率分别为:42.71%、45.07%、52.63%、61.93%、6 6.74%.以上数字表明把大细胞数目以及脱颗粒率在胚胎植入后明显增多.应用显微镜测微尺测量妊娠前后肥大细胞的细胞直径,发现妊娠小鼠子宫内的肥大细胞体积略有增加.我们的体会是:1.改变固定液的种类显著影响肥大细胞的染色反应:比较10%甲醛PB S(pH7.3)、4%多聚甲醛、Carnoy以及Bouin等几种常用固定液,以1 0%甲醛PBS的固定效果为佳;2.不同染液的染色效果有差异:甲苯胺蓝法与阿尔辛蓝-藏花红(AB-S)法比较,甲苯胺蓝能清晰地显示肥大细胞的紫红色颗粒,使在浅绿色的组织背景下的肥大细胞容易辨认.AB-S虽然能区分成熟(红色)、未成熟(蓝色)和混合型(红蓝两色)的肥大细胞,但着色的肥大细胞数目明显减少;3.分色剂的选择:30% 酒精PBS分色,肥大细胞颗粒呈紫红色,颜色鲜艳明亮,不易褪色;而90%酒精分色, 颗粒多呈蓝紫色,易褪色.4.植入期间肥大细胞数量变化尤其是脱颗粒率升高,引起局部毛细血管扩张、通透性增加,这可能有利于胚胎植入.
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四物汤对子宫平滑肌的影响
目的:观察四物汤对小鼠子宫平滑肌收缩的影响.方法:取正常小鼠子宫,观察药物对正常子宫的影响;取正常小鼠子宫,于给药前先用缩宫素使之处于收缩状态,再加入药物,观察药物对收缩的影响;取正常小鼠妊娠子宫,以观察药物对妊娠子宫的作用;四物汤口服给药对小鼠子宫的影响.结果:四物汤对正常小鼠子宫的收缩频率、幅度均显示出兴奋作用;而对收缩、孕娠小鼠子宫则显示抑制作用.结论:四物汤对小鼠子宫平滑肌具双向调节作用.
关键词： 四物汤 阿魏酸钠(FA-Na) 小鼠子宫 -
小鼠容受性子宫内膜上皮细胞和基质细胞的共培养
目的:建立一种较理想的体外子宫内膜立体共培养方法.方法:利用双室培养系统建立含有上皮细胞和基质细胞共培养的系统,光镜、电镜观察上皮细胞形态学变化;细胞免疫组化鉴定细胞来源.结果:扫描电镜显示,培养的上皮细胞生长汇合,可见到微绒毛细胞及局部有胞饮突的形成.透射电镜观察显示培养的上皮具有极性,表面有微绒毛,细胞间紧密连接及细胞间糖原沉积.结论:此方法可更好地模拟体内状态,是较理想的子宫内膜体外模型.
