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GENMED乙酸比色法定量检测试剂盒:青出于蓝而胜于蓝
乙酸(CH3COOH)是国际纯粹(理论)与应用化学联合会(IUPAC)建议名称,在化学命名法中的系统称谓是乙醇酸,中文称之为醋酸,而无水纯乙酸则称为冰乙酸.乙酸是一种简单的弱性有机羧酸和典型的脂肪酸,普遍存在于各种食品、饮料,甚至纸业、药业和工业材料中.
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食品中副溶血弧菌FQ-PCR快速检测方法的研究
目的利用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量方法.方法根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源、非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.结果该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其它24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,16株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间相关系数达到0.9871.在纯培养的条件下,其检测低限为10cfu/ml.对32个模拟样本直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.结论该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.
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氧化型α1抗胰蛋白酶定量检测试剂盒研制及对吸烟男性的检测分析
目的 介绍一种血清氧化型α1抗胰蛋白酶(Ox-AT)的定量检测方法,并分析吸烟男性血清Ox-AT的表达水平.方法 构建一种以Ox-AT特异性单抗为检测抗体的双抗夹心ELISA法,用纯化的Ox-AT作为标准品定量;分析我国吸烟与非吸烟男性血清中Ox-AT的水平.结果 所建立的双抗夹心ELISA试剂盒检测限为2.58 μg/L,在0~500 μg/L浓度范围内R2值0.995 5,批间差为11.27%,准确度为88.19%,试剂盒4℃保质期超过6个月;对20对吸烟与非吸烟男性血清Ox-AT进行检测,吸烟组为55.43±49.94μg/L,显著高于非吸烟对照组的11.01±12.15μg/L (P<0.001),两组间α1-AT无显著差异.结论所建立的EUSA法能用于血清Ox-AT的定量检测;血清Ox-AT可能比α1-AT更适合作为我国COPD的评价指标.
关键词: 氧化型α1抗胰蛋白酶 定量检测试剂盒 吸烟 -
三氧化二砷抗肝癌及其肾毒性的实验研究
探讨三氧化二砷(As2O3)抗大鼠肝癌作用及其对肾脏的毒副作用.材料与方法1.药品及试剂:As2O3(Sigma公司),顺铂(齐鲁制药厂),二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine, DEN, Sigma公司),小鼠bcl-2(IgG1)单抗(1∶50,Santa Cruz)、小鼠抗大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)单抗(1∶100,北京中山生物技术有限公司).HistostainTM-Plus免疫组化试剂盒(Zymed公司).APO-BRDUTM凋亡定量检测试剂盒(Becton Dickinson公司).
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两种商品化降钙素原定量检测试剂盒方法学比对
降钙素原( Procalcitonin,PCT )由位于11号染色体(11p15.4)上的Calc-I基因编码,通过选择性剪接(编码1~4外显子)生成Calc-ImRNA,转录后在甲状腺滤泡旁细胞粗面内质网翻译成降钙素原前体。裂解生成的PCT由116个氨基酸组成,相对分子质量为13000[1,2]。它在细菌或真菌感染合并严重全身系统反应或器官低灌注时显著升高,而在病毒或局灶感染时水平正常或轻度升高。这个特性使得PCT 用来鉴别系统感染和非感染性炎症或局灶感染,是具有高灵敏度、特异性的新指标。此外,PCT 还可用来判断治疗的有效性、疾病的严重程度和预后[3]。
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国产乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定量检测试剂盒技术现状介绍
利用核酸扩增技术(PCR)定量检测样本中HBVDNA是乙型肝炎治疗过程中疗效监测的重要手段之一.继乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定性检测试剂盒批准临床使用之后,定量检测试剂盒也已陆续批准临床使用.本文对乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定量检测试剂盒的技术现状,国家定量检测标准品的组成、定值方法、合格标准及国产试剂存在的问题等方面作一粗浅的介绍,以供使用者、临床医生及诊断试剂的研发者参考.
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尿与血清HCG金标定量同步比较及临床实用性
近来国际上血清HCG定量试剂盒往往同时可用于尿HCG定量测定,但我国尿HCG定量尚未广泛开展.在开展尿定量临床测定之前,观察同一妊娠妇女血清与尿液HCG定量结果间的关系是很有必要的.妊娠妇女在停经30d时的HCG水平只有每ml数十mU,但再过10d可升高到数千mU,每h都在上升,只有尿和血清尽量同时采集才可有可靠的比较结果.我们使用国家标准HCG校核过的金标定量检测试剂盒及其读数仪,同时采集待检者的血样和尿液,观察二种样品HCG定量结果间的关系,为尿液HCG定量与血清定量间的异同提供可靠依据.
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尖锐湿疣HPV的基因型与临床研究
我们检测尖锐湿疣(CA)组织中感染HPV亚型,旨在探讨HPV基因型和主要临床特征之间是否具有相关性.因此,快速准确地诊断HPV的基因型,对于泌尿生殖道肿瘤的早期发现、治疗及预防、预后监测十分重要.我们应用PCR荧光法,低危型HPV(5个型)和高危型(8个型)核酸定量检测试剂盒对100例CA标本进行DNA检测,探讨其型别及其临床的相关性.
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国内某人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)核酸检测试剂盒的自动化应用性能评估
目的 对国内某人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)核酸定量检测试剂盒的自动化应用性能进行评估.方法 收集150份血液样品,用待评试剂和参比试剂及自动化设备进行双盲检测.2种试剂定性结果用符合率和卡方检验等统计方法分析;2种试剂的定量结果用相关性分析、回归分析等统计方法分析.结果 2种试剂检测结果的总体符合率为100.00%,Kappa值为1.00.2种试剂盒定量检测结果的相关性分析显示2种试剂检测结果一致,配对t检验显示2种试剂具有等效性.结论 待评试剂和参比试剂对同一血液样本检测结果具有较高的定性符合率、较强相关性以及定量一致性.
关键词: 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1) 自动化 定量检测试剂盒 性能评估 -
尿碘快速定量检测试剂盒的方法学论证
尿碘快速定量检测试剂盒是"九五"国家攻关项目研究成果,本文对该试剂盒检测方法的灵敏度、精密度、准确度进行了方法学验证,具体报告如下.
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乙型肝炎病毒PCR酶免定量与标本稀释度的关系
乙型肝炎病毒是一种严重影响我国人民身体健康的传染病,检测血清中HBV DNA含量高低有无,可以协助医生对疾病诊断、治疗和预后有个科学的判断.上海浩源生物科技有限公司生产的HBV DNA PCR酶免定量检测试剂盒,因设有"内对照"系统可以校正扩增效率而获得HBV DNA定量,试剂盒要求HBeAg阳性标本扩增前作1/25和1/625倍稀释,各做一个PCR;HBeAg阴性标本,则作1/5和1/125倍稀释,各做一个PCR.这样操作很复杂,试剂成本增加.采用HBeAg阳性标本扩增前1/125倍稀释,HBeAg阴性标本扩增前1/5倍稀释,做一个PCR,取得较为理想的结果(本文均采用扩增后5倍稀释).
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胆囊炎性假瘤并CA199异常升高1例
一、病历摘要患者,男,55岁,因反复发作右上腹绞痛半月于2014年8月25日入院,入院时查体院一般情况可,体温正常,巩膜及皮肤无黄染,心肺无明显异常,腹部平软,右上腹及剑突下明显压痛,无反跳痛,Murphy's征阳性,肝脾肋下未触及,腹水征阴性,肠鸣音正常。入院后实验室检查院肝肾功能正常,CEA(-),AFP(-),CA199跃2083.0 U/mL[应用美国贝克曼-库尔特公司生产的糖类抗原199定量检测试剂盒(化学发光法),连续检测3 d],空腹血糖14.62 mmol/L,餐后2 h血糖28.29 mmol/L,糖化血红蛋白(HbA1c)9.50%。MRI平扫(见图1)提示胆囊体积增大,胆囊底部不均匀增厚,增强扫描(见图2)见胆囊底增厚,囊壁渐进性不均匀强化,以周边强化为主,中间分隔样强化,所见胃窦壁不均匀增厚,增厚胃壁内表面不规则,MRI诊断考虑胆囊肿瘤性病变居多,邻近肝实质受累可能,所见胃窦壁不均匀增厚,建议胃镜检查。CT平扫提示胆囊体积增大,胆囊底部密度欠均匀,局部呈蜂窝样改变,胆囊壁增厚,厚度不均匀,边缘毛糙,盆腔及右侧胸腔少量积液,诊断胆囊炎,不除外胆囊肿瘤性病变。胃镜检查见胃窦黏膜充血水肿、多发平坦糜烂灶,病理为黏膜炎性改变。依据患者临床病例特点、影像学检查,结合CA199异常增高,考虑胆囊肿瘤性病变,胆囊癌可能性大。于9月1日行胆囊癌根治术,术中探查见,腹腔未见明显积液,肝脏色红质软,胆囊与大网膜及十二指肠广泛粘连,胆囊大小5.0 cm×3.0 cm,胆囊壁色泽发白,质硬,胆囊床表现疑为受肿瘤侵犯、固定。术中切取部分大网膜粘连组织送快速切片病检,未见肿瘤组织,探查考虑肿瘤可能侵及肝脏5段及部分4b段,肝十二指肠韧带未触及明显肿块,术中仍考虑胆囊癌可能性大,遂决定行胆囊癌根治术,手术顺利。术后病理提示院胆囊炎性假瘤改变(送检大网膜、肝脏均未见肿瘤组织),术后患者预后良好,术后第4天拔除腹腔引流管,第6天出院。出院后应用胰岛
素控制血糖,9月11日复查空腹血糖9.80 mmol/L,糖化血红蛋白(HbA1c)9.50%,CA199恢复正常,随访半年,血糖控制良好,多次复查CA199正常,体重明显增加。 -
乙肝患者的不同血清学指标组合与HBV-DNA检测之间的比较
乙型肝炎病毒感染检测的方法主要是HBV血清学标志物的检测和HBV-DNA的含量测定.研究者采用实时荧光定量PCR方法检测乙肝患者血清HBV-DNA,以观察不同血清学指标的乙肝患者血清中HBV-DNA含量及其意义.1 资料与方法1.1 一般资料 对象为本院2010年5~10月住院及门诊的乙型肝炎患者332例,全部乙肝病例均为临床确诊的乙肝患者.年龄在11~63岁,其中男性186例,女性146例.1.2 仪器与试剂 西安天隆TL-988型全自动荧光定量扩增仪.上海复星长征医学科学有限公司生产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒;厦门英科新创科技有限公司提供HBV诊断试剂.
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用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌
[目的]采用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒.[方法]根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源及非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.[结果]该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,其它15株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.9871.直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.[结论]该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.
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肾素浓度检测的方法学对比研究
对血浆肾素浓度检测试剂盒进行性能验证,判断该试剂盒是否能够满足本实验室的日常检验要求.方法:分析肾素定量检测试剂盒的灵敏度(包括空白限、检出限和功能灵敏度)、精密度(包括批内精密度和批间精密度),同时比较使用上述试剂盒和肾素活性方法检测患者标本的一致性情况.结果:肾素定量试剂盒的空白限(LOB)为0.48pg/ml,检出限(LOD)为1.15pg/ml,功能灵敏度(FS)为1.5pg/ml.肾素定量试剂盒检测2个水平质控品的批内精密度和批间精密度分别是4.66%、5.21%和3.73%、4.34%.其结果与目前市场上使用的肾素活性相比,相关性 R 为0.971,相关性较好.检测方法结论:该肾素定量检测试剂盒性能验证有效,其结果与目前市场上使用的肾素活性检测方法具有可比性,可应用于实验室日常检测需要.