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抑制KAI1诱导的自噬对胰腺癌MiaPaCa-2细胞增殖及凋亡的影响
细胞自噬是一种重要的促细胞生存途径,同时也是一种不同于凋亡和坏死的死亡方式.KAI1是缺氧目的基因,体内缺氧时亦可诱导细胞自噬[1].我们前期报道了KAI1诱导MiaPaCa-2自噬,并增加细胞的存活[2],本研究进一步探讨抑制KAI1诱导的自噬对该细胞增殖及凋亡的影响.一、材料与方法1.CCK-8检测细胞增殖:应用KAI1抑制剂3-MA预处理MiaPaCa-2细胞1h,以未处理组作为对照,应用100 MOI的Ad5-KAI1及Ad5 -null分别感染细胞,具体步骤参考我们前期报道[3].取转染细胞接种96孔板,培养0.5、1、2、3、4、5d后每孔分别加人10μl的CCK-8( Dojindo Molecular Technologies公司,日本)继续培养1h,在酶标仪(Themo,Germany)测定450 nm吸光值(A450).每组设3个复孔,实验重复3次,取均值.
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Eppendorf BioPhotometer核酸蛋白测定仪故障分析与处理
Eppendorf公司的BioPhotometer是适用于分子生物学、生物化学和细胞生物学领域的一款功能强大的核酸蛋白测定仪,保证其正常运转和日常维护极其重要,现将日常使用中出现的故障及排除方法介绍如下,供参考.1 故障一1.1故障现象核酸定量时,BioPhotometer的读数出现漂移.1.2故障分析与检修仪器的设计原理和工作原理:仪器吸光值在一定范围内变化是允许的,且灵敏度越高的仪器,吸光值的漂移越大[1].Eppendorf BioPhotometer plus的准确度为1.0%,若多次检测结果均在1.0%左右即为正常.
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水样中硫酸盐测定方法的改进
铬酸钡分光光度法(热法)测定水中硫酸盐是《生活饮用水卫生规范》中的方法之一.实验所用的铬酸钡是悬浊液,由铬酸钾和氯化钡配制而成.实际在标准和水样中的加入量是不同的,不如把铬酸钡溶于盐酸溶液,配成溶液,可以减少吸光度的波动性,空白管吸光值比较稳定且操作简便,线性好、宽,经多次试验结果如下:
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选用不同纯水做试剂空白吸光值的比较
目的通过比较试剂空白吸光值的大小,选择佳纯水.方法用离子交换纯水、亚沸蒸馏纯水、两次蒸馏纯水,这3种纯水作为国标GB/T 16031车间空气中氨的测定方法的试剂空白,采用纳氏试剂比色法.结果 3种水试剂空白的吸光值:离子交换水>亚沸蒸馏水>两次蒸馏水.结论两次蒸馏水作为测定氨的用水好.离子交换纯水与亚沸蒸馏纯水因吸光值小于 0.02,故也可用于氨测定时所用的溶剂.
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Bilitec 2000光纤分光光度仪应用中两个问题的研究
目的研究Bilitec 2000光纤分光光度仪应用中胆红素吸光值(abs)与其浓度的关系,及pH对abs的影响.方法用Bilitec 2000进行体外实验,将胃液与胆汁配成不同浓度的混合液,测其abs;改变胆汁和胆红素溶液的pH,测定abs的变化.结果胆红素浓度低于89 μmol/L时,abs与浓度呈明显线性关系;酸性环境下(pH<3.5),质量浓度为10%胆汁的abs偏低32.8%.结论胆红素浓度较低时,abs与浓度呈线性关系,pH<3.5时abs偏低.故用Bilitec 2000检测胆汁反流时,对abs应全面综合分析后再做结论.
关键词: Bilitec 2000 胆汁反流 胆红素 吸光值 氢离子浓度 -
尿磺砷铈催化分光光度法测定过程中引起吸光值下降的原因分析
近年来碘缺乏病的评估工作在全国展开,尿碘值作为消除碘缺乏病进程的重要指标.所以各级卫生防疫站尿碘测定结果的准确性直接影响着碘缺乏病的评估工作.下面将影响尿碘测定的因素分别加以分析.
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重铬酸钾氧化分光光度法测定酒中乙醇含量
乙醇是酒重要的质量指标之一,酒中乙醇常用比重法[1]、气相色谱法[2]吸光光度法[3]等方法测定.重铬酸钾作为常用的氧化剂,在各种分析中有较多应用,未见用于乙醇含量的测定.本文发现在硫酸介质中,乙醇可定量被重铬酸钾氧化,生成绿色的三价铬.大吸收波长λmax为600nm,其吸光值与乙醇浓度成正比,据此建立了测定乙醇的新方法,应用于酒样测定简便、实用.方法相对标准偏差为3.6%,低检出浓度0.40mg/10ml乙醇,结果满意,现报告如下.
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低浓度铬天青S测铝降低试剂空白吸光值
<生活饮用水卫生规范>铬天青分光光度法测铝时,试剂空白的颜色很深,以水为参比,试剂空白的吸光值多在0.2以上,肉眼几乎无法判断标准系列的色差[1].我们在工作中通过降低铝天青的浓度,用10%乙酸铵代替乙二铵-盐酸缓冲液,显著降低了试剂空白的吸光值,肉眼就能明显地区分标准系列的色差,且铝含量在0~0.2mg/L范围内与吸光值线性相关,回归方程:A=M=11.816A+0.021,r=0.9995.现报告如下.
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比色法测水样中硫酸盐方法的改进
本文用酸性铬酸钡溶液代替铬酸钡悬浮液,克服了上述的不足,使吸光值增大,标准曲线斜率增大.硫酸盐的测定上限由原来的200mg/L扩大到300mg/L减少了操作步骤,节约了实验时间.在酸性溶液中,铬酸钡与硫酸盐生成硫酸钡沉淀和铬酸离子.将溶液中和后,过滤除去多余的铬酸钡和生成的硫酸钡,滤液中即为硫酸盐所取代出的铬酸离子,呈现黄色,比色定量.
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混合溶剂提取天然番茄红素的工艺研究
考查了乙酸乙酯:丙酮(1:2)、10%二氯甲烷的正己烷、石油醚:丙酮(8:3)三种混合溶剂对番茄红素的提取效果,通过测定不同提取液的吸光值,比较得出用乙酸乙酯:丙酮(1:2)效果好。结果表明:经柱层析分离得到较纯的番茄红素,经紫外可见光谱测其大吸收波长与文献吻合,提取率为172.mg/g。
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泡沫试验与磷脂酰甘油定性测定评估胎儿肺成熟度的比较
胎儿肺成熟度的监测是决定高危妊娠处理方针的一个重要依据.评估胎儿肺成熟度的检测方法有磷脂酰甘油(PG)测定、卵磷脂/鞘磷脂(S/L)比值试验、泡沫试验和羊水吸光值等.目前使用较多的是泡沫试验和PG 测定[1] .为了解这两种检测方法评估胎儿肺成熟度的相关性,我们对33例妊娠34~41周的孕妇经羊膜腔穿刺获得的羊水标本进行比较,现报告如下.
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蜕皮甾酮对Aβ5-35诱导PC12细胞毒的保护作用
目的:观察蜕皮甾酮(Ecdysterone,ECR)对Aβ25-35诱导的PC12细胞毒的保护作用,并进一步探讨其作用机制.方法:实验分为Aβ组(Aβ5-35 100μmol·L-1)、空白组、阳性对照组(VitE 100μmol·L-1)、ECR(1-100μmol·L-1)组,各组PC12细胞的受损及存活情况分别用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量及MTT法检测;测定脂质过氧化水平(细胞匀浆中的丙二醛(malondialdehyde,MDA)),PC12细胞中的抗氧化物酶活性(超氧化物歧化酶(superoxide dismutases,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSHpx)的活性).结果:100μmol?L-1 Aβ25-35与PC12细胞作用24h时,MTT吸光值减小,SOD、CAT及GSHpx活性均明显降低,而LDH释放量及MDA含量则明显增加(均P<0.01);1-100μmol·-1 ECR预处理PC12细胞24h,则ECR可剂量依赖性地减轻Aβ25-35的PC12细胞毒作用(ECR50,P<0.05;ECR100,P<0.01).而且,ECR对Aβ25-35诱导的SOD和GSHpx活性降低有明显的抑制作用,对CAT活性降低的作用不明显.结论:ECR对Aβ25-35的PC12细胞毒有明显的抑制作用,其保护机制可能与其相对增加SOD和GSHpx活性、降低MDA含量有关.