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微生物学检验面临的主要任务
微生物学是生物学的一个分支,是研究微生物的进化,分类,在一定条件下的形态结构,生命活动及其规律以及与动物,植物,人类和自然界相瓦作用的科学,医学微,圭物学着重研究与医学相关的病原微生物的生物学性状,致病机理,机体抗感染免疫应答的规律,以及有关微生物学基本原理和实用技术在疾病诊断,预防和治疗等方面的应崩,临床微生物学检验面临的主要任务是:
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肺炎衣原体的诊断和治疗
肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae Cpn)是1989年定名的新种.首株Cpn是于1965年从台湾省一名儿童的眼部用鸡胚分离出来的;1983年又从西雅图一名患咽喉炎的大学生咽部分离出一株,分别命名为TW-183和AR-39.因其一些生物学性状类似于鹦鹉热衣原体,所以当时归于鹦鹉热衣原体种中TWAR组,后经深入研究,根据其独特的超微结构及基因和特异性抗原分析,于1989年定为衣原体属中一个新种.Cpn主要引起人的非典型性肺炎,同时还可致支气管炎、咽炎、鼻窦炎、中耳炎、虹膜炎、肝炎、心肌炎、心内膜炎、脑膜炎、结节性红斑等疾病,也是艾滋病、白血病等继发感染的重要病原菌之一.另外,流行病学和病原学研究认为,Cpn感染与心血管疾病相关,已引起各国学者的高度重视.
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重组蛋白血管内皮生长因子-C促进NB4细胞增殖及抑制其凋亡的研究
血管内皮生长因子家族(VEGFs:VEGF-A,B,C,D,E和PIGF)和它们的受体是已知的一类重要的血管/淋巴管新生的调控因子.VEGF-C通过VEGFR-2,3信号途径可促进血管/淋巴管新生,因而在实体肿瘤进展和浸润转移病理过程中也发挥着重要作用.近年来发现血管内皮生长因子(VEGF)-C及其受体也在某些血液肿瘤细胞表达,但对白血病细胞生物学性状的作用尚不清楚.因而我们利用自己构建的人VEGF-C真核表达载体并通过脂质体介导稳定转染至中国仓鼠卵巢(CHO)细胞进行表达,研究此对白血病细胞生物学性状的作用.
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不同类型急性白血病患者骨髓间充质干细胞的病理学特征
骨髓间充质干细胞(MSC)具有在体内和体外支持造血的功能,因此联合MSC的造血干细胞移植有可能增强移植效果,近研究结果证实联合MSC的造血干细胞移植可以促进造血干细胞的植入和造血恢复[1,2].既往研究发现急性白血病患者骨髓造血微环境存在病理改变,包括细胞的组成和功能改变.但是,急性白血病患者骨髓MSC是否受到影响以及影响程度,尚不清楚.此外,MSC的来源有限,而且异基因MSC存在归巢效率低等问题.因此,本研究获取急性白血病患者自体的骨髓MSC,采用低血清培养基培养和扩增,观察其体外增殖能力、多向分化和支持造血功能,以明确其生物学性状并为自体MSC在临床中的进一步应用提供详尽的实验依据.
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Skp2在恶性肿瘤发生发展中作用的研究进展
随着分子生物学的研究进展,肿瘤已被认为是一个多基因多信号通路参与调节的复杂的分子过程,以细胞增长和增殖失控为特征,表现为细胞周期调控的紊乱.细胞周期调定点以G1/S期调控检测点为重要,正调控因子可促进细胞通过调定点,而负调控因子则抑制细胞通过调定点,S期激酶相关蛋白2 (S-phase associated kinase protein2,Skp2)可通过泛素蛋白酶体途径降解磷酸化的p27kip1从而促使细胞进入S期,导致肿瘤的发生.本文对Skp2的生物学作用及其在恶性肿瘤中发生、发展的新进展进行综述.
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黑色素细胞生物学性状的影响因素
黑色素细胞(MC)体外纯培养可以用来研究白癜风等疾.病的发病机制,也可以利用MC筛选治疗色素障碍性皮肤病的药物,并进行药效、免疫等指标的考察,以此提示人们寻找色素障碍性皮肤病(如白癜风、黄褐斑等)的治疗方法和药物,从而更好地控制MC的生物学性状,为实验室研究服务.
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394例使用吸附百白破制剂引起接种反应的调查分析
接种吸附百白破制剂是目前降低百日咳、白喉、破伤风发病率的一种有效途径,由于制剂本身固有的生物学性状,加之使用方法和接种者个体差异等因素,接种该制剂后反应较多,为掌握吸附百白破制剂使用后接种反应发生特点、程度、预后等情况,对394例发生接种反应儿童进行调查分析.报告如下:
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流式细胞术的应用及发展
流式细胞仪(Flow cytometer)是一项集激光技术、电子物理、流体力学、光电测量技术、计算机技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,被誉为试验室的"CT",是一种可以对细胞(或亚细胞)结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术.简单说流式细胞术(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或亚细胞结构,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或亚细胞)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行快速定性或定量检测的一种现代细胞分析技术.
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经典中医学和现代中医学的分野
世界上的事物原本都是相通的.虽然我们每个人的骨子里都有自己的生物和文化基因,因而去表达仅属于自己的生物学性状和社会行为方式,但大凡人生又都会有近乎相同的经历.人生如此,科学的发展亦如此.
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多种肠道致病菌初筛鉴定培养基研制
肠道杆菌是寄居在人类和动物肠道中生物学性状近似的革兰阴性杆菌,是引起腹泻病的病原菌.大多数肠道杆菌是肠道的正常菌群,但当宿主免疫力降低或细菌侵入肠道外部等特定条件下也可成为条件致病菌而引起疾病或食物中毒.在肠道菌的鉴定方面,致病性的肠道菌所用的初筛培养基对变形杆菌族的细菌无特殊的鉴别意义.为简化细菌鉴定实验手段,提高工作效率,我们利用细菌的各种生长特性,研制出一种简单、快速、易于掌握、特异性和稳定性强的鉴别培养基.现将结果报告如下.
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Caveolin-1在膀胱癌的表达及其与膀胱癌生物学性状关系
目的探讨caveolin-1在膀胱癌中的表达及其与膀胱移行细胞癌(以下简称为膀胱癌)生物学性状的关系.方法采用SABC免疫组织化学法分析63例膀胱癌组织及15例正常膀胱粘膜中caveolin-1表达,结合临床病理资料采用x2检验进行统计学分析.结果正常膀胱粘膜中caveolin-1无表达,膀胱癌组织中caveolin-1阳性表达率为34.92%.其中G1、G2、G3期膀胱癌阳性率分别为0%、2.86%、54.28%,病理分级间比较有显著性差异(P<0.01);临床分期Ta~T4阳性率分别为0%、25%、52.94%、40%、50%,各期间比较有显著性差异(P<0.01).结论caveolin-1在膀胱癌的高表达与其病理分级及临床分期有密切的关系,对膀胱癌生物学性状评估有重要意义.
关键词: Caveolin-1 膀胱移行细胞癌 免疫组织化学 生物学性状 -
脐血与骨髓间充质干细胞生物学性状的比较
背景:实验证实脐带血与骨髓在体外均可分离培养出间充质干细胞,且两种不同来源的间充质干细胞均具有自我更新及多向分化的能力.目的:比较脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞的表型和生物学性状差异.设计、时间及地点:对比观察,于2007-10/2008-05在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:3份正常成人骨髓血,取自青岛大学医学院附属医院3例行自体干细胞移植治疗的糖尿病患者(40~50岁),3份胎儿脐带血取自青岛大学医学院附属医院妇产科.方法:在无菌条件下抽取糖尿病患者骨髓血0.5 mL,肝素抗凝后与1.5 mL PBS混匀,然后按1:1比例加入2 mL percoll淋巴细胞分层液中,2 000 r/min离心10 min,吸取其云雾状自膜层,PBS冲洗稀释后1 000 r/min离心10 min.离心后的沉淀细胞加入含体积分数为10%胎牛血清的LG-DMEM培养液,制成单细胞悬液后接种于培养瓶中.取胎儿脐带血,用PBS1:1稀释,分离及培养方法同上.主要观察指标:显微镜下观察第3代培养的间充质干细胞形态变化;四甲基偶氮唑盐法测定细胞生长曲线;碱性磷酸酶染色观察间充质干细胞向成骨的分化.结果:①分离的脐血接种到培养瓶中的白膜层细胞在两三天时开始贴壁,2周左右达到80%~90%汇合.细胞形态不均一,随培养时间延长,细胞体积逐渐增大伸展;骨髓间充质干细胞大部分于24 h内贴壁.倒置显微镜下可见贴壁细胞呈圆形,有小的胞浆突起.瑞特染色后,可见成纤维样细胞形态,细胞呈平行排列生长或漩涡状生长,与脐血间充质干细胞相比,贴壁早,增殖快.②电镜观察可见间充质干细胞为成纤维样细胞,为长形或梭形,少数细胞核质比大,胞浆少,核仁明显,具有干细胞特征.③在细胞生长的对数期,脐血和骨髓间充质干细胞倍增时间分别为150 h和50 h.④脐血和骨髓间充质干细胞成功诱导后细胞形态由原来的梭形变成了立方形,随着细胞生长形成结节结构,碱性磷酸酶染色阳性.结论:两种不同来源的间充质干细胞均具有自我更新及多向分化的能力.骨髓间充质干细胞支持造血、促进造血功能恢复和重建造血的功能强于脐血间充质干细胞.
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组织块法培养成年兔肌腱细胞
背景:体外分离培养肌腱细胞,熟悉其生物学特性是研究肌腱愈合机制、改善肌腱愈合内环境的前提和基础.目的:采用组织块法体外培养成年兔肌腱细胞,观察其细胞形态、生长增殖情况以及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达.方法:无菌条件下取成年新西兰白兔双侧后肢趾屈肌腱,手术显微镜下剥离、去除肌腱外膜组织,剪成组织小块,0.25%胰蛋白酶和0.1%胶原酶Ⅰ消化10~15 min,离心去上清,将组织小块转移到培养瓶中,贴壁后加入1 mL培养液,待细胞游出贴壁生长时,再加培养液继续培养,每3 d换液1次,当细胞长到80%~90%融合时按1∶3传代.结果与结论:一般10 d左右细胞会从组织块游出贴壁生长,此时细胞多呈星形或不规则形,随着时间延长细胞逐渐增多,呈梭形的成纤维细胞样.传代细胞刚接种时圆形,4~6 h开始贴壁并伸展为梭形,排列逐渐规则成群.从传代细胞的生长曲线可看出,前4 d细胞生长较慢,为潜伏期,第5天后进入快速增殖期,7 d以后进入平台期.免疫荧光法证实Ⅰ型胶原染色阳性,而Ⅲ型胶原染色呈阴性.结果表明采用组织块法可在体外成功培养成年兔肌腱细胞.
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人正常椎间盘髓核细胞体外不同培养代次的生物学性状分析:适应于组织工程椎间盘种子细胞的选择
背景:目前用作组织工程椎间盘研究的种子细胞主要来源于体外培养的髓核细胞,而体外培养的髓核细胞传至一定代次后即出现老化现象,老化的细胞失去生长能力不适于组织工程研究.目的:比较不同代次正常髓核细胞的形态学、增殖特性以及细胞的主要细胞外基质成分基因表达情况.方法:以酶消化法分离、培养人正常椎间盘髓核细胞,对不同代次髓核细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,采用XTT实验检测不同代次细胞间的生长动力学差异,测定髓核细胞的活力和细胞Ⅱ型胶原及糖胺多糖mRNA表达.结果与结论:传3代之前细胞形态饱满,胞浆丰富,细胞呈多角形、短梭形,细胞内细胞器丰富,形态正常,线粒体含量少,核糖体含量多,说明细胞代谢旺盛,增殖能力强,生长曲线和XTT实验也提示传3代之前髓核细胞活性高,增殖能力强,细胞活力高,细胞外基质分泌旺盛.从传4代起,部分细胞形态逐渐向长梭形演化,逐渐表现为成纤维细胞的形态,说明细胞开始出现"返祖"现象,也称为老化现象,细胞的生长趋缓,传六七代后细胞均表现为长梭形,粗面内质网扩张,线粒体增多,细胞活力降低,细胞外基质明显减少,生长处于停滞状态.实验结果提示,体外培养条件下,人髓核细胞前3代细胞形态良好,增殖能力强,适合作为组织工程椎间盘的种子细胞,而细胞传4代后增殖能力逐渐减弱,不宜作为组织工程椎间盘的种子细胞.
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胃癌肿瘤干细胞的分离与成脂分化
背景:肿瘤干细胞是否存在于所有肿瘤中仍有争议.目的:从人胃癌细胞中分离并鉴定类肿瘤干细胞,对胃癌的发生机制进行探讨.方法:原代培养胃癌细胞,并通过流式细胞术检测CD44和CD29等细胞因子的阳性表达率,分选阳性细胞进行成脂诱导.结果与结论:胃癌细胞中CD44、CD29的阳性百分率分别为5.67%和5.53%,CD44和CD29阳性细胞具有成脂能力,证明胃癌肿瘤细胞中存在具有分化能力的类肿瘤干细胞.
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成人与胎儿骨髓间充质干细胞生物学性状的比较
背景:目前间充质干细胞主要来源于骨髓,成人骨髓中的间充质干细胞含量较低,胎儿骨髓间充质干细胞具有较弱的免疫原性和良好的分化潜能.目的:比较成人与胎儿骨髓间充质干细胞的生物学性状差异.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-02/10在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成.材料:成人骨髓血标本3份,来源于青岛大学医学院附属医院.流产胎儿骨髓样品3份,由青岛市立医院提供.方法:Percoll法体外分离培养成人、胎儿骨髓间充质干细胞,加入含体积分数为10%胎牛血清的LG-DMEM培养液,待细胞汇合至90%后消化传代.分别取相同代数的成人、胎儿骨髓间充质干细胞,加入KGla悬液以及含胎牛血清的DMEM培养液,在37℃、体积分数为0.05的C02条件下培养2 h,吸出未黏附细胞.取第3代骨髓间充质干细胞,按1×106浓度接种,当细胞达60%~80%融合时,换为成骨细胞诱导分化培养液,诱导16 d.主要观察指标:细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,计算细胞体外黏附率,碱性磷酸酶染色榆测细胞成骨分化结果.结果:成人、胎儿骨髓间充质干细胞均呈成纤维细胞样梭形外观,但后者体积略小,二者倍增时间分别为50 h和30 h.与成人骨髓间充质干细胞黏附率比较,胎儿骨髓间充质干细胞黏附率明显降低(t=4.22,P<0.05).二者均可分化为成骨细胞.结论:从成人、胎儿骨髓中培养出的间充质干细胞在细胞形态、生长特性等方面基本相似,在体外均可有效扩增且能够成骨分化.前者促进造血功能恢复和造血重建功能强于后者,扩增潜力弱于后者.
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水凝胶与硅凝胶在香猪乳腺组织下的生物学性状的观察(Ⅱ)
4 结果二:不同时期水凝胶比重的测量取注入香猪乳腺下的水凝胶、抗生素、麻醉药的混合液及不同观察时期的腺体下水凝胶各1ml,分析天平称重后放于37℃烤箱72小时,烤干后称重(表1,图7)。术后半个月体积缩小约为21%,其中第2周内缩小幅度大为11%。而到第4个月后则基本稳定,无明显变化,这与临床上的观察结果相符。
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冷饮食品条件致病菌污染情况分析
近年来,条件致病菌引起的食物中毒已经逐渐引起人们的重视,这类菌与常见的肠道致病菌在生物学性状与生化反应方面有明显差别,是一群不发酵碳水化合物的革兰氏阴性无芽胞杆菌.我们对呼兰县95份冷饮食品进行了非发酵型条件致病菌的分析.
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冠心病患者的C-反应蛋白变化及临床意义
近年来大量研究表明,炎症反应基本上参与了动脉粥样硬化形成的各个阶段.而冠心病的临床表现主要与冠脉内斑块的生物学性状有关,并不取决于冠脉狭窄程度,斑块病变的不断进展与炎症反应密切相关[1].本文是通过对不同类型冠心病患者血清C-反应蛋白(CRP)的测定,来探讨CRP在冠心病中的差异及意义.
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河北省鼠疫菌株的鉴定
河北省康保县境内,1994年秋季到次年春季发生过长爪沙鼠鼠疫流行,共检出鼠疫菌65株.为鉴定本疫源地分离的鼠疫菌生物学性状,为动物鼠疫流行病学分析提供可靠的资料,对其中40株鼠疫菌做了形态、染色、培养、噬菌体裂解试验,动物试验,生化特性,鉴别培养、毒力决定因子等方面的鉴定,结果如下.