CTLA4-Ig抑制异种混合淋巴细胞反应

目的研究共刺激分子细胞毒性T细胞抗原4(CTLA4)对人-猪异种移植反应中,T细胞活化的抑制作用.方法用转染CTLA4-Ig融合基因的猪血管内皮细胞系(PIEC)和CTLA4-Ig融合蛋白抑制T细胞增殖反应.结果 B7/CD28共刺激信号途径在异种细胞排斥反应中起重要作用,CTLA4-Ig的抑制效应没有对同种细胞反应的影响强.结论上述结果的机制可能是因为异种间分子不相容性降低协同分子的匹配性,或者异种移植反应中其它协同分子"替代性"参与了辅佐信号的传导.

白细胞介素4在输注供体肝脏非实质细胞诱导免疫耐受中的作用

目的探讨皮肤移植受体在输注供体肝脏非实质细胞(NPC)诱导免疫耐受过程中,白细胞介素4(IL-4)所起的作用.方法将2×107个C3H/He (C3H)小鼠的肝脏非实质细胞通过尾静脉输入C57BL/6(B6)小鼠的体内,48h后B6小鼠腹腔注射环磷酰胺200mg/kg,18d后接受C3H小鼠皮片的移植,分别于NPC细胞输注前及输注后7、18、30、60d采血监测IL-4水平的动态变化.结果 15只接受皮片移植的小鼠,其皮片存活时间显著延长,皮片平均存活时间(70±17.2)d,正常对照组其移植皮肤的平均存活时间仅(10±0.4)d,用Elisa法检测NPC输注后不同时期IL-4水平的动态变化发现,B6小鼠体内血清IL-4水平逐渐升高,在长期耐受的小鼠中,其水平增加尤其显著,甚至成倍的提高.结论 IL-4水平的升高对于诱导和保持免疫耐受起着重要的作用.

同种异体反应性淋巴细胞克隆疫苗回输诱导受体特异性免疫耐受的研究

目的探讨同种异体移植抗原特异性免疫耐受诱导的新途径,以达到心肺移植长期存活的目的.方法以同种异体反应性淋巴细胞克隆在体外培养条件下大量增殖后,作为自身独特性疫苗,体内注射免疫家兔,以混合淋巴细胞反应来观察免疫前和免疫后对供体淋巴细胞刺激指数(SI)的变化.结果同种异体反应性自身独特型淋巴细胞疫苗具有显著诱导特异性免疫应答移植现象,SI值显著降低(P＜0.05),而对卡介苗诱导的特异性免疫应答并未因独特型淋巴细胞疫苗的应用而下降.结论同种异体反应性自身独特型淋巴细胞疫苗有可能成为诱导抗原特异性免疫耐受的一种手段.

大鼠胰十二指肠肾脏联合移植模型的实验研究

目的为了进行胰肾联合移植基础研究,建立一种简易可靠的大鼠胰十二指肠肾脏联合移植(SPKT)模型.方法雄性SD大鼠作同品系异体移植的供受体.受体尾静脉注射链脲霉素（STZ）50 mg/kg,建立大鼠糖尿病模型.在保存液中,移植物门静脉与肾下下腔静脉作袖套式吻合;移植物肾上腹主动脉、肾上下腔静脉分别与受体肾下腹主动脉、肾下下腔静脉显微缝合吻合;移植物十二指肠与受体十二指肠端侧吻合;移植物带输尿管的膀胱片与受体膀胱吻合.结果血管吻合时间及受体手术时间短,手术成功率为88%,移植胰腺及肾脏功能良好.结论此模型是一种简易可靠的大鼠胰十二指肠肾脏联合移植模型.

DCs单抗对大鼠肾移植后排斥反应时CD40/CD40L表达的影响

目的观察大鼠树突状细胞(DCs )单抗单独或与甲泼尼龙(MP)联合应用对移植后排斥反应的影响,并结合检测大鼠移植肾CD40/CD40L表达水平,探讨其抗排斥的作用机制.方法实验共分为5组:同系移植组;不用药实验对照组;MP治疗组; DCs单抗治疗组; DCs单抗+MP治疗组.利用免疫组织化学方法检测移植肾内CD40/CD40L表达,每一样本采用计算机图像分析定量测定.结果大鼠DCs单抗单独或与MP联合治疗组受体鼠存活时间较不用药对照组显著延长(P<0.01), 其中DCs单抗+MP治疗组尤为明显.术后7d,不用药实验对照组移植肾脏组织CD40/CD40L表达水平显著高于其它各组,DCs单抗+MP治疗组表达水平显著低于MP组及DCs单抗组(P<0.01),同系移植组表达水平低.结论单独应用DCs单抗或与MP联合应用均显著延长大鼠肾移植存活期.干扰CD40/CD40L共刺激通路信号传导可能是其抗排斥机制之一.

凝血酶与移植物内皮细胞损伤

随着移植免疫基础理论的研究和进展、实验手段及移植配型等方法日臻完善、以及免疫抑制剂的成功应用,有效降低了抗宿主排斥反应,器官移植后的存活率等方面取得卓著成绩.人们转而逐渐认识到移植后的血栓并发症,以及由凝血酶(thrombin/Ⅱα)等凝血相关因子、细胞因子、粘附分子、趋化因子等相互作用,介导移植物内皮细胞损伤、血管平滑肌增生、纤维素沉积等一系列病理变化,已成为导致移植失败的重要原因.本文将着重对同种异体移植后急性排斥反应中凝血酶参与介导的内皮细胞损伤机制作一综述.

小肠移植临床进展

1.小肠移植的现状80年代后期随着环孢素A(CsA)的问世, 小肠移植才开始有了根本性的突破.1987年Starzl等[1]为1例肠衰竭患儿成功实施包括肝、胰、小肠和胃的首例腹腔多脏器移植,术后存活6个月;1989年Grant等[2]又率先实施了首例肝-小肠移植,并获得成功.据国际小肠移植登记处统计[3]资料显示,1985年～1997年2月,全球共有33家机构为260人开展了273例次的小肠移植,移植例数逐年递增,1996年达58例,2/3的受者为儿童和青少年.移植类型包括:伴或不伴结肠的单独小肠移植(41%)、肝-小肠移植(48%)和腹腔多脏器移植(11%).1995年后移植物/患者1年存活率分别为:小肠移植63%/69%、肝-小肠移植63%/66%、多脏器移植63%/63%.77%的存活患者已经脱离全胃肠外营养(TPN),开始正常饮食.美国Pittsburgh大学Starzl移植研究所手术例数多,1990～1999年共做121例(127次)小肠移植,患者/移植物1年和5年存活率分别达到72%/64%和48%/40%, 长存活时间近9年[4],其中儿童5年生存率达到68%.近较大宗病例显示小肠移植3年存活率可达50%以上[5],手术安全性和费效比明显提高. 我国自1993年南京军区总医院实施首例同种异体全小肠移植以来,到1999年5月四家单位共实施了临床小肠移植7例,手术方式包括全小肠移植(5例)、肝-小肠联合移植[6]和亲属活体部分小肠移植[7](各1例),生存长时间仅2年多.

肾移植术中一种简化的输尿管膀胱吻合术

自1996～2001年,采用一种简化的输尿管膀胱吻合术完成肾移植手术30例,取得了满意效果,介绍如下.手术方法:(1)术中完成相应手术的有关步骤后,输尿管呈游离状态,根据拟吻合输尿管膀胱吻合处的位置,修剪输尿管长度,使其末段呈椭圆形.在手术切口下段,向内、上侧推开腹膜,显露膀胱外侧顶部.(2)在膀胱外侧顶部,用电刀切开膀胱浆肌层约0.5cm,保留粘膜层完整.自该切口粘膜下向上穿一潜行遂道,隧道长约1.0cm,自隧道另一端穿出浆肌层,将输尿管断端自该穿出处拉入隧道.(3)用两端带针4-0羊肠线一根从外向内呈"u"型缝合输尿管尖端,不打结,两缝针经第一切口处捅破膀胱粘膜层将输尿管拖入膀胱腔内,距切口约2.0cm,两缝针自膀胱腔向外贯穿膀胱全层穿出,两针间距约0.5cm,这时输尿管末端已完全进入膀胱腔内.(4)小心收紧羊肠线两端,防止缝线与输尿管纠搭,羊肠线在膀胱外打结,这时输尿管即

肾移植后泌尿系肿瘤二例

同种异体肾移植后,由于免疫抑制剂的长期应用,免疫功能低下,机体抵抗力差,易导致恶性肿瘤的发生和发展.本文报道2例肾移植后发生于泌尿系统的肿瘤. 例1,男性,65岁,同种异体肾移植后19年,因发现无痛性肉眼血尿而入院.B超检查示膀胱内1.8cm占位性病变.因双股骨头出现缺血坏死,致使关节强直,不能作膀胱镜检,故作膀胱切开探查,发现膀胱左后壁带蒂菜花状肿瘤,直径约1.5cm,作膀胱部分切除术.术

非协同性异种肝移植模型的探索

我们参照Kamada等的方法在成功建立大鼠同种原位肝移植模型的基础上,对豚鼠到大鼠的异种原位肝移植模型进行了探索.其主要操作过程与同种相似.由于豚鼠解剖结构的特殊性,在某些方面与同种又有所不同,主要表现在供肝手术过程方面.

腹膜外胰肾十二指肠同期移植术后随访

1997年12月26日我们为1例I型糖尿病性终末期肾病的患者进行了腹膜外同期胰、肾联合移植,至今存活已2年4个月,胰、肾功能良好,报道如下.

手助腹腔镜取肾亲属肾移植一例

2001年12月7日,我院做了首例女儿供肾给母亲的肾移植,并采用手助腹腔镜取肾,手术获得成功.

预防和治疗肝移植术后乙型肝炎复发(附3例报告)

乙型肝炎复发是直接影响肝移植术后患者长期存活的一个主要因素.人们一直在努力探索预防乙型肝炎复发的有效、经济、安全的方法.现将我们应用核苷类似物预防和治疗肝移植术后乙型肝炎复发的体会报道如下.

钙通道阻滞剂对他克莫司血浓度的影响及临床意义

目的探讨钙通道阻滞剂(CA)对免疫抑制剂他克莫司(FK506)血浓度的影响.方法 (1)将20例肾移植患者平均分为2组,观察组除服用FK506外,还同时服用钙拮抗剂维拉帕米;对照组不服用钙拮抗剂.分别检测并比较两组的FK506血浓度变化及其量化关系.(2)检测10例肾移植患者服用钙拮抗剂维拉帕米前、后自身FK506血浓度变化及量化关系.结果 (1)观察组术后第15d时的FK506血浓度为(15.8±1.3)μg/ L,对照组为(10.2±1.7)μg/L , 观察组比对照组平均升高54.9%,P<0.01;根据血浓度调整观察组术后不同时间内FK506服用量,比对照组平均减少27.1%～50.0%.(2)观察组10例肾移植患者加用维拉帕米前FK506用量为(0.06±0.02)mg·kg-1·d-1,血药浓度为(9.2±1.8)μg/L,加用维拉帕米1w后,FK506血浓度升至(14.1±2.9)μg/L,其浓度平均升高了53.3%,此时调整FK506用量减少了(0.02±0.01)mg·kg-1·d-1,减少幅度平均达33.3%.结论维拉帕米能提高肾移植患者FK506的血浓度,减少术后FK506的服用量,具有重大的临床应用价值及社会经济效益.

肾移植患者细菌谱的调查及耐药性的研究

目的通过调查研究肾移植患者常见致病菌株分布特点及其对抗生素敏感性的规律,进一步提高临床治疗肾移植后感染患者的成功率.方法 1997年4月～2000年5月间,对拟诊为呼吸系和/或泌尿系细菌感染的肾移植患者进行研究,取其痰、咽拭子或中段尿标本进行细菌培养并作24种常用抗生素药敏试验,对结果进行统计学分析.结果共有653份标本培养结果阳性,其中痰标本233份,咽拭子173份,中段尿247份,主要阳性菌株是铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌和表皮葡萄球菌等.敏感率较高的抗生素有万古霉素、亚胺培南、阿米卡星和头孢他啶等,耐药率较高的有青霉素、氨苄西林、红霉素、苯唑西林和头孢唑林等.结论 (1)肾移植后感染的主要菌株种类与其他患者有所不同;(2)肾移植患者的感染菌株对抗生素敏感率高的依次为万古霉素、亚胺培南、阿米卡星和头孢他啶,但耐药性也正在逐渐增强;(3)肾移植患者的感染主要发生在呼吸和泌尿系统,其他部位的感染少见;(4)痰和咽拭子来源的细菌株对抗生素更敏感,中段尿来源的细菌则耐药株相对多见.

肾移植术后他克莫司加泼尼松二联免疫抑制治疗的临床观察

目的探讨肾移植术后他克莫司(FK506)加泼尼松(Pred)二联免疫抑制治疗方案的临床疗效及副作用.方法 22例尸肾移植患者术后应用FK506加Pred二联免疫抑制治疗,临床观察3～22个月,监测FK506血浓度和副作用及移植肾功能.结果 22例患者术后肾功能均恢复正常,无排斥反应, FK506血浓度手术后第1个月为10～15μg/L,第2～3个月为8～10μg/L,3个月后浓度维持在5～9μg/L即可.22例中,仅1例于术后3个月发生糖尿病,现口服降糖药,血糖控制在正常范围.结论肾移植术后FK506加Pred二联免疫抑制治疗方案是安全和有效的.

移植肾输尿管梗阻的介入治疗

目的探讨介入治疗对移植肾积水的有效性和安全性.方法 7例肾移植术后发生积水者行介入治疗,其中输尿管膀胱吻合处狭窄6例,结石梗阻1例.2例行经皮穿刺肾引流术、1例行狭窄段输尿管顺行球囊扩张术,4例行顺行球囊扩张+双J管植入术.术后平均随访31个月.结果介入治疗手术成功率为100%,无1例发生并发症.血肌酐由术前（434.0±66.5)μmol/L,下降至术后(139.9±50.4)μmol/L,6例随访4～51个月无复发.结论介入治疗移植肾积水是安全和有效的首选方法.采用B超导向和同轴穿刺技术可以提高肾盂穿刺的准确性与安全性,减少患者的痛苦.

尿流式细胞学在诊断移植肾急性排斥反应中的应用价值

目的探讨尿流式细胞学在诊断移植肾急性排斥反应中的临床应用价值.方法对43例肾移植受者的116份尿样本进行尿流式细胞学分析,并将急性排斥组和肾功能稳定组的分析结果进行比较.结果急性排斥反应组尿淋巴细胞总数以及HLA-DR+淋巴细胞数显著增多,与肾功能稳定组比较,P<0.01;CD8+细胞亦增多(P<0.05);而CD3+、CD4+、CD19+细胞数变化两组差异不显著(P>0.05).在诊断移植肾急性排斥反应上,HLA-DR阳性样本和淋巴细胞数阳性样本的诊断敏感性和特异性分别达95.2%、90.5%和92.6%、87.4%.结论尿流式细胞学分析可反映移植肾内的免疫状态,尿淋巴细胞数的显著增多和尿HLA-DR+淋巴细胞增多可以作为诊断急性排斥反应的有意义指标.

新山地明在我国肾移植中用法的初步报告

目的将新山地明(Neoral)的用法从2次/d改为3次/d,降低其毒副作用.方法初次肾移植者60例,随机分为2组,Ⅰ组:28例,2次/d;Ⅱ组:32例,3次/d,Neoral口服剂量相同.术后随访3个月.结果 Neoral血药浓度Ⅱ组与Ⅰ组相比,谷值显著上升,峰值显著下降;两组急性排斥反应率相似,但Ⅱ组毒副作用(4/32)显著低于Ⅰ组(11/28),P<0.01.结论将Neoral的用法从2次/d改为3次/d,可以显著降低其毒副作用,尤其是肝毒性,并且不增加排斥反应发生率.

低温保存人肝细胞膜Na+、K+通道特性的研究

目的研究低温(0～4℃)保存人肝细胞膜Na+、K+、Na+/H+交换、Na+/K+/2Cl-协同转运通道以及Na+/K+-ATP酶的状态.方法胶原酶循环灌注分离人肝细胞; 对照组保存液中不加任何其它试剂,实验组保存液中加入不同的离子通道阻滞剂,分别为:氨氯吡咪(Amiloride,A组),丁苯氧酸(Bumetanide,B组),利多卡因(Lidocaine,L组),奎尼丁(Quinidine,Q组) 及Na+/K+-ATP酶阻滞剂哇巴因(Ouabain,O组). 台盼兰染色测定各组的细胞存活率;原子吸收法测定细胞内Na+、K+浓度.结果 (1)细胞存活率:B组与对照组比较差异不显著;A组保存1h、Q组、L组保存12h后,细胞存活率较对照组显著升高;(2)细胞内Na+浓度: 对照组及B组细胞保存的初始阶段显著增高,随着时间的推移又逐渐降低,两组比较,各保存时段差异均不显著;L组保存15min内显著增高,但低于对照组;O组各保存时段均显著高于对照组,A组各保存时段均显著低于对照组;(3)细胞内K+浓度:对照组保存1h内降低,以后逐渐趋于平稳;O组各保存时段均显著高于对照组,Q组则低于对照组.结论各种离子通道阻滞剂对细胞的保存,在不同的方面有着特定的作用.0～4℃保存的人肝细胞膜上,短时间内Na+、K+通道开放,而Na+/H+交换机制异常活跃,起主要作用,Na+/K+/2Cl-协同转运通道基本无活性;Na+/K+-ATP酶保留一定的活性.

肝移植术后胆道并发症的防治

目的探讨肝移植术后胆道并发症的防治.方法对7例终末期肝病(包括3例原发性肝癌)患者行原位肝移植,供肝除1例仅经门静脉灌注外,其余均经动脉及门静脉双重灌注.胆道重建采用胆管端端吻合6例,胆肠吻合1例.结果 3例出现胆道并发症.术后2w,发现1例T管周围胆漏,经放开T管后治愈;术后12d,1例出现胆漏,再次手术发现胆管从吻合口穿出,第2次术后腹腔感染一度控制,术后49d再次高热,术后52d死亡,尸检发现胆管坏死、胆漏;1例术后3d发生胆漏,经充分引流治愈,术后4个月发现有胆泥,经口服溶石药等治疗,症状消失.结论对供者动脉充分灌注、胆道充分冲洗,尽量减少对供者胆管血供的损害是预防胆道并发症的关键,而术后胆道并发症多经非手术或微创手术治愈.

第四次全国器官移植学术会议纪要

多供体脐血输注诱导免疫低反应性的研究

目的通过多供体脐血输注诱导肾移植术前患者产生同种免疫低反应性.方法选取终末期尿毒症拟行肾移植的患者39例,20例接受多供体脐血输注(脐血组),19例接受成人外周血洗涤红细胞输注(对照组).分别于输血前(T0)、输血后1个月(T1)、2个月(T2)、3个月(T3)及移植术前后动态监测受者混合淋巴细胞培养(MLC)以及血清HLA同种抗体水平的变化.结果脐血组输血后1、2、3个月受者淋巴细胞对供脐血淋巴细胞及无关成人淋巴细胞的MLC明显下降.脐血组自身前后对照MLC受抑制率可达70%以上;与对照组比较,差异有显著性(P<0.05).脐血组移植术前后受者淋巴细胞对供肾淋巴细胞的MLC亦受到明显抑制,和对照组比较,差异有显著性.脐血组输血后血清同种反应抗体水平亦显著下降.7例输血前同种抗体呈阳性反应者,输血后6例转为阴性,1例有明显下降;而对照组输血前4例抗体阳性者无1例下降或转阴.结论多供体脐血输注能够诱导受者淋巴细胞对供脐血淋巴细胞的特异性免疫低反应性,这一低反应性还可"非特异"地表现为受者对无关成人淋巴细胞和供肾淋巴细胞的免疫低反应性.

亲体部分肝移植治疗肝豆状核变性

目的研究亲体部分肝移植术在肝豆状核变性(Wilson's病)治疗中的应用价值.方法 2001年1月至2001年12月连续为10例Wilson's病患者施行肝移植术,供肝者均为患者的母亲.结果手术全部获得成功,术后无严重并发症发生,均恢复顺利.术后铜氧化酶均显著升高,分别从术前(9.9±9.3)U/L升高至术后(124.0±33.8)U/L; 角膜缘K-F环均明显变淡;神经系统症状改善;现已分别存活12、11、10、8、7、7、3、3、2和1个月.结论肝移植术是治疗肝豆状核变性的有效手段.亲体部分肝移植术具有供肝来源可靠、临床疗效好、费用低的优点,应用前景广阔.

肾移植术后卡氏肺囊虫肺炎的临床研究

目的提高对卡氏肺囊虫肺炎(PCP)的认识,探索电镜对卡氏肺囊虫肺炎的诊断意义以及预防PCP的方法.方法通过对95例肾移植术后受者中有发热、呼吸困难伴干咳的16例患者作回顾性分析,X线胸片及肺部CT显示此16例患者两肺弥漫性渗出性病变.其中 13例作支气管镜检,六胺银染色(Jones)结合电镜活检确诊为卡氏肺囊虫肺炎.结果选用复方磺胺甲基异恶唑(SMZco)治疗,15例康复,治疗过程中4例血肌酐及胆红素轻度增高,停药后恢复正常,随访2～12个月,PCP未复发.有1例因呼吸衰竭死亡.结论肾移植术后易罹患卡氏肺囊虫肺炎;PCP关键在于早期预防,早期诊断、早期治疗.电镜对诊断PCP有其重要的临床意义.

显性调控相关早反应基因的大规模扫描和分析

目的动态观察白细胞介素10(IL-10)作用后,淋巴细胞早反应基因表达谱变化,为下一步评价患者免疫状态和诱导治疗提供理论依据.方法应用DNA微矩阵技术,分离正常人外周血单个核细胞(PBMC),予以抗CD3McAb及CD3McAb+IL-10刺激,抽提24 h PBMC mRNA,反转录后与芯片杂交,通过生物信息学方法比较分析.结果培养24h后,抗CD3McAb+IL-10组与抗CD3McAb组比较有15个基因发生改变,5个基因表达明显下调,10个基因上调,主要功能在于促进基因编码区连接,影响细胞骨架和运动,不同部位的磷酸化、去磷酸化,细胞识别,会促进细胞生长作用,细胞凋亡,信号传递的基因则重点涉及钙离子-钙调蛋白、G-蛋白信号通路.结论在IL-10作用下,一系列基因转录活化,其中许多先前与免疫细胞无明确功能的相关基因参与了T细胞活化与调控,是否该群基因即代表IL-10作用下淋巴细胞的基因表达标签,尚须进一步证实;要完全明确T细胞调控网络,还应全面分析T淋巴细胞基因表达谱,从中筛选差异有显著意义的基因,进行功能研究.

1200次移植肾穿刺的并发症及临床意义分析

目的分析移植肾穿刺术的临床意义及并发症,以促进移植肾活检术在肾移植患者中的广泛应用.方法 1994年1月至2001年1月行肾移植术的590例患者,术后常规行移植肾活检术,肾功能短期内急剧恶化者急诊行肾穿刺活检术.采用斜角进针负压吸引法,对其并发症及肾活检组织病理学改变进行了分析.结果 590例患者共行1 200次肾穿刺术,穿刺成功率为99.8%,组织质量较好的占81.3%,光镜标本平均每份包含肾小球(19.0±9.0)个.肾穿刺后肉眼血尿的发生率为1.6%,肾周血肿的发生率为0.3%,经对症处理后缓解.出现出血并发症的患者肾组织病理学检查均有异常改变,包括急性肾小管坏死(ATN),急性排斥反应,慢性排斥反应等.病情稳定患者的血清肌酐水平在肾活检后无明显的变化.肾功能正常患者的肾活检组织病理检查发现异常的有27.8%, 其中临界改变占11.9%,动脉内膜炎占4.0%,急性排斥占1.4%,此外尚有少量的慢性排斥及间质非特异性细胞浸润.肾功能异常的患者中有34.9%肾组织病理表现为正常移植肾改变,30.2%的患者诊断为急性排斥,17.4%患者诊断为临界改变,动脉内膜炎及ATN各占有0.3%.结论斜角进针负压吸引肾活检术在肾脏移植患者中应用成功率高,且较为安全.移植肾穿刺病理检查,无论是常规肾活检还是急诊活检对明确诊断及确定治疗方案都是必要的.