首页 > 文献资料
-
上皮干细胞发育调控与临床应用的研究进展
近年来,干细胞成为医学领域研究的热点,其中上皮干细胞的研究在干细胞组织工程中具有非常重要的意义.现已证明,上皮干细胞在正常组织的更新和损伤组织的再生过程中起到关键作用,但因其发育过程受到多种因素的影响,具体调控机制尚不完全清楚,从而使临床应用受到一定的限制,作者就其分化过程中对不同阶段起着调控作用的因素及机制作了综述.
-
表皮生长因子提高大鼠肺泡Ⅱ型细胞的肺水转运功能
急性肺损伤引起的肺水肿和呼吸衰竭在临床上通常采用常规的通气支持治疗,但对已经受损的肺泡上皮尚缺乏有效的修复手段,而难以从根本上扭转病情.近年来对干细胞和生长因子的广泛研究为主动修复受损的肺泡上皮提供了可能.现已证明,肺泡Ⅱ型细胞是肺泡上皮干细胞,它不仅具有分泌表面活性物质和清除肺泡内液体等多种功能,而且还能通过增殖和分化,补充减少的肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞,维持正常肺泡上皮数量.近解放军第三○四医院创伤研究室的科研人员,观察了生长因子对肺泡Ⅱ型上皮清除肺泡内液体功能的影响.研究者首先建立了以125 Ⅰ-白蛋白为示踪剂进行肺灌注检测肺泡液体清除率(alveolar liquid clearance,ALC)的方法.将36只正常SD大鼠随机分为6组,其中5组动物经气管滴入重组人表皮细胞生长因子(rhEGF,100 μg/kg),分别于48、72、120、168和240小时测量 1小时肺泡液体清除率,对照组以生理盐水代替rhEGF.同时监测ALC测量期间血气变化.实验结果显示,对照组ALC为(21.68±3.65)%;气管滴入rhEGF后48、72和120小时AL C显著升高[(43.33±13.21)%,P<0.01;(42.52±10.05)%,P<0.01; (34 .35±3.76)%,P<0.01],168小时后恢复正常水平.48小时组、72小时组在灌注后1 小时动脉氧分压也明显高于对照组.此项研究结果表明,rhEGF能提高肺泡Ⅱ型上皮的液体转运能力 ,促进肺泡内液体清除,从而改善肺泡表面氧气交换,有可能为肺损伤和肺水肿的防治提供一种新的方法.
-
对有关干细胞在创伤以及创伤修复中作用的认识
干细胞(stem cells)近来已成为生物学家、医学家、患者乃至普通民众关注的焦点之一,其重要意义在于它们不仅功能巨大,能转变为机体几乎所有不同类型的细胞,从而根据需要构建组织和器官,而且该项技术的直接应用将有可能为修复与重建外科带来革命性的突破,因而具有十分重要的现实和临床应用价值。 就干细胞而言,过去人们研究较多的是造血干细胞。而近来,上皮干细胞的重要性和作用正日益引起人们的高度重视。因为在哺乳动物,机体大约60%的不同组织类型为上皮,其功能涉及分泌、吸收以及机械屏障等诸多方面。因此,了解上皮干细胞在上皮发生以及功能维持中的作用,不仅是发育生物学中未决的基本问题,而且对将来人为调控干细胞分化、增殖以及构建组织和器官十分重要。
-
鼠口腔黏膜上皮干细胞的分离培养与鉴定
目的探索和建立鼠口腔黏膜上皮干细胞体外分离与培养的技术方法.方法利用纤维结合素-胶原包被的培养瓶快速黏附法分离鼠口腔黏膜上皮干细胞,以鼠成纤维细胞条件培养基和无钙EMEM培养基配制表皮干细胞培养基进行培养.通过β1整合素和角蛋白15(K15)免疫组化染色对培养细胞进行鉴定.结果鼠口腔黏膜上皮干细胞呈明显克隆性生长,β1整合素和角蛋白15(K15)免疫组化染色呈强阳性.结论利用纤维结合素-胶原包被的培养瓶快速黏附法分离鼠口腔黏膜上皮干细胞,用鼠成纤维细胞条件培养基和无钙EMEM培养基配制的表皮干细胞培养基进行培养,可以初步实现对鼠口腔黏膜上皮干细胞体外分离与培养.
-
干细胞龛位调控皮肤上皮干细胞增殖与分化机制的研究进展
胚胎干细胞是产生并分布在人体许多器官的多潜能子代干细胞,后者即成体干细胞,是维持组织平衡、细胞更新和修复损伤的先决条件.干细胞的数量、分裂、增殖、分化等是干细胞内因素和周围的微环境提供的胞外因素所共同调控的,这种干细胞的微环境,被称为干细胞龛位.龛位不仅是干细胞生理所在的位置,当干细胞被移出正常的细胞微环境时,干细胞丧失自我更新的潜力,也是来自微环境的信号能够直接决定干细胞子代的命运.笔者就干细胞龛位调控皮肤上皮干细胞增殖分化及皮肤老化的机制进行综述.
关键词: 上皮干细胞 间充质干细胞 短暂扩充细胞 Wnt/β-catenin信号通路 龛位 -
人乳腺癌干细胞异种移植动物模型研究进展
乳腺癌作为一种严重威胁女性健康和生命安全的恶性肿瘤[1]。近45年来,乳腺癌的发病率在世界各国均呈上升趋势[2]。全世界每年新发乳腺癌约100万例,死亡约60万例[3]。乳腺癌的预防、诊断和治疗已经成为当今医学及生物科学研究的“热点”。干细胞或祖细胞已有研究证明在肿瘤发生、发展过程中成为恶性转化靶点的关键。肿瘤干细胞主要通过 Notch,Wnt,Hedgehog 等三条通路调解自我更新的信号传导[4-8],如 Notch 途径的激活会导致细胞命运的改变;wnt 信号转导途径的激活促进了上皮干细胞向上皮癌转化;Hedgehog 信号通路在大多数乳腺癌中被激活,过度表达PTC1和 GLI1(Hedgehog 信号通路激活标记物)。上述通路的异常会导致正常乳腺的干细胞发生恶性转化,致使乳腺癌的产生。实验动物模型已今已成为是研究乳腺癌干细胞生物学行为的重要工具之一。
-
肝干细胞
干细胞是指组织中原始的具有多潜能性、自我更新的细胞,但不同于组织中的一些前体细胞.虽然前体细胞也具有自我更新能力,但自我更新时间较为短暂.目前通常将干细胞分为三类:①全能干细胞:如胚胎干细胞可以分化形成所有的成体组织细胞,甚至发育成完整个体.②多能干细胞:具有多向分化潜能,可以分化形成除自身组织细胞外的其他组织细胞,如造血干细胞、间充质干细胞和肝干细胞等.③专能干细胞:维持某一特定组织细胞的自我更新,如肠上皮干细胞等.
-
人毛囊隆突区上皮干细胞、黑素干细胞及自发荧光存在的研究
目的 探讨人毛囊隆突区是否存在上皮干细胞、黑素干细胞及自发荧光.方法 标本收集自整形外科健康志愿者后枕部和颞部全层头皮,分离完整毛囊.利用荧光显微镜观察毛囊自发荧光情况;采用间接免疫荧光法和免疫组织化学法检测毛囊角蛋白K15和K19的表达情况;采用RT-PCR检测毛球和隆突区上皮干细胞及黑素干细胞的标志物Dct、K15和K19,以及成熟细胞标志物Tyrase、Tyrp1、MC1R、MITF的mRNA水平.结果 人毛囊隆突区细胞可观察到自发荧光;免疫荧光和免疫组织化学检测结果显示隆突区外毛根鞘表达K15和K19;RT-PCR结果显示,隆突区Dct、K15的mRNA水平显著高于毛球,K19的mRNA水平与毛球相比无显著差异,而Tyrase、Tyrp1、MITF-M、MC1R的mRNA表达水平显著低于毛球.结论 人毛囊隆突区细胞可观察到自发荧光,且有上皮干细胞与黑素干细胞的存在.
-
眼表干细胞定位和鉴定的研究进展
正常眼表对于保证清晰视觉起至关重要的作用.角膜和结膜上皮干细胞(stem cells,SC)不断增殖、分化,以维持眼表的完整性.通过对角膜和结膜的生长分化、基因分析[1]、免疫组织化学及细胞动力学分析[2],证实结膜上皮和角膜-角膜缘是由不同的干细胞群控制.目前,角膜上皮SC的基础和临床研究已取得丰富成果,但对结膜上皮SC的研究尚处于探索起步阶段,各家观点各有不同.
-
Y27632条件培养基体外扩增口腔黏膜上皮细胞
目的:通过优化条件培养基用于非牙源性上皮细胞的体外扩增,为进一步开展组织工程牙提供上皮种子细胞来源奠定基础。方法:获取出生后1 d C57BL 鼠原代口腔黏膜上皮细胞,接种于含有 Y27632的上皮条件培养基的培养瓶内。细胞长满后,消化传代,采用条件培养基与3T3饲养层细胞共培养进行扩增并连续传代,观察细胞生长情况及连续传代后的生物学特性,免疫组织化学进行干细胞鉴定。结果:与传统上皮细胞培养方式相比,含 Y27632的条件性培养基加3T3饲养层方式培养的上皮细胞生长迅速,细胞呈立方形或多角形,呈铺路石样排列。免疫组织化学染色表明这些干细胞表达 CK14,SOX2和LGR5。连续传代至第7代后,细胞形态、生长曲线和干细胞标志没有明显变化。结论:含有 Y27632的条件培养基可有效用于体外大量扩增非牙源性上皮细胞,并能保持干细胞生长特性,有望用于组织工程牙的种子细胞来源。
-
细胞周期依赖性激酶抑制剂P27、P21在人角膜上皮的表达研究
目的探讨细胞周期依赖性激酶抑制剂(CKI)P27、P21在角膜上皮细胞的表达情况.方法应用SP免疫组化法,检测P27、P21等细胞周期依赖性激酶抑制剂和增殖细胞核抗原(PCNA)在角膜上皮不同部位的表达情况.结果角膜缘上皮区PCNA呈阳性表达,主要位于基底细胞层,中央区角膜上皮内未见阳性表达,差异有显著意义(P<0.01);P27、P21在中央区角膜上皮内呈阳性表达,角膜缘上皮内未见阳性表达,差异均有显著意义(P<0.01).结论细胞周期依赖性激酶抑制剂P27、P21和PCAN在角膜上皮不同部位的表达差异,提示在角膜缘上皮基底层内存在着一群有较高的增殖能力、处于G1期的细胞群,即干细胞.
-
胚胎干细胞定向分化为垂体样细胞的研究
目的 探讨胚胎干细胞定向分化为垂体细胞的潜能.方法 129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4d,定向诱导其分化为上皮样干细胞克隆,取成年129小鼠新鲜垂体,用生长有上皮样干细胞克隆的人羊膜将其包裹,无菌手术下移植入129小鼠双侧背部皮下,术后4周取材,对移植后细胞的分化情况进行形态学观察.结果 129小鼠E14胚胎干细胞与人羊膜共培养4 d后,在人羊膜上皮面形成上皮样干细胞集落,表达高水平的β1整合素、CK 15和CK 19,移植物在小鼠皮下生长4周后体积明显增大,苏木精-伊红染色表明,人羊膜表面有垂体样细胞形成.结论 胚胎干细胞在适当的条件下有分化为垂体样细胞的潜能.
-
肠上皮干细胞分裂、分化的信号转导机制
肠上皮干细胞的研究始于20世纪80年代,它与肿瘤、溃疡和吸收不良等疾病的发生密切相关,对肠黏膜的损伤修复也有重要意义,因此越来越受到人们的重视.
-
皮肤上皮干细胞可用于角膜修复
一直以来,角膜缘干细胞移植受限于供体来源不足及异体移植排斥反应,而不能让更多患者收益。
《自然》杂志近日在线发表了一篇中美联合研究干细胞治疗角膜疾病的突破性成果,首次将皮肤干细胞诱导分化为角膜缘干细胞,并成功修复角膜功能,为治疗角膜疾病指出了一条新策略。 -
肺泡Ⅱ型上皮细胞及其分离鉴定与原代培养
肺泡是构成肺脏的主要结构,是气体交换的基本单位,其表面被覆的单层肺泡上皮主要由肺泡Ⅰ型和Ⅱ型上皮细胞构成,其中肺泡Ⅱ型上皮细胞(type Ⅱ alveolar cells, AT-Ⅱ)具有重要的功能.当受到各种刺激时,AT-Ⅱ可增生并修复已损伤的上皮细胞,起着肺泡上皮干细胞的作用.在其受到损伤后,若延迟修复,可影响上皮细胞对肺泡壁成纤维细胞的抑制作用,从而导致成纤维细胞增生,与肺纤维化病变关系密切.此外,在内外环境损伤因素如慢性炎症、肺内瘢痕、慢性间质性肺纤维化、吸烟及其它有害因素的作用下,AT-Ⅱ和Clara细胞(细支气管无纤毛分泌细胞)可发生轻度至重度不典型增生,增生细胞呈腺样或乳头样结构;如致病因素持续作用,可进一步发生癌变.因此,对于AT-Ⅱ的研究是目前研究肺纤维化及肺癌发病中较为活跃的课题,而体外培养AT-Ⅱ则为研究提供了重要的技术手段.
-
肺类癌
类癌是一种神经内分泌癌.1914年Gossett[1]发现类癌源于肠腺腺管基部的嗜银细胞(Kultschitzky细胞,K细胞).K细胞初被认为起源于胚胎的神经嵴,但近年来研究发现它可能来源于内胚层或多潜能分化特征的支气管上皮干细胞[1,2~5].类癌可发生于几乎身体各个部位,而这与K细胞的广泛分布相关[6].本文就近年来肺类癌的相关研究综述如下.
-
前列腺成体干细胞研究进展
成体干细胞维持着组织器官的正常形态和功能,与组织器官疾病的发生发展密切相关.已有证据显示前列腺组织可能存在前列腺成体干细胞.本文主要就近年来有关前列腺成体干细胞及其标志物、前列腺成体干细胞与良性前列腺增生发生发展的关系作一综述.