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结膜上皮干细胞的研究进展
结膜上皮干细胞是结膜上皮中杯状细胞和非杯状细胞的共同祖细胞,对维持结膜上皮细胞的更新和正常眼表的生理功能有重要作用.本文综述结膜上皮干细胞的概念、存在的部位、鉴别、分化增殖特性、调控因素等的研究进展.
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羟基磷灰石眼座植入后暴露的原因分析及处理
目的分析羟基磷灰石跟座植入后暴露的原因及眼座暴露的处理方法.方法根据HA暴露程度不同,分别采用观察、结膜囊修补、同种异体保存人羊膜移植部分结膜囊成形、HA取出后再植入的方法.结果HA轻度暴露(≤5mm12例),平均6.2个月,结膜上皮自行愈合,HA中度暴露(> 5 mm,≤10mm,8例)2例观察1.2~1.5年,结膜上皮自行愈合,6例行结膜囊修补术后愈合;HA重度暴露(>10mm7例,其中>20mm 4例),3例行结膜囊修补术,4例行HA取出再植入后愈合.结论HA暴露的原因主要是筋膜缝合张力过大及眼座包裹材料处理不当;HA轻中度暴露可自行愈合,中重度暴露须行结膜囊修补或取出再植入.
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为细胞培养提供单纯结膜上皮的新方法--翻转-固定分离法的实验研究
目的探索一种新的分离结膜上皮与固有层的方法,为结膜上皮细胞的培养提供单纯的结膜上皮组织.方法采用翻转-固定分离法分离结膜上皮与固有层.分离下来的结膜上皮进行组织切片HE染色,以观察分离效果.用胰蛋白酶将上皮组织消化成细胞悬液,台盼蓝染色法检测细胞的活性.结果翻转-固定分离法分离的结膜上皮菲薄,光镜下观察结膜上皮下无纤维组织残留.台盼蓝染色法证实上皮细胞活性良好.结论翻转-固定分离法是一种可靠、廉价的获取单纯结膜上皮的方法.获取的结膜上皮可用于进一步的细胞培养.
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维生素A缺乏致角膜软化症九例临床分析
角膜软化症是维生素A缺乏引起角膜、结膜上皮干燥变性,晚期出现角膜混浊、软化、溃疡、坏死、穿孔而失明,常双眼发病.解放前为小儿致盲的主要眼病之一,解放后随着人民生活水平提高,角膜软化症的发病率大大降低,近年来报道不多.作者于1994年1月至2000年8月共收治角膜软化症9例,现报告如下:
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人眼结膜上皮细胞的体外培养
目的 探讨体外分离培养结膜上皮细胞的方法.方法 用组织块培养法将人眼结膜上皮组织分别种植于培养皿及处理过的羊膜上,培养2周.观察结膜上皮细胞的生长特点.结果 接种在培养皿的结膜上皮6天左右组织块之间可融合成膜状,细胞为单层上皮细胞.接种在羊膜上的结膜组织,生长较慢,2周左右组织块之间可互相连接,融合成膜状,细胞为复层上皮细胞.免疫组化鉴定结膜上皮细胞CK13染色阳性.结论 组织块培养法是结膜上皮细胞培养的较好方法,种植在羊膜上可获得复层上皮细胞.
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角膜结膜上皮内上皮瘤变
角膜上皮内上皮瘤又称角膜原位癌,是一种单眼发病、病程缓慢的上皮性肿瘤.早的变化是上皮内异常增生,被其下基底膜限制,随着病程进展,异常增生的组织可突破基底膜,侵及其下组织.
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兔眼结膜上皮细胞体外培养
目的 探讨体外分离培养结膜上皮细胞的方法.方法 兔眼结膜上皮组织,用组织块培养法,分别种植于培养皿及处理过的羊膜上,培养2周,观察结膜上皮细胞的生长特性.结果 接种在培养皿的结膜上皮8天左右组织块之间可融合成膜状,细胞为单层上皮细胞.接种在羊膜上的结膜组织,生长较快,6天左右组织块之间可互相连接,融合成膜状,细胞为复层上皮细胞.免疫组化鉴定,结膜上皮细胞CK13染色阳性.结论 组织块培养法是结膜上皮细胞培养的较好方法,种植在羊膜上可获得复层上皮细胞.
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角膜表面异物的处理
角膜表面大部分暴露于睑裂, 当有细小异物如砂粒、金属碎屑、灰尘、煤屑等飞入眼睛, 主要附着在睑裂角膜, 可产生如刺痛、畏光、流泪、睑痉挛等不同程度的刺激症状. 如果处理不当, 异物在眼睑与角膜的摩擦下可引起角膜、结膜上皮脱落, 其至引起感染.
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羟基磷灰石眼座栓钉植入的并发症
自从1985年Perry首先将珊瑚多孔羟基磷灰石眼座应用于临床以来,羟基磷灰石眼座已成为临床上首选的眶内植入材料.羟基磷灰石眼座大的优点是组织相容性好和可纤维血管化,术后4~8个月,眼座已基本实现血管化[1,2],此时允许打孔植入栓钉.栓钉植入后3~4周结膜上皮可以完成孔内壁的上皮化,孔内创面消失.此时可在义眼背面制成一个凹臼,使义眼与栓钉之间通过球-窝状关节而连接,从而增加义眼活动度,并减轻义眼对下睑的压力,减少下睑松弛等并发症.但部分患者在栓钉植入术后会发生栓钉脱出和肉芽组织增生等并发症,造成义眼配戴困难,现对羟基磷灰石眼座栓钉植入的并发症进行分析,并提出相应的处理方法.
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蠕形螨睑缘炎眼表改变的研究
目的:探讨蠕形螨睑缘炎的眼表改变,了解蠕形螨睑缘炎患者眼表的细胞学改变.方法:收集2013年9月-2015年9月在我院眼科门诊确诊为蠕形螨睑缘炎的患者60例作为实验组;对照组为体检中心眼科检查无眼部蠕形螨感染的体检人群40例.对每位患者进行蠕形螨镜检和眼表疾病指标问卷(OSDI)调查,记录实验组蠕形螨感染的数量和OSDI得分等参数;同时进行角膜荧光素钠染色(FL)、泪膜破裂时间测定(BUT)和泪液分泌试验(SIT)检查.运用结膜印迹细胞学联合苏木素-糖原(PAS)染色方法,分析实验对象结膜上皮鳞状化生程度.鳞状化生程度比较采用 χ2检验.结果:(1)本研究60例蠕形螨睑缘炎患者(120只眼)中,31(25.83%)只眼为重度蠕形螨感染;48(40.00%)只眼为中度感染;41(34.17%)只眼为轻度感染;对照组40例(80眼),均无眼部蠕形螨感染.实验组BUT及SIT较对照组均降低,差异有统计学意义(P<0.05);OSDI问卷的得分比较,实验组较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).(2)结膜印迹细胞学检查中发现实验组结膜鳞状化生程度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:(1)蠕形螨睑缘炎导致泪膜不稳定及泪液分泌减少同时伴发炎症.(2)蠕形螨睑缘炎引起结膜细胞学改变,导致患者结膜上皮鳞状化生级别升高.
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干眼症68例临床分析
干眼症是由于泪腺分泌不足、泪液蒸发过多或泪液质量异常而致泪膜不稳定和角膜上皮、结膜上皮等眼表组织病变,并伴有眼部不适的一类疾病.现将2003年6月至2005年12月我院随访的68例干眼症患者的临床资料分析报告如下.
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激光泪道治疗机治疗眼睑及结膜良性肿瘤51例
Nd:YAG激光泪道治疗机是近几年应用于泪道阻塞性疾病的新技术,我们利用此技术于2001年8月至2004年1月,开展治疗眼睑结膜上皮良性肿瘤及瘤样增生性疾病.取得满意的效果.现报告如下.
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羊膜移植与碱烧伤眼球表面的重建
碱烧伤是临床上复杂而难以治愈的眼病之一.碱烧伤会对眼表面组织造成严重损伤,可导致角、结膜上皮的坏死、脱落,角膜持续性上皮缺损、多发性角膜上皮糜烂、角膜血管翳性混浊及睑球粘连等严重并发症,是临床治疗难症之一.
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兔眼表上皮细胞蛋白表达及分析
正常眼表由角膜和结膜上皮所覆盖,它们共同作用以维持眼表的完整性和泪膜的稳定性,而这两种眼表上皮的更新及创伤愈合过程有赖于干细胞的增殖、移行来补充,当角、结膜干细胞的供给发生衰竭或不足时可导致眼表的稳定被破坏,出现各种不同的病理改变.
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不同方法体外培养兔结膜上皮细胞的比较研究
目的 比较不同方法体外培养兔结膜上皮细胞的效率,确定体外培养兔结膜上皮细胞的佳方法,建立兔结膜上皮细胞系,为进一步研究结膜上皮干细胞的鉴别、定位及其增殖分化提供基础.方法 分别采用Dispase Ⅱ消化法、组织块培养法、胰酶/EDTA混合消化法获得兔结膜上皮细胞后进行体外培养,在不同时间观察细胞的形态,并应用免疫组化的方法进行细胞鉴定.结果 组织块培养法细胞生长较慢,胰酶/EDTA混合消化法容易有成纤维细胞等污染,DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,免疫荧光pan-cytoeratin染色阳性,部分细胞MUC5AC染色阳性.结论 DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的佳方法.
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人、兔结膜上皮细胞的原代培养
目的探索结膜上皮细胞体外培养的佳方法,研究其生长特性,为毒理实验及体外结膜上皮移植提供基础.方法分别用3种培养方法:(1) 组织块培养法;(2) 混合肖化法;(3) 组织块消化后贴壁法来培养人、兔的结膜上皮细胞,观察细胞状态、不同部位的长生特性等,并尝试在羊膜、饲细胞层上培养建系.结果 3种培养方法中,组织块培养法能获得较纯的结膜上皮细胞但生长缓慢,消化法能获得大量细胞,生长较快,但常常混有其它杂细胞,组织块消化后贴壁法获得细胞量较少.观察到来自兔、睑结膜及穹隆部结膜上皮的细胞生长速度较快,细胞量多,来自球结膜的细胞生长较慢.应用间接免疫荧光染色,人结膜上皮细胞K13染色阳性.结论组织块培养法及混合消化法皆能培养结膜上皮细胞,各有利弊.
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眼表干细胞定位和鉴定的研究进展
正常眼表对于保证清晰视觉起至关重要的作用.角膜和结膜上皮干细胞(stem cells,SC)不断增殖、分化,以维持眼表的完整性.通过对角膜和结膜的生长分化、基因分析[1]、免疫组织化学及细胞动力学分析[2],证实结膜上皮和角膜-角膜缘是由不同的干细胞群控制.目前,角膜上皮SC的基础和临床研究已取得丰富成果,但对结膜上皮SC的研究尚处于探索起步阶段,各家观点各有不同.
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翼状胬肉两种手术疗效的比较
翼状胬肉是一种结膜增生性疾病,临床常见,特别是在海岛,其发病率更高,发病机制目前尚无定论.有人认为,在正常情况下,角膜缘部的增殖压力可抑制结膜上皮及血管长入角膜组织;当角膜缘干细胞功能下降或缺乏时,造成角膜缘屏障功能下降,可使结膜组织和新生血管长入角膜内形成胬肉[1].
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人眼结膜上皮细胞体外培养治疗翼状胬肉
目的 探讨体外分离培养结膜上皮细胞治疗翼状胬肉的方法.方法 将126例翼状胬肉患者(均为单眼患者)随机分为2组.治疗组58例,术前2周取其穹隆部结膜(1mm×1mm)剪成0.5mm×O.5mm大小后种植于羊膜上体外培养,术中逆行切除胬肉组织,再将培养好的结膜上皮植片移植于结膜创口,缝合固定.对照组68例,单纯切除翼状胬肉,暴露角巩膜缘.两组术后均行妥布霉素眼膏及滴眼液治疗,预防感染.结果 接种在羊膜上的结膜组织,8d左右融合成膜状,细胞为复层上皮细胞.植片3d后开始呈透明或半透明状,1周时可见新生血管长入,植片与周围结膜逐渐融合,2周左右植片与周围结膜完全融合.术后随访1~2年.治疗组复发2例(3.45%),对照组复发23例(33.82%),两组问复发率差异显著,有统计学意义(x2=16.3.P<0.01).所有患者眼球活动自如,未发生睑球粘连、疤痕增生等并发症.结论 体外分离培养结膜上皮细胞治疗翼状胬肉是一种理想的方法.
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人眼结膜上皮干细胞的定位分析
目的 探讨人眼结膜上皮干细胞的定位.方法 对人眼不同部位(穹隆部、球结膜及睑结膜)结膜上皮组织用组织块培养法,种植于培养皿,观察结膜上皮细胞的生长特性.结果 细胞生长速度不同:同一组织块其四周细胞生长速度不同,有的部位细胞生长快,有的部位细胞仅有移行现象;取自同一部位如穹隆部结膜的不同组织块,上皮细胞生长速度也不同,有的组织块周围细胞生长快,有的组织块周围细胞生长慢;但取自穹隆部结膜、睑结膜、角巩缘处球结膜的组织块,细胞生长形态相似.结论 结膜干细胞散在分布于穹隆部和睑球结膜,但不均匀,即使在相同部位结膜干细胞分布也不平衡.