首页 > 文献资料
-
隐睾术中所见的睾丸与附睾异常
隐睾是小儿外科常见疾病，既往对未降睾丸及并存的睾丸与附 睾的异常研究较少。我们对1997～1998年159例隐睾术中睾丸和附睾异常变化进行观察分 析。报告如下。 资料与方法 本组159例，年龄分布：<2岁者19例，2岁～者23例，3 岁～者19例，4岁～者22例，5岁～者27例，7岁～者24例，9岁～者22例，>12岁者3例。159 例中有6例系院外已作过隐睾固定术，但睾丸仍未进入阴囊，解剖困难，予以除外；37例无 图示者，亦予除外。116例术中探查后有手术绘图者，单侧97例(左34，右63)，双侧19例。 合计左侧53，右侧82，共135侧。 结果 术中探查发现睾丸缺如7例(左6右1)，精索血管均止于耻骨 结节或阴囊上口，未见睾丸或仅见精索末端有膨大部分。标本病理检查均未发现睾丸组织。 睾丸发育极差者3例，经家长同意予以切除。病理检查2例未见精原细胞，1例曲细精管发育 差，精原细胞极少。125侧附睾形态状况见图1。
-
高功率微波辐照对大鼠血睾屏障通透性的影响
目的探讨高功率微波(HPM)辐照大鼠睾丸对血睾屏障的影响.方法雄性SD大鼠35只,随机分为7组,每组5只.6组为辐照组,1组为对照组.于辐照后2、6、12、48、96 h和8 d活杀大鼠后取双侧睾丸组织各约1 mm3,镧-醛固定液固定后制备电镜标本,在透射电镜下进行观察.结果对照组可见硝酸镧主要沉积在曲细精管基膜部和精原细胞周围,未越过紧密连接;辐照后2～6 h电镜下所见与对照组大致相同;辐照后12～96 h,从基底部到管腔面的各层生精细胞之间、支持细胞内都有大量的镧颗粒沉积;辐照后8 d,仍可见细胞间隙增大,部分区域靠近精子表面的镧颗粒沉积甚至比前面时间点的更为严重.结论高功率微波辐照能够改变细胞的通透性,破坏血睾屏障的保护作用.
-
慢病毒载体感染小鼠曲细精管的研究
目的 探讨基于慢病毒载体曲细精管注射方法 建立转基因动物的可行性.方法 将8只4w～5w龄的雄性昆明小鼠分为高剂量(2只)、低剂量(6只)2个实验组,曲细精管注射滴度分别为1×109、2×107 TU/mL的绿色荧光蛋白慢病毒载体(LV-GFP),注射量均为20 μL/testis.注射后第4w、8w分别处死高剂量组小鼠各1只,于第5 w、13 w、17 w各处死2只低剂量组小鼠,取睾丸,通过PCR、荧光显微镜和免疫组化等方法 检测睾丸组织中GFP基因及表达.结果 3只低剂量和2只高剂量小鼠睾丸组织中均可检测到GFP基因;但GFP表达仅见于高剂量组小鼠睾丸,其分布范围主要集中于曲细精管基膜及管间隙.结论 慢病毒载体可通过曲细精管注射感染小鼠睾丸组织,但其感染效率与病毒滴度有关.
-
体外培养小鼠睾丸间质细胞的形态学特征
本研究初步观察了睾丸间质细胞体外培养的形态学特征,以期为深入研究其分泌睾酮的影响因素奠定基础.方法为无菌取成年雄性昆明小白鼠的双侧睾丸,置于盛有适量PBS的培养皿中;用尖镊撕去附睾及白膜,用吸管吹打至曲细精管与间质组织分散;加入10倍体积的胶原酶,37℃下消化10～15 min后移入10 mL离心管,待曲细精管及间质组织沉降后移出上层细胞悬液;取一滴细胞悬液,加入适量台盼蓝混匀后用红细胞记数板计算细胞数目,调整细胞密度至3×105个/mL;将细胞接种在直径35 mm的塑料培养皿中,常规条件下培养;当细胞开始贴壁时,小心吸去旧液,加入新鲜培养液(D-MEM+10%小牛血清+1%双抗+1%谷氨酰胺)培养,定时观察;当培养细胞80%汇合时,弃去培养液,用PBS缓冲4%多聚甲醛室温固定1 h,PBS洗2次;用异丙醇油红法略加改进后进行脂质染色,苏木精复染;另用95%乙醇和PBS缓冲4%多聚甲醛(9∶1)室温下固定细胞40 min,PBS洗2次,1.4%甲基蓝染色后进行观察.本实验每次所获细胞悬液量均为3 mL,细胞密度为1.76×106个/mL,平均每侧睾丸可获间质细胞5.28×106个,其中活细胞、死细胞的平均百分比分别为88.94%、12.06%.在体外,间质细胞贴壁性状良好,不需特殊粘附分子.接种后一般8～10 h后即发生极化,胞质铺展,伸出突起.培养约14～15 h后即开始贴壁.镜见贴壁细胞透明,基本无颗粒,轮廊不清,增殖的细胞相互连接成单层膜状.细胞化学:甲基蓝染色显示,间质细胞核呈圆形或卵圆形,嗜碱性,位于胞质中央;核仁1～2个,清晰可见,一般位于核的边缘部;其胞质轮廊为多角形,一般有3～4个突起,遥抟中可见有多量大小不一的空泡状结构.油红O脂质染色显示,这些空泡状结构为脂质小滴,呈红色或红褐色,大小不一,圆形悬浮状存在,聚集于胞质两极或散布于核的四周.本实验结果表明,间质细胞胞质中存在大量脂滴,推测这些脂质是为其雄激素分泌功能提供必备前体物质而存在的.
-
大鼠精子发生中一种新的阶段性表达基因全长cDNA的分离
精子发生是一系列基因严格按照时空顺序相继转录表达的过程.寻找和研究不同时期、不同发育阶段的差异表达基因,将有助于终阐明精子发生的机理.由于大鼠生精细胞在曲细精管内的排列极为有序,本研究采用曲细精管分段分离结合差异显示PCR(DDRT-PCR)的方法,寻找精子发生中差异表达的基因.
-
精原干细胞移植及其相关研究进展
睾丸功能有赖于精原干细胞持续不断的增殖,这些细胞紧贴于曲细精管基膜,埋嵌在支持细胞间,经过同源性扩增形成分化型精原细胞链,分化形成的精母细胞经过两次减数分裂形成精子细胞,后者经过变态过程后形成成熟的精子.在整个精子发生过程中,精原干细胞在所有生殖细胞类型中展现出巨大的细胞群扩增能力.另外,DNA在复制和减数分裂的过程中,很可能会出现DNA缺失,精原干细胞池作为携带遗传物质的始发点,对于基因组完整性的改变有重要意义.由此可见,精原干细胞为生殖细胞基因工程研究提供了一条路径.作为干细胞家族成员,精原干细胞具有永生化和多能化潜能,是精子形成的前体细胞,其终生扩增为男性精子细胞源源不断产生所必需,近年来对其研究越来越深入[1].随着对其研究过程中在方法学上的突破,尤其精原干细胞移植,使精原干细胞展现出广阔的应用前景.
-
氟对大鼠曲细精管生殖细胞DNA损伤和凋亡作用的研究
目的 观察饮水氟染毒对雄性SD大鼠曲细精管生殖细胞DNA损伤及凋亡的影响.方法 将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(10 mg/L)、中(50 mg/L)和高(100 mg/L)浓度氟化钠染毒组,每组15只.采用自由饮用方式进行染毒,连续染毒120 d.分别于染毒第60、90、120天,从每组随机抽取5只大鼠,采用硫代巴比妥酸法、单细胞凝胶电泳(SCGE)和流式细胞技术分别检测各组生殖细胞中丙二醛(MDA)含量、DNA损伤及细胞凋亡情况.结果 与对照组比较,各染氟周期中、高浓度氟化钠染毒组大鼠曲细精管生殖细胞中MDA含量均明显升高(P＜0.05)；60和120 d时各浓度氟化钠染毒组大鼠曲细精管生殖细胞彗尾长和Olive尾矩较高(P＜0.05)；但90 d时各浓度氟化钠染毒组大鼠曲细精管生殖细胞彗尾长和Olive尾矩无显著变化.与对照组比较,60和90 d时高浓度氟化钠染毒组及120d时中、高浓度氟化钠染毒组大鼠曲细精管生殖细胞凋亡率均较高(P＜0.05)；随着染毒时间的延长,中、高浓度氟化钠染毒组大鼠曲细精管生殖细胞凋亡率呈逐渐增高的趋势.结论 过量氟通过诱导大鼠曲细精管生殖细胞脂质过氧化和DNA损伤进而激活生殖细胞凋亡,这可能是氟中毒雄性生殖损害的重要作用机制之一.
-
儿童多睾症合并睾丸扭转超声表现1例
患儿男,12岁。左阴囊肿痛2 d伴呕吐,体温不高,排尿正常。查体：左阴囊红肿,左睾丸压痛、抬举痛阳性。超声检查：双侧睾丸均位于阴囊内,右睾丸约36 mm×17 mm,回声均匀,左睾丸体积小,约17 mm×13 mm,回声均匀,内可见血流信号(图1)。左侧阴囊内左睾丸上方可见一大小约30 mm×23 mm的类圆形不均匀混杂回声肿块,内可见斑片状低回声区(图2),边界清晰,可见包膜,形态饱满,内未见血流信号(图3)；其上方附睾及精索扭结呈不均匀团块状高回声,内未见血流信号(图4)。左阴囊内可见少量无回声区。超声提示：①左睾丸扭转可能性大；②多睾症可能。术中左阴囊内见一睾丸及其所属独立附睾色黑紫,鞘内逆时针扭转720°；扭转睾丸近端精索处还可见一2 cm×2 cm睾丸样组织,有独立附睾且与扭转睾丸共用精索,血运良好。取小块组织,术中病理：镜下见曲细精管及原始生殖细胞、支持细胞,符合睾丸组织。结扎扭转睾丸血管,切除扭转睾丸及附睾,固定近端血运良好的睾丸。术后诊断：左睾丸扭转坏死、多睾症。术后病理诊断：镜下见曲细精管残影,符合睾丸扭转坏死。
-
核型为46,XY/47,XXY克氏综合征1例报告
克氏综合征(Klinefelter Syndrome),也称为先天性曲细精管发育不全症,是一种性染色体畸变的遗传病.本病特点为患者有类无睾身材、男性乳房发育、小睾丸、无精子及促性腺激素增高等,常见典型核型是47,XXY.根据性染色体异常类型,本病可分为3类:47,XXY(常见型);46,XY/47,XXY(嵌合型);48,XXYY,48,XXXY,49,XXXXY(变异型)等.现将我科收治的1例少见的嵌合型46,XY/47,XXY克氏综合征报告如下.
-
HCG和HMG在男科中的应用
HCG和HMG为类脑下垂体前叶促性腺激素,能促进性腺功能,刺激男性睾丸间质细胞产生睾酮,而且能影响睾丸的曲细精管和生精上皮功能.
-
精原干细胞和睾丸组织的同种异体移植
背景:精原干细胞作为精子发生过程的基础和前提,其自我更新和分化途径目前仍不完全清楚.目的:观察非免疫缺陷动物新生Wistar大鼠的精原干细胞和睾丸组织移植丁去势成年Wistar大鼠后的成活及生长发育情况.设计、时间及地点:组织细胞形态学水平的随机动物对照实验,于2007-04/08在广西医科大学实验动物中心外科实验室完成.材料:选用健康新生7-9 d雄性Wistar大鼠为供体,受体为经过严格检疫合格的8-12周的成年雄性Wistar大鼠,体质量180-220 g.方法:取新生雄性大鼠睾丸,采用两步法组合酶顺序消化制备大鼠精原干细胞悬液,以Percoll不连续密度梯度离心法初步纯化精原干细胞.取10只成年雄性大鼠,切除双侧睾丸肜成去势大鼠,按随机数字表法分为2组,每组5只.精原干细胞悬液移植组将制取好的1 mL精原于细胞恳液在5 min内注射至受体背部皮下.睾丸组织块移植组将制备好的已剖开的睾丸组织植入受体背部皮下,每个受体移植2个睾丸4块睾丸组织.主要观察指标:移植物的生长发育情况,移植8周末移植物的组织学特点及C-kit免疫组化定性分析结果.结果:精原干细胞悬液移植后,移植物未见成活生长.睾丸组织块移植后移植物部分成活,移植8周末组织学检查可见特征性的精曲小管和细胞结构,可见精于细胞,部分生精小管退化;睾丸间质中可见淋巴细胞浸润;免疫组化鉴定可见睾丸组织内C-kit阳性细胞表达.结论:同种异体异位移植于非免疫缺陷鼠中,新生睾丸组织块可以成活并能形成精子细胞,而精原干细胞悬液移植后未见移植物生长.
-
女性两性畸形的诊治
人类正常性别分化包括染色体性别确定、性腺及附属性器官分化以及外生殖器分化三个生理过程.大多数人性染色体和生殖系统发育一致,表现为正常的男性或女性.如果某些患者的生殖器官,特别是外生殖器兼具男女两性特征,影响性别的确定,称为两性畸形.Anne Fausto-Sterling曾报道两性畸形的发生率为1.7%.Sax[1]则认为,这一数字包含如曲细精管发育不良(Klinefelter)综合征、特纳(Turner)综合征及晚发型肾上腺皮质增生症等大多数医生并不认为是两性畸形的情况.如将该名词定义为染色体性别与表型性别不一致,则两性畸形的发病率约为 0.018%.
-
原发性睾丸功能减退症的雄激素替代治疗
原发性睾丸功能减退症又称高促性腺激素性睾丸功能减退症,原发病变在睾丸、曲细精管和/或赖迪(Leydig)细胞破坏,睾酮的合成和分泌减少,垂体前叶的促性腺激素(LH和FSH)反馈性分泌增多.常见的先天性原发性睾丸功能减退症包括先天性曲细精管发育不全、45,X/46,XY型性腺发育不全、46,XY型单纯性腺发育不全、胚胎睾丸退化综合征和双侧性隐睾.此外,睾丸创伤、慢性炎症或肉芽肿性疾病、幅射和肿瘤等疾病在少见的情况下可以累及双侧睾丸,不仅引起生精细胞的破坏,亦导致睾酮分泌不足,需要给予雄激素替代治疗,限于篇幅,这部分疾病就不在此讨论了.
-
山楂总黄酮对糖尿病大鼠睾丸保护作用及其对PCNA表达的影响
目的：探讨山楂总黄酮对雄性Wistar糖尿病（ DM）大鼠睾丸组织的保护作用及其PCNA表达影响。方法：Wistar雄性大鼠40只，随机分为正常对照组、糖尿病模型组、胰岛素治疗组和山楂叶总黄酮治疗组（ HLF组）。，每组10只，尾静脉注射1％链尿佐菌素（STZ）溶液诱导糖尿病模型。 HLF组给予山楂叶总黄酮200mg/（ kg· d）定时灌胃给药。取一侧睾丸组织甲醛固定，用于制作免疫荧光切片，激光共聚焦显微镜观察。结果：2型糖尿病模型制备成功， HLF治疗后大鼠血糖显著低于模型组（p＜0.01），大鼠体重和睾丸质量明显增加，曲细精管直径接近于正常，HLF组大鼠睾丸组织PCNA含量显著高于对照组（ p＜0.01）。结论：山楂叶总黄酮能改善糖尿病大鼠睾丸损伤提升睾丸组织中PCNA的含量表达，对睾丸组织具有明显保护作用。
-
实验性隐睾术后大鼠睾丸生精上皮酶的动态变化
目的:研究热作用对睾丸生精过程影响中AKP、ACP和SDH活性的变化,探讨其生物学意义,为男性抗生育提供形态学资料.方法:人工隐睾术后1～70天取出大鼠睾丸,冰冻切片,显示AKP、ACP和SDH活性,光镜观察.结果:术后曲细精管界膜AKP活性减弱,直到晚期仍较弱;支持细胞术后1～10天酶增强,随后减弱,50天始为微弱反应;各级生精细胞反应不一.术后界膜ACP阴性;支持细胞酶增强,晚期仍较强;生精细胞酶反应不一.术后界膜SDH为阳性;支持细胞早期反应较强,3天始减弱,到晚期仍较弱;生精细胞酶减弱,15天始为阴性.结论:隐睾术后热作用影响生精过程,使AKP、ACP和SDH有明显变化,因各级生精细胞对热作用的反应性与耐受性不同,使以上三种酶反应强弱不一.
-
抗精子抗体对男子生育有何影响
人精子是在睾丸的曲细精管内产生的.曲细精管由界膜围绕,管壁上皮是由两类形态和功能不同的生精细胞和支持细胞组成.
-
Klinefelter综合征(47,XXY)1例报告
Klinefelter综合征,又称曲细精管发育不全症,是男性性腺机能减退常见的原因和男性不育症常见的遗传学病因之一.典型的Klinefelter综合征核型为47, XXY,存在一个额外的X染色体,有些核型为XXXY、XXXXY、XXYY或为XXYY染色体嵌合体等被认为是这一综合征的变异形式.我科收治47, XXY 1例,现报告如下.
-
唯支持细胞综合征病理变化和发病机制
目的:观察唯支持细胞综合征(SCOS)患者睾丸的病理变化,并探讨其可能的发病机制.方法:选取70例SCOS睾丸标本,通过光镜、电镜观察形态学改变,采用免疫组化方法分析其中40例石蜡标本中GATA-4及Inhibin-α的表达.并测定患者周围血激素水平.结果:①光镜下主要表现为曲细精管内生精细胞完全缺如,生精上皮仅由支持细胞组成,支持细胞显著增生,排列疏松、紊乱,部分曲细精管广泛纤维化、玻璃样变性、皱缩、塌陷,甚至管腔闭锁.间质细胞形态正常,相对增生.②电镜下主要表现为界膜胶原纤维增生,支持细胞胞浆内质网较丰富,有轻微扩张,部分线粒体嵴消失,甚至空泡变,支持细胞胞浆内出现较多自噬体.③40例SCOS睾丸标本免疫组化染色显示,GATA-4均呈阴性表达,Inhibin-α均呈阳性表达.④血清卵泡刺激素(FSH)值较正常成年男性水平升高,差异有统计学意义(P＜0.01),而黄体生成素(LH)、睾酮(T)差异无统计学意义(P＞0.05).结论:支持细胞的线粒体病变及其功能受损是SCOS的病变基础,血清FSH浓度升高、GATA-4在支持细胞的表达缺失可能与SCOS的发生有关.
-
海狗肾抗衰老作用的实验研究
目的:研究海狗肾对雄性老龄大鼠的抗衰老作用.方法:以环磷酰胺造成雄性大鼠生殖系统受损模型,灌胃海狗肾30d后,测定血清睾酮含量,血清SOD活性和MDA含量;采用石蜡包埋,H-E染色的方法,光镜下观察睾丸的组织学变化.结果:海狗肾能够显著提高正常大鼠和生殖系统受损模型大鼠的血清睾酮含量,改善其睾丸间质细胞的功能状态,促进精子的发生与发育;显著提高血清SOD活力,降低血清MDA含量.结论:海狗肾具有显著的抗衰老作用.
-
Klinefelter综合征
Klinefelter综合征,又称曲细精管发育不全症,是男性性腺机能减退常见的原因,其发病率在男性胎儿大约为0.2%,而在出生后的男性婴儿为0.1%.典型的Klinefelter综合征核型为47,XXY,存在一个额外的X染色体,有些核型为XXXY、XXXXY、XXYY或为XXYY染色体嵌合体等被认为是这一综合征的变异形式.
