首页 > 文献资料
-
乙醇对大鼠生精上皮形态学的影响及机制初探
酗酒是当今世界上的一个重要的公共卫生问题,它不仅危害社会治安,更严重影响人体健康.据研究表明,乙醇是一种确认致畸物,母亲孕期大量饮酒可致"胎儿乙醇综合征"[1],男性酗酒可使血清睾酮下降,性功能减退并引起后代发育和行为异常[2,3].为提高人类生命质量和优生优育,研究乙醇的生殖遗传毒性具深远意义.本研究通过经口灌胃给予雄性大鼠乙醇,光、电镜观察睾丸生精上皮的形态学改变,免疫组化法检测睾丸诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达以及睾丸线粒体丙二醛(MDA)含量测定,初步探讨乙醇引起睾丸损伤的作用机制.
-
补肾毓麟汤对雷公藤多苷致伤大鼠睾丸生殖细胞的修复作用
目的:探讨补肾毓麟汤对雷公藤多苷(GTW)所致雄性大鼠生精细胞的对抗作用和机制.方法:用GTW30mg/d灌喂SD雄性大鼠30d,然后用补肾毓麟汤及氯米芬分别治疗30d,在光、电镜下观察曲细精管中生精上皮的变化.结果:实验对照组的曲细精管上皮中多数精母细胞变性、死亡,精子细胞不发育,无精子形成,管腔中无精子,支持细胞有明显病变.氯米芬组除生精上皮中有许多脂质球状体外,其余变化基本上同模型组.补肾毓麟汤组的生精上皮层次丰富,各级生精上皮细胞及精子细胞发育良好,与空白对照组相似或略优于空白对照组.结论:补肾毓麟汤具有显著的对抗雷公藤多苷对雄性大鼠生精细胞的毒性,对损伤的生精上皮修复有明显的促进作用.
-
渔游蛇生精上皮超微结构的季节性变化
目的研究渔游蛇生精上皮各类细胞超微结构的季节性变化,为探讨蛇类的受精机理及人工养殖提供理论依据.方法以2.5%戊二醛和1%锇酸双固定,按常规制作石蜡切片和超薄切片,分别用光镜和H-600电镜观察.结果渔游蛇4月份生精上皮的细胞呈休止状态;5～7月份是精原细胞复苏、增殖、分化形成精母细胞时期;8～9月份是精母细胞分裂成为精细胞时期;9月末至11月份是精子形成高峰期;12月至次年1月份,精子发生渐趋停滞.结论渔游蛇精子发生的周期性符合羊膜动物的基本规律,又有其自身的特点,特别是精子形成过程有许多独特之处.
-
睾丸免疫豁免机制的研究进展
精子的产生、分化的过程是在机体的免疫系统成熟之后,却并未引起机体的免疫排斥反应,这种独特的自我免疫耐受现象的出现是对机体免疫系统的一种挑战.初,人们观察到某些染料不能被睾丸生精上皮细胞吸收,随后进行的超微及生化实验证实睾丸支持细胞之间的高度特化的紧密连接能够限制大的亲水分子尤其是蛋白分子通过细胞间隙.依据这些初步的研究结果,人们将睾丸的免疫豁免现象简单地认为是由于存在血睾屏障的缘故,血睾屏障可保护自体生殖细胞及植入睾丸内的移植组织免受免疫排斥反应.然而近来研究发现,睾丸的免疫豁免机制是一个多因素参与的复杂体系.其中物理因素和免疫因素对于建立并维持这种免疫耐受环境尤为重要.
-
小鼠精子顶体发生的形态学研究
目的 探讨小鼠精子形成过程中顶体发生的形态学变化特点,为深入研究顶体对男性生殖功能的影响提供理论基础.方法 应用PAS染色法,在光学显微镜下区分小鼠睾丸生精上皮周期中不同时相的生精上皮,观察精子细胞顶体在不同时相的形态学变化特点.结果 精子细胞顶体含有多糖类物质,经PAS染色后呈紫红色.小鼠精子发生的后1个半周期为精子形成过程,也是顶体的发生过程.在圆形精子细胞期,顶体变化由圆形、椭圆形至左右对称的帽形,角度逐渐增大；在变形精子细胞早期,顶体由左右对称的帽形演变成位于头背部的镰形；在变形精子细胞晚期,顶体位于头背部.结论 上述对小鼠精子顶体发生过程中形态学变化特点的观察为进一步研究顶体发生机制及临床评价男性生育力奠定了基础.
-
睾丸扭转复位后生精上皮细胞核转录因子表达的改变及其凋亡
目的探讨睾丸扭转2 h复位后第3天睾丸生精上皮细胞核转录因子(NF-κB)表达的改变及其凋亡的关系.方法用24只雄性SD大鼠建立左侧睾丸扭转复位模型.分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,每组8只.Ⅰ组动物睾丸扭转复位后用柳氮磺胺吡啶灌胃;Ⅱ组动物睾丸扭转复位后用等量的生理盐水灌胃;Ⅲ组动物假手术后用等量的生理盐水灌胃.分别用Western蛋白印迹和免疫组织化学原位检测睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达情况;TUNEL法检测生精上皮细胞凋亡情况.结果Ⅱ组动物睾丸扭转复位后第3天扭转侧睾丸生精上皮细胞胞质NF-κB蛋白质(9.4±2.68)表达与Ⅰ、Ⅲ组扭转侧睾丸生精上皮细胞胞质NF-κB表达(分别为:12±2.2;11.1±3)相比下降水平差异无统计学意义,胞核NF-κB表达升高水平差异有统计学意义(3组分别为8.4±3.1;21.1±3.6;6.0±2.3).免疫组织化学原位检测Ⅰ和Ⅲ组扭转侧睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达以胞质为主,Ⅱ组扭转侧睾丸生精上皮细胞中NF-κB的表达以细胞核为主,而且NF-κB阳性细胞比例较其他两组阳性率显著上升(三组分别为15.6%±2.6%,66.1%±3.8%,10.8%±2.7%).Ⅰ组(7.7%±2.0%)和Ⅲ组(5.9%±1.7%)扭转侧睾丸生精上皮细胞凋亡指数差异不明显;Ⅱ组扭转侧睾丸生精上皮细胞凋亡水平(37.2%±3.3%)跟以上两组相比升高有显著性差异.结论睾丸扭转2 h复位后第3 d,睾丸生精上皮细胞NF-κB蛋白已被激活,从胞质转移至核内,启动生精上皮细胞凋亡过程.NF-κB蛋白质的激活是导致睾丸扭转复位后生精上皮细胞特别是精原细胞和各级精母细胞凋亡增加的重要环节.
关键词： NF-kappa B 精索扭转 脱噬作用 生精上皮 -
不育症患者精液生精细胞检测的临床意义
目的：探讨精液生精细胞检测对不育症诊断的临床价值。方法：采用瑞-姬氏染色法，对生育组20例和不育组30例精液，进行生精细胞的检测与分类，并进行生精细胞定量计数。同时采用直接涂片法与染色镜检法对不育组30例精液进行白细胞检测对比。结果：两组绝大多数精液中都能看到精子细胞和精母细胞，而不育组70％的病例精原细胞的例数高于生育组(40％)，表明不育组的多数病例存在生精障碍并导致生精细胞成熟停滞。两组生精细胞定量计数精母细胞与精子细胞，差异有显著性意义。用直接涂片法和染色镜检法两种方法检测白细胞，结果有显著性差异。结论：为提高精液检验的临床价值，须采用染色方法以鉴别生精细胞和白细胞。同时生精细胞的变化反映了生精功能的变化，根据生精细胞的类型可进一步衡量睾丸生精功能，为分析睾丸病因提供了客观指标。
-
红外线对大鼠生精上皮超微结构的影响
目的 观察红外线对大鼠睾丸生精上皮超微结构的影响.方法 采用不同波段的红外线对大鼠的睾丸局部照射,并与对照组进行比较,采用透射电镜观察睾丸生精上皮超微结构变化.结果 与对照组比较,实验组大鼠电镜下生精细胞排列紊乱,精原细胞内细胞器变性多见;支持细胞线粒体空泡化,嵴消失,内质网肿胀.结论 红外线可导致大鼠睾丸生精上皮超微结构损伤.
-
低强度电磁场对大鼠生精上皮超微结构的影响
目的 观察低强度电磁场对大鼠睾丸生精上皮超微结构的影响.方珐20只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组和实验组,实验组暴露于0.1mT电磁场中,12周后处死动物迅速取出睾丸,锋利预冷刀片切开,取1 mm×1 min×2 mm的组织于戊二醛磷酸缓冲液固定,超薄切片,透射电镜观察睾丸生精上皮超微结构变化.结果与对照组比较,实验组大鼠电镜下生精细胞排列出现紊乱,精原细胞内细胞器变性多见;支持细胞线粒体空泡化,嵴消失,内质网肿胀.结论 低强度电磁场可导致大鼠睾丸生精上皮超微结构损伤.
-
HCG和HMG在男科中的应用
HCG和HMG为类脑下垂体前叶促性腺激素,能促进性腺功能,刺激男性睾丸间质细胞产生睾酮,而且能影响睾丸的曲细精管和生精上皮功能.
-
骨髓间充质干细胞对大鼠生精上皮不同照射剂量放射性损伤的修复作用
目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法,建立大鼠生精上皮放射性损伤动物模型,观察骨髓间充质干细胞对大鼠生精上皮放射性损伤的修复作用.方法 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,建立大鼠放射性损伤动物模型.高剂量(2Gy)放射线照射组Wister大鼠20只,低剂量(0.5Gy)放射线照射组Wister大鼠20只,各组中随机取10只移植骨髓间充质干细胞作为实验组,剩余未移植大鼠10只作为对照组.取10只为经放射线照射大鼠作为正常对照组.照射2周和4周后取大鼠睾丸,切片染色镜下观察.结果 高剂量照射组较低剂量照射组大鼠睾丸组织损伤明显加重,低剂量照射组实验组大鼠睾丸组织于移植后两周各级生精细胞基本恢复正常,移植后4周完全恢复与正常未照射组无明显区别.高剂量照射组实验组大鼠睾丸组织于移植后两周管腔内可见少量各级生精细胞,移植后4周管腔内各级生精细胞增多,可见成熟精子.各实验组恢复均好于对照组.结论 大鼠骨髓间充质干细胞对生精上皮放射性损伤的修复可起重要作用.
-
淋巴管阻断对大鼠睾丸生精上皮的影响
用外科手术的方法将正常成年SD大鼠双侧睾丸淋巴管阻断后,观察术后不同时间睾丸生精上皮的组织学变化.术后2天出现生精上皮的形态改变,生精细胞排列松散,部分精子细胞脱落,聚集在管腔部位.术后6天多数曲细精管的精子细胞全部脱落.术后12天、24天和48天许多曲细精管上皮只含有支持细胞和精原细胞,其它生精细胞均已脱落.假手术对照组,睾丸生精上皮具有正常的形态结构.
-
镉对睾丸的毒性作用研究进展
镉(Cd)作为一种重金属微量元素，可引起全身的毒性反应。睾丸更易招致镉等重金属元素的损害，如诱导睾丸退化，体积缩小，重量下降，质地变硬，充血、出血，生精上皮被破坏，从而引起睾丸组织坏死，严重危害着人类的性功能、生殖功能和后代的健康水平，必须引起人们足够重视。……
-
地黄多糖干预对低剂量X线照射小鼠生精细胞P53和bcl-2蛋白表达的影响
目的 探讨地黄多糖干预对低剂量X线照射损伤小鼠生精细胞中p53和bcl-2蛋白水平表达的影响.方法 选择70只雄性昆明小鼠(5～6周龄;体重22±2g),随机分为:单纯照射组(1～3组),给药照射组(4～9组)和正常对照组(10组).所有小鼠自照射前5d开始每天灌胃一次,分别给予0.2mL生理盐水灌胃(1～3组和10组)和地黄多糖(溶于0.2mL生理盐水)200mg/Kg(4～6组)、800mg/Kg(7～9组),共24次.照射组自第6天起采用X线每天一次全身照射,共15次;单次照射剂量分别为0.025、0.075、0.100Gy,剂量率为0.025Gy/min.所有小鼠在末次照射结束后48小时内脱颈法处死摘取睾丸,经Bouin氏液固定24h后石蜡包埋、切片.采用HE染色观察睾丸生精小管形态结构,免疫组织化学法检测生精细胞中P53及bcl-2蛋白的表达水平.结果 随着单次低剂量X线照射剂量增加,HE染色可见照射组小鼠睾丸生精小管各级生精细胞数目逐渐减少,结构排列出现不同程度的紊乱;免疫组织化学可见生精细胞中p53蛋白表达水平逐渐增加,而bcl-2蛋白表达水平则逐渐下降.给予200mg/Kg及800mg/Kg地黄多糖灌胃能下调生精细胞中p53蛋白和上调bcl-2蛋白表达水平,但后者对p53及bcl-2蛋白表达水平调节作用更明显,两者具有显著统计学意义(P＜0.05).结论 地黄多糖对低剂量X线全身照射小鼠的损伤生殖功能有一定保护作用,其抗辐射作用机制部分可能与下调生精细胞中p53蛋白、上调bcl-2蛋白表达水平有关.
-
补肾生精汤对铅损伤小鼠生精细胞凋亡的影响
目的：探讨补肾生精汤对铅损伤小鼠生精细胞凋亡的影响，为临床治疗重金属所致男性不育提供理论依据。方法成年健康清洁级ICR雄性小鼠30只，随机分为对照组、模型组和给药组，每组10只。醋酸铅灌胃建立睾丸损伤模型（30mg/kg体质量，0.1ml/10g容积），采用中药补肾生精汤灌胃治疗（15.0g/kg，即25mL/kg体质量），每天1次，共28d。TUNEL法检测细胞凋亡情况，共聚焦激光扫描显微镜观察；JC-1染色法检测线粒体膜电位变化情况，NucleoCounter NC-3000TM对线粒体膜电位进行分析。结果 TUNEL法检测，模型组凋亡细胞数量（11.60±2.01）明显高于对照组（1.20±1.03）（P ＜0.01），阳性细胞多发生于精原细胞和精母细胞的位置；给药组凋亡细胞数（3.40±1.78）明显低于模型组（P ＜0.01）。JC-1染色法检测，模型组去极化细胞（凋亡细胞）比例为（74.20%±1.3038），明显高于对照组（31.80%±0.8367）（P ＜0.01）；给药组去极化细胞比例为（54.20%±1.3038），低于模型组（P＜0.01）。结论补肾生精汤可通过抑制生精细胞凋亡而改善铅损伤小鼠的生精功能。
-
大鼠脊髓损伤急性期睾丸生精细胞凋亡及Fas和Bcl-2蛋白表达的改变
目的 研究脊髓损伤急性期对成年大鼠睾丸生精功能障碍的影响及其机制.方法 80只SD雄性大鼠随机分为脊髓损伤组(40只)和脊髓非损伤组(40只),采用原位细胞凋亡TUNEL法检测脊髓损伤后第1、2、4、8、1 6天睾丸生精细胞的形态及数量变化.采用免疫组化SABC法检测大鼠脊髓损伤后第1、2、4、8、16天睾丸生精细胞Fas、Bcl-2表达情况.结果 大鼠脊髓损伤后睾丸TUNEL标记阳性凋亡细胞第4天开始出现,多表达于初级、次级精母细胞及精原细胞,至第16d,随时间点推移阳性凋亡细胞数逐渐增多.脊髓损伤后第4～16d损伤组睾丸生精细胞Fas表达与非损伤组比较显著增强(P＜0.05),Bcl-2表达损伤组与非损伤组差别无显著性(P＞0.05).结论 大鼠脊髓损伤急性期存在睾丸生精细胞凋亡现象,睾丸生精功能障碍与Fas高表达密切相关,和Bcl-2表达无明显相关性.
-
睾丸局部热作用对幼鼠生精细胞凋亡的影响
目的探讨睾丸局部热作用对幼鼠生精细胞凋亡的影响.方法48只健康幼年期SD雄性大鼠随机分为热处理组(43℃,15min)和对照组(22℃,15min):分别按睾丸局部处理后2h,6h,24h,14d分成4个亚组.应用电镜和原位末端标记法(TUNEL)检测各亚组幼鼠睾丸生精细胞凋亡情况,并在光镜下观察睾丸组织学变化.结果电镜显示热处理组除2h外各组均出现生精细胞凋亡表现;TUNEL法检测结果用生精细胞凋亡指数(AI)表示;热处理组2h AI与对照组相比无统计学意义,热处理组6h AI高于对照组(P＜0.05),热处理组24h和14d AI明显高于对照组(P＜0.01).结论睾丸局部热作用导致幼鼠生精细胞凋亡增加.
-
睾丸扭转患者血与精浆抗精子抗体变化规律的临床研究
睾丸扭转（Testicular Torsion, TT）作为泌尿男科的常见急诊，好发于青春期和青春前期[1]青少年。患者的害羞及临床表现的非特异性常导致本病误诊，因诊治不及时导致睾丸坏死而不得已作睾丸切除，这已成为青少年男性丧失睾丸的主要原因之一。与此同时，睾丸组织因缺血导致部分或者全部坏死，进而引起血-睾屏障破坏、血抗精子抗体（antisperm antibody, AsAb）的产生多被认为是患者术后免疫性不育的常见原因[2]。为研究TT患者术后血与精浆AsAb产生的时间及其规律，早期发现免疫性不育、并为制定早期干预措施提供可靠依据，我课题组收集整理了2009年8月至2012年3月间在我院诊治的TT 患者24例与非生殖系统疾病手术患者24例作为正常对照组进行对比研究。现将研究结果报道如下。
-
环磷酰胺睾丸毒性研究进展
环磷酰胺（cyclophosphamide，CP）具有较强的睾丸毒性，可诱导生精细胞凋亡、抑制精原干细胞增殖、分化，损伤生精细胞遗传物质及支持细胞，这与CP造成睾丸的氧化应激损伤有关。CP还可以通过抑制胆固醇转运蛋白StAR、睾酮合成关键酶3β-HSD、17β-HSD等表达，抑制睾酮合成。本文就CP造成的睾丸毒性，引起生精异常及睾酮合成障碍做一综述。
-
精原干细胞在男性生殖医学领域应用现状
干细胞是具有自我更新、分化和移植后能够向特定组织种群分化的一类原始细胞。近年来，随着干细胞技术发展，从基础医学到临床应用（神经系统疾病、血液病、自身免疫性疾病）等治疗取得突破性进展。根据其发育阶段，干细胞通常被分为胚胎干细胞、成体干细胞。精原干细胞（Spermatogonial stem cells SSCs）隶属成体干细胞，同样具有自我更新和分化潜能。
