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胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B的表达
蛋白激酶 B(protein kinase B,PKB)具有促进生长、增殖、抑制凋亡的作用,对糖代谢有明显影响.本研究通过高脂喂养诱导Sprague-Dawley(SD)大鼠产生胰岛素抵抗,检测大鼠骨骼肌中胰岛素诱导的蛋白激酶B的表达的改变,揭示胰岛素抵抗与蛋白激酶B表达的关系.
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胰岛素样生长因子-1对慢性肾功能不全大鼠骨骼肌蛋白质合成与分解的影响
目的探讨胰岛素样生长因子(IGF-1),在CRF大鼠及配对喂养的假手术(ShamOperated,SO)对照组大鼠骨骼肌蛋白质代谢上的作用.方法从两组大鼠血清和骨骼肌中提取IGF-1,用放射免疫分析法测定血清及骨骼肌中的IGF-1水平;用荧光测定法检测肱骨内上髁肌培养液中总酪氨酸的浓度,进而计算基础蛋白合成率及分解率.通过剂量反应试验,观察不同浓度重组人类胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1)对骨骼肌蛋白质合成与分解的影响.结果CRF大鼠血清IGF-1浓度显著低于SO对照大鼠(170.3±16.4比410.4±49.3ng/ml),骨骼肌IGF-1含量也明显低于SO组(4.22±1.03比6.93±1.4lng/g),P值均<0.001.CRF组大鼠肱骨内上髁肌的基础蛋白合成串(24.0±2.1nmol酪氨酸·g肌肉-1·h-1)比SO组(30.8±2.4nmol酪氨酸·g肌肉-1·h-1)低22%,P<0.05.而基础蛋白分解率则比SO组高78%(234.4±13.8比131.7±8.4nmol酪氨酸·g肌肉-1.h-1,P<0.001.剂量反应试验发现,rhlGF-1对CRF大鼠骨骼肌蛋白质合成和分解的作用明显低于SO大鼠.浓度为25-500ng/ml的rhlGF-1对CRF大鼠蛋白质合成的促进作用仅为SO大鼠的25%~44%,对蛋白质分解的抑制作用仅为对照组的15%~42%.说明CRF大鼠骨骼肌对rhlGF-1促进蛋白质合成代谢的反应性降低.结论CRF时血清及骨骼肌的IGF-1含量减少,骨骼肌对IGF-1促进蛋白质合成代谢的作用存在抵抗,这些可能是CRF患者骨骼肌蛋白质合成减少、分解增强,进而导致营养不良、肌肉萎缩的主要原因.
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老年大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶对胰岛素敏感性的影响
胰岛素抵抗(insulin resistanse IR)是2型糖尿病的主要发病机制和心血管疾病的危险因素.随着年龄的增长,IR和2型糖尿病的发生呈增高趋势,但年龄相关的IR发生的确切机制仍不清楚.
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大强度耐力训练和不同剂量补铁对大鼠血清铁、血红蛋白及骨骼肌线粒体呼吸链功能的影响
目的:探讨大强度耐力训练和不同剂量补铁对大鼠血清铁、血红蛋白及骨骼肌线粒体呼吸链功能的影响.方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为5组(n=8):对照组(C组)、训练组(T组)、小剂量补铁+训练组(S组)、中剂量补铁+训练组(M组)和大剂量补铁+训练组(L组).训练大鼠进行每周6天、共8周的递增负荷运动.补铁组大鼠第5~8周补铁,小剂量为28.85 mg/d/kg,中剂量为57.7 mg/d/kg,大剂量为115.4 mg/d/kg.训练结束后取血液及骨骼肌样本,测定血红蛋白(Hb)、血清铁含量及骨骼肌线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ~Ⅳ(CⅠ~Ⅳ)活性.结果:1)与C组相比,T组血清铁含量显著下降(P<0.01),M组和L组血清铁含量均显著升高(P< 0.05或P< 0.01).与T组相比,S组、M组和L组血清铁含量均显著升高(P<0.01).2)与C组相比,T组Hb含量显著下降(P<0.01).与T组相比,S组、M组和L组Hb含量均显著升高(P<0.01).3)与C组相比,T组和S组CⅠ~Ⅲ活性均显著升高(P<0.01),CⅣ活性显著下降(P< 0.01);M组CⅠ~Ⅳ活性均显著升高(P<0.01);L组CⅠ和CⅢ活性显著升高(P<0.01),CⅣ活性显著下降(P<0.01).与T组相比,S组CⅠ、CⅡ和CⅣ活性均显著下降(P<0.01),CⅢ活性显著升高(P<0.01);M组C Ⅰ~Ⅳ活性均显著提高(P<0.01);L组CⅠ、CⅡ和CⅣ活性均显著下降(P<0.01).结论:大强度耐力训练引起大鼠缺铁性贫血,训练期间补铁可改善贫血状况,中剂量补铁提高骨骼肌线粒体呼吸链功能的效果佳.
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静力训练对大鼠骨骼肌超微结构的影响
1998年,本课题组报道了一种大鼠静力练习法[1]。在此基础上,我们采用电镜技术,进一步观察持续递增静力训练对大鼠骨骼肌组织结构的影响。1 材料与方法1.1 体重160-180克的雄性SD大鼠32只,随机分为静力训练1、2、3组和空白对照组(每组各8只)。1.2 静力训练采用后肢倒置悬吊法[1],经过3天适应性训练后,进行为期4周不同训练量的静力训练(每天1次,每次训练时间见表1)。
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骨骼肌肌质网非核DNA结合蛋白及其生物学意义
细胞内的DNA结合蛋白主要分布于核内,作为转录调控因子调节核内基因的转录和表达.1996年,Wolff实验室在研究质粒DNA转染入骨骼肌细胞的机制时发现,家兔骨骼肌肌质网膜上存在特异的DNA结合蛋白,称为非核DNA结合蛋白.本实验室在分离的大鼠骨骼肌肌质网中发现存在两种非核DNA结合蛋白,分子量为83 000和58 000,并证实这些DNA结合蛋白与双链线状、环状及单链DNA的结合无选择性,因此将其称为非序列依赖性的非核DNA结合蛋白,这种蛋白仅存在于肌质网而不存在于肌浆膜.质粒DNA与肌质网非核DNA结合蛋白结合后可以明显增加肌质网Ca2+摄入和释放,即turnover加快,而且这一作用仍与DNA序列无关.这些研究结果提示,DNA与非核DNA结合蛋白结合之后可以影响肌质网的Ca2+转运,进而可能影响胞浆钙稳态的调节,影响肌细胞的功能.非核DNA结合蛋白的生物学意义及在外源质粒DNA转入骨骼肌细胞后对细胞的生物学行为的影响正在进一步研究中.
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一种新型材料体外复合培养观察大鼠骨骼肌肌球蛋白变化
本实验系基于仿生学的原理,参照骨骼肌肌原纤维的超微结构而设计的.首先将由胶原蛋白和甲壳素交联而成医用可吸收缝线平行折叠,并制备成圆柱体样结构,然后将其与大鼠骨骼肌成肌细胞L6体外复合培养,分别于第1天至第6天消化细胞并溶解于PBS中,ELISA检测大鼠骨骼肌肌球蛋白的变化,统计软件分析并进行曲线拟合,以寻求大鼠骨骼肌肌球蛋白在体外培养早期的变化态势.
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细胞凋亡和丙二醛在长时间大强度运动模型大鼠骨骼肌中的表达
背景:骨骼肌细胞凋亡会导致多种骨骼肌疾病的出现,常规疗法效果都不太理想.目的:分析不同强度运动对大鼠骨骼肌形态结构和细胞凋亡的影响,可以起到预防骨骼肌细胞凋亡的作用.方法:健康3月龄雄性SD大鼠30只随机分为3组:安静对照组、一般有氧运动组和长时间大强度运动组.安静对照组不进行游泳运动,运动组运用游泳运动制备动物模型,运动组的训练周期都为10周,10周后对大鼠全部实施麻醉后取腓肠肌,用以苏木精-伊红染色观察骨骼肌形态和TUNEL检测细胞凋亡情况;并检测骨骼肌组织超氧化物歧化酶、丙二醛含量,做丙二醛与积分吸光度的相关分析.结果与结论:①骨骼肌苏木精-伊红染色结果:长时间大强度运动组肌纤维排列紊乱、结构模糊;②丙二醛和超氧化物歧化酶含量:与安静对照组相比,一般有氧运动组、长时间大强度运动组的丙二醛增加,一般有氧运动组与安静对照组相比较超氧化物歧化酶有显著性增加(P < 0.05),长时间大强度运动组与有氧组相比较超氧化物歧化酶显著性减少(P < 0.05);③TUNEL检测结果:长时间大强度运动组细胞凋亡积分吸光度值显著高于一般有氧运动组和安静对照组(P < 0.01);④相关分析:丙二醛与积分吸光度值之间显著相关,呈正相关关系;⑤结果说明,长时间大强度运动组骨骼肌组织中的长丙二醛增多,机体疲劳程度更为严重.有氧运动使机体骨骼肌逐渐有适应性,而由于过度运动负荷较大,对骨骼肌形态结构有一定损伤,使得细胞凋亡增加.随着运动强度增加导致丙二醛生成增加而清除相对不足,细胞凋亡积分吸光度值增大.
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SOD模型配合物MSODa对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用
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大鼠骨骼肌在复合肥作用下肌电现象变化初探
在探计复合肥剂对大鼠各器官组织结构的影响系列实验工作很多,结果表明,复合肥剂对大鼠睾丸酮水平没有明显影响,但对实验大鼠一些器官组织超微结构存在一定损伤机制[1~4].在实验过程中我们发现,实验组大鼠大腿出现不同程度的抽搐现象,导致实验组部分大鼠偶尔出现跛行(后腿),疑有肌肉痉挛存在,尽管这些现在比较微弱,还是引起我们注意,这就引发我们尝试探究复合肥剂(20%)对实验大鼠骨骼肌自发放电及骨骼肌超微结构的影响,从机能学及形态学2个角度进行分析.实验结果显示,复合肥剂对部分实验大鼠骨骼肌自发放电的产生存在一定影响,但对实验大鼠骨骼肌超微结构改变没有影响.
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睫状神经营养因子对大鼠去神经骨骼肌的营养作用
目的:通过测定SD大鼠坐骨神经离断后比目鱼肌(SOL)和趾长伸肌(EDL)肌纤维横截面积,观察持续给睫状神经营养因子(CNTF)对去神经骨骼肌萎缩的影响.结果:SD大鼠坐骨神经离断后,持续给0.2mg/kg.d的CNTF20天后,损伤侧SOL和EDL肌纤维横截面积分别比实验对照组高27%(P<0.01)和14%,SOL肌纤维横截面积比EDL增加的幅度大,而给予0.05mg/kg.d的CNTF20天后,动物肌纤维横截面积与实验对照组无明显差异.结论:CNTF可显著改善坐骨神经离断后SD大鼠骨骼肌的萎缩,并且CNTF效应的强弱与用药剂量和肌肉类型有关,0.2mg/kg.dCNTF作用明显强于0.05mg/kg.d CNTF,慢肌(SOL)比快肌(EDL)对CNTF更敏感.
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幼年大鼠骨骼肌在电刺激下的收缩特性测试
应力与生长的关系,一直是广大生物力学工作者所关心的课题,不同的功能治疗和各种训练都可以使肌肉的收缩特性发生变化,本研究设计了对大鼠后肢骨骼肌的收缩特性进行测试的装置,利用该装置对一月龄大鼠后肢两组骨骼肌在电刺激下的收缩特性进行了测试,为研究大鼠骨骼肌在长期不同应力刺激水平及不同功能治疗等因素对其收缩特性改变打下基础.
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慢性肾功能不全大鼠骨骼肌IGF-1及其受体的基因表达
探讨IGF-1及其受体在慢性肾功能不全(CRF)时骨骼肌蛋白质代谢中的作用.用放射免疫分析法检测CRF大鼠和与其配对喂养的假手术(SO)对照组大鼠血清和骨骼肌中IGF-1的含量;用液相杂交/RNase Protection Assay法观察骨骼肌中IGF-1和IGF-1受体的基因表达;用密度扫描法测定IGF-1 mRNA和IGF-1受体mRNA的水平;用配位结合置换试验测定IGF-1受体的数量;通过计算解离常数测定IGF-1受体的结合亲和力,以期发现CRF病人发生骨骼肌蛋白质营养不良、肌肉萎缩的原因.
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肠道喂养和静脉营养对烧伤大鼠骨骼肌26S蛋白酶复合体及19S调节复合体作用的影响
旨在考察静脉营养和肠道营养对严重烫伤后大鼠骨骼肌26S蛋白酶复合体和19S调节复合体的作用,为临床营养支持途径提供理论依据.利用两种烧伤营养模型--肠道喂养和静脉营养,用免疫沉淀扣除法测定了30%体表皮肤全层烫伤大鼠骨骼肌中26S蛋白酶复合体及19S调节复合体的活性变化.
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周围神经损伤大鼠骨骼肌运动终板的变化
本研究观察了周围神经损伤大鼠骨骼肌运动终板的改变,现报告如下.1 材料与方法1.1材料(1)动物与分组:24只10周龄SD雄性大鼠,质量220-250 g,常规喂养;随机分为正常对照组、去神经组、制动组,每组8只.
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8-羟基脱氧鸟苷在胰岛素抵抗大鼠骨骼肌的表达及运动、吡格列酮的干预作用
胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)是许多内分泌代谢失调相关疾病的共同病理生理基础,现代社会长期高脂膳食和运动缺乏的生活方式,使其患病率明显增加.虽然对IR的研究十分活跃,但由于其发病机制十分复杂,迄今尚未完全阐明.近年的研究表明氧化应激是IR发生、发展的关键因素.8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy-2'-Deoxyguanosine,8-OHdG)是体内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)引起DNA氧化损伤修饰产物之一,是国际上公认的一种新的评价DNA氧化损伤和氧化应激状态的敏感指标和生物标志物[1].目前国内外对氧化应激和IR关系的研究较多,但关于8-OHdG这一新型氧化应激指标与IR的关系研究尚少,尤其运动对这一指标的影响国内尚未见报道.故本实验以高糖高脂饲料诱导IR模型大鼠为对象,观察8-OHdG在IR大鼠骨骼肌的表达,探讨氧化应激指标8-OHdG和IR的关系,并观察运动、吡格列酮的干预作用.
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中药复方补剂对运动大鼠骨骼肌酶活性的影响
目的 研究中药复方补剂对运动大鼠骨骼肌酶活性的影响.方法 将40只SD大鼠分为补剂组和对照组,进行游泳运动后每组再分别分为即刻处死组和休息24h再行处死组,用酶组织化学方法 染色观察骨骼肌中多种酶活性的变化.结果 方剂组的运动鼠骨骼肌酶活性较对照组高(P<0.05).结论 中药复方补剂能通过提高运动大鼠骨骼肌酶活性来改善骨骼肌细胞的能量供给,从而减缓大鼠体力性疲劳产生和促进大鼠体力性疲劳恢复.
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大鼠骨骼肌P27染色抗原修复的探讨
抗原修复是指染色前使用酶、表面活性药剂或微波金属盐等对石蜡切片的被掩盖的抗原决定簇或变性的抗原实施暴露或修复,使抗原性得到一定程度恢复的过程.为了提高大鼠骨骼肌P27免疫组织化学(简称免疫组化)染色的抗原性,使阳性部位显色更加明显,本实验采用多种方法进行比较,以探讨佳的抗原修复方法.
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缺氧习服对冻伤大鼠骨骼肌耗氧量的影响
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低氧习服大鼠骨骼肌毛细血管密度和血流供应的变化特点