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核酸的吸收与代谢
肠细胞刷状缘表面广泛存在着钠离子依赖性的核苷转运蛋白,证明人体可利用外源性核酸.超过90%的核苷和核苷酸被吸收入肠上皮细胞之后,被体内各器官广泛存在的各种亚型的核苷转运蛋白转运入组织和细胞内,转运过程中,也存在着核苷的合成和分解.大约2~5%的饮食核苷酸进入了组织中的核酸池参与体内核酸的合成,吸收入体内的核苷和核苷酸还可参与细胞内众多的生化反应.体内核苷核苷酸的分解代谢主要发生在肝脏,分解产物主要由肾脏排出体外.本文就百余年来人们对核酸的消化、吸收和代谢研究作一综述.
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胃癌组织gp96表达的临床意义
目的:探讨gp96在人胃癌组织及癌旁正常组织中的表达及其临床意义.方法:采用原位杂交技术和SABC免疫组化法,在核酸和蛋白水平检测胃癌组织(n=50)及癌旁正常组织(n=50)gp96的表达.结果:胃癌组织及癌旁正常组织均可检测到gp96的表达,胃癌组织gp96的表达均显著高于其癌旁正常组织(强阳性:18/50 vs 0/50,P<0.01).gp96的表达与组织学类型显著相关(r=0.387,P<0.05),不同分化程度的胃癌组织之间,gp96的表达存在显著差异(P<0.05);与肿瘤分期显著相关(r=0.203,P<0.05),临床Ⅲ,Ⅳ期显著高于Ⅰ,Ⅱ期(强阳性:13/50 vs 5/50,P<0.05);与淋巴结转移显著相关(r=0.391,P<0.05),有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者(强阳性:14/50 vs 4/50,P<0.05);而gp96表达与性别、年龄及肿瘤部位无显著相关.结论:gp96的表达与胃癌的发生、发展密切相关,其表达水平可以作为判断胃癌预后的参考指标之一.
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实验性肝纤维化形成过程中几种基质金属蛋白酶表达的研究
目的:研究基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶抑制因子在大鼠实验性肝纤维化形成过程中的作用及表达.方法:应用免疫组织化学和核酸原位杂交法研究MMP-1、MMP-2、TIMP-1蛋白及其mRNA和MT1-MMP mRNA在四氯化碳实验性大鼠肝纤维化形成过程中的表达变化.结果:在肝脏间质细胞和部分肝细胞中表达.在纤维化形成过程中MMP-1、MMP-2、TIMP-1蛋白及其mRNA和MT1-MMP mRNA的表达程度与肝纤维化程度密切相关.结论:肝脏间质细胞是MMPs及TIMPs主要细胞来源,部分肝细胞也有表达.MMPs及TIMPs在肝纤维化形成过程中共同发挥作用.
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核酸扩增试验诊断结核淋巴结炎:系统性回顾
资料背景:淋巴结炎是结核病常见的肺外表现.常规诊断方法,例如涂片镜检和培养,对于结核性淋巴结炎的诊断都不是非常精确.核酸扩增试验(NAAT)可以提供有益的辅助诊断.目的:通过系统回顾,评价NAAT方法诊断结核性淋巴结炎的实际效果.实验设计:我们进行了文献检索,发现36篇文章中包含了49个NAAT与结核性淋巴结炎参比标准的比较研究.每一个研究估计的灵敏度和特异性均采用树状图和概括性接收器工作特性曲线(SROC)来体现.结果:所有研究的质量大致相当,但很多研究的报告质量较差.各研究估计的NAAT的灵敏度(2%~100%)和特异性(28%~100%)差异很大,可能是由于研究的人群、质量和检测技术不同所致.商业化的NAAT试验应用20μl以上的模板,包含差异分析的报告提供了较高的诊断精确性.双盲、模板体积和差异分析可能解释一些结果不同的原因.结论:检测结核性淋巴结炎的NAAT研究所获得的结果高度可变,而且不一致,不可能成为临床确诊的指标.研究报告未标准化,而且通常包含的信息量不足.由于可能存在假阳性和假阴性结果,因此NAAT方法需与常规的方法联合应用,对临床可疑病例需依具体情况判断.
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朊病毒--传染性蛋白质颗粒、人早老性痴呆、疯牛病(之一)
朊病毒(Prion或-PrP)是一种与病毒和类病毒都很不同的蛋白质传染病原.早提出"朊病毒"一词的是1982年美国加州大学Prusiner等人,当时他们将该病原描述成蛋白性传染颗粒.在此之前朊病毒曾经有过许多不同的名字,如非寻常病毒、慢病毒、瘙痒病伴随纤维(scrapie associated fibrils,SAF)、传染性大脑淀粉样变等.多年来大量的实验说明,这是一组至今不能查到任何核酸、对各种理化作用都有很强的抵抗力、传染性很强、分子质量在27 KD~30KD的蛋白质颗粒,它们能在人和动物中引起可传递的海绵脑病.
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关注尿酸代谢与胰岛素抵抗和糖尿病相关机制的研究
尿酸(UA)是嘌呤分解的产物,亦即是核酸物质代谢的产物.正常人体尿酸总量约1800mg,其中2/3来自体内新合成的嘌呤碱,1/3来自食物[1],显然血尿酸(SUA)的变化反映嘌呤代谢改变,而与人体的物质代谢有连系.事实上,已有不少研究报道,在肥胖、血脂异常、糖代谢异常、高胰岛素血症,以及高血压和心血管疾病等均合并有高尿酸血症,以致WHO关于代谢综合征工作定义将高尿酸血症列为代谢综合征组分之一.
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非小细胞肺癌间隙连接蛋白Cx43的表达与DNA含量的关系
近来的研究表明,多种癌细胞中间隙连接蛋白Cx43的表达水平下降,Cx43基因表现出肿瘤抑制基因的特点[1].DNA含量测定是通过反映肿瘤细胞核酸代谢状况了解其生长增殖活性的一项新方法,为临床判断肿瘤的演进状态和恶性程度提供了客观的依据[2].本研究旨在探讨Cx43表达水平和DNA含量测定在评估肺癌恶性程度和预测患者临床预后等方面的意义.
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阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清糖基化终末产物的变化
阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是心血管疾病、脑血管意外、糖尿病、代谢综合征等多种全身疾患的独立因素.晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGE)是指蛋白质、脂质或核酸等大分子在没有酶参与的条件下,自发地与葡萄糖或其他还原单糖发生非酶糖基化反应,生成的一组产物总称.我们通过观察OSAHS患者血清中AGE水平的变化,初步探讨血清AGE与OSAHS的关系.
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也谈结核分支杆菌核酸阳性的临床含义
依据在局限性肺结核患者外周血中高比例发现结核分支杆菌核酸阳性的事实,近张天民教授[1]提出了结核性亚临床菌血症概念,再次引起了人们对临床标本中结核分支杆菌核酸阳性的生物学和临床含义的关注.
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也谈对结核分支杆菌菌血症及核酸阳性的几点看法
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结直肠癌的精准医学:大数据和微进展的时代
依据大数据为基础的结直肠癌精准医学是一个有吸引力的研究方向。虽然下一代测序(next generation sequencing,NGS)技术发展迅速,但科学和实践方面的挑战导致临床上进展微小。大的挑战是驱动突变的识别,因为除了EGFR、MLH1、PIK3CA和KRAS基因异常,结直肠癌没有其他有效的致癌驱动突变存在。发展生物信息学工具,超深度测序和监测循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)方法,以帮助确定发生率微小的驱动突变,以及评估通路的激活,并进行联合治疗的方法,有助于在将来解决上述问题。大多数候选基因组改变的发生率微小,限制了精准医学的临床实践。解决策略是发展个体化的篮子试验或雨伞试验。
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不同核酸提取方法对EB病毒DNA准确定量的影响
目前,血液中EB病毒DNA检测主要采用聚合酶链式反应(PCR)技术.荧光定量PCR又称实时定量PCR,是近年开发出来的全新PCR技术,可以全程、动态、不间断地光学监控被荧光标记的PCR反应,以此来评价被检测标本中的DNA 含量,能反映PCR 扩增动力学变化,实现实时定量检测,具有快速、准确、不易被污染等优点[1-3].
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活性氧在细胞凋亡信号转导中的作用
活性氧(reactive oxygen species,ROS)是指化学性质更为活跃的氧的代谢产物或由其衍生的含氧产物,主要有氧自由基,一氧化氮,单线态氧,含羟基过氧化物等.所有的含氧自由基都属于ROS,但ROS不一定都是自由基(如H2O2).ROS主要通过脂质过氧化方式损伤生物大分子,如蛋白质、核酸等[1].
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阜新市无偿献血员HIV感染情况与两代酶免试剂检测结果的比较
目的:通过观察阜新地区献血员HIV感染情况,探讨该地区检测部门对防治HIV采取什么检测试剂及方法更有效.方法:运用x2检验对阜新地区43691名无偿献血员HIV的初筛和确证结果及两代酶免试剂检测结果进行统计,再根据p值看其有无统计学意义.结果:3年间献血员HIV初筛阳性率由0.17%上升至0.20%,确证阳性率由69/10万上升至13.3/10万,均呈上升趋势,初筛阳性率差异无统计学意义;初筛单试剂阳性者无确证阳性,双试剂阳性11人确证阳性6人,初筛单试剂阳性与初筛双试剂阳性的确证阳性人数差异有统计学意义.结论:无偿献血员队伍中的HIV感染者人数逐步上升,应该采用更加准确的试剂检测,酶免试剂容易出现假阳性,建议采用核酸检测.
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胃癌的遗传不稳定性随机引物扩增多态性DNA分析
目的分析胃癌发生发展过程中DNA和染色体的不稳定性.方法用9个随机引物对胃癌DNA做随机引物扩增多态性DNA(RAPD)分析.结果 5号和3号胃癌样本显示出高的遗传变异.每个随机引物的检出率有显著差异,分别从21%到85%不等.结论遗传不稳定性往往集中发生在胃癌细胞染色体上的一些特定位点如微卫星DNA的重复序列上.由于在胃癌的发生发展中有大量位点的遗传物质损伤、变异,提示针对单个癌基因或抑癌基因的基因疗法是不易取得成功的.
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肠道病毒71型感染致中枢神经系统损害及其免疫发病机制
肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)为小RNA病毒科(picornavirida)肠道病毒属(enterovirus)成员,其核酸为单股正旋RNA.1974年schmidt等[1]首次从美国加利福尼亚州有中枢神经系统(central nervous system,CNS)症状患者的标本中分离到EV71,此后其感染的流行范围遍及全球.EV71与柯萨奇病毒A组16型(Coxsackie A16,CA16)为引起手足口病(hand-foot-mouth-disease,HFMD)的主要病原体,好发于夏秋季,多发于5岁以下儿童.由于CA16感染表现轻微,在临床上较少有严重的中枢神系统症状,常预后良好.
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产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌的研究
目的分析烧伤科病房产金属酶铜绿假单胞菌的同源性、金属酶基因型及耐药谱特点. 方法用E-test法进行药物敏感性试验;采用2-巯基乙醇纸片协同试验筛选产金属酶菌株,对金属酶基因和整合酶基因进行聚合酶链反应(PCR)和序列分析;碱裂解法提取质粒,质粒结合、电转化试验和质粒消除试验验证酶基因有无可转移性;应用随机扩增DNA多态性分析技术(RAPD)分析产金属酶菌株的同源性. 结果 48株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌2-巯基乙醇纸片协同试验阳性6株,6株菌金属酶引物VIM-2扩增阳性,经测序证实为VIM-2型金属酶,定位于质粒上;RAPD分析显示所有产酶株均来自同一克隆,都携带Ⅰ类整合酶基因. 结论烧伤科病房有产VIM-2型金属酶铜绿假单胞菌流行.
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实用型低密度石英谐振式生物传感器阵列检测系统的构建
目的构建实用型低密度石英谐振式生物传感器(quartz oscillation biosensor, QOBS)阵列检测系统. 方法首先利用精细微加工法制作单个QOBS,在此基础上先后构建了粘接式以及夹具式2×5型QOBS阵列;并自行开发研制自激式振荡电路、PESA V2.0版频率记录分析软件;将它们与计算机联用以构建QOBS阵列检测系统. 结果成功地制造出了在气、液相中稳定振荡的单个QOBS,构建的粘接式及夹具式QOBS阵列各有其优缺点;自激式振荡电路有非常强的振荡能力,在液相中起振非常容易,其频率稳定度也可达实用要求;PESA V2.0版频率记录分析软件具有自行设置各初始参数,实时记录频率变化、自动绘制频率变化趋势图及分析结果等多项功能. 结论成功地构建出QOBS阵列检测系统,搭建起一个生物检测的技术平台,为临床上病原性微生物的检测以及多种疾病的早期诊断提供一种新的方法.
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乙型肝炎病毒DNA定量试剂检测样本的结果评定与分析
目的:对国产乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量试剂低检测限样本进行结果评定与分析,评估国产定量试剂的临床应用性能。方法2011年6月-2012年6月应用国产HBV-DNA检测试剂检测2061份临床样本、12份灵敏度试验稀释血清、10份卫生部临床检验中心标准品中 HBV-DNA含量,结合实时荧光定量曲线和DNA凝胶电泳对小于低检测限样本进行结果评定,分别采用化学发光法和全自动生化分析仪检测低病毒载量患者血清学指标和肝功能生化指标,对FX试剂定量结果进行相关性统计分析。结果2061份样本中小于低检测限的样本1233份占59.9%,其中<1000 IU/ml的低载量阳性样本393份占19.1%;393份低病毒载量样本中有193份样本检出有至少1项肝功能生化指标异常,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc 3项阳性的有332份占84.48%, HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性26份占6.62%;10份标准品经检测均能正确检出,其实测值和理论靶值相关性比较差异有统计学意义(R=0.9942,P<0.01);国产试剂检测灵敏度试验稀释血清,检出稀释度样本低浓度为57.8 IU/ml。结论国产HBV-DNA定量试剂结果为小于低检测限的样本中存在一定比例低病毒载量 HBV感染者,建议对小于低检测限样本采用进口试剂检测确认以避免漏检。
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多重连接探针扩增技术在产前诊断中的应用
多重连接探针扩增技术(multiplex ligationdependent probe amplification, MLPA),是一种高通量、针对待测核酸中靶序列进行定性和定量分析的新技术.