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松果菊苷对血管内皮细胞损伤的保护作用
目的 观察肉苁蓉提取物松果菊苷(ECH)对血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其机制.方法 离体培养人脐静脉内皮细胞(H UVEC),建立炎性因子(TNF-α)致HUVEC损伤模型;ECH设为5个质量浓度梯度(5、10、20、40、80、100 mg/L)进行预处理,MTT法检测细胞存活率;同时观察LDH、MDA、ICAM-1的分泌趋势以及细胞内活性氧的浓度.结果 模型组与阴性对照组比较,细胞存活率减低(P<0.01),细胞分泌LDH、MDA明显增多(P<0.01),ICAM-1表达明显提高(P<0.01),细胞内活性氧产生明显增多.经过不同浓度ECH(40、80、100 mg/L)预处理后,细胞存活率增高,上述细胞分泌改变均减少(P<0.05),活性氧产生减少.结论 ECH抗动脉粥样硬化的机制可能是通过抑制TNF-α诱导的HUVEC损伤,提高细胞存活率,减轻炎性反应和降低细胞内活性氧水平来实现的.
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大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
目的 建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法.方法 无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜.按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片法组、单纯消化法组和单纯压片法组,并进行对应的处理和培养,通过倒置相差显微镜观察VECs形态,免疫荧光法鉴定VECs的细胞标记物.结果 消化压片法组在接种后48~72 h即有VECs自血管段中迁移出,原代细胞约10~11 d可达到近融合状态,子代细胞生长速度加快,5 d后达到融合状态,呈典型的"铺路石"样特征.相对于其他两组,消化压片法组VECs的迁移速度快、细胞数量多.免疫学鉴定显示细胞标志物Ⅷ因子、vWF和CD31的阳性率高达99%.所培养的VECs传代培养至第10代,未见明显的细胞形态特征变化,免疫荧光鉴定至第8代,未见明显的细胞免疫特征变化.结论 本研究成功建立了一种简单经济的大鼠主动脉VECs分离、纯化和培养方法.
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应用荧光偏振技术研究缺氧再灌注培养血管内皮细胞膜流动性
目的定量研究缺氧再灌注状态下血管内皮细胞膜流动性.方法采用荧光偏振法对缺氧再灌注动物模型的培养血管内皮细胞的荧光特征光谱进行对比实验分析,并定量观测了缺氧再灌注对培养血管内皮细胞膜流动性的影响以及FDP和CAP的保护功能.结果缺氧和再灌注不同时段内,DPH标记的血管内皮细胞的荧光光谱没有实质性改变,荧光强度的曲线斜率变化与对照组趋于一致,缺氧再灌注损伤可导致血管内皮细胞膜的荧光各向异性值降低,FDP和CAP对缺氧状态的培养血管内皮细胞有显著的保护作用.结论荧光偏振技术是一种高灵敏和稳定的定量研究血管内皮细胞膜流动性的方法.
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血小板反应蛋白-1在妇产科相关疾病的表达及意义
血小板反应蛋白-1(Thrombospondin-1,TSP-1)又称凝血酶敏感蛋白-1,属于血小板反应蛋白家族(TSPs),是内源性血管生成抑制因子[1].1971年,Benziger[2]发现TSP-1是由凝血酶刺激人血小板α颗粒选择性分泌的一种多肽,之后研究发现,巨核细胞、纤维母细胞、血管内皮细胞等也能合成和分泌TSP-1.1986年,Lawler等首次克隆出TSP-1 cDNA编码序列.相关研究表明:TSP-1具有多种生物学功能,如:调节新生血管的形成、细胞的凋亡,促进血小板的激活和聚集,参与胚胎发育、组织修复、肿瘤细胞的生长和转移等[3].许多妇产科疾病与TSP-1的表达异常有关.
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BMP和VEC复合磷酸钙陶瓷人工骨修复大段骨缺损的研究
目的 探讨骨形态发生蛋白(BMP)结合血管内皮细胞(VEC)修复兔桡骨大段骨缺损的效果.方法 将BMP/VEC/β-TCP和BMP/β-TCP两种复合材料分别植入到兔桡骨15mm大段骨缺损模型中,以单纯植入β-TCP材料作对照.在术后2,4,8,16周,通过大体解剖、X线片、病理组织切片、扫描电镜及荧光标记等方法观察各组材料血管化、骨愈合及降解性.结果 在术后2,4,8,16周,病理组织切片及X线片显示BMP/VEC/β-TCP组骨缺损修复及血管化程度优于BME/β-TCP组和单纯材料组.结论 BMP和VEC联用有明显促进材料血管化及骨缺损修复的作用,效果明显优于单纯应用BMP和单纯植入磷酸钙生物陶瓷人工骨支架.
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血管内皮细胞原代培养方法的改良及应用
目的:建立一种简单易行的大鼠主动脉内皮细胞原代培养的改进方法.方法:分离出大鼠主动脉,将主动脉内膜暴露于外,两端折入结扎,以胶原酶磁力搅拌消化和细胞刮擦法交替进行,每次消化10min,共消化3次,离心后的沉淀再磁力搅拌消化20min,将收集的细胞接种在培养瓶中.结果:细胞在第3天延展,呈短梭形或类三角形.10~14d汇合成单层细胞,呈铺路石状,经第8因子相关抗原ABC法鉴定其为内皮细胞.结论:用此改良的方法可以更好的培养出血管内皮细胞.
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三氧化二砷对血管内皮细胞增殖和周期的影响
目的:观察As2O3对血管内皮细胞增殖、凋亡和细胞周期的干扰,探讨As2O3对血管内皮细胞生长的直接影响.方法:血管内皮细胞EVC-304体外培养,As2O3干预.采用MTT测定细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡.结果:ECV-304细胞经过As2O3干预,其存活率明显降低,并且呈剂量依赖性.As2O3干预后,进入S期的细胞减少,细胞周期被阻在G1期,细胞可能在G1期进入凋亡.As2O3诱导早期凋亡是对照组的2.88~5.1倍,并且呈剂量依赖性;其晚期凋亡是对照组的1.17~1.67倍.结论:As2O3可直接干扰血管内皮细胞的细胞周期,阻滞细胞在G1期,并诱导细胞凋亡,进而抑制血管内皮细胞的增殖.
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血管生成素与动脉粥样硬化关系的研究进展
血管内皮细胞在炎症反应中发挥着重要的作用,它可调节血管的通透性,影响炎症细胞的局部浸润。炎症反应在动脉粥样硬化的进程中发挥着重要的作用,内皮细胞的完整性具有抑制动脉粥样硬化形成的作用[1]。多项研究表明,血管生成素(Angiopoietin ,Ang)-酪氨酸激酶受体(Tie)系统在调节血管内皮细胞炎性反应中起重要作用,影响动脉粥样硬化的形成与发展。本文根据国内外的研究进展,通过对Ang-Tie受体系统在血管性疾病的调节作用及机理,尤其是Ang-1及Ang-2对动脉粥样硬化进展的影响,进行简要综述和归纳,以进一步了解A ng在动脉粥样硬化中的作用。
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VEGF对雄性生殖系统的作用
血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)又叫血管通透性因子或血管调理素,1989年,由Ferrara等从牛垂体滤泡细胞培养液中分离出来,能高度特异性地作用于血管内皮细胞,是血管内皮细胞特异性有丝分裂原,还是强效的血管发生诱导物,在成体组织内广泛分布,以受体介导的方式发挥其生物学作用.体内许多与生殖有关的细胞都表达VEGF和(或)VEGF受体.
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血管内皮祖细胞临床应用与生物安全性
血管内皮祖细胞是机体成熟血管内皮细胞的前体细胞,近年来,它在心血管疾病和外周血管疾病中的治疗作用受到广泛关注,成为一个研究热点.现就其动员、临床应用和安全性作一综述.
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内皮祖细胞与冠心病的研究进展
1997年Asahara等[1]首次证明循环外周血中存在能分化为血管内皮细胞的前体细胞,并将其命名为血管内皮祖细胞(Endothelial progenitor cels,EPCs).内皮祖细胞(EPC)是一类能增殖并分化为血管内皮细胞,但尚未表达成熟的血管内皮细胞表型,也未形成血管的前体细胞[1].研究发现,EPC不仅参与人胚胎血管生成,同时也参与出生后血管新生和内皮损伤后的修复过程[1,2].近年来,临床上通过EPCs移植治疗缺血性疾病获得成功.EPC为临床上治疗缺血性疾病展现了美好的未来,本文对内皮祖细胞的研究予以综述.
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一氧化氮与内皮素在胃粘膜损伤中的作用与关系
内源性一氧化氮(NO)是一种新型的神经递质和细胞内信使,它由一氧化氮合酶(NOS)介导产生,在机体内发挥重要的生理和病理生理作用.已有研究表明NO参与调节胃肠道运动、胃粘膜血流量、胃肠粘膜保护、胃肠及胰腺的分泌和肝细胞功能等.内皮素(ET)是一类有21个氨基酸残基的多肽,早于1988年从血管内皮细胞中发现,是一种强烈的血管张力调节因子,具有极强的血管活性,在胃粘膜损伤中具有重要作用.胃粘膜血流量在维持胃的功能和结构上的作用十分重要,参与胃粘膜损伤和痊愈过程.胃血流量可受到全身系统性调节以及局部代谢因子如前列腺素、细胞因子及内源性化学因子包括ET和NO的调节.由内皮细胞产生的血管活性物质ET和NO参与调控胃粘膜的微循环,这些内皮细胞衍生因子之间的不平衡在胃损伤的发展中起着重要作用.
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高血压患者血管内皮功能的改变
血管内皮功能失调是多种心血管疾病的早期病理改变,大量研究表明高血压、高胆固醇血症、吸烟和糖尿病是引起血管内皮舒张功能障碍的主要因素,尤其原发性高血压与血管内皮细胞的功能密切相关.近年来,随着超产技术的发展,高频血管超声检查已经得到了广泛的应用.血管超声技术观察肱动脉内径变化是日益被人们所认同的检测动脉内皮功能的非创伤性方法[1~3].本研究采用高频超声技术检测健康人和高血压患者药物治疗前后血管内径的变化,以探讨高频超声无创性评估血管内皮依赖性舒张功能的临床价值.
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乌司他丁对患者血浆MMP-9水平的影响及对肺脏的保护作用
目的:通过对肺损伤患者血浆中MMP-9浓度的影响,探讨乌司他丁注射液对肺脏的保护作用及其作用机制。方法选用肺损伤患者40例按照随机原则分为治疗组和对照组,每组20例,治疗组加用乌司他丁,检测血浆MMP-9水平,比较两组患者血清MMP-9水平、临床改善情况、LIS评分及氧和指数改变情况以及患者的预后情况。结果两组肺损伤患者经过治疗后病情均有所改善,但治疗组患者氧和指数、氧分压、LIS评分及死亡率情况明显好于对照组(<0.05)。两组患者未经治疗前体内的血浆MMP-9水平均高于正常,经过治疗后两组血浆MMP-9水平均下降,且治疗组患者加用乌司他丁后,血浆内MMP-9水平于第1d、第3d、第5d、第7d均低于对照组(<0.05)。结论乌司他丁注射液可减少血浆MMP-9水平,减轻肺血管内皮细胞损伤,改善肺血管通透性,对肺脏有一定的保护作用,降低死亡率。
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血糖波动对血管内皮细胞功能影响的研究分析
糖尿病可引起血管内皮功能紊乱和形态异常,破坏血管结构和血管内皮舒张功能,导致糖尿病血管病变.目前认为糖尿病的血糖代谢紊乱包括三要素:空腹血糖升高、餐后血糖升高(侧重慢性持续性高血糖状态)以及血糖波动异常(侧重血糖水平的急性改变)[1].
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Vasohibin-1在结肠癌细胞共培养体系中对血管内皮细胞作用的研究
目的 探讨Vasohibin-1在人结肠癌细胞株SW480和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养体系中对HUVECs的作用.方法 通过四甲基偶氮唑蓝评价Vasohibin-1对HUVECs的抑制作用;以流式细胞术测定HUVECs凋亡率.结果 Vasohibin-1能抑制人结肠癌细胞株SW480和HUVECs共培养体系中HUVECs增殖;流式细胞术测定显示随其浓度的增加HUVECs的凋亡率在逐渐增加.结论 Vasohibin-1能促进人结肠癌细胞株SW480与HUVECs共培养中HUVECs的凋亡.
关键词: 血管生成抑制因子-1 血管内皮细胞 凋亡 -
替格瑞洛对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞vWF表达的影响
目的探讨不同浓度的替格瑞洛(Tigeralor)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cel s,HUVECs)血管性假血友病因子(vWF)表达的影响。方法离体培养人脐静脉内皮细胞,以1×10/ml接种于6孔培养板,200ul/孔,待细胞生长到融合状态时取三孔加人ox-LDL (50ug/m1),处理24h后分别加入不同浓度的替格瑞洛(0、20及40umol/L)再作用24h。然后采用Western Blot法测定vWF的蛋白表达水平。结果 ox-LDL可增加vWF的蛋白表达;替格瑞洛可抑制ox-LDL诱导的HUVECs vWF的蛋白表达,并呈浓度依赖性。
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骨髓间充质干细胞在深度烧伤创面修复中的应用
对于深度烧伤创面的治疗虽然取得了较大的进展,但深度烧伤创面仍存在供体皮来源不足、皮肤附属器官修复困难、瘢痕增生及瘢痕所致的功能障碍等诸多难题。随着组织工程的发展,人们逐渐重视应用多能干细胞定向分化成目的细胞作替代治疗。组织工程的三大要素包括种子细胞,支架材料及合适的微环境。而组织工程研究的关键要素是种子细胞。理想的种子细胞应该具有以下的特点:来源较为方便;在体外增殖迅速并且可以短期扩增到所需的数量;长期体外传代不改变其生物学特性等。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymalstemcel s,BMSCs)作为种子细胞是成体干细胞的一种,不仅具有无限增殖、多向分化的潜能,而且还有明显的可塑性,体内移植后能迁移到病变部位并转化为病变部位的多能干细胞,其遗传背景稳定。能够分化为表皮细胞、血管内皮细胞、骨及软骨细胞、脂肪细胞、神经元细胞,胰岛素分泌细胞等多种细胞,且易于分离、培养、扩增,在体外长期培养后仍能保持分化的潜能,还具有免疫调节性及免疫抑制作用等。本文就骨髓间充质干细胞的生物学特性及其在深度烧伤创面修复中的应用作一综述。
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高同型半胱氨酸血症与心脑血管疾病的相关性研究进展
血清高同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)目前已被证实与冠心病、动脉粥样硬化、短暂性脑缺血发作、脑梗塞等多种心脑血管疾病相关,是心脑血管、周围血管系统疾病的独立危险因素,在相关疾病的发生、发展中起着重要作用。疾病进展越严重,患者的Hcy水平越高,因此,患者的Hcy水平能够反映心脑血管疾病的病变类型及病变严重程度。 Hcy可通过氧化应激毒性损伤血管内皮细胞、炎性反应、细胞凋亡、促进平滑肌细胞增生、免疫反应、破坏机体凝血和纤溶的平衡、影响脂质代谢,使机体处于血栓前状态等多种机制损害人体心脑血管系统,维生素B族在同型半胱氨酸的代谢中发挥着重要作用,特别是VitB6、VitB12以及叶酸的补充可降低同型半胱氨酸浓度。而人体由于种种原因引起的维生素吸收不良,易导致高同型半胱氨酸血症。
目前,冠心病、脑梗死等心脑血管疾病的发病率和死亡率均逐年上升。近10年来,国内外对于同型半胱氨酸的研究不断,多个基础实验研究和临床观察表明,Hcy水平与心脑血管疾病密切相关,血浆Hcy升高引起的高同型半胱氨酸血症(HHcy)可以加速心脑血管疾病的发生和发展[1,2]。心脑血管疾病的发病率、致死率极高,在各种死亡原因中占据第二位,1969年Mc Cul y首次意外发现同型半胱氨酸在动脉粥样硬化发病中的重要作用,之后高血清同型半胱氨酸血症成为一个独立的心血管疾病的危险因素而备受关注。 -
血管性血友病因子的研究进展
血管性血友病因子(von Wilebrand Factor,vWF)是由内皮细胞和巨核细胞合成并分泌的糖蛋白,在初期止血及血栓形成中起重要作用,并与临床出血及血栓性疾病密切相关,因此研究vWF的生物学特性和功能对临床相关疾病的诊治具有重要意义。