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模板指导末端延伸法检测内皮型一氧化氮合酶基因多态性研究
糖尿病肾病(DN)是糖尿病的并发症之一,内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因多态性对DN易感性及预后有重要意义[1].本研究建立了模板指导末端延伸反应结合荧光偏振技术(TDI-FP)检测eNOS基因单核苷酸多态性(SNP)的方法,并对DN患者和正常人检测价值进行了探讨.
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关于糖化血红蛋白HbA1c测定在全世界标准化的共识——来自美国糖尿病协会(ADA)等的共识声明
糖化血红蛋白是指血红蛋白糖基化,而糖基化就是葡萄糖通过非酶促反应结合到蛋白质的氨基上.糖化血红蛋白一旦形成,是不可逆转的.它代表过去6~10周的整体血糖水平,是评价血糖控制情况和预测并发症的指标.影响糖化血红蛋白浓度的因素有红细胞的寿命和血糖浓度.1978年检测糖化血红蛋白的商品试剂上市;1988年美国糖尿病协会(ADA)推荐其为糖尿病的常规监测项目.
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广西毛南族群体12个短串联重复序列的遗传多态性研究
短串联重复序列(short tandem repeats,STR)是人类基因组中具有高度多态性的遗传学标记[1],很容易通过PCR扩增,进行基因检测[2].STR广泛应用于人类遗传连锁图谱、基因定位或诊断、遗传病连锁分析、器官移植、个体识别、亲子鉴定、司法审判以及民族学、人类学和考古学领域[3].我们采用复合基因扩增PCR反应结合ABI3100遗传分析仪,对广西毛南族群体中12个STR位点的群体遗传学特征进行了研究,检测这些STR位点在广西毛南族人群中的等位基因分布特征,以便提供这一地域人群的相关资料.
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聚合酶链反应结合地高辛标记寡核苷酸杂交检测肠道致病菌的应用
16S rDNA是细菌染色体上编码rRNA相对应的DNA序列,既保守又相对,呈现出保守区和可变区交错排列的状态.根据这些特点,我们在16S rDNA保守区设计聚合酶链反应(PCR)引物,用一对通用引物在适宜的PCR反应条件下就可以将所有细菌的相应基因片段全部扩增出来,同时利用可变区设计地高辛标记的种特异性寡核苷酸探针与扩增产物进行斑点杂交而区分不同细菌.现报告如下.
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免疫酶细胞化学技术
免疫酶细胞化学技术,是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)中常用的方法之一.与抗体特异性反应结合下,借助于酶细胞化学的手段来检测组织工程化构建组织细胞内抗原.上世纪60年代初Nakane、Pierce Avrameas和Uriel等成功地把辣根过氧化物酶(Horseradish-peroxidase,HRP)标记在抗体分子上.从而开创了酶标抗体的新技术.
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聚合酶链反应结合尿嘧啶糖基化酶鉴定临床常见念珠菌
体外基于聚合酶链反应(PCR)技术用于念珠菌DNA特异性鉴定方法很多,但所用引物序列和种级水平鉴定临床常见念珠菌的方法不同,加之防污措施的不足或欠缺,致使其特异性、稳定性、重复性受到影响而未能应用于临床.
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综合护理干预对胸部手术患者疼痛管理满意度的影响分析
疼痛是生理感觉和心理反应结合的感受. 在临床护理中,疼痛已成为继体温、脉搏、呼吸、血压四大生命体征之后的第五大生命体征,是临床上常遇见的一种情况. 胸部手术由于创伤大,出血多,术后疼痛尤为明显. 本次研究通过胸部手术患者术后疼痛的综合护理干预,观察疼痛减轻情况.
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胃复安引起锥体外系症状3例报告
胃复安(灭吐灵)有较好的止吐功效,是临床各科的常用药物。近年来也出现了一些严重的不良反应。现将笔者在诊治3例由胃复安引起严重不良反应结合有关文献报告如下,供同道们参考。 例1,患者男,1(3)/(12)岁。因上感呕吐、腹泻厌食8h,肌注胃复安3.5mg(0.3mg*kg-1),30min后患儿哭声微弱,颈向后仰,两眼向上凝视,反应迟钝,强制性张口,流涎,角弓反张,呼吸困难但无紫绀、发热,无大小便失禁。患儿足月顺产,家庭中无特殊病史。体检:T37℃,神志清楚,急性痛苦面容,双侧瞳孔等大等圆,对光反射正常,颈部活动自如,心肺无异常,腹部膨隆,无明显压痛及跳痛,叩诊呈鼓音,肠鸣音亢进,四肢肌张力增高,腹壁反射,提睾反射及膝反射均正常,病理反射阴性。初诊1、婴幼儿消化不良;2、胃复安不良反应。予吸氧、抗胆碱药、抗感染、镇静、补液处理后,2h后患儿活动如常。继续抗感染补液等治疗,72h后大便恢复正常,食欲增加,无任何不适。
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罗氏cobase 411电化学发光仪使用体会及常见报警故障处理
电化学发光是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代免疫标记测定技术,其原理是采用双抗夹心原理,将形成的抗原抗体复合物通过生物素与链霉素亲和素间的反应结合到微粒上,在测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上经清洗电极加电压产生化学发光,光电倍增管将其测定到的发光强度自动对应标准曲线,查出结果,整个检测结果仅18分钟.罗氏Cobase 411全自动电化学发光免疫分析仪罗氏公司开发制造的产品,我院于2010年5月引进该仪器,经过近一年的使用,我们认为该仪器具有线性范围宽、准确性灵敏度高、检测速度快等特点.笔者将在使用过程中的体会及常见报警故障分析处理介绍如下.
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青霉素皮试假阴性结果分析及预防
青霉素作为一种古老的抗生素因其价廉物美,抗菌谱广,疗效高,毒性低,剂量选择幅度大,至今临床使用仍常兴不衰.青霉素是一种半抗原,进入人体后可以引起机体过敏反应,使用青霉素前作皮试及皮试阳性者不能使用青霉素已成护理操作常规,有关青霉素皮试假阳性及如何降低阳性率的探讨也屡见报道,但关于青霉素皮试假阴性问题及临床意义并未引起护理界足够的重视;就其假阴性结果而言,轻则给病人增加痛苦,重则危及病人生命,因此,做好假阴性结果的预防具有十分重要的临床意义.本人就临床工作中遇到的11例青霉素过敏反应结合有关报道进行分析,认为青霉素过敏反应多属青霉素假阴性结果所致.现介绍如下.
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影响ELISA检测HBsAg错误结果的分析
目前国内临床多采用 ELISA双抗体夹心法检测乙型肝炎表面抗原 (HBsAg),其基本原理:将包抗体被在载体后作固相抗体,加入代测标本,使其中的相应抗原通过免疫学反应结合到固相抗体上,洗去未结合的抗原;加入酶结合物与结合在固相抗体的抗原反应,洗去未结合的游离结合物;加入酶(常用辣根过氧化物酶)的相应底物,固相化的酶催化底物反应生成有色反应.
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用免疫组化ABC法的漂片法做好脑片实验的体会
ABC法是将亲和素作为桥,把生物素化的抗体与生物素结合的酶连接起来.首先,以Ⅰ抗与组织切片共孵育,使特异性Ⅰ抗与组织中的相应抗原结合,之后加上生物素标记的Ⅱ抗,Ⅱ抗与Ⅰ抗通过抗原-抗体反应结合,后加入ABC复合物,Ⅱ抗上的生物素则与ABC复合物中的亲和素上空下的位点结合.用ABC法中的漂片法做脊髓冰冻切片的染色比较容易做出结果,但如果是用此法做大鼠脑的冰冻切片染色则较难做出结果,特别是做出漂亮的脑片更难.作者在用ABC漂片法做脑组织冰冻切片的免疫组织化学实验的过程中,通过改变常规的操作步骤环节,使做出的脑片质量大为提高.以下实验技术介绍的是将免疫组化ABC法的漂片法用于脑组织冰冻切片中的几点体会.
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应用微机处理聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色图像结果
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是核酸研究中的重要实验技术.以PAGE为基础的聚合酶链反应结合单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术已成为筛查基因突变的基本方法[1-3],特别是以硝酸银染色显示结果的非同位素PCR-SSCP技术受到国内科研工作者的喜爱[4,5].银染色使凝胶中的DNA条带肉眼可见,因此银染凝胶片是重要的原始资料,常用吸水纸[4]将凝胶制成干胶片后保存,拍照记录结果,但较为麻烦.近我们在采用银染色PCR-SSCP技术筛检胃癌组织p53基因突变时,直接应用微机对PAGE银染色图象结果进行处理和保存,简便易行,特介绍如下.