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卵磷脂类保健食品中PE、PC的高效液相色谱测定
为准确快速地对卵磷脂保健食品中有效成分进行定量分析,我们建立了卵磷脂保健食品中磷脂主要组分磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)的高效液相色谱测定方法.方法的日间精密度为5.4%~9.0%;PE、PC的加标回收率分别为83.0%~105.6%和81.3%~86.0%,均可满足卫生分析的要求.对5种卵磷脂保健食品中的PC、PE的含量进行了测定,PC、PE的含量分别为15.2%~24.2%和3.1%~6.1%.方法的样品前处理方法简单,且检测灵敏度高,分析速度快,适于在国内推广使用.
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玄参对脾虚水湿不化大鼠模型的影响及其肝脏代谢组学分析
目的:探索玄参对脾虚水湿不化大鼠模型的影响,并利用代谢组学方法对生物标志物和代谢通路进行分析.方法:高脂低蛋白饲料喂养加尾部负重游泳的方法建立脾虚水湿不化大鼠模型,玄参水煎液高、低剂量给药2周后检测各给药组肝脏指数、血清蛋白、血脂、胃肠功能和水负荷的变化情况,给药剂量分别为1.35,5.40 g·kg-1.利用UPLC-Q-TOF-MS检测肝组织中内源性小分子代谢物,电喷雾正离子模式(ESI+)和负离子模式(ESI-)对样品进行检测,m/z 100 ~1 500;利用主成分分析(PCA)和偏小二乘法-判别分析(PLS-DA)比较空白组、模型组,玄参高、低剂量组内源性小分子代谢物的变化情况;对差异代谢物进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)代谢通路分析.结果:与模型组比较,玄参高剂量组的胃排空率和D-木糖排泄率显著升高;玄参低剂量组能升高血清白蛋白、总蛋白含量;玄参高剂量组能降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量和水负荷指数.代谢组学方法共鉴定出21个生物标志物,找到7条主要代谢通路,主要涉及胰岛素分泌、甘油磷脂代谢、嘌呤代谢、胆汁酸分泌、磷脂酶D信号通路、糖基磷脂酰肌醇锚的合成、内源性大麻素的生物合成等.结论:玄参对脾虚水湿不化模型大鼠的影响与改善消化功能、抑制糖代谢、改善血脂代谢等有关.
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使用磁性细菌粒子分离浓缩和检测癌胚抗原
磁性细菌为厌氧性螺旋状菌,呈革兰阴性,多发现于海底的淤泥之中;磁性细菌有沿着磁力线朝N极或S极泳动的走磁性,细菌体内约有10~20颗粒径(50~100nm)的磁性细菌粒子呈串状排列其中.电子线回折等的分析表明磁性细菌粒子的主成份为磁性Fe3O4,磁性细菌在含有铁离子的培养液中,常温常压状态下可以大量繁殖,生成的磁性细菌粒子成本低廉[1,2].磁性细菌粒子表面全面覆盖着一层含有磷脂酰乙醇胺的脂质有机薄膜,与人工合成的磁石粒子相比磁性细菌粒子具有表面有机膜厚度均一且稳定牢固、有机膜表面抗体接种容易、形成的磁性抗体对外磁场的磁性应答强及在溶液中分散性良好等的特点[2,3].Tadashi Matsunaga等将多种食品生产相关的生物酶分别接种固定于磁石粒子表面,形成可用外磁场进行控制的磁性酶.20世纪70年代有报道菌体内含有磁石微粒子的磁性细菌,作为一种纳米新材料,日本的学者们对磁性细菌生成的磁性细菌粒子进行了大量的应用性基础研究,在多项工业化应用开发[2]及DNA[4]、胰岛素[5]、抗体[3,6]的高感度检测实验中获得成功.
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黄芪多糖降低红斑狼疮小鼠抗磷脂抗体和尿蛋白的作用
为了研究黄芪多糖对抗磷脂抗体和尿蛋白的影响,本研究选用病理及组织学改变类似人类红斑狼疮的自发SLE模型NZB×NZW F1小鼠观察不同剂量黄芪多糖对其抗心磷脂(anticardiolipin, aCL)、抗磷脂酰胆碱(antiphosphatidyl choline, aPC)、抗磷脂酰丝氨酸(antiphosphatidyl serine, aPS)、抗磷脂酰肌醇(antiphos-phatidyl inositol,aPI)、抗磷脂酸(antiphosphatidic acid, aPA)抗体和抗磷脂酰乙醇胺(anti-phosphatidyl ethanolamine, aPE)抗体的水平、尿蛋白含量的影响.
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梅毒病人抗磷脂抗体检测
20世纪初发现的梅毒非特异性抗体可与多种磷脂成分反应.人体内的磷脂主要是含甘油醇的甘油磷脂[1].应用ELISA法对82名正常人、76例梅毒病人和另外11例病人治疗前后抗心磷脂抗体(aCL)、抗磷脂酸抗体(aPA)、抗磷脂酰丝氨酸抗体(aPS)、抗磷脂酰乙醇胺抗体(aPE)、抗磷脂酰胆碱抗体(aPC)、抗磷脂酰肌醇(aPI)抗体进行检测.
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抗心磷脂抗体检测和抗磷脂抗体综合征诊断
磷脂是指分子中含有醇,脂肪酸和磷酸基因团的一类化合物.人体内的磷脂主要是含有甘油醇的甘油磷脂,包括心磷脂,磷脂酰丝氨酸,磷脂酰胆固醇,磷脂酰乙醇胺等.
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卷苦肝泰对CCl4肝损伤大鼠肝脏线粒体膜的影响
目的:观察中药复方卷苦肝泰对慢生四氯化碳肝损伤的治疗作用,探讨其可能的作用机制,为中医药治疗肝病提供@定依据.方法:用CCl4灌胃4 wk复制慢性肝损伤模型.予卷苦肝泰6 wk.检测并观察了各组大鼠:肝线粒体膜总磷脂(DL)、总胆固醇(Chol)的含量及膜脂质组分磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、神经磷脂(SM)、心磷脂(CL)的含量.结果:与自然恢复组比较,卷苦肝泰煎剂能降低膜胆固醇含量,维持膜磷脂稳定;显著提高PC、PE、CL含量;降低膜老化指数Ch/PL,SM/PC.结论:卷苦肝泰具有保护肝线粒体膜的作用即抗膜磷脂降解作用;降低膜胆固醇含量;稳定膜流动性、防止膜老化.
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盐酸洛拉曲克长循环脂质体的制备及其对肝癌细胞的体外毒性
目的:研制出具有缓释作用的盐酸洛拉曲克长循环脂质体并考察其理化特性以及在体外的抗瘤效应.方法:用两亲性聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEGDSPE)对脂质体膜进行修饰,以薄膜挤压-硫酸铵梯度法制备盐酸洛拉曲克长循环脂质体;用MTT法比较盐酸洛拉曲克长循环脂质体与盐酸洛拉曲克普通脂质体及游离的盐酸洛拉曲克的体外细胞毒性.结果:制备的盐酸洛拉曲克隐形脂质体包封率达68%左右,粒径110nm左右;与普通脂质体及游离的盐酸洛拉曲克相对照,长循环脂质体显示了较好长效的毒性作用,2 h组长循环脂质体的ID50明显高于另外两组,而48 h组的ID50则与另外两组无显著差别.结论:新制备的盐酸洛拉曲克长循环脂质体在体外显示了其较好的缓释效应,可以弥补盐酸洛拉曲克在体内半衰期比较短的缺点.
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Stargardt病的病因及治疗展望
Stargardt病(STGD)是一种黄斑萎缩性遗传性疾病,多见于青少年时期发病,进行性中心视力减退,尚无有效疗法.近年来对STGD遗传学及发病机制的研究有了新的进展,其发病过程可概括为:(1)ABCA4基因的突变导致其编码产物Rim蛋白的缺陷;(2)视杆细胞外节膜盘上Rim蛋白的缺陷导致外节中N-亚视黄基磷脂酰乙醇胺(N-RPE)的积聚;(3)膜盘被视网膜色素上皮(RPE)细胞吞噬后,N-RPE的副产物A2E在RPE细胞中积聚并对其产生破坏;(4)RPE细胞的功能障碍或死亡导致光感受器细胞的萎缩.基础研究进展为临床治疗指明了方向.
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基于UHPLC-QTOF/MS技术RAW264.7巨噬细胞甘油磷脂成分的快速表征
采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间高分辨质谱联用技术(UHPLC-QTOF/MS)对RA264.7巨噬细胞甘油磷脂成分进行结构推断,运用修饰后的Bligh-Dyer法提取甘油磷脂,以流动相A:水(含10 mmol.L-1乙酸铵和0.25%乙酸),流动相B:乙腈-异丙醇(1∶1)(含10 mmol·L-1乙酸铵和0.25%乙酸)进行梯度洗脱,在ESI正负离子模式下进行数据采集.本实验推断出82个甘油磷脂成分,其中包括57个磷脂酰胆碱(PCs)、21个磷脂酰乙醇胺(PEs)、3个磷脂酰甘油(PGs)和1个磷脂酰肌醇(PI).本文建立的基于UHPLC-QTOF/MS液质联用技术的RAW264.7巨噬细胞甘油磷脂类成分分析方法快速、简便、可靠.
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麦胚凝集素修饰的胰岛素脂质体对小鼠口服吸收的促进作用
目的研究不同磷脂组成及麦胚凝集素(WGA)修饰脂质体对正常小鼠口服胰岛素的吸收促进作用.方法逆相蒸发法制备包裹胰岛素的磷脂酰乙醇胺(PE)脂质体和普通大豆磷脂(主要成分为磷脂酰胆碱,PC)脂质体.将WGA与PE结合物(wGA-PE)分别掺入上述两种磷脂制备的胰岛素脂质体中制成修饰脂质体.正常小鼠按胰岛素剂量每只7 u分别灌胃给予修饰PE脂质体或PC脂质体,未修饰的PE脂质体或PC脂质体,用葡萄糖酶试剂盒测定小鼠血糖.比较不同WGA-PE掺入浓度的影响.结果wGA修饰PE脂质体、修饰PC脂质体和未修饰PE脂质体口服后4 h血糖分别降至初始水平的(61.10±16.22)%,(64.72±22.90)%和(86.50±22.40)%,8 h降至(48.52±18.36)%,(46.36±15.12)%和(44.40±28.87)%,12 h为(63.65±16.40)%,(35.9±17.75)%和(72.85±24.08)%.PC脂质体几乎没有降糖作用,与生理盐水对照组相当.低浓度wGA修饰脂质体也表现了降糖作用.结论磷脂类型对脂质体的促进作用有明显影响,PE的促进作用明显强于PC,可能与PE在胃肠道通过氨基磷脂移入酶的快速移入作用有关.但WGA修饰脂质体中,改进胰岛素吸收的程度相近,表明在修饰脂质体中以WGA的特异性结合为主导作用而与磷脂的种类关系不大.
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抗磷脂抗体和狼疮性肾炎
1抗磷脂抗体及抗磷脂综合征1.1抗磷脂抗体(Antiphospholipidantibody,aPL)aPL是一族针对带负电荷磷脂或带负电荷磷脂与蛋白的复合物的异质性自身抗体的总称,是诊断抗磷脂综合征(Antiphospholipid Syndrome,APS)的条件之一.目前已知的aPL的靶抗原有三大类:①磷脂:心磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇;②磷脂-蛋白复合物:β2糖蛋白Ⅰ(β2-GP Ⅰ)、凝血酶原、纤溶酶、组织型纤溶酶原激活物、蛋白C、蛋白S、血栓调节素、膜联蛋白V、抗凝血酶原Ⅲ、PT复合物(Xa、V a、Ca、及磷脂)、Tenase复合体(因子Ⅸa、Ⅷa、Ca及磷脂)、高/低小分子激肽原等;③脂蛋白:氧化低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、载脂蛋白A-I.
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大豆磷脂的保健功能
大豆磷脂是指以大豆为原料所制成的一种混合磷脂,它是由卵磷脂(学名:磷脂酰胆碱,简称PC,高等级为PPC)、脑磷脂(学名:磷脂酰乙醇胺,简称PE)、肌醇磷脂(学名:磷脂酰肌醇,简称PI)和丝胺酸磷脂(又称磷脂酰丝胺酸,简称PS)等组成,还含有胆碱、肌醇、维生素E和生物素等成分,其中典型的为前三种,是组成人体细胞(细胞膜、核膜、质体膜)的基本成分,为人体生理功能所必需的物质,具有很高营养价值和保健功能,与蛋白质、维生素并列称为"第三营养素".大豆磷脂究竟有哪些保健功能呢?1、改善脑功能,增强记忆力磷脂代谢与脑的机能状态有关,随着年龄增长,人的记忆力会减退,这与乙酰胆碱含量不足有一定关系.
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甲状腺机能低下大鼠红细胞膜PE/PC比值的变化
为探讨甲状腺机能低下(简称甲低)时红细胞磷脂的代谢,我们采用CS-930型薄层色谱扫描仪测定了用甲基硫脲嘧啶(MTU)饮食饲养的不同日龄大鼠红细胞膜磷脂酰乙醇胺(PE)/磷脂酰胆碱(PC)比值的变化.
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卵磷脂类保健食品中卵磷脂主要组分的高效液相色谱法测定
[目的]建立卵磷脂类保健食品中卵磷脂主要组分磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)和磷脂酰肌醇(PI)的高效液相色谱测定方法. [方法]样品经萃取分离后,采用单元流动相为甲醇的高效液相色谱法(UV检测器)测定.[结果]方法的精密度为2.8%~8.4%,PC、PE和PI的检测限分别为0.2、0.06和0.6μg(进样10μL).PC、PE和PI的加标回收率分别为85.7%~107.0%、82.5%~97.5%和80.0%~93.3%. [结论]本方法操作简便,分析速度快,检测灵敏度高,适用于卵磷脂类保健食品中卵磷脂主要组分PC、PE和PI含量的测定.
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HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量
目的:采用HPLC法测定卵磷脂中6个成分的含量.方法:采用LiChrosphere 100 DIOL色谱柱(250 mm×4mm,5μm),以正庚烷:异丙醇(65:114)为流动相A,正庚烷:异丙醇:水(31:62:12)为流动相B,梯度洗脱,流速0.8mL/min,用蒸发光散射检测器进行检测.结果:磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为1.69~33.76μg(r=0.997 9),0.33~6.57μg(r=0.999 6),棕榈酸甘油酯、胆固醇、鞘磷脂和溶血性磷脂酰胆碱的低检测限分别为0.3、3、10和20 ng.结论:本方法操作简便、准确,可用于卵磷脂中各个成分的测定.
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麦胚凝集素修饰磷脂酰乙醇胺的制备
提取麦胚凝集素(WGA),通过碳二亚胺交联法使wGA与磷脂酰乙醇胺(PE)共价接合,制备wGA修饰的PE(WGA-PE).用2,4,6-三硝基苯磺酸法测定修饰程度,显微镜下观察合成产物的凝血活性.结果表明,3批wGA-PE 的修饰率为40%~70%,凝血活性与等蛋白浓度的游离凝集素接近.
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不同泌乳期人乳磷脂成分的研究
目的·获得上海地区部分人乳磷脂成分的新数据,比较不同泌乳期人乳磷脂成分的差异.方法·招募上海交通大学医学院附属新华医院产科2016年4—7月足月分娩的健康产妇.采集第3日的初乳、第10日的过渡乳、第45日的成熟乳,Folch法提取人乳脂肪后经固相萃取分离磷脂,用高效液相色谱-可变波长检测器对磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱及鞘磷脂进行定量分析.采用单因素方差分析和Games-Howell检验比较不同泌乳阶段人乳中磷脂成分的差异.结果·入选能提供至少1份母乳的乳母100名,共收集初乳70份、过渡乳96份、成熟乳82份.成熟乳总磷脂含量平均为(281.93±118.54)μg/g,明显低于初乳的(381.99±205.90)μg/g;在泌乳期的各个阶段,磷脂酰胆碱相对含量均高(53.74%~59.36%),鞘磷脂相对含量其次(28.12%~32.74%);随着泌乳期的延长,磷脂酰乙醇胺相对含量恒定(P=0.617),磷脂酰胆碱相对含量逐渐减少(P=0.000),而鞘磷脂相对含量逐渐增加(P=0.000).结论·鞘磷脂和磷脂酰胆碱是人乳磷脂的主要成分;人乳磷脂含量随泌乳期延长而改变,成熟乳磷脂总量低于初乳和过渡乳;磷脂酰乙醇胺相对含量在各泌乳阶段保持一致,磷脂酰胆碱相对含量逐渐减少,而鞘磷脂相对含量逐渐增加.
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抗心磷脂抗体与抗β2糖蛋白1型抗体在临床上的应用
磷脂是一组构成细胞膜的脂类,这些分子不仅有维持细胞膜的功能,而且有调节细胞膜表面分子的作用,在凝血中有重要作用.磷脂可分为带负电荷磷脂,包括心磷脂、磷脂酰丝胺酸、磷脂酸、磷脂酰肌醇;中性磷脂,磷脂酰胆碱;两性磷脂,磷脂酰乙醇胺.
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高效液相色谱法测定保健食品中脑磷脂
目的:建立脑磷脂类保健食品中脑磷脂的高效液相色谱测定方法.方法:样品经提取后,采用单流动相为甲醇的带紫外检测器的高效液相色谱法测定.结果:方法的精密度为1.5%;检测限为0.5μg;回收率为90.0%~94.O%.结论:本方法操作简便、分析速度快、检测灵敏度高,适用于脑磷脂类保健食品中脑磷脂的测定.