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吹扫捕集-气相色谱/质谱法测定水中挥发性有机物
本文用吹扫捕集-气相色谱/质谱法测定水中的挥发性有机物。实验表明,此方法可以快速分离出27种挥发性有机物,且相关系数基本达到0.998以上,线性关系良好.通过测定乙苯质控平行样及与真实浓度对比,论证了此方法的精密度和准确度。
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变色液体培养基快速培养分支杆菌的临床应用
快速分离临床标本中分支杆菌一直是结核病学科领域中迫切需要解决的课题.
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金黄色葡萄球菌及SPA快速分离检验新技术的研究
免疫磁珠是一项免疫学技术,一般由载体磁珠和免疫配基结合而成.迄今,我国尚没有批量生产成为商品的高质量免疫磁珠.金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)是致病性金黄色葡萄球菌细胞表面一种特有的蛋白质,它具有与人IgG的Fc片段特异性结合的能力,每个SPA分子可以同时结合2个人IgG分子,因此,可用来建立一种致病性金黄色葡萄球菌快速分离检验的体系.
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多重聚合酶链反应联合芯片电泳在人乳头瘤病毒基因分型检测中的应用
研究证实HPV感染是CIN和宫颈癌的主要病因,而且不同HPV亚型感染的致病性和后果也有差异~([1-2]).HPV分型检测对临床CIN和宫颈癌筛查和评估、病程的进展监测、治疗后的随访、以及人群的流行病学状态和病毒疫苗的研制都有重要意义.目前用于临床的HPV检测技术主要有杂交法与实时荧光定量PCR~([3]),但这2种方法存在操作复杂、检测时间较长等不足.例如,导流杂交基因芯片技术即凯普导流杂交.HPV DNA检测法虽然能同时对多种HPV基因型进行分型检测,但操作繁琐、杂交时间较长~([4-5]).芯片电泳(microchip electrophoresis)具有快速分离和低样品消耗量等优点~([6]),目前已广泛应用于多种类型基因分析研究~([7]).本研究建立一种基于芯片电泳的HPV快速分型方法,为临床筛查提供依据.
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一种从新鲜脑胶质瘤标本中分离小胶质细胞的改良方法
目的 建立一种快速有效从脑胶质瘤组织中分离小胶质细胞的改良方法.方法 采用密度梯度离心法联合磁珠分选法从脑胶质瘤组织中分离小胶质细胞.用流式细胞术、Western blot 和细胞免疫荧光检测细胞纯度,流式检测免疫表型,趋化及吞噬实验检测其生物学功能;对从不同级别胶质瘤组织分离的小胶质细胞产量进行定量分析.结果 收获细胞具有小胶质细胞典型形态及Iba1染色阳性,纯度可达(95.1±4.2)%;流式细胞术检测显示其表达CD11b、HLA-DR等,并对ATP 的趋化作用呈浓度依赖性,且在体外具有良好的吞噬乳胶微球(latex beads)的功能.此外,每克胶质瘤组织分离小胶质细胞细胞产量:低级别组(n=4),(4.0±0.5) ×105;高级别组(n=8),(4.3±0.4) ×105,两组差异无统计学意义(P>0.05).结论 利用改良的分离小胶质细胞方法能从新鲜脑胶质瘤组织中快速获得大量高纯度小胶质细胞.
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HPLC法测定苦参素注射液的含量
苦参素系从苦豆科植物苦豆子中提取的混合生物碱,其主要成分为氧化苦参碱及少量的氧化槐果碱,目前临床上用于治疗慢性乙型肝炎及抗肿瘤等[1].苦参素注射液质量标准中含量测定的方法为化学滴定法[2],此方法中,样品需经过强碱性阴离子树脂置换出氧化苦参碱及氧化槐果碱等混合生物碱,然后用硫酸滴定液滴定.此方法比较繁琐且所得到的结果误差较大,因此,本文采用高效液相色谱法测定苦参素注射液的含量,能够快速分离主成分氧化苦参碱与其它生物碱,方法简便,结果准确,重现性好.
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快速分离YAC末端的方法
近年来发展的酵母人工染色体Yeast Artifical Chromosome(YAC)可以克隆长至几百kb的DNA片段.目前世界上已有一些YAC文库,可以用PCR方法或传统的原位杂交法来筛选高密度克隆膜以得到单一YAC克隆,建立染色体特定区域的YAC重叠群,为研究此区域的DNA结构与功能及克隆其基因提供基础.
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SARS病毒知多少?--台湾大学完成的基因序列测定统计误差小
SARS病毒是新发现的一种冠状病毒,和已知的人类冠状病毒不同,SARS病毒是从病人身上分离出来的,目前尚无从每一个病人快速分离的方法,所以分离一株病毒就是一项研究成果.早分离出SARS病毒是重大创新发现,美国国立卫生研究院(NIH)下属国家生物信息中心(N CBI)网站的SARS coronavirus页面列出了已分离的60种SARS病毒株(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?id=227859)及基因序列的完整测定.
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支气管肺泡灌洗液BACTECMGIT960system快速分离结核杆菌的效果评价
结核分枝杆菌培养是结核病细菌学检查的金标准[1],而目前常规使用结核分枝杆菌改良罗氏培养基培养法,存在结核菌生长缓慢,阳性率低,严重影响结核病的诊断治疗的现状,因而寻找一种快速培养结核分枝杆菌的方法对结核病诊断治疗有着重大意义.2007年我院购进的BACTECMGI960system是培养结核分枝杆菌的一种新方法、新技术.为了更好更快更准确为临床治疗提供检验依据,我院应用了作为标本相结合的分离培养结核分枝杆菌的新方法.为了解其分离结核分枝杆菌的效果,以常规的改良罗氏培养基、结核菌快速培养仪和常规痰标本、支气管肺泡灌洗液两两结合对比研究,报告如下.
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血清分离胶技术在交叉配血中的应用
血清分离胶是一种由数种化合物组成的半固体惰性胶,其密度约为1.03×103 kg/m3,与血液混合离心后分离成血清(上层)、分离胶(中层)、血细胞(下层),用血清分离胶真空采血管采集受血者交叉配血标本,可以快速分离出血清和血细胞,在临床急诊交叉配血中具有较高的应用价值.为了解血清分离胶是否影响凝聚胺交叉配血的结果,笔者作了比较,现报告如下.
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高效液相色谱法测定6种水溶性维生素
水溶性维生素包括Vit C、Vit B1、Vit B2、Vit B6、Vit B12、烟酸、叶酸、生物素、泛酸等.在以前的测定中应用较多的方法有光度法、微生物法、酶标法等,这些方法费时且不能同时测定.高效液相色谱法可快速分离、能同时测定多种水溶性维生素.
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小肠结肠炎耶尔森氏菌的快速分离、鉴定、分型及基础性研究
1 研究、试验方法或技术路线1) 从南京市肉联厂屠宰场共采集猪扁桃体,猪屠体,地面污水,砧板,围裙等222份样,检测了小肠结肠炎耶尔森氏菌在上述样本中的污染状况,并对分离到的菌株进行血清型、生物型分布研究.2)采集农贸市场散装生鲜猪、牛、羊肉、鲜鱼,冷藏冷冻禽肉,生禽肉共95份检测该菌,并对检出的菌株进行进行血清和生化分型.
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兔阴茎海绵体平滑肌细胞的快速分离及鉴定
目的探讨兔阴茎海绵体平滑肌细胞快速分离方法,为应用膜片钳技术研究阴茎勃起机制提供实验材料.方法采用木瓜蛋白酶和胶原酶两步酶解消化法,快速分离出新西兰大白兔阴茎海绵体平滑肌细胞并应用免疫组化鉴定.结果分离的细胞成活率较高,贴壁呈长梭形,胞膜光滑完整,胞浆均匀,可用于膜片钳记录.免疫组化鉴定为兔阴茎海绵体平滑肌细胞.结论酶解消化快速分离兔阴茎海綿体平滑肌细胞为全细胞膜片钳技术研究阴茎勃起功能障碍的电生理机制提供了较好的实验材料.
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一起混合致病菌质控样品的快速分离与鉴定
在江苏省疾病预防控制中心的质控考核中,要求对混有三种未知肠道致病菌的半固体标本作分离鉴定,我们在短时间内,准确、有效地完成了这项工作.现将结果报告如下.
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抗酸性分枝杆菌快速培养仪960的应用与研究
在世纪之交,结核病仍是全球严重性的公共卫生问题,其死亡率居传染性疾病首位.由于耐药及耐多药结核病的增多及流行,使抗酸性分枝杆菌的快速分离培养成为实验室急需解决的问题.我院应用美国BD公司(Becton Dickinson and Company)的抗酸性分枝杆菌快速培养仪,现将结果分析并加以讨论.
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变色液体培养基在分枝杆菌快速分离、鉴定及药敏试验检测中的应用
近10余年来,分枝杆菌感染尤其是结核病的发生率在发达国家呈上升趋势,且仍然是发展中国家严重的公共卫生问题[1].分枝杆菌诊断技术的发展远远不能满足临床实验室的需要.传统固体培养基虽可直接获取结果,但分离、鉴定分枝杆菌及药敏试验需2~3个月,且其在制作过程需加热,培养基中蛋白质对药物有吸附作用,故仅用于常规抗结核药敏试验,不适合用于分枝杆菌低抑菌浓度(MIC)测定.
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常温液相色谱法快速测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠
液相色谱测定各类食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠时,样品经透析[1]处理耗时长,可乐饮料如果经过脱气、稀释、过滤的简单处理即上机分析,极易堵塞色谱柱,造成柱压升高、柱效下降,对色谱柱造成难以修复的损坏.酸奶、活性乳、果汁、花生乳等黏稠的饮料、固体样品等更不可能简单处理即上机分析,而各种样品中的许多杂质被氢氧化钠-硫酸锌[2]蛋白质沉淀剂沉淀、过滤后与被测组分分离,对色谱柱的损害大大降低.在一定的色谱条件下,常温即可快速分离4种被测组分.
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利用CHROMagarTM沙门菌显色平板快速分离3株普顿沙门菌
于2005年8~10月间在从业人员肛拭体检中分离到3株非A-F群沙门菌,经CHROMagarTM沙门菌显色平板分离培养和特征菌落、形态、生化、O-I噬菌体裂解试验、血清学试验证实均为沙门菌普顿血清型(Salmonella ser putten,13,23:d:l,w),为本地区首次检出.
关键词: CHROMagarTM沙门菌显色平板 快速分离 普顿沙门菌 -
快速分离液相色谱法测定三七中3种皂苷的含量
目的 用快速分离液相色谱法分离测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.方法 采用ZOBAX SB-C18柱(3.0 mm×50 mm,1.8 μm);流动相:A为乙腈,B为水,梯度洗脱0~12 min为18%A,~23 min为18%A→35%A,~26 min为35%A;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:203 nm;柱温:35 ℃.结果 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.000~0.666,0.000~1.077 和0.000~1.181 μg,相关系数均为0.999 9;平均加样回收率分别为98.33%,97.99%和99.56%;RSD分别为1.77%,1.48%和0.50%(n=6).结论 该方法具有快速、准确、重复性好等特点,适合于三七的含量测定.
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西洋参中人参皂苷Rg1人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量测定
目的 用快速分离液相色谱法分离测定西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的含量.方法 采用ZOBAX SB-C18柱(4.6 mm×50 mm,1.8 μm),流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱(0~25min,5%A→20%A;~35min,20%A→40%A);流速:2.0 mL·min-1,测定波长:203 nm,柱温:35 ℃.结果 人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的线性范围分别为0.12~2.49,0.61~12.15,1.42~28.48 μg,相关系数分别为0.999 8,0.999 6,0.999 9;平均加样回收率(n=6)分别为97.8%,98.1%,98.3%;RSD分别为1.0%,0.8%,0.4%.结论 该方法具有快速、准确、重复性好等特点,适合于西洋参的含量测定.