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变色液体培养基快速培养分支杆菌的临床应用
快速分离临床标本中分支杆菌一直是结核病学科领域中迫切需要解决的课题.
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分枝杆菌快速变色液体培养基临床应用的评价
长期以来,痰涂片抗酸染色镜检和细菌培养仍是现阶段我国临床常规确诊肺结核病的主要依据,传统的罗一琼(Lowenstein-Jensen,L-J)培养基也一直被延用至今,但是因其生长周期长(4~8周),不利于肺结核病例的早期诊断和及时治疗,目前临床上迫切需要一种新型快捷的培养基替代L-J培养基.近年来,分枝杆菌快速变色液体培养基在国外广泛应用[1].熊礼宽等[2]于2001年报道了一种新型的分枝杆菌快速变色液体培养基与改良L-J培养基的比较研究.为了寻找替代传统培养方法,进一步提高传染源的早期实验室发现效率,我们于2002年开展了分枝杆菌快速变色液体培养基临床应用的研究,现将结果报道如下.
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分支杆菌快速变色液体培养基临床应用的评价
目的:评价快速变色液体培养基对分支杆菌的检测与肺结核病早期诊断的临床应用和推广价值.
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一种新型快速检出分枝杆菌变色液体培养基的评价
结核病的早期发现主要靠实验室诊断,涂片抗酸染色(或荧光染色)找抗酸杆菌阳性率低(10%~20%);常用的固体培养基阳性率虽可达40%。但时间长。尽管BACTEC 460TB检测系统能快速检出分枝杆菌,但其仪器及试剂价格昂贵、且有放射性污染[1]。近年来,变色液体培养基在国外应用的越来越广泛[2]。我们将一种新型的分枝杆菌快速变色液体培养基与改良罗-琼(Lowenstein-Jensen,L-J)培养基进行了比较研究,现将结果报道如下。 一、材料 1.标准菌株:人型结核分枝杆菌、浅黄色分枝杆菌、草分枝杆菌、戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、胞内分枝杆菌、马耳摩分枝杆菌、爱知分枝杆菌、田鼠分枝杆菌、偶发分枝杆菌、副偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟亚种、龟分枝杆菌脓肿亚种、耻垢分枝杆菌、次要分枝杆菌、非洲分枝杆菌、胃分枝杆菌、不产色分枝杆菌、金色分枝杆菌、新金色分枝杆菌、鸟分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、卡介苗和蟾蜍分枝杆菌由我们研究所保藏。 2.标本:141份临床标本,其中139份痰、1份伤口脓性分泌物和1份支气管肺泡灌洗液。 3. 快速变色液体培养基:由深圳市怡百世生物技术有限公司提供。其主要成分为磷酸盐缓冲液、谷氨酸钠、多种维生素、多种微量元素、甘油、马血清、变色剂以及甲氧苄氨嘧啶、氨苄青霉素、多粘菌素B、两性霉素B和萘啶酸等多种抗生素。 4. 改良罗-琼(L-J)培养基:按照文献[1]配制。 二、方法 1.取对数生长期的标准人型结核分枝杆菌和偶发分枝杆菌于含10%吐温80磨菌瓶中,磨菌混匀,用无菌磷酸盐缓冲液调其浊度为No1 MacFarland单位,再用无菌磷酸盐缓冲液作1∶10系列稀释,各分别接种100 μl于变色液体培养基和改良L-J培养基,37℃培养。当培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀时,取少量液体涂片,进行金胺O荧光染色证实为分枝杆菌。 2. 标本处理:标本经2~4倍体积的4%NaOH消化20 min,离心10 min,沉淀经无菌磷酸盐缓冲液洗涤2次,再加入400 μl无菌磷酸盐缓冲液,混匀后,分别取200 μl接种于变色液体培养基和改良L-J培养基,37℃培养。 3.结果观察与报告:变色培养基接种后,每24 h观察1次,2周后每周观察3次,若培养基变为紫红色或底层有紫色颗粒沉淀,经荧光染色证实有分枝杆菌时,报告分枝杆菌生长阳性。改良L-J培养基接种后3 d、7d观察结果,以后每周观察1次。8周未见液体培养基变紫红色或底层有紫色颗粒沉淀,固体培养基上未见菌落,报告分枝杆菌培养阴性。
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变色液体培养基系统快速鉴定结核分枝杆菌和耐药性测定
由于固体培养基鉴定结核分枝杆菌(结核菌)及药敏试验均需28 d,其制作过程需加热,且培养基中蛋白质对药物有吸附作用,故仅用于常规抗结核药敏试验,不适合用于分枝杆菌低抑菌浓度(MIC)测定.多耐药结核菌和非结核菌对常用抗结核药物耐药,因此急需一种快速测定分枝杆菌药敏的方法,筛选新的药物.尽管Bactec系统可用于分枝杆菌药敏试验和MIC测定[1],但试剂和仪器昂贵.因此,我们采用快速变色液体培养基系统鉴定结核与非结核分枝杆菌,并测定了结核菌常规药物的敏感性和非结核分枝杆菌对9种药物的MIC,结果如下.一、材料和方法1.标本来源:128株结核菌,34株非结核分枝杆菌(其中15株龟分枝杆菌脓肿亚种、4株龟分枝杆菌龟亚种、14株偶发分枝杆菌和1株胞内分枝杆菌).上述菌株为深圳地区和广州地区分离株.2.结核菌快速鉴定及药敏试剂、分枝杆菌MIC测定试剂和菌株鉴定试剂:对硝基苯甲酸(PNB)培养基、5%氯化钠耐受试验、芳香硫酸酯酶(3、14
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分支杆菌快速变色培养基应用初探
结核分支杆菌(MTB)的快速培养历来是国内外学者关注的热门课题[1-3]。本文报道了快速变色液体培养基临床应用结果,并与涂片和罗氏培养结果进行比较。 材料与方法(1)分支杆菌快速变色液体培养基由深圳怡百世公司提供。(2)50份待检患者痰标本取自我市肺科医院住院患者。其中肺结核39例,非结核性呼吸系疾病患者11例。(3)痰涂片和罗氏培养按常规方法进行。(4)变色液体培养基接种标本量为0.4 ml,37℃培养,每天观察结果1次,4周仍无生长为阴性。若培养基变紫色,底层有紫色颗粒状沉淀,且无混浊现象为分支杆菌培养阳性。
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变色液体培养基快速检测结核分枝杆菌及其耐药性研究
目前用于检测结核分枝杆菌及其耐药性的方法有多种,但大部分检测方法所需时间都较长,以培养为基础的绝对浓度法或者比例法需要2~3个月的时间才能得到药敏结果,因此建立快速、简便、准确的检测方法就成为临床研究领域的一个重要课题.
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变色液体培养基快速测定分支杆菌耐药性
由于罗-琼固体培养基鉴定结核分支杆菌及药敏试验需28d,其制作过程需加热,且对药物有吸附作用,Bactec460和960系统可用于分支杆菌药敏试验,但测定试剂和仪器昂贵.因此,我们采用快速变色液体培养基系统鉴定结核与非结核分支杆菌,并测定结核分支杆菌对10种药物的敏感性.现将结果报告如下.
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变色液体培养基快速检测分枝杆菌
目的评价变色液体培养基快速检测分枝杆菌的应用价值.方法利用变色液体培养基接种痰标本培养,并与改良酸性罗-琼氏(Lowenstein-Jensen,L-J)培养基平行比较.结果 911例痰标本的涂阳检测率为29.1%,变色液体培养阳性率为43.4%,略高于改良罗-琼氏(L-J)培养阳性率40.1%,变色液体培养基和改良罗-琼培养涂阳平均检出时间分别为6和18 d,涂阴平均检出时间分别为15和28 d,污染率分别为2.7%和2.1%.结论变色液体培养基检测结核分枝杆菌,具有快速、简便、可靠和实用性好的特点.
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应用快速分枝杆菌变色液体培养基检出咽部分枝杆菌1例
分枝杆菌引起的咽部感染极其少见,我们应用快速分枝杆菌变包液体培养基检出咽部分枝杆菌1例,报道如下:
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变色液体培养基在分枝杆菌快速分离、鉴定及药敏试验检测中的应用
近10余年来,分枝杆菌感染尤其是结核病的发生率在发达国家呈上升趋势,且仍然是发展中国家严重的公共卫生问题[1].分枝杆菌诊断技术的发展远远不能满足临床实验室的需要.传统固体培养基虽可直接获取结果,但分离、鉴定分枝杆菌及药敏试验需2~3个月,且其在制作过程需加热,培养基中蛋白质对药物有吸附作用,故仅用于常规抗结核药敏试验,不适合用于分枝杆菌低抑菌浓度(MIC)测定.
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变色液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究
目的:评价变色液体培养基在结核病早期诊断中的应用.方法:通过选择确诊的肺结核200例,同时用4种方法检验结核分枝杆菌,比较方法的特点和优劣.结果:快速液体变色培养法与涂片法相比阳性率高并且有显著性差异,高于L-J培养法,低于BACT/ALERT法,但与两者比较均无显著性差异.结论:快速液体变色培养法用于结核杆菌培养具有快速廉价,结果可靠,操作简单等优点.