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内吗啡肽在子宫内膜异位症大鼠模型中的分布及意义
子宫内膜异位症(内异症,EMS)日益受到人们的关注,内异症所引起的痛经、慢性盆腔疼痛和不孕,严重影响着中青年妇女的健康和生活质量.内吗啡肽是1997年新发现的一种调节多肽,其与生殖系统的关系受到国内外学者的关注.为此,我们自2006年3月至2006年4月建立子宫内膜异位症大鼠模型,观察内吗啡肽在大鼠中枢神经系统及生殖系统的分布及变化,希望从新的角度探索子宫内膜异位症的发病机制.
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大鼠中枢神经系统一氧化氮对电针镇痛作用影响的研究
中枢神经系统一氧化氮(nitric oxide, NO)在痛和痛觉调制过程中的作用及其机制,受到国内外广泛关注,积累了大量的实验资料.但迄今为止,电针(EA)镇痛时中枢神经系统NO的作用及其机制尚不清楚.本工作电针大鼠双侧"足三里"穴,观察向大鼠侧脑室微量注射NO前体和供体物质、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂以及血红蛋白(Hb)、亚甲基蓝(MB)等,对大鼠痛和电针镇痛作用的影响,试图探讨NO在中枢神经系统痛觉调制和针刺(电针)镇痛过程中的作用及其机制.
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吸入麻醉剂诱导c-fos基因和一氧化氮合成酶在大鼠中枢神经系统的共同表达
在笑气(N2O)被用于手术麻醉的100多年之后,另一种相关的性质不同的无机气体一氧化氮(NO)开始受到神经科学家的重视。新研究表明,这种有毒气体分子可能是一种内源性神经递质[1]。NO由L-精氨酸通过一氧化氮合成酶(NOS)生成[2]。在中枢包括大脑皮层、海马、小脑和脊髓等不同水平均可找到NOS[3]。研究还表明NO在外周及中枢的不同水平的痛觉调节中起一定作用,并推测与麻醉作用也有重要关系,但尚无明确的形态学实验证据。本研究将运用免疫组织化学双标方法,研究吸入麻醉剂对c-fos基因和NOS的关系,为进一步深入研究全麻机制提供形态学依据。
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细胞因子信号转导抑制因子3在成年大鼠中枢神经系统内的表达与定位
JAK/STAT(Janus kinase/signal transducers and activators of transcription)细胞因子信号转导途径在神经系统中的作用日益显著,该途径广泛参与神经细胞的生长发育、分化及衰老等过程,并与脑肿瘤、缺血损伤等神经系统病理过程密切相关[13].近来研究发现细胞因子信号转导抑制因子(suppressors of cytokine signaling,SOCSs)是对JAK/STAT活动进行负反馈调节的重要蛋白家族.已证实此家族至少包括8位成员,即SOCS-1~SOCS-7和CIS.其中SOCS-3在脑发育、衰老等过程中均有所表达,并参与神经内分泌系统的功能调节[45],但目前尚未见到SOCS-3蛋白在中枢神经系统内分布及细胞定位的形态学报道.本研究用神经免疫细胞化学方法对SOCS-3在中枢神经系统分布和细胞定位进行了观察.
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细胞外基质蛋白SC1及其在中枢神经系统的作用
细胞外基质蛋白SC1(extracellular matrix associated sparc-like 1,SC1/SPAR-CL1)又名BEN,HEVIN,DM-GRASP,ECM2,MAST9,RAGS1,属于SPARC家族抗黏附分子,是一个与细胞外基质分子富含半胱氨酸酸性分泌型糖蛋白(secreted protein,acidic and rich in cytosine,SPARC)具有同源性的小分子,SC1首先由Johnston和Coworkers从大鼠中枢神经系统(central nervous system,CNS)的突触连接糖蛋白表达抗体的分子文库中筛选分离得到.
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新生大鼠中枢神经系统不同区域细胞生长的形态学比较研究
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大鼠中枢神经系统连续切片显示神经核团
大鼠中枢神经系统(CNS)连续切片是神经生物学教学重要的实习标本,它能显示大鼠神经传导通路、位置、走向及其上下左右邻里关系,尤其通过CNS连续切片的观察和思维联想,有助于学员建立完整的直观的CNS 的立位体形象.目前此类工作国内外研究较少,开展的工作也不多,有一些介绍连续切片制作方法,但多数局限于火棉胶切片,其过程相当繁琐,难以大量制作,且连续切片有一定困难.为此我室申请了一项校管理题,专门对制作方法进行研究,现就目前完成的工作介绍一下.材料和方法:1.健康成年Wistar大鼠,1%戌巴比妥钠腹腔注射麻醉,心脏穿刺10%Formalin灌注固定.取嗅脑至脊髓尾段,10%Formalin浸泡固定3d以上.2.按30%蔗糖比例加入蔗糖,浸泡3d,Leica恒冷箱切片机切片, 厚30μm.3.切片入蒸馏水,30min两次,入0.2%硫堇水溶液染5~10mi n,蒸馏水分化,室温自然干燥,二甲苯透明,Dpx封固.结果:大鼠CNS各段面切片神经元尼氏体呈紫蓝色,神经胶质细胞和其它细胞胞核呈淡蓝色.讨论:制片方法方面我们同时进行了石蜡包埋切片,切30μm厚片,效果不甚理想,进行火棉胶包埋切片,由于连续切片方面的问题也做得不好,唯有冰冻切片进行得很顺利,而且染色不掉片.染色方面我们选择硫堇染色,尼氏体呈鲜蓝色,背景对比好.要注意载玻片用蛋白甘油处理,稍稍多涂一些;冰冻切片放室温自然晾干,染色时间不宜过长.
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大鼠中枢神经系统连续切片制作的实验研究
大鼠中枢神经系统 (central nervous system,CNS)显示神经核团和/或神经纤维束的全程连续切片标本是神经生物学教学的重要的实习标本,也是神经生物学研究工作中的重要参考;但这类标本比较缺乏,尤其是同时显示神经核团和神经束的标本更不易制作, 而且这方面的实验研究也较少.现有的一些连续切片制作方法,大多局限于火棉胶包埋切片 ,其过程相当繁琐,制作周期长,已有的染色方法多为显示单一结构的方法.为了教学和科研工作的需要,我们进行了CNS全程连续切片和染色方面的实验研究.材料和方法:健康成年Wistar大鼠,重250-300g,1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉.取出嗅脑到脊髓腰膨大的完整的CNS.10%中性福尔马林浸泡固定2周以上,按30%蔗糖比例加入蔗糖 ,4℃,3d.将完整的CNS按顺序修成厚2cm的块待切.低温冰箱(-70℃)速冻 ,恒冷箱切片机切片,厚30μm,间张贴片,共制成两套CNS连续切片.室温干燥1周左右.染色:(1)冰冻切片从无水酒精下行至蒸馏水,各20min.(2)入2.5%铁铵矾水溶液中媒染4-6h,蒸馏水速洗.(3)入苏木精液(10%酒精苏木精5ml+蒸馏水 100ml)染色2-6h,蒸馏水速选.(4)入2.5%铁铵矾水溶液中分色,镜检至神经纤维束呈兰色,神经核团呈兰黑色.(5)自来水冲洗,晾干,无水酒精脱水,10%石碳酸二甲苯透明,DPX封片,结果:CNS神经纤维及神经纤维束呈鲜兰色,神经元呈兰黑色, 其它细胞胞核呈黑色.讨论:本实验是将CNS速冻后制作连续冰冻切片,同时显示神经纤维束和神经核团,方法简便,结果稳定,重复性好.要注意的问题是冰冻切片需经酒精脱脂 ,媒染铁铵钒水溶液应新鲜配制,CNS各段媒染及染色时间略有不同,应作适当调整.
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Ⅲ.Nogo-A:一种髓鞘源性神经突生长抑制因子和单克隆抗体IN-1的抗原
成人脑和脊髓轴突损伤后的再生能力是非常有限的.在大鼠中枢神经系统,NI220/250是一种抑制神经突生长的髓鞘蛋白,针对NI220/250的一种单克隆抗体IN-1,可以使中枢神经损伤代偿性再生[1-4].我们克隆了nogo A基因,编码NI-220/250的cDNA,nogo基因编码至少三种蛋白(Nogo-A,-B和-C),重组Nogo-A可以被单克隆抗体IN-1识别,可以很敏感地抑制背根神经节(DRG)和3T3成纤维细胞的生长.针对Nogo-A的抗体可以使中枢神经髓鞘和少突胶质细胞着色,并能使DRG神经突长入中枢神经髓鞘和视神经移植物.这表明Nogo-A是一种神经突生长抑制因子及一种由少突胶质细胞产生的IN-1的抗原,由此可以引出一些新的物质,导致中枢神经再生或可塑性成为可能.
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代谢型谷氨酸受体7亚型在大鼠中枢神经系统内的分布