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颅骨对磁感应断层成像信号检测影响的仿真与实验研究
采用仿真和实验研究颅骨对磁感应断层成像(MIT)信号检测的影响.使用Comsol软件建立3层球形仿真颅脑模型,仿真计算颅骨电导率对MIT信号检测的影响.使用螺线管线圈、后置电路及数据接收仪器搭建单通道磁感应信号测量实验系统,利用琼脂和NaCl溶液制作与真实颅脑电导率分布相近的脑出血分层模型,模型外径为158 mm;后采用有颅骨和无颅骨两种模型,测量无病变及不同病变位置情况下MIT信号的相位变化,模型中心与检测线圈相距85 mm.实验结果显示,在无病变和病变分别位于X-Y平面上坐标为(-40,0)、(0,0)和(40,0)的位置时,有、无颅骨数据的幅值比例分别为0.57、0.59、0.42、0.61,其中,坐标点(-40,0)代表y轴左侧距离激励线圈45 mm的位置,坐标点(40,0)代表y轴右侧距离接收线圈45 mm的位置.当病变存在时,有、无颅骨数据的变化趋势均为:病变位于坐标点(-40,0)时大,病变位于坐标点(40,0)时次之,病变位于坐标点(0,0)时小.实验结果表明,颅骨对MIT信号的数据大小有衰减作用,但不影响数据的变化趋势,提示在实际应用中结合高精度检测设备,可实现颅内病变的无创、无接触图像监测.
关键词： 磁感应断层成像(MIT) 颅骨 脑出血模型 仿真 琼脂模型 -
粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血后脑组织NF-κB和 IL-1β表达变化的影响
目的：：观察脑出血( ICH)后粒细胞集落刺激因子( G-CSF)对炎症因子NF-κB和IL-1β表达的影响,探讨G-CSF对ICH后脑组织继发性炎症损伤的保护机制。方法：将健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和G-CSF治疗组(治疗组),每组10只。采用注入自体血方法复制脑出血模型。 Garcia等方法进行神经功能障碍评分；干湿重法检测脑组织含水量；免疫组织化学SP法检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达；免疫印迹检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达水平。结果：与假手术组比较,大鼠脑出血后神经功能障碍评分降低,NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量明显增多(P<0.05)；G-CSF干预后NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量显著下调(P<0.05),与脑神经功能障碍评分上调相一致。结论：粒细胞集落刺激因子可能通过抑制炎症因子NF-κB和IL-1β的表达,减轻脑出血血肿周围组织的炎性反应,改善神经功能损伤,起到神经保护作用。
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大鼠脑出血早期出血灶周围黏附分子的表达
脑出血是病死率和致残率极高的常见病之一,治疗效果不理想.许多研究证实脑出血区及其周围存在一定的炎性反应[1,2],我们用免疫组化方法和免疫荧光双标记技术对脑出血后早期病变周围黏附分子的表达变化进行研究.1.材料和方法:雄性SD大鼠12只,体重230～250 g,采用胶原酶和肝素混合注射制作纹状体脑出血模型[3].将动物随机分为脑出血后4、14和24 h组,常规灌流固定,取出血灶及其周围组织冰冻切片,片厚40 μm.免疫组化ABC法[4]:一抗为山羊抗大鼠细胞间黏附分子(ICAM)-1、血管细胞黏附分子(VCAM)-1和E-选择凝集素(1∶500),硫酸镍铵加强DAB蓝色反应法呈色.
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脑出血不同时机灶周损伤的实验研究
通过观察不同时间点乳猪脑出血模型血肿周围脑组织的损伤程度,旨在探讨佳手术时机,为界定脑出血的治疗时机提供理论依据.
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清开灵注射液对实验性脑出血大鼠脑内P物质的影响
采用胶原酶注入脑内造膜法,经ABC免疫组织化学技术显示了清开灵注射液对脑出血大鼠脑内P物质(SP)的分布及含量影响.揭示清开灵注射液治疗脑中风的机理之一很可能是通过调节脑内SP的含量达到治病疗效的.
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大鼠脑出血模型在细胞移植治疗中枢神经损伤中的应用
脑出血模型自建立至今已有近40年时间,模型制作方法及研究方向均有巨大的变化.目前,大鼠脑出血模型主要用于细胞移植治疗中枢神经损伤方面的研究.胶原酶与自体血注入大鼠尾状核建立的脑出血模型是常用的方法;胶原酶具有制作方法简单的特点,自体血模型的特点是其更接近临床过程.脑出血模型制作成功后可以从大鼠行为学和组织学变化两方面来评价细胞移植治疗大鼠脑出血的疗效.脑出血模型无论从疾病的发生率和严重性来讲,还是该模型的稳定性及重复性角度来讲,都是细胞移植治疗中枢神经损伤的重要动物模型.
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复方甘油与甘露醇对实验性脑出血犬降颅压作用的比较
甘露醇和复方甘油制剂均为高渗脱水剂,是临床上常用的降颅压药物.我们在实验性脑出血模型中对两药进行降颅压效果的观察,报告如下.
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补阳还五汤对脑出血模型大鼠脑组织CXCR4-PI3K自噬信号传导通路及Beclin-1的影响
背景：补阳还五汤是治疗脑出血的临床常用药，前期研究已发现其出色的神经保护作用，能够高效的抑制神经细胞凋亡。自噬活动与神经细胞凋亡关系密切，CXCR4-PI3K自噬信号传导通路在少许的临床常用药中已得以验证，然而关于补阳还五汤对其影响却知之甚少；同时对于Beclin-1在补阳还五汤神经保护的研究中尚未见报道。
目的：探究补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织CXCR4-PI3K自噬信号传导通路与Beclin-1的影响及其相关机制。
方法：按照Rosenberg法复制脑出血大鼠模型，以补阳还五汤灌胃给药，采用Western blot法检测Beclin-1蛋白，免疫组化方法检测PI3K、AKT、基质细胞衍生因子1、CXCR-4蛋白表达，TUNEL法检测细胞凋亡情况。
结果与结论：①补阳还五汤灌胃给药后，能够减轻脑出血大鼠神经细胞凋亡数量，在脑出血发生后几小时上调Beclin-1、PI3K、AKT、基质细胞衍生因子1、CXCR-4等蛋白的表达，发挥脑保护效果；②补阳还五汤能够激活 CXCR4-PI3K 自噬轴信号传导通路，既能够激发细胞自噬，又能够调控细胞自噬状态，实现抑制细胞凋亡的脑保护作用。 -
实验性脑出血后组织水含量和ATP含量变化
缺血性中风所引起的脑水肿是能量代谢障碍所致，以细胞内水肿为主[1]。研究发现：脑出血早期血肿周围就有血流量下降，对其原因有多种假说，如颅内压增高[2]、血肿机械压迫[3]、介质释放所致的血管痉挛[4]等。但上述假说有些并不符合临床的具体情况。近有报道[5]认为脑出血后早期，血肿周围组织因处于缺血状态，组织能量代谢障碍导致了脑水肿的产生。本实验建立大鼠脑出血模型，观察血肿周围组织水分和ATP含量的变化并探讨相互关系。 材料和方法 实验动物 成熟雄性Wistar大鼠96只，体重250～300g，随机分为12组，分别为脑出血后1、4、12、24、48、96、1 68h组，假手术后1、12、48、168h组及正常对照组(各组n＝8)。
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脑出血大鼠脑内胚胎神经干细胞移植的运动神经功能改变和形态学研究
目的 研究脑出血大鼠脑内胚胎神经干细胞移植对运动神经功能改善作用以及移植细胞分化后形态学改变.方法 通过大鼠尾状核注射胶原酶IV制作脑出血模型大鼠,分离培养胚胎神经干细胞移植入脑出血大鼠脑内.对脑出血大鼠移植前后运动神经功能进行评价,并通过组织免疫荧光检测移植神经干细胞脑内分化后形态学改变情况.结果 Hoechst标记的神经干细胞移植入脑出血大鼠后可见其在脑内存活,主要分布于血肿腔周边,免疫荧光检测显示移植细胞能进一步分化为神经元及星形胶质细胞;从移植术后第21天到第28天,神经干细胞移植组大鼠的神经功能改善显著好于培养液移植组和单纯脑出血组,有统计学意义(P＜0.001).结论 胚胎神经干细胞脑出血大鼠脑内移植能促进偏瘫肢体功能恢复;胚胎神经干细胞脑出血大鼠脑内移植后能存活并进一步分化为神经元及星形胶质细胞.
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胶原酶与自体血建立脑出血模型的比较研究
目的：比较胶原酶脑出血模型与自体血脑出血模型的稳定性。方法分别采用胶原酶和自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型，比较两组模型死亡率、神经功能缺陷评分、脑组织水含量、血肿大小、神经元细胞凋亡的差异。结果假手术组术后神经功能缺陷评分、脑水含量、血肿体积、神经元细胞凋亡数量未见明显变化；胶原酶组成功率高于自体血组（P ＜0.05）；两组死亡率基本一致。胶原酶模型组24 h、3 d、7 d 时间点神经功能缺陷、脑水含量、血肿体积、神经元细胞凋亡数量均明显高于自体血模型组（P ＜0.05）。结论胶原酶脑出血模型较自体血脑出血模型稳定。
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脑出血后成年大鼠神经干细胞移植的研究
近年来,胚胎来源的神经干细胞移植治疗脑出血的研究已有报道[1],我们通过对大鼠脑出血模型进行成年神经干细胞移植治疗,观察出血部位移植神经干细胞的生长情况.
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羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制
目的:探讨羚蝎胶囊对实验性脑出血大鼠脑细胞的保护机制.方法:(1)采用胶原酶与肝素复合法制造大鼠脑出血模型.动物分成正常、假手术、模型、清开灵、羚蝎胶囊等五组(各10只).(2)胰蛋白酶法制备大鼠脑细胞悬液,Fura-2/AM(终浓度为5 μmol/L)负载.用日立F-4500型双波长荧光分光光度计测定大鼠脑细胞内Ca2+的浓度.(3)采用黄嘌呤氧化酶法测定大鼠脑组织内SOD的活力;硫代巴比妥酸(TBA)法测定大鼠脑组织MDA的含量.(4)用高效液相色谱仪测定大鼠海马组织中EAA的含量.
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救脑宁注射液改善实验性脑血肿家兔心肌损害作用的研究
目的:观察脑出血模型动物心肌组织病理学改变和救脑宁注射液的干预作用,并探讨其作用机制.方法:实验动物随机分为正常组、模型组、救脑宁注射液组,行颅内血块埋藏术复制脑出血模型,通过HE、碱性复红苦味酸染色、电镜等观察家兔3 d、7 d、15 d心肌形态学改变以及救脑宁注射液的治疗效应,同时测定心肌组织ET、NO、MDA、SOD含量变化和ET、NOS的表达情况.
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急性中风病痰热腑实证大鼠模型复制
目的:复制中风病痰热腑实证动物模型.方法: 用胶原酶脑内注射配合大鼠自体粪便灌胃的方法,复制中风病痰热腑实证中医证候大鼠模型.Wistar大鼠55只,雌雄各半,体重250-300 g,随机分4组:痰热腑实证模型组,以药测证组,单纯脑出血模型对照组,假手术对照组.参照文献向尾壳核缓慢注射胶原酶Ⅶ-肝素混合液1.25 μL.在复制脑出血模型前2 d起痰热腑实证组和以药测证组用10%自体粪便1 mL/100 g灌胃,每日1次,连续3 d,复制成痰热腑实证模型.以药测证组在灌胃自体粪便后第3 d开始,用通腑醒神胶囊灌胃,1 g/kg体重,每日1次,连续3 d;其余3组用等体积凉开水灌胃,每日1次,连续3 d.结果: 该模型大鼠有较明显的神经缺损体征和粪便干结、烦躁、鼻分泌物多、喉中痰鸣等热腑实证表现,脑含水量测定示该模型大鼠脑组织含水量明显高于单纯脑出血模型组(P＜0.01).通过以通腑化痰治法组方的通腑醒神胶囊治疗该模型大鼠,结果神经体征和粪便干结、烦躁、鼻分泌物多、喉中痰鸣等痰热腑实证表现明显减轻,脑组织含水量明显低于痰热腑实证模型组和单纯脑出血模型组(P＜0.01),说明模型是成功的.结论: 用胶原酶脑内注射配合大鼠自体粪便灌胃的方法可成功复制中风病痰热腑实证大鼠模型.
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大黄虫庶虫丸治疗实验性大鼠脑出血的实验研究
目的:探讨大黄虫庶虫丸治疗实验性大鼠脑出血的可能机理.方法: 采用胶原酶与肝素复合注入大鼠尾状核,制成大鼠脑出血模型.将动物分成正常组、假手术组、模型组、大黄虫庶虫丸治疗组,分别观察其对脑出血大鼠脑组织病理形态学变化、神经功能缺损积分、脑组织含水量;脑组织生化指标一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、总抗氧化能力(T-AOC)、兴奋性氨基酸(EAA)/抑制性氨基酸(IAA)改变;并进一步运用了RT-PCR的方法观察了其对脑出血大鼠脑组织IL-1 β mRNA、iNOSmRNA、凝血酶受体(TR)mRNA表达的影响. 结果: 大黄虫庶虫丸能改善大鼠脑出血模型的病理形态结构的损害;降低脑含水量;改善脑出血大鼠的神经功能缺损;降低脑出血大鼠脑组织的NO、ET的含量;改善脑出血大鼠脑组织的EAA/IAA的失衡;提高大鼠脑组织的总抗氧化能力;下调因出血而致的脑组织IL-1 β mRNA、iNOSmRNA、凝血酶受体(TR) mRNA过度表达.结论: 大黄虫庶虫丸可能与降低脑出血大鼠脑组织的NO、ET、EAA的升高而致的细胞毒性,提高大鼠脑组织的总抗氧化能力;降低脑组织(TR)mRNA过度表达,以减轻凝血酶对脑组织的毒性损害;降低脑组织IL-1 β mRNA过度表达,以减轻炎性介质对组织的损害有关.
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两种脑出血动物模型的AQP4表达与磁共振成像的比较研究
目的 比较两种脑出血(ICH)动物模型磁共振成像(MRI)的差异,并对其分子机制进行探讨.方法 将胶原酶和自体血注入大鼠尾状核建立脑出血模型,分别于术后6h、12h、1d、2d、3d和7d进行磁共振成像扫描,观察两组脑出血模型血肿体积的大小；运用干湿重法、伊文思蓝(EB)测定法和免疫印迹分别检测两组脑出血模型的脑含水量(BWC)、血脑屏障(BBB)通透性和AQP4的表达变化.结果 胶原酶模型组的血肿体积在脑出血后1d达到大并持续至3d,自体血组的血肿体积在12h达到大；胶原酶模型组的BWC在1d达到高峰并持续至3d,而自体血组BWC在2d逐渐降低；胶原酶模型组的EB含量在12h达到高峰并持续至2d,而自体血组EB含量在1d逐渐下降；两组模型的AQP4表达量在6h开始升高,1d达到高峰,2d逐渐降低.两组模型比较具有统计学差异(P＜0.05).结论 胶原酶对BBB和细胞外基质的破坏以及AQP4的表达变化是两组脑出血模型血肿体积出现差异的重要原因.
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三水胶囊对脑出血模型大鼠的治疗作用
目的 观察三水胶囊对大鼠急性脑出血后脑水肿的防治作用.方法 将大鼠随机分为假手术组、模型组、安宫牛黄丸组、三水胶囊(高、中、低剂量分别为30、15、7.5 g·kg-1)组.于术前3d至术后8d给药.用脑内注射自身股动脉血建立大鼠急性脑出血模型,分别采用行为学评分法和干湿质量法,比较各组大鼠的行为学得分和脑组织的含水量.结果 从第1天开始至实验结束,模型组大鼠的行为学得分均非常显著地高于假手术组;与模型组比较,第1天、第4天,各给药组大鼠的行为学得分无显著差异;与模型组比较,术后第8天,高、中剂量三水胶囊组大鼠的行为学得分非常显著地降低,低剂量组的显著降低.与假手术组比较,模型组大鼠的脑系数和脑组织中的含水量均非常显著地升高;与模型组比较,高、中剂量三水胶囊组大鼠的脑系数和脑组织中的含水量显著地降低,低剂量组的差异不明显.结论 三水胶囊对脑出血水肿有较好的防治作用.
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中医药治疗脑出血急性期实验研究进展
脑出血是一种临床上常见的危急重症，其发病率高，在我国约占全部新发脑卒中的10%~15%。且脑出血死亡率和致残率极高，严重危害人类健康。现代医学通过实验研究对其发病机制进行了探讨，但临床治疗仍以对症治疗及手术为主，疗效不理想。中医药在治疗中风病方面积累了丰富的临床经验，近年来的实验研究证实，中医药对脑出血的治疗有一定优势，取得了较多研究成果，本文就此予以综述。
1减轻脑出血后的脑水肿
脑水肿是脑出血的重要并发症，易致颅内压增高，形成脑疝，是早期造成患者死亡的重要原因，临床上，防治脑水肿是脑出血急性期必不可少的治疗措施。近年来，中药对抗脑水肿的作用已被多次实验证实。如侯学寨[1]等应用自体血注入法制作大鼠脑出血模型，治疗组予水蛭活血散肿口服液（由水蛭、三七、全蝎、大黄、丹参、天竺黄、土鳖虫组成）灌胃，观察到治疗组大鼠脑含水量明显低于模型对照组（P<0.05），说明水蛭活血散肿口服液能有效对抗脑出血后脑水肿。孙皓[2]等采用自体血注入法制作大鼠右侧纹状体出血模型，治疗组给予补阳还五汤化裁（由黄芪、当归、赤芍、川芎、大黄、水蛭、桃仁、红花、生三七组成）灌胃，观察到治疗组、对照组与假手术组在1d时的脑组织含水量比较，差异有统计学意义（P<0.05），说明补阳还五汤化裁具有减轻脑出血引起的脑水肿的作用。郑淑美[3]等采用胶原酶法制作大鼠脑出血模型，治疗组予涤痰汤（由姜南星、姜半夏、枳实、茯苓、石菖蒲、竹茹、橘红、甘草组成）灌胃，观察到治疗72h后模型组脑含水量变化为（80.98±0.43）%，涤痰汤治疗组为（79.05±0.29）%，二者比较差异具有统计学意义（P<0.05），说明涤痰汤治疗能够降低脑出血大鼠的脑水肿程度。
