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以药测证绘制肾虚证两大基因网络调控路线图谱
目的研究肾虚证基因网络调控的路线和规律.方法选择青年组(4月龄)、老年组(24月龄)、淫羊藿总黄酮(Epimedium Flavonoids,EF)治疗组SD大鼠,取全面反映肾虚的7个组织下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞、骨骼、肝脏、肾脏,采用Affymetrix公司的大鼠全基因组芯片再次重复肾虚证基因表达谱差异研究.结果老年大鼠下丘脑、垂体、肾上腺(HPA轴)显示神经递质γ氨基丁酸(GABA),促性腺激素释放激素(GnRH),促甲状腺激素释放激素(TRH)与促甲状腺激素(TSH),生长激素释放激素受体(GHRH)、胰岛素样生长因子及结合蛋白(IGF、IGFBP);淋巴细胞显示与细胞生长相关的生长因子相关蛋白(GFRP),与免疫调节相关的IFNγ、IL-4、IL-6等;骨骼显示甲状旁腺(PTH)、降钙素(calcitonin)与骨基质相关的前胶原、胶原、结缔组织生长因子等;肝脏显示氧化磷酸化相关的细胞色素Cytochrome P450、NADH脱氢酶,与蛋白质代谢相关的谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase),与糖代谢相关的葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Phosphatase)均为低表达.EF作用后,可见老年大鼠7个标本低表达的基因几乎全部上调,此外还有大量与衰老机理相关的基因明显上调.包括HPA轴的神经递质如GABA,激素如GnRH,细胞周期相关基因如CyclinB,免疫调节相关基因如NF-κB105;淋巴细胞与生长调节相关的基因如GFRP,免疫调节相关的基因如IFNγ;骨骼的甲状旁腺、降钙素、IGF、前胶原、胶原、GnRH、Progesterone等;肝脏的大量代谢相关的基因如Cytochrome P450、NADH脱氢酶;肾脏的代谢相关基因及钠、氯通道等基因.结论通过以药测证,发现肾虚证大鼠模型存在神经-内分泌-免疫以及神经-内分泌-骨代谢两大基因调控路线的紊乱,补肾能纠正该网络功能低下.
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衰老—生理性肾虚证的HPAT轴分子网络调控研究
国内对于证本质的研究积累了大量奠基性的成果,中西医结合工作者结合时代的特征,将研究工作通过证的研究介入到生命科学的领域,这样就从"证明性研究"开始进入"创新发展研究",而且使得分子水平上的所见与整体水平上的人,相互之间的距离不是越来越大,而是越来越小,宏观与微观的结合点将要落实在建立"证"的基因表达谱和以药测证的基因调控网络.中医药学与现代生命科学求得同步发展,定能加速实现中医药现代化.
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以药测证对肾虚证基因网络和信号转导的研究
总结了从细胞内的小的信号转导通路组成的网络到中等的下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴网络和涵盖全身,联络多个重要系统的大的神经内分泌免疫(NEI)网络,提出人体受到外界干预而形成的"病"或"证",亦都是以众多的分子网络变化为基础.描绘了信号转导通路的方式、能力、研究信号转导通路变化的方法,提出"以药测证"是按系统生物学方法研究证的干预手段.作者采用补肾复方以药测证发现肾阳虚证涵盖着NEI调节网络,而且直接作用于NEI网络的调控中枢-下丘脑.采用从补肾复方中提取的有效组分--淫羊藿总黄酮(EF),发现它通过NEI网络的下行通路激活免疫系统,能激活生长激素轴、性腺轴、淋巴细胞凋亡3个方面的网络机制发挥分子网络效应;也观察到EF调控基因网络表现出多种多样的方式,在淋巴细胞凋亡和增殖的网络机制中重塑对立的凋亡相关基因及增殖相关基因平衡;能会聚与整合共刺激分子、转化生长因子及多个原癌基因,成为启动促增殖、抗凋亡的上游因子网络;使NIK/IKK/IκB/Rel/NFκB信号转导通路中对立的IκBα与NFκB同时升高,既维持NFκB适度升高,又保证NFκB呈强者态势发挥其分子调控网络中的枢纽作用,并由此观察到肾虚证HPAT轴上有序的基因网络调控路线图谱.
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肾阳虚证及其"以药测证"的基因芯片研究进展
基因芯片以高通量、多因素、微型化和快速灵敏的特点而见长.其可以对证在微观基因方面做大面积、多基因、高密度的综合分析,能够针对中药的多成分、多途径、多系统和多靶点的作用特点进行深入的研究[1-2].
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从细胞因子研究雷公藤多苷致大鼠卵巢功能低下模型的中医证候属性
目的:探讨雷公藤致卵巢储备功能下降大鼠模型的中医证候属性.方法:用雷公藤多苷片造成雌性卵巢功能低下大鼠模型,通过以方测证观察新加归肾丸、圣愈汤、逍遥散、丹溪治湿痰方对大鼠卵巢组织IGF-1R、VEGF及Flk-1表达的影响.结果:各用药组中新加归肾丸组3项指标接近于正常组.结论:补肾中药复方治疗的有效性在一定程度上证实了该大鼠模型符合中医肾虚证候属性.
关键词： 雷公藤多苷(GTW) 卵巢功能低下 动物模型 以药测证 中医证候属性 -
小议候氏黑散
张仲景<金匮要略>中的候氏黑散,自问世以来,一直没有被人们重视.从古代的医典文献(除<外台>载治风癫外)及现代的临床报导中,很少见到对此方的正确论述,以及临床运用和评价.诸如陈修园、尤在泾等辈,虽对此方有解释,但都偏重于补虚填窍之说,只不过是以经解经而已,对其真正价值未能解透.张仲景创立此方,并列为治疗中风之首方,决非偶然,而是有其深刻的意义.<金匮要略,中风历节病脉证并治>篇中载:"主治大风四肢烦重,心中恶寒不足者".对于此一首重要的方剂张仲景仅有此一条短短的论述,是秘而不宣,还是其它什么原因,不得而之.主证讲得太简单,几乎使人难以捉摸;其实仲景之书早就告诉了我们一个学习的方法,那就是"以药测证".
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997首焦虑情绪治疗方剂的用药组方规律分析
焦虑情绪是临床常见症状,以"惊恐、提心吊胆、精神紧张"为特征,属中医神(情)志病范畴,是诊断焦虑性障碍的必备症状,也常伴发于其他精神疾病和躯体疾病.历代中医学者对其认识非常丰富,但内容比较分散,尚未形成系统和规范的辨治体系.笔者从历代焦虑情绪的治疗方剂入手,通过分析其用药规律,运用"以药测证"的方法,探讨焦虑情绪的病机和治疗特点,为进一步开展焦虑性障碍的研究莫定基础.现将研究结果报告如下.
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烦躁的用药组方规律分析
目的:分析烦躁的用药组方规律,探讨烦躁的病机和治法特点.方法:在运用贝叶斯网络技术处理《中医方剂大辞典》中1968首烦躁治疗方荆的基础上,继而进行药物分类、使用频次、药性及各种治法的使用频次、配伍频次分析.结果:烦躁的用药以清热药、养阴（血）药和益气药的使用频次多；烦躁治疗药物的药性以苦寒、甘寒、甘温为主,归经涉及五脏系统；清热、养阴（血）、益气是烦躁的主要治疗方法.结论:烦躁的主要病机是阴虚内热和气阴（血）不足,清热养阴（血）法和益气养阴（血）法是烦躁治疗的重要基础.
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基于以药测证的热病证候模型评价方法研究
目的:建立一套完善的中医证候动物模型的评价方法.方法:以2,4-二硝基苯酚诱导的热病证候模型为切入点,利用寒性药物与温性药物对比干预的实验研究,探讨动物模型的评价方法.结果:寒性药物与温性药物干预的对比研究结果表明,2,4-二硝基苯酚诱导的动物模型符合中医临床的热病证候表征.结论:2,4-二硝基苯酚所复制的动物模型为热病证候模型,而非炎症发热模型.
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235首抑郁情绪治疗方剂的用药组方规律分析
[目的]分析抑郁情绪的用药组方规律,探讨抑郁情绪的病机和治法特点.[方法]在运用贝叶斯网络技术处理<中医方剂大辞典>中235首抑郁情绪治疗方剂的基础上,进行药物分类、使用频次、药性及各种治法的使用频次、配伍频次分析.[结果]抑郁情绪的用药可分为辨病用药和辨证用药,辨证用药以益气药和补(温)阳药的使用频次多;抑郁情绪治疗药物的药性以味甘、辛,性温热为主,归经涉及五脏系统;益气、补(温)阳、安神是抑郁情绪的主要治疗方法.[结论]抑郁情绪属虚寒性疾病,阳气亏虚、升发无力是主要病机,益气温阳法是抑郁情绪治疗的重要基础.
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急性中风病痰热腑实证大鼠模型复制
目的:复制中风病痰热腑实证动物模型.方法: 用胶原酶脑内注射配合大鼠自体粪便灌胃的方法,复制中风病痰热腑实证中医证候大鼠模型.Wistar大鼠55只,雌雄各半,体重250-300 g,随机分4组:痰热腑实证模型组,以药测证组,单纯脑出血模型对照组,假手术对照组.参照文献向尾壳核缓慢注射胶原酶Ⅶ-肝素混合液1.25 μL.在复制脑出血模型前2 d起痰热腑实证组和以药测证组用10%自体粪便1 mL/100 g灌胃,每日1次,连续3 d,复制成痰热腑实证模型.以药测证组在灌胃自体粪便后第3 d开始,用通腑醒神胶囊灌胃,1 g/kg体重,每日1次,连续3 d;其余3组用等体积凉开水灌胃,每日1次,连续3 d.结果: 该模型大鼠有较明显的神经缺损体征和粪便干结、烦躁、鼻分泌物多、喉中痰鸣等热腑实证表现,脑含水量测定示该模型大鼠脑组织含水量明显高于单纯脑出血模型组(P＜0.01).通过以通腑化痰治法组方的通腑醒神胶囊治疗该模型大鼠,结果神经体征和粪便干结、烦躁、鼻分泌物多、喉中痰鸣等痰热腑实证表现明显减轻,脑组织含水量明显低于痰热腑实证模型组和单纯脑出血模型组(P＜0.01),说明模型是成功的.结论: 用胶原酶脑内注射配合大鼠自体粪便灌胃的方法可成功复制中风病痰热腑实证大鼠模型.
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浅谈对《金匮要略》鳖甲煎丸方证的理解
《金匮要略》鳖甲煎丸由23味药物组成,文章阐述了《伤寒杂病论》所载疟疾应属“少阳病”且为现代所言疟疾的一种类型,因此《金匮要略》中疟母实则属少阳病范畴.阐释了鳖甲煎丸以小柴胡汤引药入少阳、鳖甲为君主软坚散结消癥;活血祛瘀药兼利水药助鳖甲消癥之功,配伍益气养血扶正药兼顾久病虚弱;清酒作引药,引诸药入血分.可谓集祛瘀、祛痰、行水、行气、泻下、滋阴于一方,立方严谨,病证结合.启悟鳖甲煎丸方证的含义,以期对临床应用有所裨益.如有纰缪,望斧正.
