复方瑞康欣可逆转吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核和伏核突触形态结构的可塑性

目的 观察复方瑞康欣(CR)对吗啡戒断焦虑大鼠海马、杏仁核和伏核突触形态结构可塑性的影响.方法 雄性SD大鼠84只,随机分为生理盐水对照组、吗啡戒断焦虑模型组、CR 高、中、低剂量组和丁螺环酮组.以剂量递增方式皮下注射吗啡,10 d后自然戒断,于戒断1～3 d CR灌胃治疗后行高架十字迷宫实验.采用透射电镜技术比较各组(6只)突触体视学和界面结构各参数.结果在300 mg/kg和200 mg/kg CR组,大鼠进入开放臂次数的百分比和在开放臂停留时间的百分比明显增加(P<0.01或P<0.05);海马、杏仁核突触的数密度和面密度显著降低(P<0.01),突触连接带平均面积增加(P<0.01或P<0.05),伏核突触数密度降低(P<0.01);海马突触后致密物厚度、突触活性区长度、间隙宽度和界面曲率降低(P<0.01或P<0.05).结论 CR能缓解吗啡依赖戒断所引起的焦虑,其细胞生物学机制可能是逆转吗啡戒断时海马、杏仁核和伏核突触形态结构的可塑性.

FosB和Glu受体Ⅱ亚型与慢性可卡因成瘾

过去的一段时间里,CREB一直被认为是与药物成瘾有密切关系的明星分子.但随着研究的不断深入发现,急性给予可卡因可引起ΔFosB家族的多种转录因子在伏核暂时性高表达,但慢性给予可卡因却可诱导Fos家族的异型体ΔFosB在伏核长期高表达,类似现象也见于反复给予其他成瘾性药物,因此ΔFosB遂脱颖而出成为又一个新星分子.1999年9月在英国Nature杂志发表的一篇文章报道,ΔFosB的表达增加及其引发的Glu受体Ⅱ亚型的增加可加强慢性给予可卡因引起的成瘾性,这可能与人类成瘾的形成相似.

伏核内的ΔFosB--吗啡成瘾中的重要调节因子

伏核内勿动蛋白A和降钙素基因相关肽1受体在炎性痛大鼠痛觉调制过程中的角色

目的:探讨大鼠伏核内勿动蛋白A(Nogo-A)和降钙素基因相关肽1(CGRP1)受体在痛觉调制过程中的作用.方法:健康雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组,伏核内注射生理盐水1μl;炎性痛模型对照组、吗啡组和纳洛酮组.福尔马林致炎成功后,分别向其伏核内注射生理盐水、吗啡、纳洛酮各1μl.采用Western blot法,观察各组大鼠伏核内Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达的变化,分析炎性痛、吗啡、纳洛酮对大鼠伏核内Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达的影响.结果:正常大鼠伏核内有Nogo-A和CGRP1受体蛋白表达；福尔马林致炎后Nogo-A的蛋白表达量降低(P＜0.05),而CGRP1表达升高(P＜0.05)；与炎性痛模型对照组比较,吗啡组大鼠伏核内Nogo-A的蛋白表达量增高(P＜0.05),CGRP1降低(P＜0.05),而纳洛酮组Nogo-A降低(P＜0.05),CGRP1增高(P＜0.05).结论:Nogo-A和CGRP参与了炎症致痛敏大鼠伏核内的痛觉调制过程,且二者之间存在反向调节关系,内源性阿片系统可能参与并影响了该过程.

中脑边缘镇痛环路

伏核(nucleus accumbes)是边缘系统的重要核团.以往对伏核的研究多集中于其在内脏感觉、情感反应、运动调控和药物成瘾等方面的作用,并将中脑腹侧被盖区(VTA)、黑质和脚间核向伏核的上行性投射称为"中脑边缘多巴胺系统”(mesolimbic dopaminesystem)[1].进入80年代,我国一些学者在机能学研究中观察到伏核在镇痛效应中也发挥重要作用.中脑导水管周围灰质(PAG)是中枢内源性镇痛系统的关键结构,处在承上启下的重要地位[2].

母爱剥夺的成年大鼠伏隔核DNA甲基转移酶的表达

目的 探讨DNA甲基化是否参与调控伏隔核多巴胺受体2(DRD2)基因表达,探索DNA甲基转移酶(Dnmts)是否参与调控DRD2基因的表达.方法 采用随机数字表法对16只新生大鼠随机分为母爱剥夺组和对照组,每组8只.母爱剥夺组大鼠于授乳期每天接受6 h母爱剥夺,12周龄时采用实时定量聚合酶链反应检测伏隔核DRD2受体、DNA甲基转移酶mRNA表达水平.结果 母爱剥夺组大鼠脑内伏隔核DRD2 mRNA表达水平(1.25±0.06)低于对照组(1.15±0.07;t=2.83,P<0.05);母爱剥夺组大鼠和对照组大鼠脑内伏隔核DNA甲基转移酶1 mRNA表达水平分别为1.17±0.10和1.17±0.14(t=-0.14,P>0.05);DNA甲基转移酶3a mRNA表达水平分别为1.18±0.07和1.20±0.16(t=0.39,P>0.05);DNA甲基转移酶3b无法检测.结论 DNA甲基化可能不参与调控伏隔核DRD2基因的表达.

网络游戏成瘾者伏核功能连接静息态fMRI的研究

目的 利用静息态功能磁共振(fMRI)分析网络游戏成瘾者与伏核存在功能连接的脑区,了解伏核功能异常在网络游戏成瘾发病机制中的作用.方法 网络游戏成瘾者和健康对照组各17例,扫描前上网玩耍自己喜欢的网络游戏,60 min后突然中止网络使用,对被试的网络游戏渴求程度进行心理学测评;休息30 min后进行静息态fMRI扫描,分别选取左、右侧伏核为感兴趣区进行脑功能连接分析,确定与双侧伏核有功能连接的脑区,并将激活程度与网络游戏渴求程度进行相关分析.结果 网络游戏成瘾青少年对网络游戏内容的渴望程度、喜欢程度、再次上网的渴望程度明显高于健康对照组(P＜0.05);网络游戏成瘾组的伏核与前扣带回、中脑、海马功能连接明显高于健康对照组,而与前额叶、颞叶及枕叶功能连接明显低于健康对照组(P＜0.05);网络游戏成瘾者伏核与前额叶、前扣带回、中脑及海马的功能连接程度和网络游戏渴求程度存在相关性(r=0.70、0.76、0.65、0.79,P＜0.05).结论 网络游戏成瘾者伏核功能异常,提示伏核是网络游戏成瘾“奖赏系统”的重要组成部分,伏核功能异常可能参与了网络游戏成瘾的产生与维持.

高频电刺激伏隔核壳部对肥胖大鼠摄食相关激素的影响

目的 探讨伏隔核壳部(NAc-sh)脑深部电刺激术(DBS)对肥胖大鼠摄食量和摄食相关激素分泌的影响.方法 取8周龄雄性SD大鼠60只,高脂饮食建立肥胖大鼠模型,6个月后取24只肥胖大鼠,采用随机数字表法随机分为NAc-sh高频DBS刺激组(简称刺激组)和假刺激组,每组12只.分别在双侧NAc-sh植入刺激电极固定装置.术后30 d大鼠进食完全恢复后,两组各选取进食量稳定的大鼠10只植入电极行刺激(电压3.0V,波宽100μs,频率180 ～ 200 Hz)或假刺激,并于刺激或假刺激前后断尾取血,放射免疫方法检测外周血胃促生长素、瘦素及神经肽Y(NPY)水平的变化.结果 刺激组大鼠刺激开始摄食量即较刺激前明显下降(P＜0.05),刺激后血清瘦素和神经肽Y的浓度较刺激前明显下降[瘦素:(20±10) pg/ml对比(32±10) pg/ml;神经肽Y:(926±299) pg/ml对比(1302±287)pg/ml,P值均＜0.05],胃促生长素的血清浓度较刺激前明显增加[(1 603±848) pg/ml对比(1 066 ±310) pg/ml,P＜0.05),而假刺激组刺激前后进食量及胃促生长素、瘦素、神经肽Y的变化差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 NAc-sh高频电刺激能有效降低肥胖大鼠摄食量,外周血激素的变化可能与外侧丘脑的兴奋性改变有关.

立体定向核团毁损术对可卡因成瘾大鼠戒除毒瘾的初步研究

一、材料与方法1.动物分组及手术:采用普通级SD大鼠作为实验动物,随机分成6组.A组:对照组;B组:成瘾组(假毁损组);C组:成瘾大鼠毁损伏核组;D组:成瘾大鼠毁损海马组;E组:成瘾大鼠毁损扣带回组;F组:成瘾大鼠毁损伏核、海马、扣带回组.成瘾大鼠每天接受皮下注射溶解于0.2ml生理盐水的盐酸可卡因15mg/kg,持续90d.

1周力竭运动后大鼠额叶运动脑区NF-κB表达变化

目的:探讨1周力竭性游泳运动对大鼠额叶运动脑区NF-κB表达的影响.方法:选取70只SD大鼠,适应性游泳训练后随机分为对照组(10只)和力竭运动组(60只).力竭组进行1周力竭游泳训练后在0h(即刻)、4h、8h、12h、16h、24h等时间点取材,采用免疫组织化学(SABC)法观察大脑额叶皮质与伏核NF-κB分布表达,Western-blotting法测定NF-κB蛋白含量.结果:(1)免疫组织化学结果:与对照组和即刻组比较,力竭运动后4h组、8h组、12h组、16h组额叶运动皮质NF-κB阳性细胞数差异有统计学意义(P<0.05),24h组差异无统计学意义(P>0.05);与8h组比较,4h组、16h组、24h组差异有统计学意义(P<0.05);与24h组比较,4h组、8h组、12h组、16h组差异有统计学意义(P<0.05).与对照组和即刻组比较,力竭运动后4h组、8h组、12h组、16h组伏核NF-κB阳性细胞数差异有统计学意义(P<0.05),24h组差异无统计学意义(P>0.05);与12h组比较,4h组、16h组、24h组差异有统计学意义(P<0.05);与24h组比较,4h组、8h组、12h组、16h组差异有统计学意义(P<0.05).(2)Western-blotting结果:额叶皮质与伏核NF-κB表达和免疫组织化学结果一致.结论:1周力竭性游泳运动可使大鼠额叶皮质和伏核内NF-κB信号通路得到有效的活化.

中脑边缘多巴胺神经系统与成瘾的研究进展

药物成瘾是慢性、复发性脑疾病,主要表现为强迫性药物使用,即成瘾者失去了对药物寻觅和摄取的控制[1-3].几乎所有存在滥用潜力的化学物质都有一个共同特性,那就是服用后会引起前脑伏核区域的多巴胺神经元末梢释放多巴胺增加,这些发现使中脑多巴胺神经元投射到伏核和前额皮层等边缘系统的神经通路在强化和奖赏中的作用得到了广泛的研究.本文着重对近年来该领域研究进展情况做一简单回顾.

电损毁伏核核部或壳部对大鼠吗啡奖赏效应及其性功能的影响

目的:研究直流电损毁伏核(nucleus accumbens NAc)核部及壳部对大鼠吗啡奖赏效应及其性功能的影响.方法:建成♂大鼠吗啡条件性位置偏爱(5 mg·kg-1,ip)后,用直流电损毁或假损毁其NAc核部或壳部.损毁术后7 d及10 d时再次测试大鼠位置偏爱的表达.12 d时给予大鼠小剂量吗啡(2.5 mg·kg-1,ip)后,再次进行测试.之后,让大鼠进行一轮交配,记录性功能相关指标.结果:假损毁组大鼠在各时间点测试时,均可稳定表达已形成的吗啡条件性位置偏爱,而核部及壳部损毁组大鼠在术后7 d及10 d测试时未表达对吗啡伴药侧的偏爱,但12 d给予小剂量吗啡后,壳部损毁组动物再次表达出对伴药侧的偏爱,而核部损毁组则仍未表达任何偏爱;各组大鼠的性功能未受影响.结论:NAc核部损毁能抑制大鼠吗啡CPP的重建,而壳部损毁则不能,且该损毁手术对大鼠的性功能无影响.

吗啡短期戒断时大鼠伏核TRPV1受体对兴奋性突触后电流调节功能的变化

目的:研究吗啡短期戒断后,TRPV1受体功能变化对大鼠伏核中等大小有棘神经元接受的自发性兴奋性突触后电流的影响.方法:20只SD大鼠随机分配为对照组和吗啡组,每天分别接受10 mg·kg-1的盐酸吗啡和生理盐水腹腔注射,连续5d.在自然戒断的d3制作伏核脑片,采用红外可视全细胞膜片钳记录技术,检测对照组和吗啡组大鼠的TRPV1受体功能变化对伏核中等大小有棘神经元接受的自发性兴奋性突触后电流的频率及幅度的影响.结果:(1)脑片灌流足量TRPV1受体激动剂capsaicin (CAP)后,对照组和吗啡组自发性兴奋性突触后电流的频率分别为基线水平的138.9 ±s 5.3(％)和176.3±s 8.8(％),两组差异显著(P＜0.05)；幅度分别为基线水平的的101.9±s 2.2(％)和103.9±s 2.3(％),无显著差异(P＞0.05).(2)吗啡组脑片依次灌流TRPV1受体拮抗剂capsazepine (CPZ)及激动剂CAP后,记录到自发性兴奋性突触后电流的频率分别为基线水平的99.1±s 1.8(％)和101.2±s 0.9(％),两组无显著差异(P＞0.05).结论:大鼠反复吗啡暴露短期戒断时伏核TRPV1受体功能增强.

反复吗啡暴露后短期戒断时大鼠伏核大麻素CB1受体的功能变化

目的:探索反复吗啡暴露后短期戒断时,大麻素信号对大鼠伏核中等有棘神经元接受的自发性抑制性突触后电流调节功能的变化.方法:24只SD大鼠(♂)随机分为吗啡组和对照组,并分别按10 mg·kg-1·d-1的剂量腹部皮下注射吗啡和生理盐水,连续注射7 d.在药物戒断后的d3分别制备伏核脑片,在全细胞膜片钳模式下分别记录两组大鼠伏核中等有棘神经元所接受的自发性抑制性突触后电流,观察两组电流的频率和幅度是否存在差异,以及两者对大麻素受体激动剂的反应性的异同.结果:(1)在戒断3 d后,吗啡组和对照组自发性抑制性突触后电流的幅度分别为23.40±s 3.9 pA,21.60±s 4.1 pA,两组比较无显著差异(P>0.05);频率分别是1.62±s 0.47 Hz,1.46±s 0.51 Hz,二者比较无显著差异(P>0.05).(2)灌流大麻素CB1受体激动剂WIN55,212-2后,吗啡组和对照组自发性抑制性突触后电流的幅度分别为基线水平的75.1±s 7.6(%)和93.7±s 8.4(%),两组差异显著(P<0.05);频率分别为基线水平的64.6±s 6.3(%)和89.8±s 9.7(%),两组差异显著(P<0.05).结论:大鼠反复吗啡暴露后短期戒断时,伏核大麻素CB1受体功能发生变化,表现为其对吗啡组伏核中等有棘神经元接受的自发性抑制性突触后电流的抑制作用显著增强.

吗啡条件性位置偏爱大鼠脑伏核中CaMK Ⅱ及NOS阳性神经元变化

目的:研究吗啡条件性位置偏爱(CPP)大鼠伏核中CaMK Ⅱ及NOS的阳性神经元变化.方法:采用免疫组织化学实验方法观察CaMK Ⅱ及NOS阳性神经元的形态及数目的变化.结果:与正常对照组比较,吗啡模型组CaMK Ⅱ及NOS的阳性神经元数均明显升高(P<0.01).结论:吗啡CPP大鼠伏核中显示CaMK Ⅱ及NOS的阳性神经元增多,参与了吗啡精神依赖的形成.

甲基苯丙胺条件性位置偏爱效应形成的神经机制

目的:本文探讨甲基苯丙胺(MA)的精神依赖性神经机制.方法:采用条件性位置偏爱方法,大鼠脑内立体定位技术和脑内核团给药方法.利用ABC免疫组织化学方法来显示脑内不同部位即刻早期基因c-fos的表达情况.结果:将MA注射到伏核(NAc)内,在20,40,80μg·kg-1剂量下对伴药盒产生了偏爱效应,且呈现出反相量效关系.而将相同剂量的MA注射到尾壳核(CPu)中,未出现位置偏爱效应.MA位置偏爱模型形成后可诱导伏核、隔核、额前叶皮质、梨状皮质、导水管背外侧和腹外侧亚区等部位出现Fos阳性细胞.结论:在MA的位置偏爱效应中NAc起重要作用.MA的偏爱效应可能与特定脑区c-fos基因的表达有一定关系.

钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠伏核和杏仁核中NR2B蛋白表达的影响

目的:研究钩藤碱对苯丙胺依赖大鼠伏核和杏仁核中NR2B蛋白表达的影响.方法:采用条件性位置偏爱实验和免疫组化技术.结果:(1) 建立了苯丙胺(2 mg·kg-1,连续4 d)诱导的位置偏爱模型,氯胺酮及钩藤碱低、中、高剂量均可消除苯丙胺诱导的位置偏爱效应,随钩藤碱剂量增加其效应加强,且本身无精神依赖性;(2) 苯丙胺模型组大鼠伏核和杏仁核NR2B蛋白表达增加,氯胺酮及钩藤碱中、高剂量抑制NR2B表达,低剂量及本身对NR2B表达无影响.结论:伏核和杏仁核NR2B蛋白表达参与了钩藤碱抗苯丙胺依赖作用的分子机制.

ΔFosB在慢性药物依赖中调控作用的研究进展

药物依赖是一种由成瘾性药物与大脑奖赏系统相互作用产生的慢性、复发性脑疾病,主要表现为长期反复的强迫性自我给药症状和持续性渴求状态~([1-2]).研究表明,几乎所有的成瘾性药物都可以引起中脑边缘多巴胺系统(mesolimbic dopamine system,MLDS)神经元受体及信号转导系统发生复杂的适应性变化,从而产生特定的行为效应即药物依赖~([3]).在这一长期慢性作用过程中,特定神经元的可塑性改变,是反复自我加重给药,甚至是导致长期戒毒后复吸的耐受、依赖和复吸等现象的重要因素~([4]),而在这一适应性变化中,基因表达调控的改变可能是重要机制之一.中脑边缘多巴胺系统几乎参与了所有的成瘾性药物的奖赏机制,中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)到伏核(nucleus accumbens,NAc)的多巴胺能投射系统则是奖赏通路的核心,因伏核往往直接接受其他核团的单突触信号,是该核心的关键区域,因此,伏核终成为研究的解剖靶点~([5]).

多巴胺D3受体在中枢神经兴奋剂成瘾中的作用

中枢神经兴奋剂成瘾是一种慢性、易复发性脑疾病,主要表现为强迫性觅药、摄药行为和强烈的渴求心理[1].研究表明,从腹侧被盖区投射到伏核、大脑额叶皮层、嗅结节、杏仁核的中脑边缘多巴胺系统的形态和功能改变是产生中枢神经兴奋剂成瘾的重要神经基础.中枢神经兴奋剂通过抑制多巴胺重吸收或促进多巴胺释放增加突触间隙多巴胺浓度,高于生理水平的多巴胺作用于相应的多巴胺受体,从而产生神经适应性和成瘾行为[2].中脑边缘系统中的伏核壳区多巴胺释放增加是成瘾药物产生欣快和奖赏效应的关键位点[3-5].

伏核在阿片类药物复吸中的作用

伏核是脑奖赏通路的重要核团,其生理功能包括介导自然奖赏作用、调节动机行为、维持机体内环境稳定等.