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人骨髓间充质干细胞中Toll样受体的表达特征
本研究探讨健康供体骨髓源性间充质干细胞(BM-MSC)中Toll样受体(TLR)的表达特征.用Ficoll法分离培养健康供体的BM-MSC;流式细胞术(FCM)检测BM-MSC中CD34、CD45、HLA-DR、CD44和CD71的表达;免疫细胞化学法检测爬片BM-MSC细胞中CD71的表达;应用茜素红染色和油红染色检测BM-MSC细胞成骨及成脂诱导情况;半定量RT-PCR法检测TLR1-10 mRNA的表达.结果表明,体外分离培养的BM-MSC中CD34、CD45和HLA-DR表达呈阴性,CD44和CD71表达呈阳性;爬片BM-MSC细胞中CD71的表达呈阳性.BM-MSC经成骨和成脂诱导后出现钙沉积和脂滴,茜素红染色和油红染色均呈阳性.BM-MSC中TLR1-10 mRNA均有表达,其中TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9均高表达,TLR1、TLR5、TLR6、TLR10均低表达.结论:从健康供体骨髓中分离培养的BM-MSC表达不同水平的TLR1-10 mRNA.
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核酸识别Toll样受体特性及在系统性红斑狼疮中的作用
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种由于免疫系统紊乱导致机体产生多种自身抗体的自身免疫病.SLE发病缓慢,临床表现多样化,涉及多个系统和多种脏器损伤,造成细胞和体液免疫功能障碍,产生多种自身抗体.SLE的常见临床表现为发热、皮疹、关节痛、浆膜炎及肾、心血管、肺、神经系统、消化系统等系统损伤,死亡率高.虽然目前SLE发病的确切机制尚不清楚,但对于其发病原因比较公认的是核酸识别Toll样受体对于自身核酸复合物的识别而引发的针对自身的免疫反应.Toll样受体是一类介导机体天然免疫并能作为桥梁连接机体天然免疫与获得性免疫的重要受体.Toll样受体被配体激活后能够产生多种炎症细胞因子并释放Ⅰ型干扰素,从而介导机体抵御多种病原微生物的免疫反应.Toll样受体信号的异常激活将导致自身免疫疾病的发生.本综述首先从细胞生物学与信号转导的角度阐述Toll样受体在机体天然免疫过程中的作用,之后将探讨Toll样受体信号激活在SLE发病过程中的影响.
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TLR4 Asp299Gly、Thr399Ile基因多态性对变应性哮喘的发病及IgE水平的影响
目的探讨TLR4(toll-like receptor 4)Asp299Gly、Thr399Ile基因多态性对变应性哮喘的发病和血浆IgE水平的影响. 方法利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP),对197例变应性哮喘患者和156例健康人进行TLR4的Asp299Gly、Thr399Ile两位点的基因型检测.同时利用免疫发光法检测血浆IgE的水平. 结果 197例变应性哮喘患者TLR4基因Asp299Gly位点Asp/Asp、Asp/Gly和Gly/Gly的基因型频率为0.817、0.147和0.036,与正常对照组相比差异无统计学意义(χ2=0.032,P=0.984);但变应性哮喘患者Gly/Gly、Asp/Gly基因型血浆总IgE对数值(±s: 2.615±0.6001,n=36)与Asp/Asp基因型血浆总IgE对数值(±s: 2.240±0.6894,n=161)相比较高,差异有统计学意义(P=0.002).TLR4基因Thr399Ile位点Thr/Thr、Thr/ Ile和Ile/Ile的基因型频率为0.970、0.020和0.010,与正常对照组相比差异无统计学意义(χ2=0.620,P=0.733);变应性哮喘患者Ile/Ile、Thr/Ile基因型血浆总IgE对数值(±s: 2.417±0.4423,n=6)与Thr/Thr基因型血浆总IgE对数值(±s: 2.305±0.6949,n=191)相比差异无统计学意义(P=0.571). 结论变应性哮喘患者TLR4基因Asp299Gly位点基因多态性与变应性哮喘的发病不相关,但与血浆总IgE相关.TLR4基因Thr399Ile位点基因多态性与变应性哮喘的发病及IgE水平无相关性.
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双链RNA和咪喹莫特联合刺激的协同作用研究
目的 研究双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)和咪喹莫特联合刺激是否具有协同效应.方法 在Toll样受体3(TLR3)的特异性刺激剂dsRNA、TLR7的特异性刺激剂咪唪莫特(R837)单独刺激或二者联合刺激条件下,检测BALB/c×C57BL/6和NH细胞缺陷的非肥胖型糖尿病(NOD)×C57BL/6小鼠胚胎吸收率.采用小鼠体内注射上述刺激剂的方法 ,流式细胞术检测子宫CD45+细胞内细胞因子表达水平.为进一步鉴定CD45+细胞身份,在体外培养系统中采用dsRNA和咪喹莫特刺激胎盘和底蜕膜来源的子官CD3+T细胞和CD49b+NK细胞,并检测细胞内细胞因子表达水平.采用丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抑制剂SP600125和PD98059阻断细胞因子表达水平的增加.结果 此 dsRNA和咪喹莫特联合刺激对胚胎吸收率的增高具有协同作用,同时对CD45+细胞内TNF-α和IFN-γ的表达增强具有协同刺激作用.进一步细胞鉴定研究显示,虽然在BALB/c小鼠CD3+细胞和CD49b+NK细胞中均可发现这种协同效应,但是在NOD小鼠,这种细胞因子水平的增高应主要归因于CD3+T细胞,因为在CD49b+NK细胞不显示这种细胞因子增高趋势.上述刺激剂合用的协同效应町部分地被JNK(Jun N-terminal kinase)MAPK抑制剂SP600125阻断,而几乎被ERK(extracellular signal.regulated kinase)MAPK抑制剂PD98059所完全阻断.结论 增强的TLR3和TLR7联合信号可能是通过NOD小鼠Th1型T细胞,而不是NK细胞所传导.ERK MAPK途径可能在TLR3和TLR7参与的细胞信息传递过程中发挥关键性作用.
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肺炎嗜衣原体热休克蛋白10经TLR2及TLR4调控THP-1分泌TNF-α
目的 探讨肺炎嗜衣原体(Cpn)热休克蛋白10(HSP10)诱导人单核细胞分泌炎症因子的作用及Toll样受体(TLR)2、TLR4与此作用的相关性.方法 制备Cpn HSP10(CHSP10)纯化蛋白,去内毒素活性后用不同浓度(0.5、1、5、10、20、30μ/ml)刺激THP-1细胞0、6、12、24、36、48、60 h,并比较蛋白不同处理组别中TNF-α的水平差异；以间接免疫荧光及RT-PCR鉴定THP-1细胞上的TLR4及TLR2；分离C3H系野生型和TLR4缺陷型小鼠巨噬细胞,以CHSP10刺激后检测TNF-α水平；用抗TLR2/TLR4单克隆抗体预孵育细胞,ELISA检测CHSP10刺激细胞前后TNF-α的变化.结果 CHSP10刺激THP-1细胞引起上清液炎症因子TNF-α水平显著增加,经加热等处理后蛋白诱生TNF-α的作用明显降低.THP-1细胞可检测到TLR2及TLR4的mRNA及蛋白表达,CHSP10诱生C3H系野生型小鼠细胞分泌的TNF-α明显高于TLR4缺陷型小鼠细胞,TLR2/4经单克隆抗体作用后均可显著降低CHSP10诱导THP-1分泌TNF-α的水平.结论 CHSP10可能作为炎症相关蛋白参与了Cpn对宿主细胞的致炎作用；并且TLR2及TLR4在该炎症刺激信号的传递过程中发挥一定的作用.
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牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导THP-1细胞分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及其相关Toll样受体的差异性
目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(LPS)诱导人单核-巨噬样细胞THP-1分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及相关Toll样受体(TLR)的差异. 方法 采用酚水法提取Pg ATCC33277株脂多糖(Pg-LPS),并用红外光谱法和鲎试验进行鉴定.采用ELISA试剂盒定量检测Pg-LPS作用的THP-1细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-6水平.采用TLR2或TLR4单克隆抗体阻断试验联合ELISA检测,了解Pg-LPS结合靶细胞上Toll样受体的类型.实验中采用大肠杆菌0111:B4株脂多糖(E-LPS)作为对照. 结果 1μg/ml Pg-LPS作用THP-1细胞,分别于0.5、6和6 h检测分泌IL-1β、TNF-α和IL-6的水平明显升高(P
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重组金黄葡萄球菌杀白细胞毒素体外对人肺泡巨噬细胞Toll样受体2表达的影响
金黄葡萄球菌杀白细胞毒素(panton-valentine leukocidin,PVL)是致病性金黄葡萄球菌产生的一种特异作用于中性粒细胞与单核/巨噬细胞的外毒素,是坏死性肺炎的重要毒力因子.我们用荧光定量PCR法观察重组PVL(rPVL)对人肺泡巨噬细胞Toll样受体(TLR)2表达的影响.
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人偏肺病毒感染人肺上皮细胞后Toll样受体的表达及其功能
目的 观察人偏肺病毒(human metapneumoviras)感染人肺上皮细胞后Toll样受体(TLR)表达变化及其信号通路的功能,探讨hMPV诱导气道炎症的部分机制.方法 hMPV感染体外培养的人肺上皮细胞株A549,检测病毒在A549细胞中的生长曲线,并通过RT-PCR,real-timeRT-PCR方法检测细胞TLR mRNA的表达,ELISA检测细胞培养上清IFN-α及TNF-α的表达.结果 (1)hMPV可在A549细胞中复制,感染后3 d达高峰10~(5.2)TCID_(50)/ml.(2)RT-PCR结果提示:hMPV感染A549细胞6 h后大部分TLR的表达均上调.(3)定量PCR结果提示:hMPV感染A549细胞后TLR3-4、TLR7-9的表达增高,且有时间依赖性,而紫外灭活的hMPV刺激细胞后TLR表达无明显变化.(4)ELISA结果提示hMPV感染后24 h,IFN-α及TNF-α的表达均明显升高.结论 人偏肺病毒感染A549细胞后可上调TLR表达,其诱导的炎性反应与部分TLR介导的信号转导途径有关.
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EV71感染患儿Toll样受体表达初探
目的 探讨肠道病毒71型( EV71)感染患儿免疫活性细胞模式识别受体(pattern recognition receptor，PRR)及细胞因子水平的变化。方法 EV71感染患儿71例，其中轻症EV71感染组20例，重症EV71感染组25例，危重症EV71感染组26例，同年龄正常对照组20例。采用real -time PCR检测外周血单个核细胞维甲酸蛋白Ⅰ(retinoic acidinducible gene Ⅰ，RIG-Ⅰ)、黑色素瘤分化相关基因5（melanoma differentitation-associated gene 5，MDA5）及细胞因子(IL-12、IFN-α)表达；流式细胞术检测外周血单核/巨噬细胞( monocyte/macrophages，MC)、髓样树突状细胞(myloid dentritic cells,mDC)及浆样树突状细胞（plasmacytoid dentritic cells，pDC）Toll样受体(TLRs)表达率；ELISA检测细胞因子IL-12及IFN-α的变化。结果 (1)轻症患儿仅TLR7升高，重症EV71感染患儿外周血MC、mDC、pDCTLR7表达明显升高(P＜0.05)，MC、mDC高表达TLR2、3、4，危重症患儿呈下降趋势。(2)EV71感染患儿胞内模式识别受体RIG- Ⅰ/MDA5 mRNA表达明显增加；(3)轻症患儿DC相关细胞因子有上升趋势，重症患儿DC相关细胞因子IL-12、IFN-α明显增高(P＜0.05)，轻症及危重症患儿明显降低(P＜0.05)。结论 TLR7可能是免疫活性细胞识别EV71的主要模式识别受体；RIG-I/MDA5也可能参与识别EV71；合并细菌感染或细胞破坏释放的内源性配体导致TLR2或TLR4活化，诱导炎症反应。
关键词： EV71感染 模式识别受体 Toll样受体 RIG-Ⅰ/MDA5 免疫功能 -
乙型肝炎肝硬化患者外周血Toll样受体2和4及CD4+CD25+调节性T细胞的变化
目的 检测乙型肝炎肝硬化患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuelear cells,PBMCs)表面Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4以及CD4+CD25+调节性T细胞(regulato-ry T cells,Treg)的表达,并探讨TLR2、TLR4与Treg的相关性.方法 分别应用抗-TLR2-PE、抗-TLR4-APC、抗-CD14-FITC及抗-CD4-PerCP、抗-CD25-FITC、扰-CD127-PE对67例研究对象[乙型肝炎肝硬化患者(HBV related liver cirrhosis,LC)30例、慢性乙型肝炎患者(chronic hepatitis B,CHB)21例、健康对照(normal control,Nc)16例]PBMCs表面分子进行免疫荧光染色,应用流式细胞仪分别对TLR2、TLR4及Treg进行检测.组间比较采用Kruskal-wallis秩和检验,相关性分析采用Spearman秩相关.结果 LC组、CHB组、NC组单核细胞表面TLR2、TLR4的平均荧光强度(MFI)分别为200.3±96.8和32.1±7.2、214.0±72.6和25.2 ±8.3、94.1 ±17.6和17.8 ±3.9.LC组与NC组、CHB组与NC组TLR2 MFI比较差异均有统计学意义(P<0.05),LC组与CHB组TLR2 MFI差异无统计学意义(P>0.05).LC组与NC组、CHB组与NC、LC与NC组TLR4 MFI比较差异均有统计学意义(P<0.05).LC组、CHB组、Nc组Treg占CD4+T淋巴细胞的比例分别为(5.07%±1.43%、5.88%±1.66%、4.21%±1.24%),CHB组与NC组、CHB组与LC组比较差异有统计学意义(P<0.05),而LC组与NC组比较差异无统计学意义(P>0.05).在LC组,TLR4的表达与Treg呈正相关(r=0.469,P=0.032),TLR2与血清病毒载量呈负相关(r=-0.428,P=0.021).结论 LC患者,TLR2、TLR4的表达显著上调,TLR2、TLR4可能与乙型肝炎肝硬化的发生有关.
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慢性囊型包虫病患者外周血单个核细胞中TLR2、4、7mRNA表达水平的研究
目的 探讨慢性囊型包虫病(CE)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLRs)2、4、7基因表达变化及血清IL-10的表达情况.方法 采用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)法检测42例慢性CE患者与28例健康对照组(NC)外周血中TLR2、4、7 mRNA的表达,GAPDH作为内参基因;应用ELISA方法检测两组血清中IL-10的浓度.t检验比较两组间TLR2、4、7及IL-10的表达差异;TLR2、4、7的表达水平间及它们与血清IL-10水平间的相关性分析采用线性相关分析.结果 慢性CE组的TLR2、TLR4、TLR7的mRNA相对表达量均比NC组的表达增高,其中CE组的TLR2是NC组的7.3倍,TLR4是NC组的3.6倍,TLR7是NC组的3.6倍.CE组的TLR2、TLR4、TLR7 mRNA相对表达量分别是1.0729±0.4006、5.0976±1.6682、0.6481±0.2574;NC组的TLR2、TLR4、TLR7 mRNA的相对表达量分别是0.1468±0.0435、1.4067 ±0.3279、0.1804±0.0568.与NC组相比,CE组的TLR2、TLR4的差异均具有统计学意义(P值分别为0.0287、0.033),而TLR7则无统计学意义(P=0.0862).慢性CE组、NC组外周血清IL-10分别为(17.6770±1.6298)pg/ml、(9.4898±0.7049)pg/ml,且慢性CE组与NC组的IL-10比较,差异具有统计学意义(P=0.0002);在慢性CE组中,外周血PBMC的TLR2与TLR4在mRNA相对表达水平上呈正相关(r=0.1135,P=0.036),其他均无相关.结论 TLR2、TLR4参与了慢性囊型包虫病的发生发展过程,TLR2、TLR4可作为囊型包虫抗原的受体,与不同抗原成分相互作用,调节宿主的免疫应答,同时在血清IL-10分泌增高的作用下共同促使机体向Th2型免疫应答方向发展,从而对囊型包虫感染所产生的免疫逃避发挥着重要作用.
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TLR途经负性调节因子A20、IRF-4和TRAF4在川崎病免疫发病中的变化
目的 探讨Toll样受体(TLR)信号途径负性调控因子在川崎病(KD)免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿48例,正常同年龄对照组16例,感染性疾病对照组(ID)16例.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测外周血单核/巨噬细胞(MC)TLR4信号途径传导分子、负性调节因子及前炎症细胞因子mRNA的表达.结果 (1)急性期KD患儿TLR4、MD-2、MyD88、IRAK-4、TRAF6、TAK1、TAB1及TAB2 mRNA表达明显高于正常同年龄对照组(P＜0.01);(2)KD及ID患儿A20、IRF-4、TRAF4基因表达上调(P＜0.01);KD患儿除A20表达水平高于ID对照组外,IRF-4、TRAF4表达水平明显低于ID对照组(P＜0.01);KD患儿前炎症细胞因子表达明显高于ID组(P＜0.01);(3)经细菌脂多糖(LPS)刺激后,KD患儿及正常对照组A20、IRF-4及TRAF4表达明显增高(P＜0.01),但KD患儿3种负性调节因子基因表达显著低于正常对照组(P＜0.01);(4)KD合并冠状动脉损伤组(KD-CAL+)MC负性调节因子IRF-4及TRAF4明显低于无冠状动脉损伤组(KDCAL-),A20表达则显著高于后者;KD-CAL+组前炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α均高于KD-CAL-组(P＜0.01).结论 急性期KD患儿TLR信号途径负性调节因子相对表达不足可能与KD的免疫发病机制有关.
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冠心病患者外周血单核细胞TLR4表达及其与血浆P选择素水平的相关性研究
冠心病(CHD)是导致人类死亡的原因之一,其病理生理基础是冠状动脉粥样硬化斑块形生、破裂、内皮损伤、血小板功能异常、血栓形成.参与动脉粥样硬化斑块破裂的机制较为复杂.目前认为,伴有免疫应答的炎症过程在斑块的易损性方面有着重要的作用[1],Toll样受体(TLRs)不仅是介导固有免疫和炎症反应的主要受体,还是连接固有免疫和获得性免疫的桥梁.若TLR4被激活,将启动胞内信号转导,终激活NF-κB,诱导单核/巨噬细胞产生免疫炎性细胞因子、共刺激分子以及黏附分子等,从而参与粥样斑块形成和破裂.
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过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞 TLR2、TLR4表达及其与 Th1和 Th2型免疫应答相关性观察
目的：研究Toll样受体（Toll-like receptor，TLR）2、TLR4在过敏性紫癜（HSP）患儿外周血单核细胞的表达及其与Th1和Th2型免疫应答的相关性，探讨TLR2、TLR4在HSP发病机制中的作用。方法选取2011年10月-2012年11月于我院儿内科收治的HSP患儿64例为研究对象，分为HSP无肾损害组（NHSPN，36例）及HSP有肾损害组（HSPN，28例），另选取我院儿保科健康查体儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群及单核细胞TLR2及TLR4蛋白表达，实时荧光定量PCR技术检测外周血单核细胞TLR2 mRNA及TLR4 mRNA的基因相对表达量，ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-6水平。结果（1） HSP 患儿外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均显著高于正常对照组（P均＜0．01），HSPN组外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均明显高于NHSPN组（P＜0．05；P＜0．01；P＜0．01；P＜0．01）。（2）HSP组CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞显著降低，CD3＋CD8＋T细胞及CD3＋HLADR＋活化T细胞明显升高（P均＜0．01）。（3）HSP组血浆IL-4、IL-6水平显著高于正常对照组（P＜0．01，P＜0．01），IFN-γ水平显著低于正常对照组（P＜0．05），IFN-γ/IL-4比值显著低于对照组（P＜0．01）。（4）HSP组TLR2、TLR4蛋白表达与血浆IL-4、IL-6水平均呈显著正相关（P＜0．01，P＜0．05；P＜0．01，P＜0．01）；与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关（P＜0．01；P＜0．01）。结论TLR2及TLR4活化可能参与了HSP的免疫发病机制，TLR2及TLR4的过度活化可能与HSP的肾损伤有关。 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群失调，功能紊乱，Th1/Th2失衡。活化的TLR2及TLR4可能通过上调Th2型免疫应答介导HSP的免疫发病机制。
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Toll样受体激动剂在疫苗研发中的研究进展
固有免疫细胞具有抗感染和疾病防御作用.这方面的核心是通过建立广泛的特异性联系,即通过固有免疫细胞表达模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)来检测病原体相关模式和危险物相关模式.Toll样受体(TLR)是模式识别受体中研究的为广泛的一种受体.因此,TLR的激活具有促进固有炎症因子的释放和诱导特异性免疫两种作用.充分利用TLR的特点,在疫苗设计中加入相应的TLR受体激动剂,可以加速疫苗的免疫应答,产生更持久的保护.
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Toll样受体7及9与系统性红斑狼疮的研究进展
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种病程反复、累及多种器官的自身免疫性疾病,其免疫学特征主要是高滴度的自身抗体和伴随抑制性T淋巴细胞减少的自身反应性B淋巴细胞增多,但机制尚未完全清楚.
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Toll样受体介导的固有免疫应答在HBV感染中的研究进展
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染仍是全球重大公共卫生问题,HBV入侵机体后产生持续性感染涉及的免疫机制十分复杂,HBV在与宿主免疫系统的博弈中也进化出了一系列策略影响固有免疫效应,异常的固有免疫可能是导致病毒持续性感染的诱因之一.病原体相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)被模式识别受体(pathogens recognition recep-tors,PRRs)识别进而启动固有免疫应答.Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)是PRRs家族的重要成员,TLRs介导的固有免疫应答在与HBV相互作用并引起HBV感染相关的免疫效应中发挥重要作用,关系到病毒的早期清除和随后特异性免疫应答的激活.本文就TLRs介导的固有免疫应答与HBV之间相互作用的研究进展以及基于TLRs免疫治疗策略的相关成果进行综述.
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细粒棘球蚴囊液对肝细胞表面TLR4表达的调节
目的 通过研究细粒棘球绦虫囊液对人肝细胞中Toll样受体(TLR)4表达的影响,探讨TLR在启动囊液抗细粒棘球绦虫信号转导通路中的作用.方法 用定量PCR检测肝细胞7404囊液处理前后TLR4和TGF-β1的表达变化.结果 肝细胞7404经囊液处理后随剂量增加TLR4表达减弱,TGF-β1随剂量增加表达增强,TLR2表达在各组均很低.结论 囊液可以上调TLR4的表达,提示囊液诱导的抗细粒棘球绦虫的信号转导途径町能由TLR4引起.高剂量囊液有助于TGF-β1所致的免疫逃避作用.
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荧光定量PCR检测尖锐湿疣皮损Toll样受体的表达水平
目的 检测尖锐湿疣皮损中Toll样受体(TLRs)的mRNA表达水平,探讨TLRs在人乳头瘤病毒(HPV)感染免疫中的可能作用.方法 提取40例尖锐湿疣患者皮损和35例HPV阴性的慢性宫颈炎患者宫颈刮落细胞的总RNA,逆转录为cDNA后用实时荧光定量PCR法检测TLR1～10的mRNA表达水平,并检测40例尖锐湿疣的HPV分型.结果 40例尖锐湿疣患者以低危型HPV6和11型为主(77.5%和55%).55%尖锐湿疣患者感染两种以上HPV亚型,其中35%合并高危型HPV感染.尖锐湿疣组TLR3、7、8的mRNA表达水平高于其他TLRs,TLR9的mRNA表达水平低于其他TLRs(P均<0.05).尖锐湿疣皮损TLR1～10的mRNA表达水平在HPV6型和HPV11型感染间以及在低危型与合并高危型HPV感染间差异无统计学意义(P均>0.05).尖锐湿疣组TLR1～3、TLR5～8和TLR10的mRNA表达水平均高于HPV阴性的慢性宫颈炎组(P均<0.05),其中TLR2、7、8的mRNA表达水平升高更显著(P均<0.01).而TLR4、TLR9的mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 尖锐湿疣皮损中部分TLRs(3、7、8)表达水平较高,但TLR9表达水平较低.相对于HPV阴性的慢性宫颈炎,尖锐湿疣皮损中TLR1~3、TLR5～8和TLR10的mRNA表达上调.不同HPV型别感染的尖锐湿疣皮损中TLRs表达谱差异无统计学意义.推测尖锐湿疣TLRs表达谱的改变可能与HPV感染有一定关系,是否与HPV感染的免疫逃逸机制及持续感染有关尚有待进一步明确.
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双歧杆菌脂磷壁酸对结肠癌细胞Toll样受体表达的影响
目的通过研究双歧杆菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid,LTA)对结肠癌细胞中Toll样受体(TLR)表达的影响,探讨TLR在启动双歧杆菌LTA抗肿瘤信号转导通路中的作用.方法用RT-PCR检测结肠癌细胞HCT-116经双歧杆菌LTA处理前后TLR的表达变化.结果结肠癌HCT-116细胞有TLR的基础表达,且经LTA处理后受体的表达增强,呈剂量依赖性.结论双歧杆菌LTA可上调TLR的表达,提示双歧杆菌LTA诱导肿瘤细胞凋亡的信号转导途径可能由TLR启动.
