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  • 慢性乙型肝炎患者Toll样受体3、4的表达及其临床意义

    作者:蒋福明;程书权

    乙型肝炎病毒(hepatitis b virus,HBV)感染迄今依然为我国主要的传染病之一,由此导致的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)因发病机理复杂、应用抗HBV药物治疗过程较长且易于复发与耐药.HBV感染亦为我国肝硬化、肝癌发病的首位诱因.目前认为,免疫应答情况在CHB发病中起着十分重要的作用,尤其获得性免疫反应的影响尤为突出[1].Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)作一种为重要的免疫受体,可参与到抵抗HBV感染的整个过程之中,包括炎症反应和抗原呈递细胞成熟等诸多环节[2],对CHB的发生、发展、预后与抗HBV治疗等产生一系列影响[1-3].本综述就当前CHB患者Toll样受体3、4表达及其临床意义加以总结.

  • 结核病的先天性免疫与TLR2/4/9的关系

    作者:李登瑞;杨永辉;孙巍

    Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)为宿主细胞识别各种致病微生物的重要模式受体(pattern recognition receptors, PRRs).定位于细胞膜,通过识别不同途径产生的脂蛋白和DNA等微生物成分,并通过招募特异接头蛋白,激活一系列信号级联反应,引发促炎症细胞因子的产生.

  • Toll样受体2和4在输卵管慢性炎症组织中的表达

    作者:张红霞;徐键

    目的:探讨Toll样受体2和4(TLR2、TLR4)在输卵管组织中的表达及与输卵管慢性炎症病变的关系.方法:选择201 1年1~3月在嘉兴市妇幼保健院手术切除输卵管的病例45例,经过患者知情同意后开展本研究.将临床获得的标本分3组:输卵管正常组(10例)、轻度病变组(18例)和重度病变组(17例).用免疫组化和定量PCR检测TLR2、TLR4在输卵管组织中的表达.结果:TLR2和TLR4在各组输卵管上皮细胞的胞浆和胞膜均有表达.在轻度病变组中,TLR2蛋白及mRNA表达均高于正常组(P均<0.05)和重度病变组(P均<0.01);TLR4蛋白表达高于重度病变组(P<0.05),与正常组表达无差异,TLR4 mRNA表达高于正常组和重度病变组(P均<0.01).TLR2、TLR4、TLR2mRNA和TLR4mRNA每种物质在重度病变组表达与正常组相比,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论:输卵管组织表达TLR2、TLR4,并在慢性炎症轻度病变时表达上调,随着炎症加重致输卵管发生严重病变时表达下降,推测其可能参与输卵管炎症病变的发生发展.

  • 中国北方汉族抗中性粒细胞胞浆抗体相关性小血管炎与TLR2/9基因多态性的相关性

    作者:吴子燕;徐涓娟;孙菲;陈华;吴庆军;郑文洁;李萍;宋宁;李永哲

    目的 探讨Toll样受体2/9 (Toll like receptor 2/9,TLR2/9)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)与中国北方汉族人群抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplamic autoantibody,ANCA)相关性小血管炎(ANCA-associated vasculitis,AAV)易感性的相关性.方法 采用回顾性病例对照设计.随机收集2011年11月至2012年12月北京协和医院门诊和住院的176例AAV患者,包括肉芽肿性多血管炎(granulomatosis with polyangiitis,GPA) 100例、显微镜下多血管炎(microscopic polyangitis,MPA) 76例,以及485名健康人,针对其TLR2/9基因标签SNP (tagger SNP)位点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行TLR2/9基因分型.对检测数据先进行Hardy-Weinberg和基因型(HWE)平衡检验;然后,对等位基因频率和基因型频率进行关联分析;并比较各SNP位点在各组中等位基因频率;同时进行单体型分析.结果 Rs3804100(TLR2)的C等位基因频率在MPA组[39.5% (60/76)]和健康对照组[27.9% (271/485)]的差异有统计学意义(Pc=0.026,OR 1.68,95%CI 1.18~2.40);而在GPA组[26.5% (53/100)]和健康对照组的差异无统计学意义(x2=0.17,Pc> 0.05).在单体型分析中,区域2的CC单体型频率在MPA组较健康对照组显著升高[39.5%(60/76)比27.6%(134/485)],且差异有统计学意义(x2=8.74,Pc=0.022).AAV组rs352139和rs187084 (TLR9)与健康对照组的等位基因频率比较,差异均无统计学意义(x2分别为0.29、0.05,Pc均>0.05).结论 首次发现TLR2 rs3804100位点与中国北方汉族人群MPA的易感性相关,而与GPA可能不相关.TLR9 (rs352139、rs187084)可能与中国北方汉族人群的AAV(GPA和MPA)均不相关.

  • Toll样受体家族基因多态性与结核易感性研究进展

    作者:梁晨;刘毅;唐神结

    结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染性疾病.固有免疫在对结核分枝杆菌的应答中起到重要的作用,其中Toll样受体(TLRs)是固有免疫中一种重要的模式识别受体,它是激活固有免疫的一个开关,在识别病原体相关成分的过程中举足轻重.TLR1、TLR2、TLR4、TLR9在结核分枝杆菌感染过程中对菌体相关成分进行识别从而促进固有免疫应答,其中TLR1基因的单核苷酸多态性位点rs4833095、rs5743618、rs3923647,TLR2基因的rs57473708、rs3804099位点和TLR9基因的rs352139、rs5743836等位点的变异在某些人群中与结核易感性密切相关,而TLR3、TLR6、TLR7、TLR8、TLR10基因多态性与结核易感性存在一定关系.TLRs功能的正常发挥保证了机体对结核分枝杆菌正常免疫反应.TLRs基因的多样性使不同个体应对相同的病原体产生不同的反应.对TLRs单核苷酸多态性位点与结核易感性关系的研究,可以预测某些人群的结核病易感倾向,提供药物新靶点.

  • Toll样受体2及Toll样受体9基因多态性与胃癌易感性的关系

    作者:曾红梅;潘凯枫;张阳;张联;马峻岭;周彤;苏会娟;李文庆;李吉友;游伟程

    目的 探讨Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)及TLR9基因多态性与胃癌易感性的关系.方法 以山东省临朐县胃癌高发现场人群为基础,选取248例胃癌患者,采用年龄、性别匹配的方法在同一地区按分层随机抽样方法选取496例浅表性胃炎或轻度萎缩性胃炎患者为对照,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法检测TLR2基因rs3804099位点及TLR9基因rs187084位点基因型.采用多因素logistic回归模型并调整年龄、性别、幽门螺杆菌感染及吸烟因素后,计算OR值(95%CI).结果 TLR2基因rs3804099位点TT、TC、CC基因型频率在病例组分别为53.2%(132/248)、39.9%(99/248)、6.9%(17/248),在对照组分别为43.5%(216/496)、46.6%(231/496)、9.9%(49/496),各基因型频率在两组间分布的差异有统计学意义(χ2=6.665,P=0.036).多因素logistic回归显示,以TT基因型为参照,携带TC+CC基因型者发生胃癌的风险明显降低(OR=0.68,95%CI:0.50~0.93).联合效应分析显示,以携带rs3804099位点TC+CC基因型且未感染幽门螺杆菌者为参照,携带TT基因型并感染幽门螺杆菌者发生胃癌的风险明显增加(OR=3.42,95%CI:2.16~5.42).TLR9 基因rs187084位点TT、TC、CC基因型频率在病例组分别为35.9%(89/248)、50.0%(124/248)、14.1%(35/248),在对照组分别为33.3%(165/496)、49.0%(243/496)、17.7%(88/496),各基因型频率在两组间分布的差异无统计学意义(χ2=1.684,P=0.431).结论 TLR2 基因rs3804099位点多态与胃癌发病风险密切相关.

  • 治疗前后酒精灌胃大鼠创伤弧菌脓毒症肝组织Toll样受体等的变化

    作者:李萌芳;梁欢;卢中秋;邱俏檬;周铁丽;洪广亮;吴斌

    目的 探讨抗生素对酒精灌胃大鼠创伤弧菌(vibrio vulnificus,VV)脓毒症肝组织Toll样受体(Toll like receptor,TLR)等的影响.方法 大鼠设正常对照组(N组,6只)、酒精灌胃大鼠对照组(A组,6只)、酒精灌胃大鼠抗生素对照组(AA组,6只)、酒精灌胃大鼠VV脓毒症组(AV组,24只;分别于染菌后2、6、12、24 h处死,每时相点动物数均为6只)和酒精灌胃大鼠VV脓毒症抗生素治疗组(AVA组,30只;分别于染菌后6、12、24、36 h和1周时活杀,各时相点动物数均为6只).采用逆转录聚合酶链技术检测各组大鼠不同时点肝组织TLR等的变化.结果 AV-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.775±0.101,AVA-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.600±0.064;AV-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.918±0.133,AVA-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.583±0.112;AV-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.732±0.110,AVA-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.512±0.118.AVA组大鼠染菌后6、12、24h TLR4 mRNA,与同时点AV组相比,TLR4 mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义(AVA-6 h组与AV-6 h组比较,t=-3.573,P<0.01;AVA-12 h组与AV-12 h组比较,t=-4.722,P<0.01;AVA-24 h组与AV-24 h组比较,t=-3.340,P<0.01).结论 及早联用抗生素可减低酒精灌胃大鼠VV脓毒症肝组织TLR等的表达,有利于机体促、抗炎平衡恢复,对酒精灌胃大鼠VV脓毒症有明显的治疗作用.

  • Toll样受体7在肠道病毒71型感染人Jurkat T细胞诱导炎症因子中的作用

    作者:茌静;何雅青;余光清;雷蕾

    目的:研究Toll样受体(TLRs)在肠道病毒71型(EV-A71)感染人T细胞中的表达情况,阐明其在EV-A71致炎症反应机制中的作用。方法 EV-A71毒株由深圳市CDC于2014年从手足口病患儿粪便中分离,接种200μl病毒滴度为103细胞培养半数感染量(CCID50)/ml的病毒液于人Jurkat T细胞,不同感染时间后,采用RT-PCR方法检测TLR1~TLR10 mRNA表达情况;采用Real-time PCR分析TLR7 mRNA变化水平;采用Western blot分析TLR7相关接头分子髓样分化因子(MyD88)表达水平;采用ELISA检测培养上清细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌水平。结果 Real-time PCR检测结果显示,感染6、12、24和48 h ,感染组TLR7 mRNA的相对表达水平分别为1.26±0.15、1.75±0.20、2.26±0.23和3.74±0.62,与对照组差异有统计学意义(t值分别为-2.96、-6.38、-9.57、-7.71,P值均<0.05);Western blot结果显示,感染24 h和48 h时,感染组MyD88蛋白表达水平与对照组相比分别增加1.34和2.17倍;细胞因子检测结果显示,感染24 h和48 h时,IL-6的分泌水平分别为(302.86±38.11)、(179.70±14.50)pg/ml,高于对照组24 h和48 h的分泌水平[(176.42±9.60)、(179.70±14.50)pg/ml],差异有统计学意义(t值分别为-5.57、-18.54,P值均<0.05)。48 h感染组TNF-α分泌水平为(100.81±9.81)pg/ml ,高于对照组[(56.19±6.94)pg/ml],差异有统计学意义(t=-6.43,P=0.003)。结论EV-A71主要通过TLR7被免疫活性细胞识别,进而激活TLR7相关信号通路,诱导产生大量促炎因子来参与感染致炎症反应的病理过程。

  • 解表剂功能与Toll样受体(TLR)

    作者:姜廷良;赵保胜;杜新亮;张畅斌;隋峰;李兰芳;张宏伟

    以病毒、细菌相关分子模式或具有不同证候上呼吸道感染患者的血清为激惹物,通过解表、清热类方剂的含药血清干预,观察哺乳动物巨噬细胞的Toll样受体(TLR)家族及其胞内信号转导通路接头蛋白的表达、信号诱导产生的细胞因子等的影响,探讨了方剂功能的分类学基础.结果发现,所试解表剂和清热剂作用于不同的TLR亚型;提示能识别病原体分子模式、启动先天性免疫、调节获得性免疫的TLR系统,可能是解表剂和清热剂功能分类的生物学基础之一;桂枝汤证患者血清导致的TLR表达异常,只有用桂枝汤可完全逆转其异常,也为"方证相应"提供初步的实验佐证.

  • 神经发生与Toll样受体信号通路

    作者:罗琳;周赛男

    缺血性脑血管疾病是严重威胁人类健康的常见病和多发病,且有很高的致残率,其核心问题是神经元受损引起的神经功能障碍,近年来随着组织工程学和再生医学的发展给脑缺血疾病提供了新的治疗策略,即促进神经再生使脑缺血后神经缺失的修复成为可能。Toll样受体即 TLR ( Toll-like receptor,TLR)属于模式识别受体,是一类介导天然免疫的跨膜信号传递受体家族,在细胞活化信号传导中发挥着重要作用,目前公认其参与中枢神经系统可塑性调节。文章将对Toll样受体与脑缺血后神经发生的进展作一综述,将为探索中医药治疗脑缺血的作用机制和靶点提供依据。

  • TOLL样受体TRIF信号因子与RSV关系的研究进展

    作者:谢秀春;汪受传

    呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是婴幼儿急性下呼吸道感染常见和重要的病毒病原,尤其是肺炎和毛细支气管炎。Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是近年来发现在抗感染及免疫反应起到重要作用的受体蛋白,可广泛识别多种病原微生物的病原分子相关模式(Pathogen Molecular Associated Pattern,PMAP)。机体可通过TLRs识别病毒成分介导细胞因子分泌,激活效应免疫细胞以抵抗病毒病原体入侵。其中TLR3、TLR4信号通路与其关系为密切,而含TIR结构域诱导β干扰素的接头蛋白(TIR-domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)作为两者的共同重要衔接分子,在信号途径中发挥着关键的作用,通过调控细胞因子的分泌影响适应性免疫应答。

  • 桑叶对2型糖尿病大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响

    作者:王敏;马全涛;李亚琪;柳辰玥;张驰;邱敏懿;张彩娟;王停;赵保胜;李红燕

    目的:观察桑叶降糖作用,分析桑叶对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响,初步探讨其降糖机制.方法:选取SPF级雄性Wistar大鼠46只,高脂饲料饲喂8周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),以制备T2DM模型.根据血糖值将模型大鼠随机分成模型组、阳性药二甲双胍(0.2 g/kg)组和桑叶高、低剂量(3 g/kg,1 g/kg)组,每组12只,另取10只大鼠为正常对照组.灌胃给药,持续12周,每周测其空腹血糖,并于第11周时进行OGTT和ITT实验.以上实验结束后免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清中胰岛素、IL-6、肿瘤坏死因子-(TNF-)和C反应蛋白(CRP)水平,实时PCR法测定大鼠肝脏TLRs及MyD88、TRAF-6、核因子-B mRNA水平.结果:大鼠给药桑叶后,血糖值降低,饮水量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),糖耐量得到显著改善,血清中IL-6、CRP水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),TLR7、TLR8、TLR9以及其下游信号元件TRAF-6、MyD88、核因子-B mRNA相对表达均较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:桑叶降糖可能与其抑制肝脏组织TLRs及其下游信号表达,降低炎性反应有关.

  • 桂皮醛对miRNA-146a干扰的骨关节炎滑膜炎性反应影响的实验研究

    作者:王欢;唐学章;丁海涛;张美丽;杨黎黎;张栋;刘思婷;甘稳;徐铭康;郭玉茹;许晶;王庆甫

    目的:研究miRNA-146a基因及桂皮醛对miRNA-146a干扰的滑膜成纤维细胞释放TLR4、NO、MMP-13的影响,探寻其在OA滑膜炎性反应分子学机制中的作用.方法:采用脂质体转染法将miR-146a基因模拟及抑制性质粒载体对经LPS诱导后的OA滑膜炎性反应效应细胞滑膜成纤维细胞进行基因导入,并用桂皮醛对干扰后的细胞进行干预,检测不同组间TLR4、NO及MMP-13表达的差异.结果:miRNA-146a相关质粒转染后的TLR4、NO、MMP-13浓度的变化趋势大致相同:与对照组比较,三者的inhibitor组均升高,mimics组则均呈下降趋势(P<0.05).桂皮醛单独作用于miRNA-146a干扰后的细胞时,与对照组比较,TLR4、NO、MMP-13浓度均有明显下降(P<0.05),而当mimics和CA联合干预时,三者释放量显著下降(P<0.05).结论:miRNA-146a及桂皮醛均对骨关节滑膜炎性反应产生影响,当mimics和桂皮醛联合作用时,抑制炎性反应效果好.为进一步阐明骨关节炎分子机制和药物靶点的识别与开发提供实验依据.

  • 从天然免疫介导的代谢性炎性反应角度探讨糖脂代谢病"浊"的生物学本质

    作者:吴小琴;颜凯旋;杨勇;荣向路;叶得伟;郭姣

    糖脂代谢病是一种以糖、脂代谢紊乱为特征,由遗传、环境、精神等多种因素参与的疾病,其以神经内分泌失调、胰岛素抵抗、氧化应激、炎性反应、肠道菌群失调为核心病理,以高血糖、血脂失调、非酒精性脂肪肝、超重、高血压及动脉粥样硬化等单一或合并出现为主要临床表现特点.郭姣教授率团队基于系统性经典中医文献梳理和临床研究,提出"调肝启枢化浊法"治疗糖脂代谢病的新思路,以"浊"统指由于机体水谷津液运化失常而产生的"痰""湿""饮""瘀""热"等病理产物;其相互影响,遂成为糖脂代谢病及其变证的发生发展.经实验和前期临床研究证实,"调肝启枢化浊法"及其代表方药对于糖脂代谢病具有较好疗效.但目前对于"浊"的生物学本质尚未完全阐明.借助于多组学和模式动物表型鉴定等现代生物学前沿技术,目前已证实天然免疫反应介导的代谢性炎性反应是糖脂代谢性疾病发生和进展的核心病理机制之一.文章从天然免疫细胞(主要包括巨噬细胞和中性粒细胞)及其关键介导因子(Toll-like receptor 4、Lipocalin-2)调控的代谢性炎性反应角度探讨糖脂代谢病"浊"的生物学本质,对于揭示"浊"的病理实质和化浊方药改善糖脂代谢异常的物质基础等具有重要意义.

  • Toll样受体及炎症小体在无菌性松动发病过程中的作用

    作者:刘乃澄;赵建宁

    无菌性松动是导致关节置换术失败的常见的原因,磨损微粒诱导的骨溶解在其中起到了主导作用.磨损微粒产生后被假体周围的细胞吞噬,释放各种促炎因子和化学物质,抑制成骨细胞并激活破骨细胞,导致骨溶解.然而对于磨损微粒识别并激活细胞的具体机制仍不清楚.目前研究发现磨损微粒能激活Toll样受体和炎症小体,引起促炎因子的释放导致骨溶解的形成,提示Toll样受体及炎症小体可能参与了无菌性松动的发病过程.但是,对于Toll样受体是如何被激活,以及TLR信号通路与下游信号通路之间是如何相互联系等问题,目前仍未得到明确的解释.未来进一步探讨不同材料的磨损微粒激活Toll样受体和炎症小体的机制以及目前的临床药物能否针对Toll样受体或炎症小体发挥治疗作用等将有助于阐明人工关节假体无菌性松动的发病机制.

  • 桑叶对糖尿病小鼠肝脏Toll样受体基因表达的影响

    作者:田思敏;柳辰玥;马双双;张弛;赵保胜

    目的:探讨桑叶水提物对糖尿病小鼠肝组织Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)基因表达量的影响,并探讨其相关的作用机制.方法:ICR小鼠随机分为正常组(6只),糖尿病组.糖尿病组小鼠利用高脂高糖饲料喂养10周联合多次注射链脲佐菌素(STZ)建立高脂饲养和STZ共同诱导的小鼠糖尿病模型.造模成功小鼠随机分为模型组,二甲双胍组(600 mg· kg-),桑叶高、中、低剂量组(8,4,2 g·kg-1),每组6只,灌胃(ig)给药,每周测空腹血糖,于实验中后期行口服糖耐量实验,ig给药10周后,测定小鼠血清胰岛素、总胆固醇、甘油三酯和肿瘤坏死因子-α (TNF-α),并应用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠肝组织中TLR1~9表达量.结果:糖尿病模型小鼠经桑叶水提物治疗后,进水量减少,显著降低空腹血糖,改善糖耐量,显著降低血脂,增加胰岛素含量,改善胰岛素抵抗,同时降低血清中TNF-α(P<0.05,P<0.01).Real-time PCR结果显示,糖尿病小鼠肝脏组织TLRs受体中TLR1,TLR2,TLR3,TLR7,TLR8和TLR9表达明显高于正常组(P<0.05,P<0.01),TLR5表达明显低于正常组;桑叶给药组后,桑叶中剂量组肝组织中的TLR7,TLR8和TLR9表达量,显著降低于模型组(P<0.05,P<0.01).结论:桑叶水提物的降糖作用可能与抑制糖尿病模型小鼠肝组织中TLRs受体有关.

  • 槐定碱对急性肺损伤小鼠肺组织 SOD,MDA 及 TLR4 表达的影响

    作者:杨翠萍;杨晓金;田真真;叶荷平;朱金华;付艳丽;万红娇

    目的:研究槐定碱对内毒素(LPS)致急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法:采用随机数字法,将60只清洁级昆明种小鼠分成6组:正常组、模型组、预防给药组、槐定碱低剂量组、槐定碱中剂量组、槐定碱高剂量组,每组10只.①正常组、②模型组、④槐定碱低剂量组、⑤槐定碱中剂量组、⑥槐定碱高剂量组:ip生理盐水0.5 mL,连续6d.③预防给药组:ip 5 mg·kg-1槐定碱,连续6d.上述②~⑥组均在末次注射生理盐水或药物后1 h ip脂多糖(LPS)9 mg· kg -1造模,造模2h后④~⑥组分别给槐定碱9,5,2.5 mg·kg-1.6h后检测肺组织匀浆中SOD活性及MDA的含量,取新鲜肺组织裂解后提取RNA,RT-PCR法检测TLR4 mRNA的表达水平.结果:与正常组(86.22 ±8.86) U·mg-1相比,LPS模型组(50.58±10.06) U·mg-1肺组织匀浆SOD活性明显下降;与模型组相比,各给药组SOD[预防给药组(64.71±5.74)U·mg-1,高剂量组(56.34 ±6.88) U·mg-1,中剂量组(75.50 ±13.01)U·mg-1,低剂量组(67.02±10.19)U·mg-1]均明显升高(P<0.05);而肺组织中MDA含量变化趋势与SOD相反(P<0.05);TLR4 mRNA的表达灰度值与正常组(0.45±0.20)比较,LPS模型组(0.82±0.20)明显升高;与模型组比较,各用药组[预防给药组(0.60 ±0.32)s,高剂量(0.55 ±0.19),中剂量(0.54 ±0.29),低剂量组(0.61±0.26)]均明显降低(P<0.05).结论:槐定碱能降低ALI模型小鼠肺组织匀浆中MDA的活性,提高SOD含量,降低TLR4 mRNA的表达.

  • Aβ25-35刺激对海马神经细胞株NG108-15Toll样受体3、4表达的影响

    作者:赵保胜;马群;艾璐;王秀丽;刘永刚;刘勇

    目的:研究Aβ刺激对小鼠神经细胞株NG108-15 Toll样受体(TLR)3、TLR4 mRNA表达的影响.方法:Aβ刺激NG108-15细胞,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α、IFN-β含量,荧光定量PCR法测定TLR3、TLR4mRNA表达量的变化.结果:Aβ诱导NG108-15细胞分泌TNF-α、IFN-β的量较正常对照组明显增多(均P<0.01);Aβ可诱导NG108-15细胞TLR3、TLR4 mRNA表达增强,与空白对照组相比,均P<0.01.结论:Aβ刺激可体外诱导NG108-15细胞TNF-α、IFN-β分泌增多,诱导TLR3、TLR4 mRNA表达增强,提示Aβ致阿尔茨海默病(AD)作用可能与免疫性炎症及TLRs信号转导通路有关.

  • 黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞株分泌Toll样受体及相关免疫因子的影响

    作者:许政旭;朱诗国;潘年松;罗俊;廖彬迅

    目的:通过研究黔产莪术油对直肠癌SW1463细胞中死亡因子受体(Fas)的蛋白表达及分泌的免疫因子Toll样受体2(TLR2),Toll样受体4(TLR4),白细胞介素-10(IL-10),癌基因C-Raf转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨黔产莪术油对肿瘤细胞的免疫效应.方法:将水蒸气蒸馏提取的黔产莪术油,配置成空白组,黔产莪术油80,120,160,200 mg·L-1组,作用于直肠癌细胞SW1463细胞24 h后,采用免疫酶联免疫吸附测定(enzymeLinked immunosorbent assay,ELISA)检测不同质量浓度黔产莪术油对IL-10水平的影响,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Fas,TLR2,TLR4,C-Raf,TGF-β11蛋白表达对直肠癌细胞SW1463的增殖抑制作用.结果:ELISA检测发现,与空白组比较,莪术油组IL-10水平随着药物浓度的升高表达降低(F=23.11,P<0.01).Western blot结果显示,与空白组比较,莪术油组随着药物浓度的升高,TLR2,TLR4,C-Raf蛋白表达显著降低(P <0.01);Fas,TGF-β1蛋白表达明显降低(P<0.05).结论:黔产莪术油抑制SW1463细胞的作用免疫作用机制可能与下调Fas/FasL通路有关,使得Toll样受体TLR2,TLR4蛋白表达下调,导致相关因子TGF-β1的表达下调,从而使得细胞凋亡,起到免疫增强作用.

  • 青藤碱对类风湿关节炎患者外周血树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响

    作者:余克强;罗仁

    目的:观察中药单体青藤碱对类风湿关节炎患者外周血树突状细胞toll样受体(toll like receptor,TLR)2和TLR4表达的影响.方法:分离10例类风湿关节炎患者的单核细胞,采用细胞因子刺激分化为树突状细胞.分别采用青藤碱高(5mM)、中(2mM)、低(1mM)剂量和空白对照干预.实时荧光定量PCR检测各组树突状细胞TLR2和TLR4mRNA的表达,Western-blot检测树突状细胞TLR2和TLR4蛋白的表达.结果:与对照组相比,经青藤碱高(P<0.01)、中剂量(P<0.01)干预后的树突状细胞TLR2和TLR4 mRNA表达明显降低,青藤碱干预后的树突状细胞(DC)中TLR2、TLR4表达均有所有降低.结论:青藤碱可能通过抑制树突状细胞TLR介导的炎症信号转导,而产生治疗类风湿关节炎的作用.

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