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纳米仿生组织工程血管兔腹主动脉置换术后体内演化的实验研究
目的 兔自体种子细胞构建的纳米仿生组织工程血管(nano-biomimetie tissue engineered bloodvessel,NBTEBV)移植置换兔腹主动脉,观察NBTEBV在兔体内降解和重塑演化过程,检测NBTEBV的组织相容性. 方法 6月龄新西兰大白兔20只,雌雄不限,体重2～3 kg.取兔自体种了细胞体外构建NBTEBV.取新两兰大白兔,游离.肾下腹主动脉结扎其分支,剪下长约10mm腹主动脉,采用同体种子细胞来源的NBTEBV置换兔腹主动脉,吻合口置钛夹标记.观察NBTEBV在兔体内降解及重塑演化过程:术后第12周行DSA检查及彩色多普勒检查;术后第1、4、12周,取移植血管行大体及组织学观察,并行移植血管14C标记的PLGA X射线电子能谱检测. 结果 17只兔移植NBTEBV在观察期内保持通畅,3只兔分别于术后36、72 h死于移植段腹主动脉闭寒.术后第12周DSA检查示移植血管显影良好,彩色多普勒检查示移植血管通畅,血流为层流,血流速度末见异常,无血管扩张.术后第1周移植血管腔被覆单层内皮细胞,管壁平滑肌细胞分布层次欠清晰,周围较多仿ECM夹杂未降解的黑色PLGA;术后第4周管壁平滑肌细胞分层,ECM开始形成,仿ECM成分部分降解,PLGA含量明显减少,颜色减淡;术后第12周管壁分层更清晰,ECM已形成,仿ECM成分完全降解,几乎无PLGA,血管形态近似自体血管.14C标记的PLGA射线电子能谱检测示14C能量峰值逐周递减. 结论 构建的NBTEBV有较好的手术操作性,同体移植术后具备良好组织相容性,在动物体内的自然重塑演化过程符合组织工程技术要求,电纺构建NBTEBV是可行的.
关键词： 纳米仿生组织工程血管 体内降解 组织相容性 兔 -
不同方法制备生物衍生骨体内植入的组织学观察
目的 探讨不同方法制备的生物衍生骨植入大耳白兔体内后的组织学变化,为组织工程研究提供异种动物源支架材料. 方法 取新鲜市售猪股骨两端,除去软组织及骨膜后切割为0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm大小骨块.根据不同处理方法分为5组:A组仅用生理盐水冲洗,B组经脱脂处理,C组经脱脂脱钙处理,D组经脱脂脱钙脱细胞处理,E组经脱脂脱细胞处理.取各组骨块行微量元素检测;经25 kGy辐照灭菌后植入26只新西兰大耳白兔股部肌袋内,左侧植入A、B组骨块,右侧植入C、D及E组骨块,各肌袋植入1块.术后2、6及12周取材,作HE及Masson染色,行炎性细胞、破骨细胞计数,观察胶原纤维生成及成骨情况. 结果 各组骨块微量元素残留量符合标准.所有动物术后生存良好.各组实验兔植入部位均未见组织坏死、积液及化脓感染.炎性细胞计数以A组为多,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05);破骨细胞计数各组间差异无统计学意义(P＞0.05).HE及Masson染色观察,胶原纤维及新骨形成C、D组为好,E组次之,A、B组差. 结论 脱脂脱钙脱细胞处理的猪股骨有良好的降解性、成骨性及较低的炎性反应,有可能成为组织工程骨的支架材料.
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三种胶原-壳聚糖多孔支架组织相容性的初步研究
目的制备3种具有良好稳定性的胶原-壳聚糖多孔支架, 初步探讨其植入体内后的组织相容性. 方法冻干法制备胶原-壳聚糖多孔支架,分别采用真空干热和戊二醛对其交联,制备未交联(材料1)、真空干热交联(材料2)和戊二醛交联(材料3)3种胶原-壳聚糖多孔支架,扫描电镜观察支架微观结构.将12只家兔随机分为4组(n=3),3种支架材料分别交叉埋植入12只家兔耳背部皮下,术后观察、记录全身情况及手术区变化,分别于术后3、7、14及28 d组织切片下见3种材料的稳定性和组织相容性. 结果扫描电镜下见3种支架均具有三维多孔结构,孔径分别为120±10、80±15和170±20 μm,孔隙率均大于90%.大体观察:实验家兔术后全身情况良好,手术区红肿轻微,切口均愈合良好.组织学观察:材料1降解吸收迅速,能引起明显的炎性反应,材料2降解较快,炎性反应不及材料1明显,材料3降解较慢,炎性反应轻微,术后组织再生较快. 结论胶原-壳聚糖多孔支架具有适合组织再生的三维多孔结构,交联能提高胶原-壳聚糖多孔支架的早期稳定性和组织相容性,戊二醛交联优于真空干热交联.
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脱细胞羊膜的制备及其生物相容性研究
目的制备脱细胞人羊膜(HAAM),检测其细胞相容性和组织相容性,探讨其作为组织工程支架材料的可行性. 方法新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联,0.5%SDS震摇24小时,胰蛋白酶消化4小时,充分漂洗,冷冻干燥,分装,环氧乙烷消毒备用.倒置相差显微镜和扫描电镜观察表面结构,测量孔径,并作HE、Mallory染色.体外培养人成纤维细胞并复合于HAAM,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附、生长,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定HAAM浸提液对培养的人成纤维细胞的细胞毒性.将HAAM植入SD大鼠背部皮下,观察其组织相容性. 结果 HAAM的一面为网状结构,孔径为10～80 nm,另一面为致密纤维结构.HE、Mallory染色表明材料无细胞残留,均为胶原组成.成纤维细胞能在HAAM上黏附、增殖.MTT示材料细胞毒性为0或1级,动物埋置实验无异常反应. 结论应用去垢剂-酶消化法处理新鲜人羊膜,能有效去除组织中的细胞和可溶性成分,可进一步降低其免疫原性,保留基质及网状结构,有良好的细胞相容性和组织相容性,可作为组织缺损的修复材料及组织工程的膜支架材料.
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聚磷酸钙纤维体内降解及组织相容性实验
目的研究人工合成聚磷酸钙纤维体内降解及组织相容性,为肌腱组织工程材料研究提供部分实验依据.方法聚磷酸钙纤维束和对照材料碳纤维在20只SD大鼠肢体对称部位的皮下、肌肉、肌腱内植入.术后1个月观察实验鼠的日常活动;术后当日,4、8、12、16及20周行X线片检查;术后4、8、12、16及20周取出材料,行肉眼观察、组织切片,HE染色. 结果 X线片及组织切片证实聚磷酸钙纤维在肌肉内约16周完全降解,肌腱、皮下约20周完全降解,降解产物无局部沉积现象;而对照碳纤维在实验中未观察到明显降解.聚磷酸钙纤维周围组织内淋巴细胞及巨噬细胞明显少于碳纤维周围,且与周围增生组织相融合程度亦优于碳纤维.结论聚磷酸钙纤维在体内16～20周可完全降解,组织相容性优于碳纤维.
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陶瓷样异种骨的制备及复合骨髓移植成骨的实验研究
为寻找理想的骨移植替代材料,将市售新鲜猪肋骨经物理、化学方法处理后,制得类似人骨的具有天然网状孔隙系统的陶瓷样异种骨(CXB).用CXB与兔骨髓基质细胞体外混合培养;用CXB与自体红骨髓(BM)复合移植于兔的骶棘肌内,经相差显微镜、组织学和扫描电镜观察.结果表明,CXB对兔骨髓基质细胞的生长、附着及增殖无不良影响,显示了良好的组织相容性.CXB加BM植入肌内后第2周开始成骨,并随时间而增加.至24周时有明显的新骨形成,其新骨生成过程与羟基磷灰石(HA)加BM复合移植相似,但其降解快,形成典型的松质骨结构早,而单纯植入CXB则无新骨形成.探讨了复合移植的成骨机理及临床意义.
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不同粗糙表面的纯钛种植体的组织相容性评价
目的:通过将不同粗糙度的纯钛种植体植入软组织中,观察软组织对种植体的反应,评价各种种植体的组织相容性.方法:分别将光滑表面、机械表面、微粗糙表面(Ⅰ)、微粗糙表面(Ⅱ)、大粗糙表面的纯钛种植体在第1,30,60,83天分别植入家兔的背部肌肉中,在第90天切取包绕种植体的软组织,进行组织定量评价.结果:90天时微粗糙表面的种植体的软组织反应小.结论:微粗糙表面能显著降低种植体-组织界面的炎症反应程度,减少软组织包绕层的厚度.
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颈前路带锁钢板治疗下颈椎骨折脱位的护理
前路带锁钢板由于采用无毒、无抗原性的优质钛合金材料,其组织相容性好,同时由于生物力学方面的进步,使固定更加牢固,融合更有保障,降低了术后并发症的发生率,重建了脊柱的稳定,利于脊髓功能的恢复[1].我院2000年3月至2002年1月共对16例下颈椎骨折脱位病人进行了经颈前路带锁钢板内固定治疗,其神经功能均有不同程度的恢复,无并发症发生,现将其护理总结如下.
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用顺序特异引物聚合酶链反应技术行HLA-A抗原DNA分型
作者采用顺序特异引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP),建立了汉族人群HLA-A位点DNA分型方法.研究采用PCR-SSP对345例肾移植供受者样本DNA行HLA-A位点基因分型均获得成功.共检出A位点等位基因总数635个,其中纯合子55例,杂合子290例;可准确分辨HLA-A位点等位基因20个,无假阳性和假阴性出现,重复率100%,总耗时5小时.分型结果经标准DNA验证和美国加州大学配型中心双盲验证完全符合.与标准血清学方法比较显示,69份血清学空白位点中16份存在第二个位点,13份血清学分型错误,血清学总误差率9.0%.由此表明,用该研究建立的PCR-SSP方法行HLA-A位点DNA分型,具有高分辨度、高特异性和简捷快速的特点,分型结果较血清学方法更加精确可靠,适合于临床应用.
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不同方法处理对同种异体皮质骨板移植组织相容性的影响
目的:探讨深低温冷冻、环氧乙烷和γ射线辐照对同种异体皮质骨板移植组织相容性的影响.方法:分别移植经过-70℃深低温冷冻4周、-70℃深低温冷冻4周+48℃环氧乙烷灭菌、-70℃深低温冷冻4周+25kGyγ射线辐照处理的山羊同种异体皮质骨板,对照组移植异体山羊新鲜皮质骨板.检测山羊外周血CD4+、CD8+以及移植骨板周围软组织炎性细胞浸润.结果:新鲜骨板移植组CD4+明显升高,移植骨板周围软组织大量淋巴细胞、浆细胞等炎性细胞浸润,CD4+升高以及炎性细胞浸润在术后6周达到顶峰.除深低温组术后6周CD4+升高外,深低温冷冻、深冻+环氧乙烷及深冻+γ射线辐照组T淋巴细胞亚群无明显改变,移植骨板周围软组织少量淋巴细胞等炎性细胞浸润.结论:新鲜同种异体皮质骨板移植有较强的抗原性,诱发宿主较强烈免疫排斥反应;深低温冷冻、环氧乙烷和γ射线辐照处理皮质骨板移植宿主不发生免疫排斥反应,组织相容性较好.
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53例羟基磷灰石义眼台眼窝充填术的临床观察
在眼球摘除或眼内容物剜除术后,将出现明显的眼窝凹陷,安放义眼片后其活动度也十分有限,羟基磷灰石义眼台的出现,因其无毒、组织相容性好、不致敏、植入眼眶后容易血管化等优点,已在眼部整形中广泛应用,本组共进行HA义眼台植入53例,随访1～2年,效果满意.
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异种无细胞真皮组织相容性及血管化实验研究
目的:研究异种无细胞真皮的组织相容性及血管化速度,并将结果与异体无细胞真皮的相关结果进行比较分析.方法:制备巴马香猪无细胞真皮和大鼠无细胞真皮,将二者同时皮下埋植于同一大鼠受体,1、4、8、12 w后取材,组织学切片观察其组织相容性;将二者分别进行单纯无细胞真皮移植,1、2、3、4 w后分别取材,组织学切片观察其血管化速度.结果:异种无细胞真皮与异体无细胞真皮皮下埋植后各时间点组织学反应相似,未引起受体免疫排斥反应,胶原结构未降解;单纯无细胞真皮移植后,异种无细胞真皮与异体无细胞真皮均能在2 w内完成血管化进程,且二者之间同一时间点新生血管数量无显著差异.结论:异种无细胞真皮与异体无细胞真皮同样具有组织相容性好、血管化速度快等生物学特性,理论上可替代异体无细胞真皮应用于临床.
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永久起搏器置入术后并发症的相关因素的临床分析
永久起搏器置入术作为对缓慢性心律失常有效的治疗手段,在临床上已经得到广泛应用.但由于需在人体组织中置入组织相容性的异物,一旦出现并发症,处理就非常棘手.现将我院因缓慢性心律失常置入永久起搏器的180例患者出现并发症的临床相关情况报告如下.
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颈前路带锁钢板治疗下颈椎骨折脱位的护理
前路带锁钢板由于采用无毒、无抗原质的优质钛合金材料,其组织相容性好,同时由于生物力学方面的进步,使用时更加牢固,融合更有保障,降低了术后并发症的发生率,重建了脊柱的稳定,有利于脊髓功能的恢复[1].我科2001年1月至2003年8月共对26例下颈椎骨折脱位病人进行了经颈前路带锁钢板内固定治疗及积极认真的护理,效果满意.现将具体护理措施总结如下.
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银套环抑菌抗菌作用的研究与应用
银材料应用于医学历史悠久,主要利用其组织相容性.其实,有许多实验资料表明,金属银离子可以杀灭活的细菌繁殖体,在工业上,金属银离子作为消毒剂,已经有了广泛的应用[1].我们按这一理论依据,将金属银做成环治疗包茎,应用于临床,效果令人满意.现将我们对金属银体外杀菌作用的观察及临床应用情况报告如下.
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气囊留置尿管的常见并发症及护理对策
气囊导尿管因在组织相容性、引流效果、固定方法方面优于传统导尿管，早在临床各科应用，如导尿操作护理不当，由此而引起医源性尿道损伤或并发症，导致医患纠纷，受到医护人员的关注。现提出留置气囊导尿管术后常见的并发症及护理对策。
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组织工程技术在修复骨缺损中的研究进展
全世界每年骨折和骨缺损的患者数以千万计，传统的骨缺损治疗方法有自体骨移植、同种异体骨移植和人工骨移植等，但均因各种因素使其在临床应用上受到一定的限制：自体骨移植安全性高，有良好的骨诱导性，因而被认为是骨缺损修复的金标准，但供体来源往往有限。而且手术时间长，并发症多；同种异体骨移植植入后容易吸收，而且容易感染，排斥反应重；人工骨移植原材料孔隙变异较大，成骨困难，而且来源有限。由于现行骨缺损修复方法存在以上问题和局限性，骨组织工程修复骨缺损近年来已被许多学者关注。支架作为组织细胞及细胞活性因子粘附、生长分化的载体，在组织工程骨的构建中起重要作用，组织工程骨支架的研究开展的越来越多。
以往用于修复骨缺损的材料，第一代惰性材料和第二代生物活性材料均以减少免疫反应、诱发生成新骨，使移植物被新形成的组织长入而与机体牢固结合为目的，其缺点是支架材料不能再体内降解，长期存留于体内。近年来修复骨缺损的生物材料集中于选用具有三维多孔结构、可吸收的骨组织工程支架材料方面，属于第三代新材料，不只是追求简单的填充骨缺损及诱发新生新骨，而是逐渐在体内被降解，从而被新骨替代，终使骨缺损处完全被组织所替代的新材料。目前研究的骨组织工程支架具有以下特性：（1）具有良好的组织相容性，自身降解率与组织替代率相匹配，随成骨细胞的生长和人体自身细胞外基质的分泌，支架材料逐步降解直至终完全吸收，从而避免长期的外源体反应，重要的是降解速率与组织细胞生长率相适应，降解时间应能根据组织生长特性进行认为的调控，从而保证骨缺损处拥有合适的力学性能；（2）骨诱导及骨传导性能良好，具有较高的孔隙率，构建符合生物学特性要求的支架诱导骨组织生长；（3）安全无毒，在体内不致畸，不引起无菌性炎症。 -
体外冷冻存储脂肪颗粒在隆乳术中的应用
脂肪移植已有上百年的历史,由于脂肪组织来源丰富、取材方便、操作简单、无免疫性等优点,近十余年来脂肪颗粒移植技术己广泛应用于临床,自体脂肪的组织相容性优于人工组织替代品,没有免疫排斥现象,是理想的填充材料.而冷冻脂肪是指将抽出的多余脂肪储藏起来,以备按预定计划重复注射时避免再次抽取.近年来国内外对脂肪体外冷冻储存及再移植进行了一定的研究,通过对冷冻脂肪组织学观察发现,其细胞能维持完整的形态,与正常细胞无明显差异.冷冻脂肪复温移植后能维持一定体积,组织学证实移植物内有完整的脂肪细胞.我科自2009年以来,共收治48例自体脂肪隆乳术患者,重复注射时采用冷冻脂肪收到良好的效果,现报道如下.
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自体脂肪注射隆乳术后硅凝胶假体置入的效果观察
自体脂肪注射隆乳术具有操作简便、创伤小、供区皮肤表面几乎不留瘢痕的优点,而且自体脂肪细胞组织相容性好,没有免疫排斥反应及毒性物质吸收等问题,故在临床上仍有使用.
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自体脂肪移植的临床应用
近年来,随着脂肪抽吸术的广泛应用,自体脂肪颗粒注射移植术已在国内外得到重视与开展[1-2].自体颗粒脂肪移植以其无排斥、感染率低、注射后组织相容性好的优势,是目前较理想的填充材料.
